《醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)》實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)大綱

《醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)》實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)大綱一、課程基本信息課程代碼：B0411002課程名稱：醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)課程性質(zhì)：專業(yè)必修課適用專業(yè)和年級(jí)：五年制臨床醫(yī)學(xué),四年制護(hù)理及公共事業(yè)專業(yè)(區(qū)內(nèi),外)開課學(xué)期：秋季學(xué)期課程總學(xué)時(shí)：45學(xué)時(shí)（理論：30學(xué)時(shí)；實(shí)驗(yàn)：15學(xué)時(shí)）課程簡介：本課程針對(duì)醫(yī)學(xué)本科一年級(jí)的學(xué)生，開設(shè)了顯微鏡的使用、細(xì)胞的生理、細(xì)胞的組織化學(xué)、細(xì)胞器的認(rèn)識(shí)、細(xì)胞周期、細(xì)胞的培養(yǎng)和和染色體技術(shù)等一系列實(shí)驗(yàn)課程，使學(xué)生通過本課程的學(xué)習(xí)，掌握和了解細(xì)胞生物學(xué)的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)，提高實(shí)驗(yàn)技能，激發(fā)實(shí)驗(yàn)研究興趣，探索細(xì)胞生命活動(dòng)的本質(zhì)和基本規(guī)律，為本科生的其它醫(yī)學(xué)課程學(xué)習(xí)以及將來的研究工作奠定良好的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。推薦教材：1.結(jié)合我校實(shí)際編寫的《醫(yī)學(xué)細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》（單行本）;參考書目：1.章靜波主編.《醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)及習(xí)題集》.第1版.人民衛(wèi)生出版社2004年；2.《西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》（單行本）二、課程總目標(biāo)《細(xì)胞生物學(xué)》既是生命科學(xué)的基礎(chǔ)學(xué)科又是前沿科學(xué)，它的理論知識(shí)都是以客觀的科學(xué)實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)，揭示細(xì)胞生命活動(dòng)的規(guī)律，因而具有獨(dú)特的目的要求：1、通過實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生了解細(xì)胞生物學(xué)知識(shí)和理論的由來，建立感性認(rèn)識(shí)，加深對(duì)理論知識(shí)的理解。2、通過具體的實(shí)驗(yàn)操作，使學(xué)生了解細(xì)胞生物學(xué)的基本實(shí)驗(yàn)方法和技能，鍛煉學(xué)生的動(dòng)手能力。3、通過實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)學(xué)生觀察、比較、分析、綜合的科學(xué)思維能力以及獨(dú)立的工作能力和實(shí)事求是的科學(xué)作風(fēng)。4、使學(xué)生掌握書寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告、生物繪圖、制表等方面的基本知識(shí)。5、培養(yǎng)良好的科學(xué)研究習(xí)慣和團(tuán)隊(duì)合作精神。

三、大綱內(nèi)容

實(shí)驗(yàn)一

動(dòng)物細(xì)胞基本形態(tài)和結(jié)構(gòu)的觀察【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?.掌握低倍鏡、高倍鏡的正確使用方法。2.熟悉臨時(shí)裝片的制作方法。3.了解普通顯微鏡構(gòu)造及成像原理?！緦?shí)驗(yàn)內(nèi)容】1.

細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)的觀察；2.

制作人口腔粘膜上皮細(xì)胞（臨時(shí)裝片）；【主要實(shí)驗(yàn)儀器與器材】1．普通光學(xué)顯微鏡

2.

實(shí)驗(yàn)裝片（動(dòng)物細(xì)胞永久裝片等）

3

載玻片

4.

蓋玻片

5

擦鏡紙

6

鑷子

7

吸管

8

消毒牙簽

9

吸水紙

10

生理鹽水

11.

教學(xué)投影儀及教學(xué)錄像資料

12.

