植物脫毒與組培快繁技術(shù)-紅掌組培與快繁

模塊五植物脫毒與組培快繁技術(shù)項(xiàng)目二紅掌組培與快繁123CONTENTS離體根的培養(yǎng)離體葉的培養(yǎng)紅掌葉片培養(yǎng)項(xiàng)目二紅掌組培與快繁4繼代增殖5生根及馴化移裁紅掌組培與快繁紅掌簡介

紅掌又名花燭、火鶴花、安祖花，為天南星科花燭屬常綠多年生草本植物。由于紅掌的種子繁殖時(shí)間較長，人工授粉較難；分株繁殖的繁殖系數(shù)又很低，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場的需求。因此，組培與快繁技術(shù)成為紅掌種苗工廠化生產(chǎn)的主要手段。紅掌組培與快繁紅掌組培與快繁操作流程紅掌組培與快繁三、紅掌葉片培養(yǎng)紅掌組培與快繁外植體的采集與處理

外植體：紅掌展開后約2周的幼嫩葉片。

外植體預(yù)處理：流水沖洗10min。表面消毒：10%次氯酸鈉浸泡10min，70%酒精浸泡25~30s，無菌水沖洗2次；0.1%升汞消毒8~10min，無菌水漂洗5次。紅掌組培與快繁葉片誘導(dǎo)（初代）

初代培養(yǎng)基：MS+6-BA2mg/L+2,4-D0.2mg/L+蔗糖3%+瓊脂0.7%；培養(yǎng)溫度：24~28℃；光強(qiáng)：暗培養(yǎng)3~5d光照時(shí)間：12~14h/d；紅掌組培與快繁紅掌組培與快繁紅掌葉片誘導(dǎo)愈傷紅掌組培與快繁紅掌愈傷誘導(dǎo)不定芽紅掌組培與快繁四、繼代增殖

分化培養(yǎng)基：MS+6-BA2mg/L+KT0.1mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+瓊脂0.7%；繼代培養(yǎng)基：MS+6-BA2mg/L+KT0.1mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+瓊脂0.7%；紅掌組培與快繁紅掌不定芽增殖紅掌組培與快繁紅掌不定芽增殖紅掌組培與快繁五、生根及馴化移裁

生根培養(yǎng)基：1/2

MS+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+瓊脂0.7%；將2.5cm以上的有效不定芽轉(zhuǎn)接到生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，進(jìn)行生根培養(yǎng)。15d左右開始生根，35d左右試管苗不定根數(shù)可達(dá)3-5條，生根率可達(dá)95%左右。紅掌組培與快繁紅掌組培與快繁馴化移裁當(dāng)紅掌苗有3條以上根、苗高4cm左右，不定根2cm長以上時(shí)，方可進(jìn)行移栽。移栽前，先將瓶苗移至溫室中煉苗5d左右，再開瓶煉苗2d，將苗輕輕取出并洗去所有培養(yǎng)基，然后栽植于滅過菌的混合基質(zhì)中。紅掌組培與快繁馴化移裁基質(zhì)采用泥炭：珍珠巖：河沙，比例為1:2:1.澆透水，用0.1%多菌靈噴霧至葉滴液，覆膜控溫保濕，溫度25-30，相對濕度80-90%，遮光75%，待長出新葉后開始通風(fēng)，逐漸拆膜，薄膜全揭開后，進(jìn)行常規(guī)管理，待小苗長出3片以上新葉后，即可進(jìn)行上盆或定植。紅掌組培與快繁紅掌組培與快繁紅掌組培與快繁項(xiàng)目二紅掌組培與快繁模塊五植物脫毒與組培快繁技術(shù)123CONTENTS離體根的培養(yǎng)離體葉的培養(yǎng)紅掌葉片培養(yǎng)項(xiàng)目二紅掌組培與快繁45繼代增殖生根及馴化移栽一、離體根的培養(yǎng)①生理代謝研究的優(yōu)良實(shí)驗(yàn)體系；②研究器官分化形態(tài)建成的良好體系；③建立快速生長的根無性系；④進(jìn)行誘變育種；一、離體根的培養(yǎng)1.理論和實(shí)踐意義2.培養(yǎng)基

多為無機(jī)離子濃度低的懷特培養(yǎng)基。也可用2／3MS或1／2MS、B5培養(yǎng)基。注：離體根生長要求

提供全部必需元素，蔗糖、硝態(tài)氮效果好，加入B1、B6最重要，生長素對離體根影響不一致。培養(yǎng)溫度25－27℃，暗光培養(yǎng)。一、離體根的培養(yǎng)3.根無性繁殖系的建立根無性繁殖系

無菌種子

1.2cm接后1周側(cè)根反復(fù)轉(zhuǎn)接一、離體根的培養(yǎng)4.植株再生培養(yǎng)離體根愈傷組織分化芽再生植株再分化培養(yǎng)基脫分化培養(yǎng)基一、離體根的培養(yǎng)人參根消毒、接種操作程序圖一、離體根的培養(yǎng)二、離體葉的培養(yǎng)1.成苗途徑與意義2.材料選擇與消毒3.接種4.培養(yǎng)

二、離體葉的培養(yǎng)葉原基葉鞘葉片子葉葉柄1.成苗途徑與意義愈傷組織莖和根

試管苗

不定芽二、離體葉的培養(yǎng)葉片誘導(dǎo)愈傷組織二、離體葉的培養(yǎng)A.幼嫩葉片流水沖洗；B.70－75%酒精漂洗10s（未充分展開的嫩葉用酒精棉球擦拭葉2面）；C.飽和漂白粉液浸3－15min（或在0.1%升汞液5-8min）；D.無菌水沖洗多次后，用無菌濾紙吸干水分2.材料選擇與消毒二、離體葉的培養(yǎng)上表皮朝上接種培養(yǎng)基。最好帶葉脈，注意極性3.接種外植體大小：5×5mm薄片（葉柄、子葉）二、離體葉的培養(yǎng)

培養(yǎng)基：MS、B5、White、N6；蔗糖3%；2.4－D利于愈傷組織形成，NAA抑制芽形成，利于根發(fā)生，KT、6BA利于芽形成。愈傷組織誘導(dǎo)：BA1-3mg/L,NAA0.25mg/L；分化培養(yǎng)：CTK2mg/L；

生根培養(yǎng)：NAA0.5－1.0mg/L

4.培養(yǎng)二、離體葉的培養(yǎng)培養(yǎng)條件：25－28℃，10－14