抗核抗體檢測(cè)及臨床意義-張瑾

抗核抗體檢測(cè)

及其臨床意義寧波市李惠利醫(yī)院張瑾

風(fēng)濕免疫性疾病診斷方法癥狀、體征自身抗體影像學(xué)檢查病理

風(fēng)濕免疫性疾病相關(guān)自身抗體抗核抗體譜（ANAs）類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎相關(guān)抗體(RF,抗CCP等)抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）抗自身免疫性肌炎譜自身免疫性肝病相關(guān)抗體譜抗磷脂抗體譜抗核抗體譜檢測(cè)的意義有助于彌漫性結(jié)締組織病的分類和診斷抗Sm抗體是SLE的標(biāo)記抗體；抗Scl-70抗體是SSc的標(biāo)記抗體；抗Jo-1抗體是PM/DM的標(biāo)記抗體；觀察疾病活動(dòng)度和治療反應(yīng)抗dsDNA抗體研究發(fā)病機(jī)理抗核小體抗體、抗dsDNA抗體基本概念A(yù)NA熒光核型ANAs中的常見抗體抗核抗體自身抗體：指抗自身組織、器官、細(xì)胞及其成分的抗體ANA：指抗細(xì)胞核成分（DNA，RNA，蛋白質(zhì)和酶）的抗體。ANA存在一個(gè)譜。ANA新概念：抗核酸(Nucleicacid)和核蛋白(Nucleoprotein)抗體總稱某些核抗原成分在核仁和胞漿內(nèi)比核質(zhì)內(nèi)更豐富

(如SSA/RO,Jo-1,rRNP等)ANA檢測(cè)方法-IIF法ANA滴度ANA核型ANA滴度的意義結(jié)締組織病的粗篩（>1:160）陽(yáng)性標(biāo)本還需進(jìn)一步識(shí)別感染、腫瘤及5%正常人可出現(xiàn)低滴度陽(yáng)性ANA陰性基本可以除外SLEANA滴度與疾病活動(dòng)性無明確相關(guān)性熒光顯微鏡下ANA的染色型別均質(zhì)型（H）核膜型（M)斑點(diǎn)型（S）核仁型（N）著絲點(diǎn)型（ACA）胞漿型（C）混合型均質(zhì)型(H)抗組蛋白抗ds/ssDNA抗核小體主要出現(xiàn)在SLE中均質(zhì)型

(H)核膜型

(M)主要與抗dsDNA有關(guān)

與抗原底物片固定方法和備制過程有關(guān)出現(xiàn)在SLE中部分與抗核包膜蛋白有關(guān)

抗板層素抗gp210出現(xiàn)在PBC中

核膜型

(M)與抗ENA成分有關(guān)

抗Sm

抗RNP

抗SS-A

抗SS-B出現(xiàn)在SLE、MCTD、pSS、SSc、PM/DM等

斑點(diǎn)型(S)斑點(diǎn)型(S)與抗核仁蛋白有關(guān)抗Scl-70

抗RNA多聚酶I

抗PM-Scl出現(xiàn)在SSc中核仁

型(N)核仁

型(N)與抗著絲點(diǎn)染色質(zhì)有關(guān)存在于有絲分裂期出現(xiàn)在SSc、CREST綜合征等中著絲點(diǎn)

型(ACA)著絲點(diǎn)

型(ACA)與抗胞漿成分有關(guān)抗核糖體P蛋白（rRNP）：出現(xiàn)在SLE中抗合成酶：Jo-1、PL-12、PL-7、OJ、EJ抗信號(hào)識(shí)別顆粒（SRP)抗線粒體：出現(xiàn)在PBC中抗高爾基體抗溶酶體等等

胞漿型

(C)見于PM/DM

胞漿型(C)ANA熒光核型小結(jié)均質(zhì)型（H）：像大餅，SLE相關(guān)核膜型（M)：像圈圈，SLE相關(guān)斑點(diǎn)型（S）：像藕片，抗ENA核仁型（N）：像紐扣，SD相關(guān)著絲點(diǎn)型（ACA）：像滿天星，抗ACA胞漿型（C）：像空心大餅,SLEPM/DMPBC相關(guān)混合型：稀釋后檢測(cè)有助于區(qū)分抗核抗體譜（ANAs）ANAs抗核不溶成分抗核可溶成分（抗ENA）抗染色體DNA蛋白抗核仁抗體