電腦【作業(yè)】1.撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告，畫一個(gè)觀察到的動(dòng)物細(xì)胞簡圖。2.怎樣區(qū)分低倍、高倍和油鏡？3.一般情況下，使用高倍鏡時(shí)要用小調(diào)節(jié)器，為什么？當(dāng)小調(diào)節(jié)器不能向上或向下轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)怎么辦？形

式：填寫實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)；實(shí)驗(yàn)二

細(xì)胞化學(xué)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?.掌握用細(xì)胞化學(xué)方法進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)DNA、RNA、酸性蛋白和堿性蛋白等生物大分子的定性和定位顯示技術(shù)與原理。掌握蟾蜍血涂片技術(shù)2..熟悉細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分的檢測方法3.了解其他細(xì)胞化學(xué)知識(shí)【實(shí)驗(yàn)原理】1、蟾蜍紅細(xì)胞內(nèi)酸性蛋白和堿性蛋白的顯示

蛋白質(zhì)的基本組成單位是氨基酸，它們同時(shí)具有氨基和羧基(在溶液中主要以—NH3+，—COO—式存在)，而自由氨基和羧基的游離取決于溶液的pH值，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)處于酸性溶液時(shí)，由于該溶液中正離子(H+

)多，從而抑制蛋白質(zhì)中的COOH電離，于是造成蛋白質(zhì)帶正電荷多；當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)處于堿性溶液時(shí)，由于該溶液中負(fù)離子(OH—)多，從而促使蛋白質(zhì)中的COOH都電離成COO—，于是造成蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷多；當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)處于某一種pH溶液時(shí)，它恰好帶有相等的正負(fù)電荷(呈兼性離子)。此時(shí)的pH值稱為等電點(diǎn)(pL)，由于蛋白質(zhì)除了末端氨基和末端羧基之外，還具有許多側(cè)鏈，其上的許多基團(tuán)在溶液中也都可以電離，因此，一個(gè)蛋白質(zhì)分子表面四周都有電荷。不同蛋白質(zhì)分子所帶有的堿性基團(tuán)和酸性基團(tuán)的數(shù)量不等，故它們的等電點(diǎn)也不一樣。因此蛋白質(zhì)分子所帶的凈電荷取決于：(1)分子中堿性基團(tuán)和酸性基團(tuán)含量。(2)所處溶液的pH值，如在生理?xiàng)l件下，整個(gè)蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷多。為酸性蛋白質(zhì)(等電點(diǎn)偏向酸性)；帶正電荷多，為堿性蛋白質(zhì)(等電點(diǎn)偏向堿性)。據(jù)此，可將標(biāo)本經(jīng)三氯醋酸處理后，用不同pH的固綠染液(一種弱酸性染料，本身帶負(fù)電荷)予以染色，可分別顯示細(xì)胞內(nèi)的酸性蛋白和堿性蛋白。2、細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA的顯示細(xì)胞經(jīng)甲基綠一哌洛寧染液處理后，其中DNA和RNA出現(xiàn)不同的呈色反應(yīng)（Brachef反應(yīng)），一般認(rèn)為這是由于帶有陰電荷的核酸與堿性染料哌洛寧及甲基綠具有不同的親和力而進(jìn)行選擇性染色。甲基綠可使聚合程度較高的DNA染成藍(lán)綠色，而哌洛寧與聚合程度較低的RNA結(jié)合，呈淺紅色，因此可達(dá)到對(duì)細(xì)胞內(nèi)的DNA與RNA進(jìn)行定位定性分析。3、液泡系的活體染色觀察（選做，充分利用蟾蜍）在動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)，凡是由膜所包圍的小泡和液泡除線粒體外都屬于液泡系，包括高爾基器、溶酶體、微體、消化泡、自噬小體、殘?bào)w、胞飲液泡和吞噬泡，都是由一層單位膜包圍而成。軟骨細(xì)胞內(nèi)含有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體，能合成與分泌軟骨粘蛋白及膠原纖維等，因而液泡系發(fā)達(dá)。中性紅是液泡系特殊的活體染色劑，只將液泡系染成紅色，在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí)，細(xì)胞質(zhì)及核不被染色，中性紅染色可能與液泡中的蛋白有關(guān)?！局饕獙?shí)驗(yàn)儀器與器材】1.

