微免實(shí)驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)(yt)

13微免試驗(yàn)考試整理〔一〕

步驟：1、洗手→消毒→扎手指〔一針見血〕2、一滴抗凝劑→雙凹片→1滴血，用針混勻33次→取3～4環(huán)菌液→參與血中用接種環(huán)混勻→溫育〔37度〕30分鐘→推片〔慢、厚〕自然枯燥4、加瑞氏染液2滴20秒→加緩沖液4滴〔染液與緩沖液比為1:2〕→混勻→ 染色10分鐘→沖洗→ 吸干→油鏡觀看示教片：①大吞噬現(xiàn)象要生疏“巨噬細(xì)胞”②小吞噬現(xiàn)象主要生疏“中性粒細(xì)胞”〔馬蹄狀形〕吞噬功能的測(cè)定計(jì)數(shù)方法：吞噬功能的測(cè)定計(jì)數(shù)方法：吞噬百分率:計(jì)數(shù)100個(gè)中性粒細(xì)胞中具有吞噬作用的細(xì)胞數(shù),即為吞噬百分率。吞噬指數(shù)：觀看100個(gè)中性粒細(xì)胞，計(jì)數(shù)被吞噬的細(xì)菌總數(shù)，求平均每個(gè)中性粒細(xì)胞吞噬的細(xì)菌數(shù)即為吞噬指數(shù)。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)〔原理、分型、意義〕圖片①淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)〔原理、分型、意義〕圖片原理：TT淋巴DNA與細(xì)胞分裂。轉(zhuǎn)化百分率正常值為70%左右分裂相：即染色體型母細(xì)胞：較小淋巴細(xì)胞大4-5倍；核質(zhì)疏松呈網(wǎng)狀構(gòu)造，有1-3個(gè)核仁；核周透亮區(qū)；胞漿嗜堿性，有空泡過(guò)渡型：較小淋巴細(xì)胞略大；核質(zhì)略疏松；著色較淡小淋巴細(xì)胞：核質(zhì)致密；著色深；胞漿少意義：體外淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化反響，可為測(cè)定機(jī)體細(xì)胞免疫狀態(tài)的指標(biāo)之一。EE玫瑰花環(huán)試驗(yàn)〔原理、判定結(jié)果、意義〕圖片1、原理和意義：T細(xì)胞外表有綿羊紅細(xì)胞受體，可在自然狀況下與綿羊紅細(xì)胞結(jié)合，形成E玫瑰花環(huán)，由此可區(qū)分T淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞4個(gè)以上綿羊紅細(xì)胞者為陽(yáng)性E花環(huán)形式率=E陽(yáng)性細(xì)胞/〔E陰性淋巴細(xì)胞+E陽(yáng)性細(xì)胞〕x100%40~70%〔二〕試驗(yàn)二血清學(xué)反響概念、特點(diǎn)、影響因素、分類血清學(xué)反響概念、特點(diǎn)、影響因素、分類1、根底：抗原打算簇——抗體的互補(bǔ)打算區(qū)2、特點(diǎn)：特異性、可逆性、比例性、階段性3、抗原抗體反響因素：電解質(zhì)、溫度、酸堿度凝集反響：〔原理、種類〕4、凝集反響、沉淀反響、免疫標(biāo)記技術(shù)I凝集反響：〔原理、種類〕凝集效價(jià)：概念：抗原+抗體=凝集團(tuán)塊〔1〕直接凝集：顆粒性抗原+抗體=凝集團(tuán)塊玻片凝集反響、試管凝集反響〔2〕間接凝集：可溶性抗原包被于載體+抗體=凝集團(tuán)塊依據(jù)載體種類不同，分別稱為間接血凝、間接乳凝、間接炭凝〔3〕+抗原=凝集團(tuán)塊沉淀反響：〔原理、四種類型特點(diǎn)〕〔4〕協(xié)同凝集：抗體結(jié)合金葡菌SPA+抗原=凝集團(tuán)塊沉淀反響：〔原理、四種類型特點(diǎn)〕II概念：可溶性抗原與相應(yīng)抗體在適當(dāng)狀況下〔有適量電解質(zhì)存在、抗原抗體二者比例適當(dāng)〕可形成肉眼可見的沉淀物或者沉淀線，稱為沉淀反響?？