瘧原蟲形態(tài)武漢市疾病預防控制中心吳凱課件

瘧原蟲形態(tài)戰(zhàn)爭？自然災害？疫??？瘧疾影響人類歷史！Nothingandnoonetakesasmanylivesasmalaria.一、根本知識瘧疾：是由瘧原蟲經(jīng)按蚊叮咬傳播的傳染病。臨床上以周期性、定時性發(fā)作的寒戰(zhàn)、高熱、出汗退熱，以及貧血和脾大為特點。是地球上發(fā)生最頻繁的寄生蟲病。被攜帶有瘧原蟲的雌性按蚊叮咬9～14天后，瘧疾的病癥便開始出現(xiàn)，因瘧原蟲種類不同，出現(xiàn)的天數(shù)及病癥會有所不同。瘧原蟲的發(fā)現(xiàn)：

1880年11月6日法國人CharlesLouisAlphonseLaveran發(fā)現(xiàn)瘧原蟲，因此獲得1907年NobelPrize。

1899年英國人RonaldRoss證實蚊子是瘧疾的傳播媒介，因此獲得1902年NobelPrize。寄生宿主：在脊椎動物〔人、猴、鼠、雞〕和昆蟲體內(nèi)寄生〔按蚊〕。2個宿主〔人是中間宿主，蚊是終末宿主〕，4個期〔人體內(nèi)：紅外期、紅內(nèi)期；蚊體內(nèi)：配子生殖期、孢子增殖期〕，間日瘧和卵型瘧的紅外期〔肝內(nèi)期〕有休眠體。再燃與復發(fā)：患者經(jīng)過治療后病癥消失，體內(nèi)尚存少量紅內(nèi)期瘧原蟲，在無新感染且條件適宜時，殘存瘧原蟲大量增殖，超過發(fā)熱閾值，出現(xiàn)瘧疾發(fā)作稱為復燃。患者經(jīng)過治療后病癥消失，外周血無瘧原蟲，在無新感染情況下，經(jīng)過一段潛隱期后，由肝中遲發(fā)型孢子引起瘧疾發(fā)作稱為復發(fā)。臨床初診為瘧疾病人、疑似瘧疾病人、不明原因發(fā)熱者作為“三熱〞病人列為血檢對象。二、人瘧原蟲種類及世界分布惡性瘧原蟲〔Plasmodiumfalciparum，P.F.〕間日瘧原蟲〔Plasmodiumvivax，P.V.〕三日瘧原蟲〔Plasmodiummalariae，P.M.〕卵形瘧原蟲〔Plasmodiumovale，P.O.〕諾氏瘧原蟲〔PlasmodiumKnowlesi，P.K.〕對外援助三、武漢市瘧防情況

