醬腌菜咸胚中亞硝酸鹽的測定 頂空-氣相色譜法 征求意見稿

ICS97.220.10Y55DB43湖南省地方標準DB43/TXXXX-2023醬腌菜咸胚中亞硝酸鹽的測定頂空-氣相色譜法Determinationofnitriteinpickleembryo,Headspace-Gaschromatography(征求意見稿)湖南省市場監(jiān)督管理局發(fā)布20湖南省市場監(jiān)督管理局發(fā)布2023-XX-XX實施2023-XX-XX發(fā)布目次TOC\o"1-1"\h前言 II1范圍 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14原理 15試劑和材料 16儀器設(shè)備 27分析步驟 38分析結(jié)果的表述 49精密度 410其他 4附錄A（資料性） 5前言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由湖南省工業(yè)和信息化廳提出。本文件由湖南省食品標準化技術(shù)委員會歸口。本文件起草單位：湖南省產(chǎn)商品質(zhì)量檢驗研究院、岳陽市檢驗檢測中心、懷化市檢驗檢測中心。本標準主要起草人：曾小明、吳海智、袁列江、上官佳、蘇家佑、程孟雅、何浩、朱禮、朱明揚、張鵬斐。醬腌菜咸胚中亞硝酸鹽的測定頂空-氣相色譜法范圍本文件規(guī)定了醬腌菜咸胚中亞硝酸鹽的測定方法。本文件適用于頂空-氣相色譜法測定醬腌菜咸胚中亞硝酸鹽。規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB5009.33食品安全國家標準食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定GB/T603化學試劑試驗方法中所用制劑及制品的制備GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。原理在酸性條件下，環(huán)已基氨基磺酸鈉和亞硝酸鈉在酸性條件下反應(yīng)生成環(huán)己醇，環(huán)己醇在酸性條件下又繼續(xù)與亞硝酸鈉發(fā)生酯化反應(yīng)生成環(huán)己烯，環(huán)己烯在常溫下成氣態(tài)，采用頂空氣相進樣系統(tǒng)進行定量檢測。根據(jù)環(huán)己烯色譜響應(yīng)值與亞硝酸鹽濃度成正比，計算出醬腌菜咸胚中亞硝酸鹽含量。試劑與材料除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。5.1試劑5.1.1亞鐵氰化鉀[K4Fe(CN)6·3H2O]。5.1.2乙酸鋅[Zn(CH3COO)2·2H2O]。5.1.3冰乙酸(CH3COOH)。5.1.4硼酸鈉(Na2B4O7·10H2O)。5.1.5環(huán)己基氨基磺酸鈉（C6H11NHSO3Na）。5.1.6濃硫酸（H?SO?）。5.2試劑配制5.2.1亞鐵氰化鉀溶液(106g/L)：稱取106.0g亞鐵氰化鉀，用水溶解，并稀釋至1000mL。5.2.2乙酸鋅溶液(220g/L)：稱取220.0g乙酸鋅,先加30mL冰乙酸溶解，用水稀釋至1000mL。5.2.3飽和硼砂溶液(50g/L)：稱取5.0g硼酸鈉,溶于100mL熱水中，冷卻后備用。5.2.4環(huán)己基氨基磺酸鈉溶液(10mg/mL)：稱取5.0g環(huán)己基氨基磺酸鈉，用水溶解，并稀釋至500mL。5.2.5硫酸溶液（100g/L）：量取27mL濃硫酸小心緩緩加入400mL水中，后加水至500mL。5.3標準品亞硝酸鈉(NaNO2，CAS號:7632-00-0)：基準試劑，或采用具有標準物質(zhì)證書的亞硝酸鹽標準溶液。5.4標準溶液配制5.4.1亞硝酸鈉標準儲備溶液（200ug/ml）：以亞硝酸鈉計):準確稱取0.1000g于110℃~120℃干燥恒重的亞硝酸鈉，加水溶解，移入500mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻。