全自動生化分析儀在spr小鼠血液生化學中的應用

全自動生化分析儀在spr小鼠血液生化學中的應用

由于親血性p-c、c7bl、6和daa-2的遺傳基因，個體差異小，對試驗反應均勻，試驗結(jié)果準確可靠，因此廣泛應用于生物醫(yī)學研究、藥物和生物制品的測定。近年來,有關小鼠的生理生化正常值國內(nèi)已有些報道,但由于動物品種、品系、飼養(yǎng)條件、檢測方法以及所用儀器和試劑等因素對其測定值有一定影響,因而文獻報道值略有差異。研究采用7080型全自動生化分析儀及全自動動物血液分析儀,對同一環(huán)境3種SPF近交系小鼠性別間和品系間血液生理生化正常參考值進行比較,試驗結(jié)果具有一定的參考價值。1材料表面1.1動物中心飼育SPF近交系Balb/c、C57BL/6和DBA/2小鼠,由蘭州大學基礎醫(yī)學院實驗動物中心飼育。生產(chǎn)許可證為SCXK(甘)2009-0004,使用許可證為SYXK(甘)2009-0005。1.2血液儀器檢測7080型全自動生化分析儀、全自動動物血液分析儀、血液生化檢測試劑盒,均購自北京柏定生物工程有限公司;血液試劑,購自山東卓越科學儀器有限責任公司。2方法2.1動物飲用水處理器依循環(huán)境點試驗所用動物均飼養(yǎng)在SPF環(huán)境內(nèi),飼喂SPF鼠料(由北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供)。飲水經(jīng)試驗動物飲用水處理器(由杭州潔達凈化科技有限公司提供)處理。動物自由采食和飲水,每周補充葵花籽2次。所用墊料經(jīng)高壓滅菌,每周更換2次。定期用84消毒液對地板及所用器具消毒,并且每2周紫外線照射消毒1次。2.2生化指標測定分別取6～8周齡的SPF近交系Balb/c、C57BL/6、DBA/2小鼠各40只(雌雄各半),從眶后靜脈竇采血,靜置2h后離心分離血清,利用全自動生化分析儀進行生化指標測定,生化指標及測定方法見表1。2.3紅細胞/血小板檢測分別取6～8周齡的SPF近交系Balb/c、C57BL/6、DBA/2小鼠各40只(雌雄各半),從眶后靜脈竇采血放到用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA/2K)抗凝的抗凝管中,搖勻,進行血液生理指標測定。測定指標包括白細胞(WBC)數(shù)、嗜中性白細胞(NE)數(shù)、淋巴細胞(LY)數(shù)、單核細胞(MO)數(shù)、嗜酸性粒細胞(EO)數(shù)、嗜堿細胞(BA)數(shù)、嗜中性白細胞(NE)百分比、淋巴細胞(LY)百分比、單核細胞(MO)百分比、嗜酸性粒細胞(EO)百分比、嗜堿細胞(BA)百分比、紅細胞(RBC)數(shù)、血紅蛋白濃度(Hb)、紅細胞比容(HCT)、平均紅細胞體積(MCV)、平均紅細胞血紅蛋白含量(MCH)、平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細胞分布寬度(RDW)、血小板數(shù)量(PLT)、平均血小板容量(MPV)。紅細胞/血小板檢測采用直流阻抗法,并通過聚焦流技術和多體積通道增加精度。白細胞五分類采用直流阻抗與交流射頻技術相結(jié)合的方法,能夠分辨出更復雜的動物細胞。2.4統(tǒng)計分析采用SPSS15.0統(tǒng)計軟件對試驗數(shù)據(jù)進行分析。試驗數(shù)據(jù)以xˉ±sxˉ±s表示,2個樣本間用t檢驗;品系間用單因素方差分析。3結(jié)果與分析3.1alt、tp、alb、bun、aldh、a/g、glo由表1可知:Balb/c小鼠雌雄間血液生化指標ALT、TP、ALB、BUN、CHO、HDL-C、LDL-C、LDH、A/G、GLO差異極顯著(P<0.01),其他差異不顯著。3.2cre、tp、alb、alp、alh、aa/g、glo由表2可知:C57BL/6小鼠雌雄間血液生化指標ALT、AST、CRE差異均顯著(P<0.05),TP、ALB、ALP、GGT、BUN、CHO、LDL-C、LDH、A/G、GLO差異均極顯著(P<0.01),其他差異均不顯著(P>0.05)。3.3tp、alb、alp、glu、bun、aldl-c、ldl-c、bun、aldl-c、ldl-c、aldl-c、ldl-c、bun、aldl-c、ldl-c、bun、alp、glo由表3可知:DBA/2小鼠雌雄間血液生化指標GGT、CK差異顯著(P<0.05),TP、ALB、ALP、GLU、BUN、CHO、TG、HDL-C、LDL-C、A/G、GLO差異均極顯著(P<0.01),其他差異不顯著(P>0.05)。