編制說明-火鍋底料去甲烏藥堿和曲托喹酚 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

1火鍋底料中去甲烏藥堿和曲托喹酚的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法2 4 4 4 4 52.1標(biāo)準(zhǔn)編制的必要性 52.2標(biāo)準(zhǔn)編制的預(yù)期效果 6 6 6 7 7 7 7 75.3.2混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制 85.3.3外標(biāo)混合標(biāo)準(zhǔn)中間液的配制 8 8 8 8 8 8 8 9 9 93 9 9 115.6.3線性范圍、基質(zhì)效應(yīng)以及定量限的考察 12 13 15 15 18 18 18 184方法研究》（課題編號(hào)：2021ZL01），經(jīng)質(zhì)詢和討論，學(xué)術(shù)委員會(huì)建議將立項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)名稱改為分析整理工作，完成了項(xiàng)目技術(shù)報(bào)告，制定了請(qǐng)2家單位對(duì)不同火鍋底料基質(zhì)進(jìn)行方法驗(yàn)證，進(jìn)一步完善了標(biāo)），52標(biāo)準(zhǔn)制定的必要性和預(yù)期效果2.1標(biāo)準(zhǔn)編制的必要性6于芐基異喹啉類生物堿，是一種天然的生物堿，能夠刺激β受體，常被用作強(qiáng)心劑、分別將去甲烏藥堿和曲托喹酚明確列為新增禁用物質(zhì)。上2.2標(biāo)準(zhǔn)編制的預(yù)期效果烏藥堿為研究對(duì)象，結(jié)合QuEChERS樣品前處理技術(shù)，完成了《火鍋底料中去甲烏藥堿和曲托喹酚的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)草案征集，所開發(fā)的方法具3標(biāo)準(zhǔn)制定的原則和依據(jù)在實(shí)施過程中，本項(xiàng)目組按照《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范4主要技術(shù)內(nèi)容的論據(jù)無7GCB,120~400μm)、十八烷基鍵合硅膠(octadecylsilanechemicallybondXevoTQ-S超高效液相色譜儀串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜儀(美國(guó)Waters公司);GR22GⅢ高速冷凍離心機(jī)(日本HITACHI公司);N-EVAPTM112恒溫水浴氮吹儀配備OA-SYSTM水浴加熱裝置(美國(guó)Organomation公司);MS200多管渦旋混勻儀(杭州瑞誠(chéng)儀器有限公司);多管渦旋混勻儀MS200(杭州瑞誠(chéng)儀器有限公司)；Vortex-genie2渦旋混合器(美國(guó)Scientific儀器有限公司)；純水儀Milli-QIntegral5(德國(guó)默克公司)。色譜柱AcquityUPLC85.3.2混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制5.3.3外標(biāo)混合標(biāo)準(zhǔn)中間液的配制）：移取一定量外標(biāo)混合標(biāo)準(zhǔn)中間液用甲醇+10mmol/L甲酸銨水溶液(含0.1%甲酸)稱取試樣2g(精確到0.01g)于50mL的具塞螺旋蓋聚丙烯離心管中，準(zhǔn)確加入100μL1mg/L混合內(nèi)標(biāo)工作溶液，加入20mL含5%甲酸的乙醇溶液，9）；）；表1去甲烏藥堿和曲托喹酚的MRM參數(shù)被測(cè)物定量離子對(duì)(m/z)CV/CE定性離子對(duì)(m/z)CV/CE去甲烏藥堿272.4>107.240/20272.4>161.2去甲烏藥堿-D4276.5>108.340/20276.5>164.3曲托喹酚346.5>164.2346.5>149.16/5曲托喹酚-D9355.6>164.1355.6>137.1注:錐孔電壓(conevoltage,CV),V;碰撞能量(collisionenergy,CE),eV。噴霧離子源，2種目標(biāo)物在正離子模式下有較好的響應(yīng)。所有被測(cè)物均選定[M+H]+量興奮劑檢測(cè)技術(shù)尤為重要,本研究考察了C18(100mm×2.1mm,1.7μm)、HSS采用C18色譜柱分離時(shí)，去甲烏藥堿和曲托喹酚峰形對(duì)稱性和分離效果好;當(dāng)采圖2不同流動(dòng)相體系對(duì)曲托喹酚和去甲烏藥堿響應(yīng)的影響(n=3)。圖3去甲烏藥堿和曲托喹酚以及內(nèi)標(biāo)的MRM選擇離子流色譜圖取液均能將待測(cè)物質(zhì)提取出來，F(xiàn)E提取溶劑中，曲托喹圖3提取溶劑對(duì)曲托喹酚和去甲烏藥堿回收率的影響(n=3)5.6.3線性范圍、基質(zhì)效應(yīng)以及定量限的考察離子對(duì)的峰面積與內(nèi)標(biāo)定量離子對(duì)峰面積比為縱坐標(biāo)（y），以被測(cè)物的濃度（x，參照《SN/T5171-2019出口植物源性食品中去甲烏藥堿的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/準(zhǔn)曲線斜率與溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率的比值考察了目標(biāo)物在火鍋底料基質(zhì)中的信號(hào)增強(qiáng)基質(zhì)待測(cè)物溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線基質(zhì)效應(yīng)（%）清湯清油曲托喹酚去甲烏藥堿曲托喹酚y=1.7542x-0.0692y=1.8224x-0.0659104y=1.9961x-0.0532y=2.0757x+0.0283103y=1.6565x-0.0337y=1.5579x-0.054394.0去甲烏藥堿y=1.7759x-0.0140y=1.9334x+0.0050109曲托喹酚y=1.6565x-0.0337y=1.7393x-0.1038105牛油去甲烏藥堿y=1.7759x-0.0140y=1.5806x-0.067389.0），曲托喹酚去甲烏藥堿添加量(μg/kg）測(cè)得值(μg/kg）平均值(μg/kg）平均回收率RSD(%)添加量(μg/kg）測(cè)得值(μg/kg）平均值(μg/kg）平均回收率（%）RSD(%)2.07.20.960.962.02.024.22.02.032.042.102.042.332.042.022.088.468.598.948.74表6清油火鍋底料中去甲烏藥堿和曲托喹酚的回收率曲托喹酚去甲烏藥堿添加量(μg/kg）測(cè)得值(μg/kg）平均值(μg/kg）平均回收率（%）RSD(%)添加量(μg/kg）測(cè)得值(μg/kg）平均值(μg/kg）平均回收率RSD(%)3.82.02.232.192.02.02.002.0099.83.52.162.192.162.162.262.007.19.5996.06.79.669.929.709.169.848.98曲托喹酚去甲烏藥堿添加量測(cè)得值平均值平均回RSD添加量測(cè)得值平均值平均回RSD(μg/kg）(μg/kg）(μg/kg）收率(%)(μg/kg）(μg/kg）(μg/kg）收率(%)4.44.40.992.087.14.82.086.26.89.349.1091.03.78.928.8288.25.69.078.939.479.489.079.068.108.508.40椒等香辛料中，在火鍋底料的制作過程中可能會(huì)有添本課題邀請(qǐng)了2家與食品檢測(cè)相關(guān)的機(jī)構(gòu)對(duì)所建立的方法進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室間方法2家驗(yàn)證單位均在規(guī)定的時(shí)間完成了驗(yàn)證報(bào)告，表9-表11所列數(shù)據(jù)，是將分析物(μg/kg）ir2限r(nóng)Σ2曲托喹酚ABCABCABC去甲烏藥