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PAGEPAGE4分子生物學(xué)期末考試試題一、名詞解釋1、反式作用因子:能直接或間接地識(shí)別或結(jié)合各類順式作用元件核心序列,參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。2、基因家族:在基因進(jìn)化過(guò)程中一個(gè)基因通過(guò)基因重復(fù)產(chǎn)生兩個(gè)或更多的拷貝,這些基因構(gòu)成一個(gè)基因家族,是具有顯著性的一組基因,編碼相似的蛋白質(zhì)的產(chǎn)物。3、C值矛盾:C值是指真核生物單倍體的DNA含量,一般的,真核生物的進(jìn)化程度越高,C值越大,但在一些兩棲類生物中,其C值卻比哺乳動(dòng)物大的現(xiàn)象。原因是它含有大量的重復(fù)序列,而且功能DNA序列大多被不編碼蛋白質(zhì)的非功能DNA所隔開(kāi)。4、反式作用因子:是能直接或間接的識(shí)別或結(jié)合在各類順式作用元件核心序列上,參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)5、核型:指一個(gè)物種所特有的染色體數(shù)目和每一條染色體所特有的形態(tài)特征。6、RNAediting:轉(zhuǎn)錄后的RNA在編碼區(qū)發(fā)生堿基的突變、加入或丟失等現(xiàn)象。7、分子伴侶(molecularchaperone)是一類序列上沒(méi)有相關(guān)性擔(dān)憂共同功能的保守性蛋白質(zhì),它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)能幫助其他多肽進(jìn)行正確的折疊、組裝、運(yùn)轉(zhuǎn)和降解7、8、增強(qiáng)子:是指能使與它連鎖的基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的DNA序列。二、判斷:1、真核生物所有的mRNA都有polyA結(jié)構(gòu)。(X)組蛋白的mRNA沒(méi)有2、由于密碼子存在搖擺性,使得一種tRNA分子常常能夠識(shí)別一種以上同一種氨基酸的密碼子。(√)3、大腸桿菌的連接酶以ATP作為能量來(lái)源。(X)以NAD作為能量來(lái)源4、tRNA只在蛋白質(zhì)合成中起作用。(X)tRNA還有其它的生物學(xué)功能,如可作為逆轉(zhuǎn)錄酶的引物5、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反應(yīng)都需要引物。(X)RNA聚合酶的催化反應(yīng)不需要引物6、真核生物蛋白質(zhì)合成的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸(X)真核生物蛋白質(zhì)合成的起始氨基酸是甲硫氨酸7、質(zhì)粒不能在宿主細(xì)胞中獨(dú)立自主地進(jìn)行復(fù)制(X)質(zhì)粒具有復(fù)制起始原點(diǎn),能在宿主細(xì)胞中獨(dú)立自主地進(jìn)行復(fù)制8、RNA因?yàn)椴缓蠨NA基因組,所以根據(jù)分子遺傳的中心法則,它必須先進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,才能復(fù)制和增殖。(X)不一定,有的RNA病毒可直接進(jìn)行RNA復(fù)制和翻譯9、細(xì)菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和ρ因子組成。(X)細(xì)菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和σ因子組成10、核小體在復(fù)制時(shí)組蛋白八聚體以全保留的方式傳遞給子代。(√)11、色氨酸操縱子中含有衰減子序列(√)12、SOS框是所有din基因(SOS基因)的操縱子都含有的20bp的lexA結(jié)合位點(diǎn)。(√)三、填空:1、原核生物的啟動(dòng)子的四個(gè)保守區(qū)域?yàn)檗D(zhuǎn)錄起始點(diǎn)、-10區(qū)、-35區(qū)、-10區(qū)與-35區(qū)的距離。2、根據(jù)對(duì)DNA序列和蛋白質(zhì)因子的要求,可以把重組分為同源重組、位點(diǎn)專一性重組/特異位點(diǎn)重組、轉(zhuǎn)座重組、異常重組四類。3、研究啟動(dòng)子功能的主要方法是啟動(dòng)子的突變,研究酶與啟動(dòng)子間識(shí)別與結(jié)合的方法有足跡法和堿基修飾法。4、真核生物中反式作用因子的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域有螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋(HTH)、堿性-螺旋-環(huán)-螺旋(bHLH)、鋅指(zincfinger)、堿性-亮氨酸拉鏈(bZIP)。5、根據(jù)DNA復(fù)性動(dòng)力學(xué),DNA序列可以分成哪四種類型?