顯微鏡

2.

鑷子

剪子

載玻片

3.

70％乙醇

5%三氯醋酸

4.

0.1%酸性固綠染液(1/150NHCl

pH=2.0-2.5)

5.

0.1％堿性固綠染液(0.025%Na2C03，pH=8.0-8.5)

6.

染色器皿

7.

水浴箱

8.

甲基綠-哌羅寧混合液9.

純丙酮

10.

蟾蜍

11.

吸管

12.

Ringer試液

13.

1/3000中性紅等【實(shí)驗(yàn)步驟】1、

蟾蜍紅細(xì)胞內(nèi)酸性蛋白和堿性蛋白的顯示

1.1

操作：取材制片

→

固定→

三氯醋酸處理

→染色和鏡檢1.2

結(jié)果觀察用pH

2.0—2.5酸性固綠染液染色結(jié)果，整個(gè)細(xì)胞質(zhì)和核仁中蛋白質(zhì)均被染成綠色，此即酸性蛋白在細(xì)胞內(nèi)的分布，而胞核中染色質(zhì)并不染上色(但時(shí)間太長可能染上色)。用pH8.0—8.5堿性固綠染液染色結(jié)果，只有細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)被染綠色，此即堿性蛋白在細(xì)胞內(nèi)的分布，而胞質(zhì)及核仁并不染色。2.

細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA的顯示2.1

操作：制作血涂片→固定→染色和鏡檢2.2

結(jié)果觀察：細(xì)胞質(zhì)被染成淺紅色，細(xì)胞核被染成藍(lán)綠色，而其中核仁被染成紫紅色。3、

液泡系的活體染色觀察（選做，充分利用蟾蜍）3.1

步驟：取材

→

染色

→

沖洗

→

觀察3.2

結(jié)果觀察

：顯微鏡下觀察，可見軟骨細(xì)胞為橢圓形，細(xì)胞核周圍有許多染成玫瑰紅色。大小不一的小泡，即軟骨細(xì)胞液泡系?！咀⒁馐马?xiàng)】1.

嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟操作；【作業(yè)】作業(yè)內(nèi)容：1.

撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告，用鉛筆繪出Brachef反應(yīng)的鏡下所見。

2．

說明著色的堿性蛋白可能是什么物質(zhì)?形式：紙質(zhì)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

實(shí)驗(yàn)三

細(xì)胞膜的生理【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?.掌握對(duì)細(xì)胞膜吞噬活動(dòng)和通透性的觀察，掌握細(xì)胞膜的生理特性2.熟悉觀察細(xì)胞生理的一般方法

3.了解細(xì)胞吞噬運(yùn)動(dòng)【實(shí)驗(yàn)原理】1.

吞噬運(yùn)動(dòng)

大小兩類吞噬細(xì)胞（即巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞），專司吞噬作用，成為非特異免疫功能的重要組成部分。巨噬細(xì)胞由骨髓干細(xì)胞分化生成，然后進(jìn)入血液到達(dá)各組織內(nèi)，并進(jìn)一步分化為各種巨噬細(xì)胞。當(dāng)病原微生物或其它異物侵入機(jī)體時(shí)，能招引巨噬細(xì)胞，而巨噬細(xì)胞又有趨化性，能響應(yīng)招引因子的招引，產(chǎn)生活躍的變形運(yùn)動(dòng)，主動(dòng)向病原體和異物移行，在接觸到病原體或異物時(shí)，即伸出偽足，將之包圍并內(nèi)吞入胞質(zhì)，形成吞噬泡，繼而細(xì)胞質(zhì)中的初級(jí)溶酶體與吞噬泡發(fā)生融合，形成吞噬溶酶體，通過其中水解酶等作用將病原體殺死，消化分解，最后將不能消化的殘?jiān)懦黾?xì)胞外。2、