3.4alt、tp、alb、hdl-c、支付、ldh、bun、glo由表4可知:Balb/c與C57BL/6相比ALT、GLU、CHO、TG、LDL-C、LDH、A/G、GLO差異極顯著(P<0.01),TP、HDL-C差異顯著(P<0.05)。Balb/c與DBA/2相比ALT、TP、ALB、HDL-C、CK、LDH差異極顯著(P<0.01),BUN、GLO差異顯著(P<0.05)。C57BL/6與DBA/2相比ALT、ALB、GLU、CHO、TG、HDL-C、LDL-C、CK、LDH、A/G差異極顯著(P<0.01),GGT差異顯著(P<0.05)。3.5ch男性間差異由表5可知:Balb/c小鼠的RBC、MCH雌雄間差異顯著(P<0.05),LY百分比、MO百分比、HCT、MCHC雌雄間差異均極顯著(P<0.01)。3.6s17bl和6大鼠血液生理指標的測量見表6由表6可知:C57BL/6小鼠的EO百分比、RDW雌雄間差異顯著(P<0.05),PLT雌雄間差異極顯著(P<0.01)。3.7高聚物交配比nb的兩性異形比較由表7可知:EO數(shù)、BA數(shù)、BA百分比、RDW雌雄間差異顯著(P<0.05),NE數(shù)、MO數(shù),NE百分比、MO百分比雌雄間差異均極顯著(P<0.01)。3.8b、hct、mcv、mch、mchc、plt、pv、plt、pv、plt、pv、plt、pv、row變化由表8可知:Balb/c與C57BL/6相比LY數(shù)、MO%差異顯著(P<0.05),WBC、NE數(shù)、NE百分比、LY百分比、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、MPV差異極顯著(P<0.01)。Balb/c與DBA/2相比NE數(shù)、LY數(shù)、MO數(shù)、NE百分比、LY百分比、RBC、MCV、MCH、MCHC、RDW差異極顯著(P<0.01)。C57BL/6與DBA/2相比NE數(shù)、LY數(shù)、MO數(shù)、NE百分比、LY百分比、MO百分比、RBC、MCV、MCH、RDW、PLT、MPV差異極顯著(P<0.01)。4對fps近交系小鼠血液正常生化指標的影響動物的血液生理生化指標是病理學、毒理學等研究的重要參考值,也是判斷動物健康狀態(tài)的標準,同時也是選擇實驗動物的依據(jù)之一。有關實驗動物正常生理生化值,國內(nèi)已有很多報道,但對SPF實驗小鼠血液生理生化指標的研究并不多見,本土生產(chǎn)的SPF實驗動物基本生物學數(shù)據(jù)的測定是一項十分重要的工作,是SPF實驗動物廣泛應用的重要基礎。然而實驗動物血液生理生化指標的測定極易受外界環(huán)境因素的影響,如樣品采集、貯存方法、所用儀器等人為因素,以及動物品種、品系、年齡、性別等動物自身因素的影響。但其具體機制尚不十分清楚,有待于進一步的研究。試驗在嚴格控制樣品采集的時間、儲存、運送、檢測方法及年齡的前提下,利用全自動生化和血液分析儀,測定了常用SPF近交系Balb/c、C57BL/6和DBA/2小鼠雌性組和雄性組的17項血液正常生化指標及20項血液正常生理指標,結(jié)果具有一定的參考價值。通過對SPF近交系Balb/c、C57BL/6和DBA/2小鼠血液生化指標的比較研究發(fā)現(xiàn),Balb/c小鼠雌性AST、ALB、GLU、A/G高于雄性,雄性ALT、TP、ALP、GGT、BUN、CRE、CHO、TG、HDL-C、LDL-C、CK、LDH、GLO高于雌性。C57BL/6小鼠雌性GGT、GLU、CRE、A/G高于雄性,雄性ALT、AST、TP、ALB、ALP、BUN、CHO、TG、HDL-C、LDL-C、CK、LDH、GLO高于雌性。DBA/2小鼠雌性AST、GGT、CRE、LDH、A/G高于雄性,雄性ALT、TP、ALB、ALP、GLU、BUN、CHO、TG、HDL-C、LDL-C、CK、GLO高于雌性?？梢?種品系雌雄間血液正常生化指標雄性略高于雌性,有些指標不受性別影響,與參考文獻報道相一致,這可能與不同性別生理代謝過程的差異有關。絕大多數(shù)正常血液生化指標在品系間差異極顯著,說明血液生化指標主要受遺傳基