單側(cè)腎動脈套管法建立腎血管性高血壓模型的實驗研究

單側(cè)腎動脈套管法建立腎血管性高血壓模型的實驗研究

腎血管性高血壓是指一側(cè)或兩側(cè)腎動脈樹干或分支段狹窄且堵塞，腎血管流量降低，導(dǎo)致腎缺氧的高血壓。這是高血壓的一個常見原因。我國腎血管性高血壓占高血壓人群的5%~7%。腎動脈狹窄的常見病因有3種:動脈粥樣硬化性病變、纖維肌性發(fā)育異常和大動脈炎。理想的治療是解除血管梗阻恢復(fù)血運,臨床以各種腎動脈重建手術(shù)治療為主,但隨著介入放射學(xué)的發(fā)展經(jīng)皮腔內(nèi)血管成形術(shù)、支架植入術(shù)和腎動脈栓塞術(shù)已應(yīng)用于腎動脈狹窄所致腎血管性高血壓的治療。目前各種腎血管性高血壓動物模型多建立在小動物(鼠、兔)上,不便于介入治療的研究,為提高對腎動脈狹窄所致腎血管性高血壓的臨床診治水平,比較腎切除與腎動脈栓塞的治療效果,尋找簡單、有效、經(jīng)濟的治療方法,我們建立狗的動物模型并進行了監(jiān)測。材料和方法一、動物實驗組實驗共選用京26號雜種狗36只,隨機選取,性別不限,體重22~28kg。(一)正常對照組6只,觀察正常狗的:①血壓;②腎素活性水平及分腎比;③肌酐和尿素水平;④腎小球近球細胞數(shù)目;⑤腎組織及腎動脈壁病理結(jié)構(gòu)。(二)狹窄對照組6只,觀察制作的單側(cè)腎動脈狹窄模型狗的上述指標并確認模型建立是否獲得成功(即與正常組比較是否獲得一持續(xù)穩(wěn)定的高血壓狀態(tài))。(三)腎切除術(shù)組6只,除觀察上述指標確認模型建立是否成功外并觀察腎臟切除對于腎血管性高血壓動物模型的治療效果。(另文討論)(四)腎動脈血栓形成18只,除觀察上述指標確認模型建立是否成功外并觀察腎動脈栓塞對腎血管性高血壓動物模型的治療效果。(另文討論)二、腎血管性高血壓動物模型的制作(一)術(shù)后給藥及術(shù)后處理36只實驗狗均于實驗開始時行頸動脈皮鞘術(shù),以便在實驗全程對實驗狗的血壓使用袖帶加壓法進行監(jiān)測。方法如下:將實驗狗用3%戊巴比妥鈉0.5~1ml/kg劑量行肌注全麻,致呼吸平穩(wěn)麻醉滿意,肌注0.5mg阿托品,氣管插管,建立靜脈通路。頸部備皮,消毒鋪巾,于頸部取旁正中切口,縱行切皮,分離皮下組織、頸前靜脈及其下肌肉組織,暴露并游離頸總動脈,將其置于皮下,逐層縫合包扎。術(shù)中及術(shù)后給予青霉素160萬U、鏈霉素50萬U加入500ml生理鹽水內(nèi)靜脈滴入。術(shù)后3d每日肌注青霉素60萬U,并清潔創(chuàng)口。(二)術(shù)后關(guān)腹、腎動脈內(nèi)固定術(shù)除正常對照組外,其它實驗狗均行之(于頸動脈皮鞘術(shù)后第4或第5天),以獲得持續(xù)穩(wěn)定的腎血管性高血壓動物模型。方法如下:麻醉及備皮如上。取腹部正中切口入腹腔,分開腸管,沿腹主動脈向上觸及腎動脈,分離并暴露一側(cè)腎動脈,取直徑約1mm套管約1.5cm縱行剖開,將之套在暴露的腎動脈上,以7號線分近、中、遠3點結(jié)扎(以血管造影顯示狹窄大于70%為滿意)(圖1),生理鹽水沖洗腹腔,撒入80萬單位青霉素,逐層關(guān)腹,縫合包扎。術(shù)后靜脈內(nèi)給予青霉素400萬U、鏈霉素100萬U加入500ml生理鹽水內(nèi)滴入,常規(guī)補10%葡萄糖500ml。術(shù)后禁食水24h,每日肌注青霉素80萬U1周,并消毒創(chuàng)口觀察體征(站立、精神、大小便是否正常)。三、實驗監(jiān)測指標(一)腎切除及栓塞各組均行頸動脈皮鞘術(shù)。正常組、對照組及治療組腎臟切除及栓塞術(shù)前從實驗開始日至結(jié)束采用袖帶法每日測壓2次(上午8時和下午3時),腎臟切除及栓塞術(shù)后每4h測壓1次。