5.4.2亞硝酸鈉標準使用液A(1.0ug/mL)：臨用前，吸取2.50mL亞硝酸鈉標準儲備溶液，置于500mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻。5.4.3亞硝酸鈉標準使用液B(0.05ug/mL)：臨用前，吸取5.00mL亞硝酸鈉標準溶液，置于100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻。儀器和設(shè)備6.1氣相色譜儀：配有氫火焰離子化檢測器(FID)。6.2自動頂空進樣器。6.3頂空進樣瓶：20ml。6.4分析天平：感量0.1mg。6.5渦旋儀。6.6容量瓶：10mL、50mL和100mL6.7恒溫水浴鍋。6.8恒溫干燥箱。6.9移液器或移液管：1mL和5mL。7分析步驟7.1樣品制備取適量的樣品研磨成均勻的勻漿狀。為避免水分損失，研磨過程中應(yīng)避免產(chǎn)生過多的熱量。7.2提取稱取3g(精確至0.001g)勻漿試樣，置于250mL具塞錐形瓶中，加5mL50g/L飽和硼砂溶液，加入70℃左右的水約60mL，混勻，于沸水浴中加熱15min，取出置冷水浴中冷卻，并放置至室溫。定量轉(zhuǎn)移上述提取液至100mL容量瓶中，加入2mL106g/L亞鐵氰化鉀溶液，搖勻，再加入2mL220g/L乙酸鋅溶液，搖勻，以沉淀蛋白質(zhì)。加水至刻度，搖勻，放置30min，除去上層脂肪，上清液用濾紙過濾，棄去初濾液30mL，濾液備用。7.3測定條件7.3.1頂空進樣器條件頂空進樣器測定參考條件如下：恒溫爐溫度50.0℃，樣品流路溫度90.0℃，傳輸線溫度150.0℃。GC循環(huán)時間14min，樣品瓶恒溫時間30min。7.3.2氣相色譜參考條件a）色譜柱：石英毛細管柱(10%二甲基聚硅氧烷)：(30m×0.32mm×0.50um)或等效柱。b）柱溫升溫程序：初溫80℃保持1min，40℃/min升溫至100℃保持2min，40℃/min升溫至200℃保持4min，共10min。c）進樣口：色譜柱流量2.0mL/min，分流比20∶1。d）檢測器溫度：300℃。e）載氣：高純氮氣，尾吹氣流量30mL/min。f）氫氣：40mL/min；空氣：200mL/min。7.4標準工作曲線繪制向10個頂空瓶中分別加入0.00mL、0.30mL、0.40mL、1.00mL、2.00mL標準使用液B和0.20mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL標準使用液A（相當于0、0.015、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.0、2.0、3.0亞硝酸鈉）補齊水至5mL，加入1.0mL10mg/mL環(huán)己基氨基磺酸鈉溶液，混勻，放置2min，加入1.0mL100g/L硫酸溶液，迅速壓緊瓶蓋，渦旋儀充分混勻（混勻過程中溶液不能接觸到密封墊，如果有接觸，需重新配置），上機。以亞硝酸鈉與環(huán)己基氨基磺酸鈉的衍生產(chǎn)物環(huán)己烯，作為目標物質(zhì)，繪制標準曲線。亞硝酸鈉標準品的氣相色譜圖參見附錄A中的圖A.1.7.5測定吸取5.00mL上述濾液于20mL頂空進樣瓶中，以下按7.4自“向10個頂空瓶中分別加入0.00mL、0.30mL、0.40mL、1.00mL、2.00mL……”起操作。7.6空白試驗除不稱取試樣外，均按照上述步驟進行。8分析結(jié)果的表述試樣中亞硝酸鹽的含量按式（1）計算：X=Cx100mx5………式中：X———試樣中亞硝酸鈉含量，單位為毫克每千克(mg/kg)；C———測定用樣液中亞硝酸鈉含量，單位為微克(ug)；m———試樣質(zhì)量,單位為克(g)；5———測定用樣液體積,單位為毫升(mL)；100———試樣處