抗DNA抗體

抗核小體抗體

抗組蛋白H1,H2A,H2B,H3,H4

抗Sm,U1RNP,SSA,SSB抗Scl-70,Jo-1,PM-1抗rRNP,PCNA…….dsDNAssDNA抗著絲點(diǎn)抗體（ACA)抗5sRNA抗dsDNA檢測(cè)方法以短膜蟲或馬疫錐蟲為底物的間接免疫熒光法(IIF)：≥1:5短膜蟲或馬疫錐蟲的動(dòng)基體內(nèi)含有天然純dsDNA，未經(jīng)人工處理，不含組蛋白與ssDNA，抗原性純一特異。優(yōu)點(diǎn)：特異性好

抗dsDNA檢測(cè)方法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）:≥100IU/ml優(yōu)點(diǎn)：敏感性最高

缺點(diǎn)：過于敏感，同時(shí)可能檢測(cè)到ssDNA抗體和低親和力dsDNA抗體,而這兩種致病力均不強(qiáng)

放射免疫法(Farr):≥20%

優(yōu)點(diǎn)：對(duì)高親和度DNA抗體的檢測(cè)優(yōu)于CL-IIF缺點(diǎn)：具有放射性，對(duì)技術(shù)人員身體造成一定影響蛋白印跡法（WB）

缺點(diǎn)：dsDNA抗原在純化包備過程中可變性解鏈，變成ssDNA,導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果不同方法檢測(cè)SLE患者抗dsDNA抗體的結(jié)果：everythingispossible至少用兩種方法做（報(bào)告結(jié)果時(shí)注明方法學(xué)）,互為補(bǔ)充。如：IIF法+ELISA法

抗dsDNA抗體臨床意義SLE的血清特異性抗體多有致病性（IgG型），與親和力（高）有關(guān)與LN與SLE疾病活動(dòng)性相關(guān)，活動(dòng)期達(dá)90％可用于SLE疾病活動(dòng)期判斷＆藥物療效觀察與SLE急性皮疹、血管炎、漿膜腔炎、白細(xì)胞減少等有關(guān)抗組蛋白抗體（AHA）

（酶聯(lián)免疫吸附法X2SD)可出現(xiàn)于多種結(jié)締組織病，不具有診斷特異性SLE：50%

活動(dòng)期SLE可達(dá)90.2%與LN相關(guān)，與SLE疾病活動(dòng)性存在一定意義的相關(guān)性藥物性狼瘡（DIL）：>90%如：異煙肼、苯妥因鈉、青霉胺、雌激素等

僅有AHA而無其他ANA，強(qiáng)烈支持DIL其他結(jié)締組織?。?3-30%如：RA、PBC、SSc等

核小體是真核細(xì)胞染色質(zhì)的基本復(fù)制單位，由組蛋白與DNA組成。參與SLE發(fā)病機(jī)制：多克隆B細(xì)胞活化劑產(chǎn)生ANuA，先于其他ANA促進(jìn)抗dsDNA與AHA形成參與LN的發(fā)生

抗核小體抗體（ANuA）抗核小體抗體臨床意義SLE標(biāo)記性/高特異性自身抗體敏感性：58%-66%（優(yōu)于抗dsDNA及抗Sm）特異性：98%-100%（與抗dsDNA相當(dāng)）用于SLE的早期診斷ANuA的產(chǎn)生早于抗dsDNA、AHA抗dsDNA陰性者有1/4～1/2ANuA陽(yáng)性與LN相關(guān)，用于SLE疾病活動(dòng)性監(jiān)測(cè)ANuA、抗dsDNA、AHA聯(lián)合檢測(cè)意義抗ENA抗體

extractablenuclearantigen可提取性核抗原成分：核酸與核蛋白，不含染色質(zhì)成分功能：參與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制、RNA轉(zhuǎn)錄、蛋白翻譯合成來源：無種屬差異，有組織不均一性理化特性：對(duì)溫度和RNA酶敏感（U1RNP、SS-A）意義：抗ENA抗體是ANAs中范圍最廣、最為重要的一簇抗體，與疾病活動(dòng)性大多