溶血作用與紅細(xì)胞的通透性實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞膜是細(xì)胞與環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的選擇通透性屏障。它是一種半透膜，可選擇性控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞。各種物質(zhì)出入細(xì)胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶劑，水分子可以按照物質(zhì)濃度梯度從滲透壓低的一側(cè)通過細(xì)胞膜向滲透壓高的一側(cè)擴(kuò)散，這種現(xiàn)象就是滲透。滲透作用是細(xì)胞膜的主要功能之一。將紅細(xì)胞放在低滲鹽溶液中，水分子大量滲到細(xì)胞內(nèi)，可使細(xì)胞脹破，血紅蛋白釋放到介質(zhì)中，由不透明的紅細(xì)胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅蛋白溶液，這種現(xiàn)象稱為溶血。將紅細(xì)胞放在某些等滲鹽溶液中，由于紅細(xì)胞膜對(duì)各種溶質(zhì)的通透性不同，膜兩側(cè)的滲透壓平衡會(huì)發(fā)生改變，也會(huì)發(fā)生溶血現(xiàn)象。因此，發(fā)生溶血現(xiàn)象所需時(shí)間長短可作為測量物質(zhì)進(jìn)入紅細(xì)胞速度的一種指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)選用紅細(xì)胞作為細(xì)胞膜透性的實(shí)驗(yàn)材料，將其放入不同的介質(zhì)溶液中，觀察紅細(xì)胞的變化?！緦?shí)驗(yàn)內(nèi)容】1.

吞噬運(yùn)動(dòng)

1.1.

小白鼠預(yù)處理→小白鼠注射l％雞紅細(xì)胞懸液lml→

處死小鼠

→取小鼠腹腔液

→制片觀察1.2

結(jié)果調(diào)節(jié)集光器使顯微鏡視野中光線稍暗些。在高倍鏡下，先分辨清雞紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。雞紅細(xì)胞是一些淡黃色、橢圓形有核的細(xì)胞；而數(shù)量較多，較大的圓形或不規(guī)則的細(xì)胞，其表面具有許多似刺毛狀的小突起（偽足），胞質(zhì)中含有數(shù)量不等的藍(lán)色顆粒（為吞入的含臺(tái)盼藍(lán)的淀粉肉湯形成的吞噬泡），即為巨噬細(xì)胞。慢慢移動(dòng)玻片標(biāo)本，仔細(xì)觀察巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的過程。可見有的雞紅細(xì)胞（1-多個(gè)）緊附于巨噬細(xì)胞表面；有的巨噬細(xì)胞已將l-數(shù)個(gè)紅細(xì)胞部分吞入；有的巨噬細(xì)胞已吞入1個(gè)或幾個(gè)紅細(xì)胞在胞質(zhì)中剛形成橢圓形的吞噬泡；有的巨噬細(xì)胞內(nèi)的吞噬泡體積縮小，并呈圓形，這是已與初級(jí)溶解體發(fā)生融合，泡內(nèi)物正在被消化分解。

2、

溶血作用與紅細(xì)胞的通透性實(shí)驗(yàn)

2.1

操作取血保存

→配30%的雞紅細(xì)胞（CRBC）懸液→

取11支試管，按附表中所示測試溶液，分別取樣各3ml，作出標(biāo)記后，各管均加入紅細(xì)胞懸液2

滴

→觀察2.2

結(jié)果2.2.1

試管內(nèi)液體分兩層：上層淺黃色透明，下層紅色不透明為不溶血（－），鏡檢紅細(xì)胞完好呈雙凹盤狀。2.2.2

如果試管內(nèi)液體混濁，上層帶紅色者，稱不完全溶血（＋或＋＋），鏡檢有部分紅細(xì)胞呈碎片。2.2.3

如果試管內(nèi)液體變紅而透明者，稱完全溶血（＋＋＋），鏡檢發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部呈碎片?！局饕獙?shí)驗(yàn)儀器與器材】1.

雞血細(xì)胞

2.