單一序列、輕度重復(fù)序列、中度重復(fù)序列、高度重復(fù)序列四、選擇題(10分,每題1分)1、在真核基因表達(dá)調(diào)控中,(B)調(diào)控元件能促進(jìn)轉(zhuǎn)錄的速率。A、衰減子B、增強(qiáng)子C、repressorD、TATABox2、核基因mRNA、的內(nèi)元拼接點(diǎn)序列為(D)。1.敘述由一段DNA序列形成多種蛋白產(chǎn)物的機(jī)制。答:由一段DNA形成多種蛋白產(chǎn)物的可能機(jī)制有:閱讀框不同、抗終止作用、可變剪切和RNA編輯。重疊基因在фX174中最早發(fā)現(xiàn),兩個(gè)鄰近的基因以一種巧妙的方式發(fā)生重疊,轉(zhuǎn)錄出來(lái)的mRNA以不同的閱讀框閱讀并被表達(dá),產(chǎn)生兩種以上的蛋白產(chǎn)物。在λ噬菌體中有不同時(shí)期表達(dá)的操縱子,如左向早期操縱子可以轉(zhuǎn)錄出兩種mRNA,這是由于依賴于ρ因子的終止作用以及早期基因編碼的抗終止蛋白的抗終止作用造成的??菇K止蛋白與RNA聚合酶結(jié)合后修飾了酶的構(gòu)象,使其不再識(shí)別弱終止子,從而使一段DNA可以轉(zhuǎn)錄出多種mRNA,從而產(chǎn)生兩種以上的蛋白產(chǎn)物。真核生物的hnRNA含有內(nèi)含子,通過(guò)剪接可將其出去形成Mrna,但有的高等真核細(xì)胞存在可變剪接,即來(lái)自一個(gè)基因的RNA,其某個(gè)內(nèi)含子的5‘供體在不同的條件下和不同內(nèi)含子的3’受體進(jìn)行剪接,從而將來(lái)自一個(gè)基因的mRNA前體剪接產(chǎn)生多種mRNA,翻譯出不同的蛋白質(zhì)。另外,在真核生物中存在RNA編輯,將mRNA在轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行插入、缺失或核苷酸的替換,改變DNA模板的遺傳信息,從而翻譯出氨基酸序列不同的多種蛋白質(zhì)。各種二核苷酸對(duì)的排列順序不同,對(duì)雙螺旋結(jié)構(gòu)的影響不同。請(qǐng)問(wèn)那種的Tm最低?答:的Tm值最低。含這種二核苷酸的序列有那些,為什么?(7分)答:含有A/T的主要有復(fù)制起始點(diǎn)、原核生物啟動(dòng)子的-10區(qū)、真核生物啟動(dòng)子的TATA框,此外,還有生物體選擇以UAA作為最有效的終止密碼子。DNA在復(fù)制和轉(zhuǎn)錄時(shí)要在起始原點(diǎn)和啟動(dòng)子區(qū)形成起始復(fù)合物,復(fù)制起始點(diǎn)、原核生物啟動(dòng)子的-10區(qū)、真核生物啟動(dòng)子的TATA框富含AT對(duì),二者之間有兩條氫鍵,在此處易于解開(kāi)雙鏈,容易形成起始復(fù)合物,使復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程順利進(jìn)行。生物體選擇以UAA作為最有效的終止密碼子,因?yàn)樵?4的密碼子中,假使UAA具有和它配對(duì)的反密碼子,所形成的產(chǎn)物在生理?xiàng)l件下也是不穩(wěn)定的,有利于肽鏈的釋放,而且UAA很少發(fā)生無(wú)義抑制突變,有利于肽鏈的正常終止。真核生物和原核生物在翻譯的起始過(guò)程有哪些區(qū)別?原核生物真核生物起始氨基酸甲酰甲硫氨酸甲硫氨酸起始AA-tRNAfMet-tRNAi*fMetMet-tRNAi*Met起始復(fù)合物形成30S小亞基首先與mRNA模板相結(jié)合,再與fMet-tRNA*fMet結(jié)合,最后與50S大亞基結(jié)合40s小亞基先與Met-tRNA*Met相結(jié)合,再與模板mRNA結(jié)合,最后與60S大亞基結(jié)合成80S。mRNA。Met-tRNA*Met起始復(fù)合物核糖體較小,70S較大80S起始因子較少較多mRNA無(wú)帽子結(jié)構(gòu)有帽子結(jié)構(gòu)和多聚A尾巴,都參與形成翻譯起始復(fù)合物RNAi技術(shù)的基本原理。RNAi技術(shù)利用雙鏈小RNA高效、特異性降解細(xì)胞內(nèi)同源mRNA從而阻斷靶基因表達(dá),使細(xì)胞出現(xiàn)靶基因缺失的表型。原理就是,短片段的雙鏈RNA在體內(nèi)能在酶(Dicer)及相關(guān)復(fù)合物(RISC)的作用下,變成單鏈分子,并與目標(biāo)基因mRNA互補(bǔ),在Dicer酶作用下,是mRNA發(fā)生剪切,轉(zhuǎn)錄受抑制或翻譯受到抑制,從而在轉(zhuǎn)錄水平或轉(zhuǎn)錄后水平干擾基因表達(dá)。22、操縱子:弱化子:葡萄糖效應(yīng)(代謝物阻遏效應(yīng)、降解物抑制作用):安慰性誘導(dǎo)物:23、乳糖操縱子的調(diào)控模型。主要內(nèi)容:①Z、Y、A基因的產(chǎn)物由同一條多順?lè)醋拥膍RNA分子所編碼②這個(gè)mRNA分子的啟動(dòng)子緊接著操縱區(qū)(O區(qū)),而位于阻遏基因I與操縱基因O之間的啟動(dòng)子區(qū)(P),不能單獨(dú)起動(dòng)合成β-半乳糖苷酶和透過(guò)酶的生理過(guò)
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