第06章 芳酸類非甾體抗炎藥物的分析

第六章

芳酸類非甾體抗炎藥物的分析《藥物分析》課件基本要求掌握：本類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)；主要芳酸類藥物的鑒別、檢查和含量測定的原理與特點(diǎn)。熟悉：主要芳酸類非甾體抗炎藥物雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)、危害、檢查方法與含量限度。了解：影響芳酸類非甾體抗炎藥物穩(wěn)定性的主要因素，體內(nèi)樣品與臨床監(jiān)測?；緝?nèi)容一、典型藥物的分類與性質(zhì)二、鑒別試驗(yàn)三、特殊雜質(zhì)檢查四、含量測定五、體內(nèi)藥物分析練習(xí)與思考結(jié)構(gòu)剖析理化特征鑒別試驗(yàn)雜質(zhì)檢查含量測定練習(xí)與思考

第一節(jié)典型藥物分類與理化性質(zhì)一、分類水楊酸類：水楊酸、阿司匹林鄰氨基苯甲酸類：甲芬那酸鄰氨基苯乙酸類：雙氯酚酸鈉芳基丙酸類：布洛芬吲哚乙酸類：吲哚美辛苯并噻嗪甲酸類：吡羅昔康其它芳酸：對(duì)乙酰氨基酚結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：羧基(—COOH)、苯環(huán)（）1、水楊酸類阿司匹林水楊酸（鈉）雙水楊酯二氟尼柳2、鄰氨基苯甲酸類苯甲酸（鈉）代表藥物甲芬那酸3、芳基苯丙酸類布洛芬代表藥物萘普生酮洛芬4、其他芳酸類代表藥物對(duì)乙酰氨基酚返回游離羧基阿司匹林酯鍵苯環(huán)pKa=3.49直接中和法兩步滴定法H水解后生成水楊酸雜質(zhì)水解后才發(fā)生三氯化鐵反應(yīng)酚羥基潛在芳伯氨基苯環(huán)對(duì)乙酰氨基酚1、性狀大多數(shù)是結(jié)晶性固體；2、溶解性游離芳酸類藥物，幾乎不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑芳酸堿金屬鹽易溶于水二、理化性質(zhì)3、酸性芳酸類藥物分子中具有－COOH，所以顯弱酸性（受取代基的影響）藥用芳酸pKa在3~6之間。具有酸性，可以與堿成鹽。4、紫外和紅外特征吸收

返回2.953.494.26第二節(jié)鑒別試驗(yàn)具酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基的藥物一、FeCl3反應(yīng)紫堇色1、水楊酸反應(yīng)對(duì)乙酰氨基酚的水溶液加三氯化鐵試液即顯藍(lán)紫色。2、酚羥基反應(yīng)苯甲酸的中性或堿性水溶液，與三氯化鐵試液生成堿式苯甲酸鐵鹽的赭色沉淀。二、縮合反應(yīng)酮洛芬二硝基苯肼橙色三、重氮化—偶合反應(yīng)芳香第一胺類鑒別反應(yīng)（紅色）

+CH3COONa四、水解反應(yīng)五、紫外吸收光譜法一般采用對(duì)比法：樣品吸收光譜特征與標(biāo)準(zhǔn)化合物的吸收光譜特征進(jìn)行對(duì)照比較或與文獻(xiàn)所載標(biāo)準(zhǔn)圖譜核對(duì)。（1）比較特征吸收數(shù)據(jù)（2）比較不同吸收峰處的吸收度比值（3）比較吸收曲線的一致性Amax,Amin,

