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雞傳染性支氣管炎病毒病的防控

雞感染支氣管炎(ib)是一種由雞冠狀病毒引起的急性、高度接觸性傳染病。它的臨床表現(xiàn)主要表現(xiàn)為呼吸道感染,以及腎、腺、胃和腸道的癥狀。這一疾病已成為危害畜牧業(yè)的主要疾病之一。現(xiàn)有疫苗株IBVH120、H52、W93等在該病的預防接種中起到了很大作用,但在疫苗生產中尚存在單胚抗原收獲量低、后孵化雞胚早死率高等問題。本研究選用IBVH120和W93毒株,對接毒量、接種日齡、收獲時間、后孵化溫度等生產條件進行了一些試驗研究,現(xiàn)報告如下。1材料和方法1.1特定規(guī)則IBVH120株,EID50為106.4/0.1mL;IBVW93株,EID50107.5/0.1mL,均購自中國獸藥監(jiān)察所,本公司質檢部保存、提供。1.2f雞種蛋購自北京梅里亞維通公司,孵化至10日齡~12日齡備用。1.3eifmm-8400孵化機由青島興儀電子設備有限責任公司制造。1.4接種雞胚的檢測1.4.1IBVH120株。按表1方案對每組25枚雞胚尿囊腔接種種毒,進行交叉試驗,觀察接種后33h,35h和37h收獲時,雞胚早死情況、單胚收獲量并測定病毒滴度。1.4.2選用IBVH120株、W93株為種毒,以1.4.1試驗得出的生產條件進行重復性試驗。1.4.3以IBVH120株為種毒,以1.4.1,1.4.2試驗得出的生產條件進行規(guī)?;a。1.5收獲按設計方案于接毒后不同時間收取雞胚置2℃~8℃冷卻4h~12h后收獲胚液。1.6病毒滴度測量按常規(guī)方法測定雞胚半數(shù)感染量(EID50)。2結果2.1雞胚死亡率低,單胚收獲量高接種后不同時間收獲時,雞胚早死情況、單胚收獲量以及病毒滴度見表2。由表2可知,后孵化在34.5℃下孵育,雞胚死亡率明顯低于在37℃下孵育;在其他條件相同時,接種12日齡雞胚比接種10日齡雞胚早死率低、單胚收獲量高。另外,不同接毒量、不同后孵化溫度下,收獲病毒滴度差異不顯著(P>0.05);而相同條件下,不同時間收獲的病毒滴度有差異,接毒后35h收獲的病毒滴度明顯高于33h和37h時所收獲病毒滴度。2.2雞胚的早死率及單胚收獲量由表3可知,不論IBVH120株,還是W93株接種12日齡雞胚,在34.5℃孵育35h,雞胚早死率、單胚收獲量及病毒滴度均無明顯差異,且102.7EID50/0.1mL與103.1EID50/0.1mL不同接毒量之間的差異亦不明顯。2.3接種雞胚情況由表4可知,以102.7EID50/0.1mL的接毒量接種12日齡雞胚,于34.5℃下孵化35h時收獲,與歷次生產情況相比,雞胚死亡率降低,單胚收獲量增高,所收獲的病毒滴度均能達到規(guī)程要求標準。3討論3.1雞胚增殖對鹽脅迫的影響有效利用率降低。考慮到在規(guī)程中,雞NDVLaSota和IBVH120二聯(lián)活疫苗的生產中,IBVH120毒種稀釋度與IBVH120單苗生產不同,而前者后孵化死亡率很低。經(jīng)換算,其中IBVH120在接種雞胚時,稀釋到102.7EID50/胚~103.1EID50/胚。吳金等發(fā)現(xiàn)將IBVHK株在雞胚中增殖時,接種量以102.0EID50/胚~103.0EID50/胚為最佳;使用12日齡雞胚增毒可降低死亡率并提高抗原單產量。有關資料介紹IBV在雞胚上增殖時,降低后孵化的溫度,可以減少后孵化雞胚提早死亡的數(shù)量。本試驗充分考慮以上條件,設置了試驗組別。試驗結果充分揭示了接毒量、后孵化的溫度以及雞胚日齡對IBV病毒增殖的影響關系,就疫苗生產而言,IBVH120毒株、IBVW93毒株以102.7EID50/0.1mL的毒量接種12日齡雞胚,34.5℃孵育35h為較佳條件。3.2體制改革和生產成本孵育比37℃死亡率低。本試驗結果基本符合以上規(guī)律。單胚收獲量主要取決于雞胚日齡,在一定范圍內胚齡越大,胚液收獲量也越大,同一胚齡,胚液收獲量與接種量和后孵化溫度關系不大。生物制品生產中,在保證產品質量的同時,必須降低生產成本,以實現(xiàn)對原材料價值的充分利用,達到最大的經(jīng)濟效益。本試驗改變工藝后,雞胚早死率由7.8%~15.9%下降至0%~0.3%,單胚收獲量從平均每胚8.37mL提高到平均每胚12.4mL,并且所有抗原液病毒含量均能達到部頒規(guī)程的要求

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