f級近交系wisar大鼠血常規(guī)值的影響因素研究

f級近交系wisar大鼠血常規(guī)值的影響因素研究

wistar大鼠在20世紀20年代在wistar研究所獲得了成功?，F廣泛分布于世界各地。1979年從美國國立醫(yī)學研究所引到英國牛津實驗動物場(OLAC)。1985從OLAC引到中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所(IMLAS)。這種大鼠對各種營養(yǎng)物質敏感,適用于各種營養(yǎng)、代謝性疾病研究;垂體腎上腺系統發(fā)達,應激反應靈敏,適用于神經-內分泌實驗研究,還用于藥物、腫瘤、傳染病、關節(jié)炎、肝外科等醫(yī)學研究領域。Wister大鼠是生物醫(yī)學研究中使用歷史最長的大鼠品系。本中心于2002年從國家嚙齒類種子中心上海分中心引進5♂和5♀近交系Wistar大鼠進行飼養(yǎng)繁殖,并已經建立起核心群、血緣擴大群和生產群,至今已達到F5代,已經取得廣東省實驗動物微生物監(jiān)測所頒發(fā)的SPF級微生物檢測合格證(合格證號粵2005A014)。為了掌握本中心近交系Wistar大鼠不同周齡的血常規(guī)值,我們對本群大鼠進行血常規(guī)值的測定,為采用該大鼠從事生物醫(yī)學研究的科研人員提供基礎數據。1材料和方法1.1血常規(guī)值測定時間由本中心所飼養(yǎng)的近交系Wistar大鼠生產群中分別選取出生3周齡、6周齡、13周齡和52周齡老年鼠各100只,雌雄各半用于血常規(guī)值的測定(合格證號粵2005A014)。1.2飼料與飼料制備飼養(yǎng)于屏障系統中。室內空氣經初效、中效和高效三級過濾,潔凈度達到國標1萬級標準。溫度控制在20℃~25℃,相對濕度在60%左右,光照周期為12h∶12h(光照起始時間為:6:00),換氣次數20~50次/h。所用飲水、墊料均經132℃,10min高壓蒸汽滅菌,飼料為本中心配制加工的全價顆粒飼料,并經121℃,30min高壓蒸汽滅菌。水和飼料自由飲食。1.3主要實驗設備和試劑1.3.1主要實驗設備CelltacEMEK-7222K血液分析儀:日本NIHONKOHDEN。1.3.2儀器試劑dh—主要試劑:溶血劑(DH—910、DH—680)、清洗劑(DH—520、DH—620)、稀釋液(DH—640),由上海市東湖儀器試劑有限公司生產。1.4血常規(guī)指標檢測從該近交系Wistar大鼠生產群中隨機抽取3周、6周、13周和老年鼠(52周)各100只大鼠,雌雄各半,動物空腹19h后在乙醚麻醉的狀態(tài)下從眼眶靜脈叢采血1mL,EDTAK2抗凝,采用全血檢測以下血常規(guī)指標:白細胞總數(WBC)及白細胞分類(DLC)、紅細胞總數(RBC)、血紅蛋白(HGB)、紅細胞壓積(HCT)、平均紅細胞體積(MCV)和血小板總數(PLT)等。1.5統計方法實驗所得數據采用SPSS11.0統計軟件進行雙因素方差分析。2周齡對中性細胞、血小板細胞及紅細胞血色素量的影響雙因素方差分析表明(表1),SPF級Wistar大鼠周齡對體重(F=3525)、白細胞(F=26.8)、淋巴細胞(F=7.34)、單核細胞(F=5.31)、血紅蛋白(F=9.00)、紅細胞壓積(F=9.07)、血小板(F=13.34)、血小板壓積(F=50.81)、血小板分布寬度(F=65.41)有極顯著影響(P<0.01),周齡對中性粒細胞(F=3.60)、血小板平均體積(F=3.18)有顯著影響(P<0.05),周齡對嗜酸性細胞(F=1.46)、嗜堿性細胞(F=1.32)、紅細胞(F=0.80)、紅細胞平均體積(F=2.09)、平均紅細胞血色素量(F=1.07)無顯著影響(P>0.05)。SPF級Wistar大鼠性別對體重(F=93)、白細胞(F=7.11)、血小板分布寬度(F=13.40)有極顯著影響(P<0.01),性別對嗜堿性細胞(F=5.69)有顯著影響(P<0.05),性別對中性粒細胞(F=0.18)、淋巴細胞(F=2.30)、單核細胞(F=0.19)、嗜酸性細胞(F=0.33)、紅細胞(F=0.31)、血紅蛋白(F=0.20)、紅細胞壓積(F=0.55)、紅細胞平均體積(F=0.12)、平均紅細胞血色素量(F=0.84)、血小板(F=0.003)、血小板壓積(F=3.17)、血小板平均體積(F=0.14)無顯著影響(P>0.05)。續(xù)表13fps級近交系wist大鼠血常規(guī)測定結果實驗動物被稱為生命科學領域中的活試劑,既是生命科學研究的對象,又是科學研究的載體,其各項生理數據、血液指標的準確性對生命科學研究具有重要意義。大量資料顯示,血常規(guī)值受品種品系、性別、年齡、營養(yǎng)因素的影響,這些因素的微小變化都會引起測定值的變化,因此應該對不同品種、不同年齡段、不同性別等的實驗動物血液學指標進行分別測定,以便掌握更為準確客觀的實驗動物基礎數據,便于科研工作者參考查閱。本實驗分別對不同年齡段和性別的SPF級近交系Wistar大鼠血常規(guī)進行測定,結果顯示動物在幼齡期3周齡、生長期6周齡、成年期13周齡和老年期52周齡的血常規(guī)值數據比較,有極其顯著的差異,雌雄性別也有顯著的差異。同時與詹純列等報道的SPF級遠交系Wistar大鼠青年和老年鼠血常規(guī)值進行比較,結果發(fā)現WBC、NE%、MO%、紅細胞平均體積MCV(fl)、平均紅細胞血色素量MCH(pg)、血小板記數PLT(×109/L)比詹純列等報道稍微高、紅細胞RBC(×1012/L)、血紅蛋白HGB(g/L)、紅細胞壓積HCT(%)比較低,PCT(fl)、血小板平均體積MPV(fl)、血小板分布寬度PDW(fl)比較一致。結果的不盡相同一方面可能是由于采樣方法、飼養(yǎng)環(huán)境等因素所致;另一方面動物品種、品系對血常規(guī)值的影響是主要因素。近交系動物遺傳上穩(wěn)定,不受近交、選擇和遺傳突變的影響。不同近交系之間由于近交而固定的基因不同,因此遺傳差異很大。這提示廣大科技工作者在科研工作中,有必要根據自己開展課題的具體情況,按照動物品種(品