max,

min,

shA1/A2六、紅外吸收光譜法七、色譜法1、TLC法：二氟尼柳膠囊2、HPLC法：阿司匹林片、泡騰片、腸溶片、腸溶膠囊第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查典型芳酸類非甾體抗炎藥物的有關(guān)物質(zhì)信息表：一、阿司匹林及雙水楊酯中游離水楊酸與有關(guān)物質(zhì)的檢查（一）阿司匹林及雙水楊酸酯的合成（二）阿司匹林中游離水楊酸與有關(guān)物質(zhì)的檢查1、游離水楊酸來源：Ch.P.(2005)，檢查方法：取阿司匹林原料藥0.1g，加乙醇1ml溶解后，加冷水適量使成50ml，立即加新制的稀硫酸鐵銨溶液[取鹽酸溶液（9→100）1ml，加硫酸鐵銨指示液2ml后，再加水適量使成100ml]1ml，搖勻；30秒鐘內(nèi)如顯色，與對(duì)照液（精密稱取水楊酸0.1g，加水溶解后加冰醋酸1ml，搖勻，再加水使成1000ml，搖勻，精密量取1ml，加乙醇1ml，水48ml，與上述新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml，搖勻）比較，不得更深。其限量為？檢查原理、方法(一）：Ch.P.(2010)，檢查方法：HPLC檢查原理、方法（二）：色譜柱：ODS流動(dòng)相：乙腈－四氫呋喃－冰醋酸－水（20：5：5：70）檢測波長：303nm定量方法：外標(biāo)法限量：＜0.1%限量規(guī)定原料0.1%阿司匹林片0.3%阿司匹林腸溶片1.5%阿司匹林膠囊(1.0%)阿司匹林泡騰片、栓3.0%HPLC法

2、有關(guān)物質(zhì)檢查方法：HPLC色譜柱：ODS流動(dòng)相：A（乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70））－B（乙腈）檢測波長：276nm檢測方法：自身稀釋對(duì)照法結(jié)果：A各雜質(zhì)（除水楊酸外）＜A對(duì)照主峰三、雙水楊酯中游離水楊酸的檢查檢查原理：游離水楊酸＋Fe3+(Fe(NO3)3)→紫色配合物↓A530結(jié)果：

A供試＜A對(duì)照（限度為0.5%)四、萘普生中6-甲氧基-2-萘乙酮等有關(guān)物質(zhì)的檢查（一）雜質(zhì)來源Ⅰ：2-萘甲醚;Ⅱ:6-甲氧基-2-萘乙酮；Ⅳ:萘普生（二）有關(guān)物質(zhì)檢查1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

2、溶液制備與測定法

供試品溶液對(duì)照品溶液對(duì)照溶液3、結(jié)果A6-甲氧基-2-萘乙酮（樣）＜A6-甲氧基-2-萘乙酮（對(duì)）A其它雜質(zhì)（樣）＜2A6-甲氧基-2-萘乙酮（對(duì)）A總雜質(zhì)（樣）＜A萘普生（對(duì)）五、對(duì)乙酰氨基酚中對(duì)氨基酚和對(duì)氯苯乙酰胺的檢查（一）雜質(zhì)來源（二）有關(guān)物質(zhì)檢查（HPLC法）

1、對(duì)氨基酚及有關(guān)物質(zhì)

2、對(duì)氯苯乙酰胺反應(yīng)摩爾比1：1原理產(chǎn)物為強(qiáng)堿弱酸鹽宜選酚酞為指示劑+NaOH溶解阿司匹林防止酯鍵水解第四節(jié)含量測定一、酸堿滴定法（一）直接滴定法（１）優(yōu)點(diǎn)：簡便、快速缺點(diǎn)：酯鍵水解干擾

酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸）討論：

（2）適用范圍：用于合格原料藥的含量測定方法:取本品0.4g,精密稱定,加中性乙醇(對(duì)酚酞指示液顯中性)20ml,溶解后,加酚酞指示液3滴,用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定.每1ml的氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于18.02mg的C9H8O4。2NaOH（過量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：2NaOH（總）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O空白試驗(yàn)主試驗(yàn)（二）水解后剩余滴定法

（1）反應(yīng)摩爾比為1∶2（2）優(yōu)點(diǎn)：消除了酯鍵水解的干擾（3）缺點(diǎn)：酸性雜質(zhì)干擾尚存在討論：取阿司匹林原料藥1.5078g，加入氫氧化鈉滴定液（0.5mol/L）50.0ml，混合，緩緩煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mol/L，F(xiàn)＝0.996）滴定剩余的氫氧化鈉，消耗15.70ml，空白試驗(yàn)消耗49.70ml。