普通顯微鏡、3.

普通離心機(jī)

4.

扭力天平

5.

10ml試管

6.

10ml刻度離心管

7.

試管架

8.

2ml注射器（無需針頭）或5ml

移液管

9.

洗耳球

10.

滴管

11.

載玻片

12.

擦鏡紙

13.

記號(hào)筆

14.

解剖盤

15.

剪刀

16.

鑷子

17.

載玻片

18.

蓋玻片

19.

注射器

20.

吸管

21.

吸水紙

22.

小白鼠

試劑一1.

0.85%生理鹽水

2.

4％臺(tái)盼藍(lán)染液

3.

6％淀粉肉湯(含臺(tái)盼藍(lán)染液)

4.

1%

雞紅細(xì)胞懸液試劑二1.

Alsever

溶液

2.

0.128

mol/L

NaCl

溶液

3.

0.05

mol/L

NaCl

溶液

4.

0.4

mol/L

NaCl

溶液

5.

0.128

mol/L

NH4Cl

溶液

6.

0.128

mol/L

NH4AC

溶液

7.

0.128

mol/L

NaNO3溶液

8.

0.32

mol/L

葡萄糖

9.

0.32

mol/L

甘油

10.

0.32

mol/L

乙醇

11.

0.32

mol/L

丙酮

12.

蒸餾水

【注意事項(xiàng)】1.

雞血在離心時(shí)，試管均需在扭力天平上平衡。2.

目測紅細(xì)胞體積或置于帶刻度的離心管中，加入生理鹽水配成30%的紅細(xì)胞懸液。3.

試管中有紅細(xì)胞和測試溶液時(shí)，不應(yīng)強(qiáng)力搖晃，以免造成人為的紅細(xì)胞破裂?！咀鳂I(yè)】作業(yè)內(nèi)容：1

在高倍鏡下繪出處在不同吞噬階段的巨噬細(xì)胞圖各一個(gè)（如雞紅細(xì)胞附于巨噬細(xì)胞表面、部分吞入紅細(xì)胞、吞入形成吞噬泡和吞噬泡已開始被消化分解等），示吞噬過程。2

將實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄下表

試管編號(hào)

試劑種類

是否發(fā)生溶血現(xiàn)象

溶血時(shí)間

結(jié)果分析

1

H2O

2

0.17

Mol氯化鈉

3

0.17

Mol氯化銨

4

0.17

Mol硝酸鈉

5

0.12

Mol硫酸鈉

6

0.12

Mol草酸銨

7

0.17

Mol醋酸銨

8

0.32

Mol

葡萄糖

9

0.32

Mol乙醇

10

0.32

Mol丙醇

11

0.32

Mol丙三醇

形

式：填寫在報(bào)告上，隨堂檢查實(shí)驗(yàn)四

細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)和細(xì)胞器的觀察【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?

掌握細(xì)胞骨架的光鏡臨時(shí)裝片標(biāo)本的制作方法。

2

掌握光鏡下動(dòng)物細(xì)胞器的形態(tài)特征。3.

掌握細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的形態(tài)特征4.

熟悉細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)電鏡照片的識(shí)別。

5.

了解電子顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)原理?！緦?shí)驗(yàn)內(nèi)容】1、.細(xì)胞骨架的觀察

1.1

步驟

取材→去垢處理→沖洗→固定→沖洗→染色→制片→觀察

1.2

結(jié)果顯微鏡下，可見口腔上皮細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)有被染成藍(lán)色的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，即為細(xì)胞骨架，結(jié)構(gòu)清晰。2、

其它細(xì)胞器的觀察：2.1

高爾基體的觀察（貓神經(jīng)節(jié)切片）2.2

線粒體的觀察（鼠肝切片）2.3

中心體的觀察（馬蛔蟲子宮切片）

3、

細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)指在電子顯微鏡下呈現(xiàn)的細(xì)胞內(nèi)小于0.2μm的細(xì)微結(jié)構(gòu)。本實(shí)驗(yàn)主要是通過電鏡照片、幻燈片，分析和識(shí)別細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的形態(tài)特點(diǎn)。

觀看細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的多媒體照片。3.1

細(xì)胞膜

3.2

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

3.3

線粒體

3.4

高爾基體復(fù)合體

3.5

溶酶體

3.6

中心粒

3.7

核糖體

3.8

細(xì)胞骨架3.9

核仁

3.10

核膜和核孔

3.11

染色質(zhì)【主要實(shí)驗(yàn)儀器與器材】1.