扇苄钥乖?抗體=沉淀物①單向瓊脂集中單向瓊脂集中試驗(yàn)是一種定量試驗(yàn)。將確定量抗體混于瓊脂中，制板，在適當(dāng)位置打環(huán)的直徑與抗原含量成正比。意義：Ig和補(bǔ)體成分的含量②雙向瓊脂集中：定性試驗(yàn)，在瓊脂板上打孔，把抗原和抗體分別加到相應(yīng)孔中，二者自淀線。意義：用于分析鑒定標(biāo)本中多種抗原成分〔抗原、抗體同時(shí)集中，自由、定向〕缺點(diǎn)：所需時(shí)間長(zhǎng)，不夠敏感。③對(duì)流免疫電泳：在相應(yīng)抗原抗體孔之間可見白色沉淀線。打孔：金屬打孔器打兩排孔，抗原孔與抗體孔間距離為45毫米。AFP血清加于抗體孔內(nèi)；病人血清、AFP陽(yáng)性血清、陰性比照血清分別加于抗原孔內(nèi)。電泳：將瓊脂板置電泳槽，抗原孔置陰極端。板兩端分別用濕紗布與緩沖液相連，通電20分鐘。觀看：在相應(yīng)抗原、抗體孔間消滅沉淀線。④火箭電泳：抗原定量試驗(yàn)〔抗體瓊脂板、抗原集中〔自由、定向〕泳。沉淀峰的凹凸與抗原的濃度成正比。敏感度與單擴(kuò)相仿，但需時(shí)較短。III直接凝集反響—撥片凝集〔三〕試驗(yàn)三①補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)①補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)〔簡(jiǎn)潔了解〕方法：待檢系統(tǒng)：Ag〔未知〕+Ab〔〕+補(bǔ)體指示系統(tǒng)：綿羊紅細(xì)胞〔Ag〕＋溶血素〔Ab〕結(jié)果：溶血——陰性不溶血——陽(yáng)性③免疫標(biāo)記技術(shù)：〔原理、常用標(biāo)記物〕②中和反響試驗(yàn)：〔病毒中和試驗(yàn)、毒素中和試驗(yàn)〕略③免疫標(biāo)記技術(shù)：〔原理、常用標(biāo)記物〕概念：將抗體標(biāo)記上顯示性物質(zhì)，通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記物，反映有無(wú)抗原抗體反響，從而間接測(cè)出微量的抗原或抗體。原理：免疫標(biāo)記技術(shù)是在免疫學(xué)、生物化學(xué)及顯微鏡術(shù)進(jìn)展的根底上進(jìn)展起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)，具有特異、敏感、快速的特點(diǎn)。將熒光色素〔常用異硫氰基熒光黃，簡(jiǎn)稱FITC〕與特異性抗體〔或抗原加以觀看。常用的標(biāo)記物有：酶、熒光素、放射性同位素、膠體金、生物素、電子致密物等。④④ELISA〔酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)常用的方法及途徑〕原理：把抗原抗體的免疫反響和酶〔主要有辣根過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶等〕的高效催化作用有原的量成正比。方法：主要有間接法〔用于測(cè)抗體〕和雙抗體夾心法〔用于測(cè)抗原〕。試驗(yàn)：〔四〕試驗(yàn)四革蘭染色〔方法、意義、結(jié)果判定〕革蘭染色〔方法、意義、結(jié)果判定〕意義：對(duì)細(xì)菌鑒別、選擇抗菌藥物、爭(zhēng)論細(xì)菌致病性等有重要意義。原理：1884Gram創(chuàng)立，是細(xì)菌學(xué)中最為經(jīng)典的染色法。與細(xì)菌細(xì)胞壁有關(guān)，尚未完全說(shuō)明。陰性—紅色陽(yáng)性—藍(lán)色細(xì)菌學(xué)總論細(xì)菌是一類具有細(xì)胞壁的單細(xì)胞微生物，形體微小，一般以微米〔μm〕作為測(cè)量單位。細(xì)菌按其外型可分為球菌、桿菌、螺型菌三大類。 不同種類的細(xì)菌大小不一，大多數(shù)球菌直徑約1μm，桿菌長(zhǎng)2～5μm，寬0.3～1μm。