(二)血管造影檢查除正常對照組外均于腎動脈狹窄術(shù)后7~10d行血管造影以證實腎動脈狹窄形成及程度(>70%可形成病理性高血壓);栓塞治療組術(shù)后行造影證實栓塞完全。(三)靜脈狹窄術(shù)后入血①本實驗于各組頸動脈皮鞘術(shù)前,腎動脈狹窄術(shù)后經(jīng)導(dǎo)管于下腔靜脈、兩側(cè)腎靜脈各取血10ml;②采用北京北方生物技術(shù)研究所提供的放免分析盒分析測定。(四)測量血容量和尿素水平本實驗于各組頸動脈皮鞘術(shù)前,腎動脈狹窄術(shù)后,腎臟切除或腎動脈栓塞術(shù)后及處死前均在清醒狀態(tài)下經(jīng)股靜脈取血6ml分置于2個試管內(nèi)。(五)病理檢查取各組正常、狹窄側(cè)腎臟縱行剖開腎臟經(jīng)過固定、取材、浸蠟包埋、切片染色后觀察腎小球近球細胞數(shù)目、腎組織及動脈壁結(jié)構(gòu)。(六)統(tǒng)計分析采用SPSS8.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果一、實驗?zāi)Ｐ皖i動脈皮鞘術(shù)及腎動脈狹窄術(shù)均進行順利,無嚴重并發(fā)癥,實驗狗精神狀態(tài)良好,食量及大小便正常。二、血壓(一)正常狗血壓正常對照組及其他各組狗術(shù)前正常血壓為(142.5±2.6)/(87.6±2.5)mmHg。(二)腎動脈狹窄術(shù)后狗血壓情況腎動脈狹窄術(shù)后1~3d血壓開始升高,6d后達到一穩(wěn)定的高水平,為(195.6±14.7)/(135.6±10.5)mmHg,腎動脈狹窄術(shù)后狗血壓顯著高于正常(P<0.01)。說明腎動脈狹窄術(shù)后形成了病理性高血壓,并且可維持6~8周(本實驗持續(xù)時間)。三、局限性、滑動、均勻腎動脈狹窄左側(cè)18只,右側(cè)12只。狹窄均位于中段,狹窄段局限、光滑、均勻呈管狀。正常管徑4.0~5.3mm,平均4.5mm;狹窄后血管直徑為1.2~1.7mm,平均1.5mm。腎動脈平均狹窄程度為80%,均存在狹窄后擴張(圖2)。四、腎動脈狹窄后外周血pra水平比較36只實驗狗正常外周PRA(血漿腎素活性)平均每小時為(0.90±0.74)ng/ml;腎動脈狹窄后為平均每小時(7.89±1.19)ng/ml。狹窄后外周PRA水平較正常狀態(tài)下PRA水平顯著升高(P<0.01)。30只行狹窄術(shù)實驗狗腎靜脈腎素比值RVRR(患側(cè)腎靜脈血漿腎素活性與健側(cè)腎素活性比值)均>1.5(表1)。五、l和3.54.32正常狗血肌酐及尿素水平分別為(0.94±0.25)mg/dl和(15.5±4.22)mg/dl;狹窄后分別為(0.92±0.23)mg/dl和(13.73±4.27)mg/dl;說明健側(cè)腎臟在狹窄后可起到代償作用,腎功能未受到明顯損害。六、狹窄對照組腎小球近球細胞數(shù)目改變正常對照組為(5.3±2.1)個,狹窄對照組(9.1±3.2)個。狹窄對照組近球細胞數(shù)目顯著高于正常對照(P<0.01)。討論一、外周血血漿腎素活性根據(jù)病理學(xué)光鏡表現(xiàn)見狹窄腎小球近球細胞數(shù)目顯著增多,腎小球近球細胞數(shù)目增多是血漿腎素水平升高的病理學(xué)基礎(chǔ)。實驗中監(jiān)測到血漿腎素活性明顯升高而血漿腎素活性升高是導(dǎo)致狗血壓升高的直接原因,外周血血漿腎素活性水平升高,尤其是分腎血漿腎素活性比值大于1.5是單側(cè)腎動脈狹窄后高血壓的基本特征,對單側(cè)腎血管性高血壓的診斷亦有較大的臨床意義。同時,血管造影證實結(jié)扎側(cè)狹窄段光滑均勻,狹窄程度大于80%,所以以套管系線結(jié)扎法制作的單側(cè)腎動脈狹窄動物模型能得到一持續(xù)穩(wěn)定的病理性腎血管性高血壓,實驗?zāi)Ｐ椭谱魇浅晒Φ?。二、實驗結(jié)果及分析實驗中,實驗狗血肌酐和尿素監(jiān)測始終維持在正常水平,因此可以認為,實驗狗