維生素藥物分析（藥物分析技術(shù)課件）

果味維生素C的含量測定（紫外分光光度法）果味維生素C的含量測定維生素C是人體重要的維生素之一，它影響膠原蛋白的行成，參與人體多種氧化-還原反應，并且有解毒作用。果味維生素C的含量測定測定原理

維生素C屬于水溶性維生素，分子式C6H8O6，分子結(jié)構(gòu)中具有二烯醇結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)如下：果味維生素C的含量測定測定原理維生素C分子中具有共軛雙鍵，因此在紫外光區(qū)有很強的吸收。根據(jù)維生素C在稀鹽酸溶液中，Vc吸收曲線比較穩(wěn)定，在最大吸收波長處，其吸光度A的大小與維生素C的濃度大小成正比，符合朗伯-比爾定律果味維生素C的含量測定測定原理在最大吸收波長處，首先繪制出Vc的標準曲線，然后在相同條件下測定供試品的吸光度A，由測得的吸光度A在標準曲線上查得濃度，換算為藥品中的含量(mg/片)果味維生素C的含量測定測定方法維生素C標準溶液01準確稱取105℃干燥至恒重的維生素C0.1000g,加10mL3mol/L鹽酸溶解,并以蒸餾水定容到1000mL。果味維生素C的含量測定測定方法最大吸收波長的測定：02準確吸取Vc標準溶液5.00mL于50mL容量瓶中，以去離子水稀釋至刻度,搖勻，在200～300nm范圍確定最大吸收波長。果味維生素C的含量測定測定方法標準曲線的繪制03準確吸取Vc標準溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL于6個50mL容量瓶中,以去離子水稀釋至刻度,搖勻，在最大吸收波長處分別測定吸光度A，并繪制標準曲線。果味維生素C的含量測定測定方法樣品測定04取4片果味Vc片劑研細,準確稱取0.25g～0.26g于100mL燒杯中,加入0.50mL3mol/LHCl溶解,轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶，以去離子水稀釋至刻度。移取樣品溶液5.00mL于50mL容量瓶中,定容，在最大波長處測定其吸光度。（測定條件同標準曲線）由測得的吸光度A在標準曲線上查得濃度,換算為藥品中含量(mg/片)果味維生素C的含量測定測定時的注意事項維生素C在空氣中易被氧化，在配制維生素C樣品溶液時，必須加入新煮沸的冷卻蒸餾水，以防止水中的氧化性物質(zhì)干擾測定。維生素C在酸性介質(zhì)中較為穩(wěn)定，故測定時應在稀酸溶液中進行。03小結(jié)01維生素C的結(jié)構(gòu)02紫外分光光度法的測定方法維生素C對人體有很多好處，哪些蔬菜富含維生素C？04思考題維生素E的含量測定——內(nèi)標法維生素E的含量測定維生素E

維生素E是有8種形式的脂溶性維生素，為一重要的抗氧化劑。維生素E包括生育酚和三烯生育酚兩類共8種化合物，即α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ三烯生育酚，α-生育酚是自然界中分布最廣泛含量最豐富活性最高的維生素E形式。維生素E的含量測定測定原理供試品和內(nèi)標均制成甲醇溶液，進入氣相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器于波長254nm處檢測維生素E（C31H52O3）和內(nèi)標正三十二烷的吸收值，計算出其含量。維生素E的含量測定測定方法色譜柱儀硅酮（OV-17）為固定液相，涂布濃度為2%填充柱，或以HP-1毛細管柱（100%二甲基聚硅氧烷）為分析柱；理論塔板數(shù)按維生素E峰計算不低于500（填充柱）或5000（毛細管柱），維生素E峰與內(nèi)標物質(zhì)峰的分離度應符合要求。流動相為正己烷-正戊醇（997：3），檢測波長為254nm，柱溫為265℃。色譜條件與系統(tǒng)適應性實驗01維生素E的含量測定測定方法取正三十二烷適量，加正己烷溶解并稀釋成1mL中含1.0mg的溶液，搖勻，作為內(nèi)標溶液，另取維生素E對照品約20mg，精密標定，置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標溶液10mL，密塞，振搖使溶解，取1?3μL注入氣相色譜儀，計算校正因子。校正因子測定02維生素E的含量測定測定方法取本品20粒精密稱定，清出內(nèi)容物混合均勻。囊殼以乙醚清洗干凈，置通風處使溶劑自然揮盡，再精密稱定囊殼質(zhì)量，求得平均每粒質(zhì)量，精密稱取內(nèi)容物適量（約相當于維生素E20mg），置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標溶液10mL，密塞，振搖使溶解，取取1?3μL注入氣相色譜儀，計算含量。樣品的測定03維生素E的含量測定校正因子的計算式中，AS：為內(nèi)標物的峰面積