細(xì)菌的特別構(gòu)造〔特點(diǎn)及意義〕：莢膜、鞭毛、芽孢、菌毛細(xì)菌生長(zhǎng)現(xiàn)象①細(xì)菌生長(zhǎng)現(xiàn)象〔1〕液體培育基沉淀生長(zhǎng)、混濁生長(zhǎng)、外表生長(zhǎng)〔2〕半固體培育基〔0.1%~0.3%瓊脂粉〕混濁生長(zhǎng)、線狀生長(zhǎng)〔3〕固體培育基〔1.4%~2%瓊脂粉〕菌落、菌苔細(xì)菌變異②細(xì)菌變異一、菌落變異〔S→R變異〕S型菌落(Smooth)光滑菌落—外表光滑有光澤，邊緣整齊。R型菌落(Rough)粗糙菌落—外表粗糙而暗淡，邊緣不整齊。菌落變異是由于菌體本身起變化。一般光滑的細(xì)菌有毒力；粗糙的細(xì)菌沒有毒力或毒力減退。二、鞭毛變異〔H→O變異〕細(xì)菌的鞭毛在某些狀況下可以消逝而變成沒有鞭毛的細(xì)菌。③細(xì)菌色素④細(xì)菌生化反響④細(xì)菌生化反響〔分類、指示劑、變色〕消毒滅菌器材〔看書〕細(xì)菌的劃線分別和藥敏試驗(yàn)細(xì)菌的劃線分別和藥敏試驗(yàn)1mm的游標(biāo)卡尺量取抑菌圈直徑。依據(jù)NCCLS標(biāo)準(zhǔn)，作出“敏感”、“耐藥”和“中介”的推斷。藥敏試驗(yàn)意義：①可推想抗菌藥物治療的效果，“敏感”治療可能有②指導(dǎo)臨床醫(yī)生合理選擇抗生素，AST的結(jié)果為“耐藥”，則應(yīng)更換藥物；③供給所選擇藥物的依據(jù)；④監(jiān)測(cè)耐藥性，分析耐藥菌變遷，把握耐藥菌感染病流行病學(xué)，把握和預(yù)防耐藥菌感染發(fā)生和流行〔五〕試驗(yàn)五11、常見化膿性球菌的形態(tài)及其培育特性①化膿性球菌：葡萄球菌〔左上〕、鏈球菌〔右上〕、肺炎球菌〔左下〕、淋球菌〔右下〕②甲型〔α〕乙型〔β〕丙型〔γ〕溶血鏈球菌、肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌甲型α—草綠色，不完全溶血乙型β—透亮完全溶血丙型γ—不溶血G+〔血瓊脂平板〕〔草綠色不完全溶血〕淋病奈瑟菌G-〔巧克力血瓊脂平板〕其中，鏈球菌的致?。杭幸蜃印餐噶临|(zhì)酸酶〕使膿液稀釋集中。2、白喉?xiàng)U菌〔〔亞碲酸鉀血瓊脂、Albert2、白喉?xiàng)U菌〔〔亞碲酸鉀血瓊脂、AlbertEleck桿菌毒力試驗(yàn)〕③炭疽桿菌的形態(tài)及培育特性③炭疽桿菌的形態(tài)及培育特性④結(jié)核桿菌的形態(tài)及培育特性、抗酸染色〔齊-尼抗酸染色—紅色〕〔羅氏培育基〔綠色〕—菜把戲〔黃色〕〔六〕試驗(yàn)六肥達(dá)反響〔原理、意義、凝集效價(jià)、結(jié)果判定〕①肥達(dá)反響〔原理、意義、凝集效價(jià)、結(jié)果判定〕概念：用的傷寒沙門菌菌體〔O〕抗原和鞭毛〔H〕抗原，以及引起副傷寒的甲型副傷寒沙門菌、乙型副傷寒沙門菌H抗原的診斷菌液與受檢血清做試管或微孔板凝集試驗(yàn)，測(cè)定受檢血清中有無(wú)相應(yīng)抗體及其效價(jià)的試驗(yàn)。結(jié)果推斷：腸道桿菌〔腸道桿菌〔SS培育基、雙糖鐵培育基〕SS培育基：雙糖鐵培育基：④生化反響表④霍亂弧菌⑤厭氧芽孢梭菌的形態(tài)及培育特性〔破傷風(fēng)、產(chǎn)氣莢膜、肉毒梭菌〕破傷風(fēng)梭菌G+〔皰肉培育基〕〔毒素動(dòng)物試驗(yàn)〕G+〔皰肉培育基〕〔血瓊脂平板—雙層溶血環(huán)高層瓊脂斷裂試驗(yàn)〕〔洶涌發(fā)酵試驗(yàn)〕肉毒梭菌G+〔皰肉培育基〕〔血瓊脂平板—完全溶血〕〔七〕試驗(yàn)七G+〔一般瓊脂、沙包培育基〕②型隱球菌〔血瓊脂、沙包培育基〕〔墨汁負(fù)染〕③病毒的致細(xì)胞病變作用〔CPE〕，引起細(xì)胞形態(tài)的變化，如細(xì)胞皺縮、消滅空泡、斑塊、融合、變病變作用〔cytopathiceffect，CPE〕④包涵體胞漿、胞