普通光學(xué)顯微鏡

2.

實(shí)驗(yàn)裝片（鼠肝切片、貓神經(jīng)節(jié)切片、馬蛔蟲子宮切片等永久切片）

3.

教學(xué)投影儀及教學(xué)錄像資料

4.

電腦

5.

載玻片

6.

吸水紙

7.

吸管

8.

鑷子

9.

剪刀

10.

試管

11.

表面皿

12.

滴管

13.

消毒牙簽

14.

M緩沖液

15.

1%

Triton

X-100-PBS

16.

0.2

%

考馬斯亮藍(lán)

17.

生理鹽水

18.

試管

19.

3

%

戊二醛

20.

PBS

21.

水浴箱【注意事項(xiàng)】嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)【作業(yè)】作業(yè)內(nèi)容：1、

動(dòng)物超微結(jié)構(gòu)的范圍是什么？形

式：隨堂提問實(shí)驗(yàn)五

細(xì)胞的有絲分裂和減數(shù)分裂

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?

掌握動(dòng)、植物細(xì)胞有絲分裂各期的主要特征。

2

掌握蝗蟲精巢壓片，掌握減數(shù)分裂各期的主要形態(tài)特征3.

了解動(dòng)物細(xì)胞無絲分裂的形態(tài)特征。

【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】1、動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂各期的觀察

細(xì)胞周期：指細(xì)胞從第一次分裂結(jié)束產(chǎn)生新細(xì)胞到第二次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，分為間期與分裂期兩個(gè)階段。有絲分裂：真核細(xì)胞的染色質(zhì)凝集成染色體、復(fù)制的姐妹染色單體在紡錘絲的牽拉下分向兩極，從而產(chǎn)生兩個(gè)染色體數(shù)和遺傳性相同的子細(xì)胞核的一種細(xì)胞分裂類型。通常劃分為前期、前中期、中期、后期和末期五個(gè)階段。2.

植物細(xì)胞有絲分裂的觀察（示教）

3.

無絲分裂的觀察（示教）

4、觀察各個(gè)發(fā)育時(shí)期生殖細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)性細(xì)胞分裂時(shí)，染色體只復(fù)制一次，細(xì)胞連續(xù)分裂兩次，染色體數(shù)目減半的一種特殊分裂方式。減數(shù)分裂不僅是保證物種染色體數(shù)目穩(wěn)定的機(jī)制，而且也是物種適應(yīng)環(huán)境變化不斷進(jìn)化的機(jī)制。4.1

精原細(xì)胞4.2

初級(jí)精母細(xì)胞4.3

次級(jí)精母細(xì)胞、精細(xì)胞：

第一次成熟分裂和第二次成熟分裂

4.4

精子：經(jīng)過變形期形成精子，精子可分為頭、中段和尾三部分【主要實(shí)驗(yàn)儀器與器材】1.

顯微鏡

2.

永久裝片(有絲分裂、減數(shù)分裂)

3.

擦鏡紙4.

電腦5.

投影儀

6.

教學(xué)錄像資料【作業(yè)】作業(yè)內(nèi)容：1.

有絲分裂和減數(shù)分裂的異同點(diǎn)？形

式：隨堂提問實(shí)驗(yàn)六

細(xì)胞培養(yǎng)（選做）

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?.

掌握細(xì)胞凋亡特點(diǎn)2.