(1)計(jì)算滴定度。MC9H8O4＝180.16g/mol。（2）計(jì)算含量。（三）兩步滴定法適用于阿司匹林片劑、阿司匹林腸溶片的測定片劑穩(wěn)定劑:酒石酸或枸櫞酸分解產(chǎn)物:水楊酸和醋酸第一步:中和第二步:水解和測定第一步中和酒石酸枸櫞酸水楊酸醋酸+NaOH→酒石酸鈉枸櫞酸鈉水楊酸鈉醋酸鈉不用于含量計(jì)算第二步水解后剩余滴定反應(yīng)摩爾比為1∶1+NaOH定量過量主試驗(yàn)2NaOH（總）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O空白試驗(yàn)（1）消除了酸性雜質(zhì)的干擾，（2）消除了酯鍵水解的干擾優(yōu)點(diǎn)：片劑含量測定結(jié)果的計(jì)算：取標(biāo)示量為0.3g/片的阿司匹林片10片，質(zhì)量為3.5469g，研細(xì)，精密稱取其片粉0.3592g，用20ml中性乙醇溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氫氧化鈉液至使溶液顯粉紅色，再精密加氫氧化鈉溶液（0.1mol/L）40ml，至水浴上加熱15min，迅速冷至室溫，用硫酸液（0.0539mol/L）滴定至終點(diǎn)，消耗19.02ml，空白消耗該溶液34.87ml。（1）計(jì)算滴定度。(M阿司匹林＝180.16g/mol)（2）求阿司匹林片的含量。二、柱分配色譜-紫外分光光度法USP32－NF27測定阿司匹林膠囊的含量。經(jīng)柱色譜分離后，可同時(shí)定量測定阿司匹林和水楊酸。280nm波長處測定吸收度，外標(biāo)法計(jì)含量算

阿司匹林栓Ch.P（2010）

外標(biāo)法定量三、HPLC法色譜條件：固定相：ODS流動(dòng)相：乙腈-四氫呋喃-冰醋酸水（20:5:5:70）檢測波長：276nm取本品5粒，精密稱定，置小燒杯中，在40～50℃水浴上微溫熔融，在不斷攪拌下冷卻至室溫，精密稱取適量（約相當(dāng)于阿司匹林0.1g），置50ml量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液適量，在40～50℃水浴中充分振搖使阿司匹林溶解，放冷，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，置冰浴中冷卻1h，取出，迅速濾過，取續(xù)濾液作為供試品貯備液。精密量取供試品貯備液5ml，置100ml量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取阿司匹林對(duì)照品，精密稱定，加1%冰醋酸的甲醇溶液振搖使溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。1.乙酰水楊酸及其制劑中的游離水楊酸是如何引入的？簡述檢查方法的原理及其限量。2.酸堿滴定法測定阿司匹林的含量，加中性乙醇的作用是什么?3.用水解后剩余滴定法測定阿司匹林含量時(shí)要進(jìn)行同樣條件下的空白試驗(yàn)，為什么？4.對(duì)氨基水楊酸鈉中的特殊雜質(zhì)是什么？試述檢查這種雜質(zhì)的方法的原理？5.阿司匹林含量測定通常采用哪幾種方法？設(shè)計(jì)水楊酸鈉的含量測定方法設(shè)計(jì)阿司匹林片的含量測定方法1、阿司匹林含量測定中避免水楊酸干擾的中和滴定法是

A直接滴定法

B氧化中和法

C雙相滴定法

D兩步滴定法

2、三氯化鐵與水楊酸類藥物顯色反應(yīng)最適宜酸度是

A強(qiáng)酸性

B弱酸性

C中性

D弱堿性

E強(qiáng)堿性3、水楊酸類藥物鑒別反應(yīng)

A三氯化鐵試劑呈紫色-紫堇色

B重氮化偶合反應(yīng)呈橙紅色

C碳酸鈉試液煮沸加酸酸化成白色沉淀

DA+C兩項(xiàng)反應(yīng)

EA+B+C三項(xiàng)反應(yīng)4、芳酸類的紅外光譜是重要的鑒別方法。水楊酸的結(jié)構(gòu)為苯環(huán)，羧基和鄰位羥基，紅外光譜的主要特征峰，是A3300-2300cm-1；1600cm-1；890cm-1；775cm-1

B3300-2300cm-1；1600cm-1；775cm-1

C3300-2300cm-1；1600cm-1；890cm-1

D3300-2300cm-1；1600cm-1；1610，1570，1480，1440cm-1

E3300-2300cm-1；1600cm-1；1610，1570，1480，1440cm