AR：為對照品的峰面積

mS：為加入內(nèi)標物的質(zhì)量

mR：為加入對照品的質(zhì)量維生素E的含量測定含量的計算式中，Ai：為供試品峰面積

mi：為供試品的含量維生素E的含量測定標示量的計算式中，平均片量、標示量均以mg為單位

mi/Vi：為1μL供試品溶液中所含維生素E的質(zhì)量，μg10：為供試品溶液的總體積，mL1/1000：為將μg換算成mg1000：為將1μL中的質(zhì)量換算為1mL中的質(zhì)量，μg03小結(jié)01維生素E02內(nèi)標法的測定自然界中含維生素e的食物有哪些？04思考題維生素藥物分析

維生素藥物分析維生素是維持人體正常代謝功能所必需的活性物質(zhì)，主要用于機體的能量轉(zhuǎn)移和代謝調(diào)節(jié)，體內(nèi)不能自行合成，需要從食物中攝取。它們的結(jié)構(gòu)各不相同，有些是醇、酯，有些是胺、酸，還有些是酚和醛。不同的維生素具有不同的理化性質(zhì)和生理作用。脂溶性——如VitA、D2、D3、E、K1等水溶性——如VitB族(B1、B2、B6、B12、泛酸、葉酸)VitC。維生素藥物分析不是機體需要，無需長期服用過猶不及

適量為宜維生素藥物分析維生素A（VitA）的分析——化學結(jié)構(gòu)12345678R：

-H維生素A醇-COCH3

維生素A醋酸酯-COC15H31

維生素A棕櫚酸酯維生素藥物分析維生素A（VitA）的分析——鑒別實驗維生素A在三氯甲烷中無水、無醇的條件下能與三氯化銻試劑反應，形成不穩(wěn)定的正碳離子，顯藍色，漸變成紫紅色。三氯化銻反應（Cart-Pricefy）維生素藥物分析維生素A（VitA）的分析——鑒別實驗5個共軛雙鍵λmax為326nm一個吸收峰紫外吸收光譜法6個共軛雙鍵λmax為

340～390nm有三個吸收峰維生素藥物分析維生素A（VitA）的分析——鑒別實驗紫外吸收光譜法維生素藥物分析維生素A（VitA）的分析——鑒別實驗硅膠G為吸附劑，環(huán)己烷-乙醚（4：1）為展開劑，三氯化銻或磷鉬酸為顯色劑，規(guī)定比值（Rf）鑒別維生素A。薄層色譜法維生素藥物分析維生素A（VitA）的分析——含量的測定利用維生素A與三氯化銻的無水三氯甲烷溶液反應，產(chǎn)生藍色，在618?620nm波長處有最大吸收，采用標準曲線法比色測定維生素A。三氯化銻比色法維生素藥物分析維生素A（VitA）的分析——含量的測定測定依據(jù)：維生素A分子結(jié)構(gòu)中具有共軛多烯體系，在波長325?328nm呈現(xiàn)選擇性吸收，有最大吸收峰，可用以含量測定。其最大吸收峰的位置隨溶劑不同而異，表1為不同溶劑中維生素A醇及其醋酸酯的最大吸收波長、吸收系數(shù)和換算因數(shù)。紫外分光光度法維生素藥物分析維生素A（VitA）的分析——含量的測定紫外分光光度法溶劑維生素A醋酸酯維生素A醇λmax/nm換算因數(shù)（F）λmax/nm

