異煙肼的比移值測定（實驗）-薄層色譜法檢測異煙肼

《色譜分析及操作》異煙肼的比移值測定CONTENT01實驗?zāi)康?2實驗原理03實驗試劑、儀器04實驗步驟05數(shù)據(jù)處理06思考題01實驗?zāi)康囊?、實驗?zāi)康恼莆毡由V法檢查異煙肼片中游離肼的原理掌握比移值的計算掌握薄層色譜法的基本操作02實驗原理二、實驗原理薄層色譜法，系將適宜的吸附劑或載體涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點樣、展開后，與適宜的對照物按同法在同板上所得的色譜圖對比，用以進行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測定的方法。二、實驗原理比移值（Rf）以在0.2～0.8之間為宜

03試劑與器材三、試劑與器材1、試劑硫酸肼對照液（0.2g/L）、異煙肼片展開劑（異丙醇：丙酮=3：1）乙醇制對二甲氨基苯甲醛試液：（對二甲氨基苯甲醛5g＋乙醇45.0mL＋鹽酸11.5mL）三、試劑與器材2、器材薄層色譜版（已活化）展開缸微量注射器（平頭）電吹風(fēng)噴瓶等04實驗步驟四、實驗步驟1.供試品、對照品溶液配制對照品溶液（0.08mg/mL）：準(zhǔn)確稱取0.08g硫酸肼固體，用適量的丙酮-水（1:1）溶解，并用丙酮-水稀釋，定容制成100mL對照品溶液。四、實驗步驟1.供試品、對照品溶液配制供試品溶液（100mg/mL）：取25片異煙肼片劑（規(guī)格0.1g/片）置于研缽中，仔細研成粉末，加丙酮-水（1:1）25mL，研磨溶解，轉(zhuǎn)移至漏斗中干過濾，取濾液備用。四、實驗步驟2.點樣吸取供試品溶液5μL與對照溶液5μL，點樣于薄層板上，點樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點直徑一般不大于2mm，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。四、實驗步驟2.點樣四、實驗步驟2.點樣做雜質(zhì)限量檢查時，點樣量應(yīng)準(zhǔn)確，必須用微量注射器定量點樣點樣時采用少量多次的點法，點于同一原點處點樣基線距底邊2cm兩點間距離為1.5～2.0cm點樣直徑為2～4mm，注意勿損傷薄層表面點樣注意事項：四、實驗步驟將展開劑100mL倒入展開缸中，將點好樣品的薄層板放入展開缸中，浸入展開劑的深度為距原點1cm為宜，密封。待展開一般為8～15cm，取出薄層板，標(biāo)出展開前沿，晾干。3.展開四、實驗步驟噴以乙醇制對二甲氨基苯甲醛試液，15分鐘后檢視。觀察在供試品主斑點前方與硫酸肼斑點相應(yīng)的位置上有無黃色斑點。4.顯色檢查四、實驗步驟4.顯色檢查四、實驗步驟待展開劑揮發(fā)后再進行噴霧顯色噴霧時噴霧器的噴嘴要與薄層板保持一定距離，太近時，易有大滴顯色劑噴在薄層板上而影響顯色效果。為使斑點顏色易于觀察，顯色15分鐘后，再進行檢視。顯色檢查注意事項：4.顯色檢查05數(shù)據(jù)處理五、數(shù)據(jù)處理1.比移值的計算游離肼的Rf值為

（要求約為0.75）異煙肼的Rf值為

（要求約為0.56）Rf=基線至展開斑點中心的距離基線至展開劑前沿的距離思考題薄層色譜板的制備過程有哪些？研磨：將薄層色譜硅膠10g和羧甲基纖維素鈉溶液30mL在研缽中向一方向用力研磨混合傾倒：研成糊狀后，去除表面的氣泡，立即倒在薄層板中心線上，快速左右傾斜自然風(fēng)干：于室溫下，置水平臺上晾干烘干：于110℃烘30分鐘，使薄板活化冷卻：在干燥器中冷卻檢視：使用前在反射光及透射光下檢視。思考題展開操作中有哪些注意事項？答：