了解細(xì)胞培養(yǎng)的一般方法【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】1、細(xì)胞培養(yǎng)步驟和注意事項(xiàng)（錄像）

了解原代細(xì)胞培養(yǎng)的一般方法和步驟及培養(yǎng)過程中的無菌操作技術(shù)，原代培養(yǎng)細(xì)胞的觀察方法。了解細(xì)胞凍存的方法。2、細(xì)胞凋亡的過程和特點(diǎn)（錄像）2.1

細(xì)胞凋亡的過程：自然狀態(tài)下，細(xì)胞自動(dòng)結(jié)束生命的過程叫凋亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同。正常機(jī)體內(nèi)的細(xì)胞，無論生長、分裂或分化，還是凋亡都在機(jī)體的精確調(diào)控之中。2.2

細(xì)胞凋亡的特點(diǎn)：細(xì)胞變圓，染色質(zhì)凝聚、分塊，胞質(zhì)皺縮。之后整個(gè)細(xì)胞通過發(fā)芽、起泡等方式形成一些球形的突起，并在其基部絞斷而脫落形成大小不等內(nèi)含胞質(zhì)、細(xì)胞器及核碎片的凋亡小體，然后被周圍細(xì)胞吞噬。其他特征：1

由基因控制；2

不引起炎癥；3

質(zhì)膜不破裂；4

染色質(zhì)DNA的有控裂解。3.

觀察永久切片【主要實(shí)驗(yàn)儀器與器材】1.

顯微鏡

2.

永久裝片(細(xì)胞凋亡)3.

擦鏡紙4.

電腦

5.

投影儀

6.

教學(xué)錄像資料【作業(yè)】作業(yè)內(nèi)容：1、凋亡細(xì)胞的特點(diǎn)是什么？形

式：隨堂提問

實(shí)驗(yàn)七

染色體的制備（選做）

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟆?

了解人體外周血培養(yǎng)和染色體標(biāo)本的制備技術(shù)。2

熟悉小白鼠細(xì)胞染色體制作方法和觀察小白鼠染色體的形態(tài)和數(shù)目?！緦?shí)驗(yàn)內(nèi)容】1、了解人體外周血培養(yǎng)和染色體標(biāo)本的制備技術(shù)（錄像）2、

學(xué)習(xí)小白鼠細(xì)胞染色體制作方法和觀察小白鼠染色體的形態(tài)和數(shù)目2.1

步驟

:

處死小鼠-

取股骨-

剪去骨兩端少許-用注射器注射PBS入骨髓腔-收集骨髓-制作小白鼠細(xì)胞染色體玻片2.2

結(jié)果觀察:

在顯微鏡觀察小白鼠染色體的形態(tài)和數(shù)目[主要實(shí)驗(yàn)儀器與器材]1.

小白鼠

2.

注射器（1ml,5ml）

3.

剪刀

4.

鑷子

5.

玻璃吸管

6.

10ml刻度的離心管

7.

離心機(jī)

8.

載玻片

9.

蓋玻片

10.

顯微鏡

11.

濾紙

12

.擦鏡紙

13.

紗布

14.

恒溫水浴鍋

15.

0.01

%

秋水仙素

16.

0.075

M

KCl

17.

固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）

18.

2

%

檸檬酸鈉

19.

Giemsa染液【注意事項(xiàng)】記數(shù)染色體時(shí)觀察細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)為：

1．細(xì)胞完整，輪廓清晰，染色體分布在同一水平面上。

2．染色體形態(tài)和分布良好，計(jì)數(shù)為40條。

3．最好無重疊，即使有個(gè)別重疊，也要能明確辯認(rèn)，以免差錯(cuò)。

4．所觀察的細(xì)胞處于同一有絲分裂階段，即染色體螺旋化程度或染色體長短大致一樣。在所觀察的細(xì)胞周圍，沒有離散的單個(gè)或多個(gè)染色體存在，以免影響計(jì)數(shù)?！咀鳂I(yè)】作業(yè)內(nèi)容：1

小鼠的染色體為多少條？2

撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告，繪出小鼠的染色體簡圖。