換算因數(shù)（F）環(huán)己烷327.515301900326.517551900異丙醇325.016001830325.018201830表1：維生素A醇及其醋酸酯在不同溶劑中的紫外吸收維生素藥物分析維生素A（VitA）的分析——含量的測定紫外分光光度法波長（三點）選擇

1：VitA的max（328nm）；23分別在1的兩側(cè)各選一點第一法校正公式：第二法校正公式：λ1=328nmλ2=316nmλ3=340nm維生素藥物分析維生素A（VitA）的分析——含量的測定紫外分光光度法測定對象:VitA醋酸酯第一法：等波長差法第一法適用于濃度較高的維生素A酯及其含量的測定。λ1=325nmλ2=310nmλ3=334nm維生素藥物分析維生素A（VitA）的分析——含量的測定紫外分光光度法測定對象:VitA醇

第二法等吸收度法(皂化法)一般第一法無法消除雜質(zhì)干擾時用此法維生素藥物分析維生素A（VitA）的分析——含量的測定高效液相色譜法本法適用于維生素A醋酸酯原料及其制劑中維生素A的含量測定。維生素藥物分析維生素B1(VitB1)的分析——化學結(jié)構(gòu)維生素B1（VitaminB1，VB1）又稱鹽酸硫胺素，是最早被人們提純的水溶性維生素，具有維持正常糖代謝的作用。維生素藥物分析維生素B1(VitB1)的分析——鑒別實驗硫色素反應維生素藥物分析維生素B1(VitB1)的分析——鑒別實驗沉淀反應分子結(jié)構(gòu)中含有雜環(huán)，易與生物堿沉淀劑(碘化鉍鉀、碘化汞鉀、苦味酸等)，硅鎢酸，雷氏鹽等作用形成組成恒定的沉淀。維生素藥物分析維生素B1(VitB1)的分析——鑒別實驗紫外吸收光譜

維生素B1分子結(jié)構(gòu)中具有共軛雙鍵，因此有紫外吸收，可在其最大吸收波長246nm處測定吸收峰，從而提高紫外吸收定性鑒定。維生素藥物分析維生素C(VitC)的分析——化學結(jié)構(gòu)維生素C，又稱維他命C，是一種多羥基化合物，化學式為C6H8O6，結(jié)構(gòu)類似葡萄糖。維生素藥物分析維生素C(VitC)的分析——鑒別實驗與氧化劑的反應維生素藥物分析維生素C(VitC)的分析——鑒別實驗與氧化劑的反應與2,6-二氯靛酚反應與AgNO3反應與堿性酒石酸銅反應

與KMnO4反應維生素藥物分析維生素C(VitC)的分析——鑒別實驗糖類的反應維生素C的結(jié)構(gòu)與糖類類似，具有糖類性質(zhì)，可在三氯醋酸或鹽酸存在下，經(jīng)水解、脫羧、失水等反應，轉(zhuǎn)變成糠醛，然后與吡啶在50℃下反應而產(chǎn)生藍色，可以鑒別維生素C。維生素藥物分析維生素C(VitC)的分析——鑒別實驗紫外吸收光譜

維生素C的分子結(jié)構(gòu)同樣具有共軛雙鍵，在紫外又吸收，以0.1mol/LHCl溶液為介質(zhì)時其最大吸收峰為243nm，可以定性鑒別。維生素藥物分析維生素C(VitC)的分析——含量的測定碘量法原理H+反應摩爾比1∶1淀粉指示液，終點至藍色不消失維生素藥物分析維生素C(VitC)的分析——含量的測定2,6-二氯靛酚滴定法

2,6-