輸入性瘧疾。發(fā)病率低。惡性瘧多。危險性高。鏡檢水平參差不齊。四、生活史某病例于2021年10月15日回國，回國后及時開展了抗瘧預防性服藥，2021年1月6日，該病例再次出現(xiàn)瘧疾臨床病癥，翌日經(jīng)血檢為瘧原蟲陽性。問：該病例可能感染了哪種瘧原蟲？目前，瘧原蟲抗原快速診斷試劑〔RDT〕只能檢測出惡性瘧和間日瘧，該病例RDT測試為陰性。問：該病例感染的為哪種瘧原蟲？五、瘧原蟲形態(tài)鏡檢、瘧原蟲抗原快速診斷試劑〔RDT〕、分子生物學。鑒別三要素：核、胞漿和色素。經(jīng)吉氏、瑞氏或劉氏染色一般：核呈鮮紅色或紫紅色，胞漿呈蘭色，色素呈黃褐色或深褐色。染色質(zhì)量對鏡檢影響大。間日瘧〔P.V.〕薄血膜形態(tài)環(huán)狀體〔早期/小滋養(yǎng)體〕：胞質(zhì)環(huán)狀、藍色。細胞核一個，紅色。滋養(yǎng)體：胞核增大，胞質(zhì)增多。偽足、瘧色素〔棕黃色〕、薛氏小點〔淡黃色〕、被寄生RBC脹大。裂殖體：核分裂、胞質(zhì)也分裂，形成裂殖子。瘧色素成堆。被寄生RBC脹大明顯。配子體：圓形或橢圓形，瘧色素分散，核增大，一個。胞質(zhì)占滿脹大RBC。大〔♀〕配子體胞漿深蘭色，核偏于一邊，核周可見明顯不染色帶；小〔♂〕配子體胞漿淺蘭色，核較疏松，常位于中央。惡性瘧〔P.F.〕薄血膜形態(tài)環(huán)狀體：RBC大小正常，顏色較深；核一個或二個；環(huán)小，纖細，約為紅細胞直徑1/5~1/6，時常位于紅細胞的邊緣。常見多個同寄生一紅細胞現(xiàn)象。滋養(yǎng)體：RBC大小正常，顏色較深，可出現(xiàn)較粗、大小不一、分布不勻、數(shù)目較少，紅色茂氏小點；核一個；環(huán)較小，圓形，堅實，體積??；出現(xiàn)較細的黑褐色顆粒色素，常集成塊。原蟲此時開始集中在內(nèi)臟毛細血管。裂殖體：RBC大小正常，顏色較深，可見茂氏小點；裂殖子8~36個，平均18~24個，排列不規(guī)那么或呈二重排列；色素黑褐色，集中于中央或一側(cè)。配殖體：新月型〔♀〕或臘腸型〔♂〕；核一個，位于細胞中央；黑褐色色素分布于核周圍。間日瘧與惡性瘧原蟲薄血膜形態(tài)比較被寄生RBC間日瘧：常脹大，多形，色淺，薛氏點鮮紅色，細小，數(shù)多。惡性瘧：大小正常，色稍紫；茂氏點紫紅色，粗大，數(shù)少。環(huán)狀體〔小滋養(yǎng)體〕間日瘧：胞漿肥厚，環(huán)較大，核1個,占RBC直徑1/3，常見1個原蟲。惡性瘧：環(huán)纖細，核1個或2個，占RBC直徑1/5至1/6，常見2個或多個原蟲。大滋養(yǎng)體間日瘧：蟲體不規(guī)那么，較大；阿米巴樣空泡明顯；瘧色素細小，黃褐色。惡性瘧：外周血難查見。蟲體小，圓形；空泡??；早期瘧色素細小，金黃色，晚期結(jié)成塊狀，黑褐色。裂殖體間日瘧：被寄生RBC大于正常紅細胞；裂殖子12~24個，通常16個，排列不規(guī)那么；瘧色素常集于一側(cè)，黃褐色。惡性瘧：外周血難查見。被寄生RBC小于正常紅細胞；裂殖子較小，8~26個，排列不規(guī)那么；瘧色素成團快狀，黑褐色。配殖體間日瘧：圓形核1個，充滿脹大RBC。瘧色分散。惡性瘧：臘腸形或新月形，核1個。瘧色素分散。三日瘧原蟲薄血膜形態(tài)被寄生RBC正?；蚩s小，有細小的齊氏點，淡紅色。小滋養(yǎng)體蟲體中等，核1個，胞漿較粗厚，偶見細小褐色色素顆粒。大滋養(yǎng)體蟲體較小，核1個，胞漿帶狀，空泡不顯著，色素顆粒深褐色，粗大，沿邊緣分布。裂殖體寄生的RBC縮小，裂殖子6～12個，常為8個，常圍繞聚集在中央深褐色色素顆粒排列成菊花、梅花狀。配殖體寄生的RBC縮小，配殖體呈圓形，核1個，色素顆粒深褐色，類似間日瘧配殖體形態(tài)。卵形瘧原蟲薄血膜形態(tài)被寄生RBC正?；蛎洿?，卵圓形或邊緣呈傘矢狀，細胞褪色，薛氏點粗大較多。小滋養(yǎng)體蟲體中等，核1個，胞漿粗厚，無色素。大滋養(yǎng)體蟲體較小，核1個，胞漿圓形，空泡不顯著，色素顆粒棕黃色，較粗大。裂殖體寄生的RBC縮小，裂殖子6～12個，常為8個，排列不規(guī)那么，裂殖子較大，色素顆粒棕黃色，聚集中央或細胞一側(cè)。配殖體寄生的RBC縮小，常有鋸齒狀邊緣，配殖體呈圓形，核1個，色素顆粒棕黃色，與間日瘧相似。諾氏瘧原蟲人感染諾氏瘧原蟲主要在東南亞地區(qū)被報道。灰色區(qū)域顯示諾氏瘧原蟲主要傳播媒介白踝按蚊的地理分布。數(shù)字代表人感染諾氏瘧原蟲的病人數(shù)，包括本地病例和在該地區(qū)有居住旅行史的病例。諾氏瘧原蟲是主要長尾猴和短尾猴中傳染的猴瘧原蟲，現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)也可以通過按蚊造成猴與人、人與人和人與猴之間的傳染。諾氏瘧原蟲發(fā)育周期為24h，被感染病人血內(nèi)容易出現(xiàn)高原蟲血癥及臨床病癥加重而出現(xiàn)危險。諾氏瘧原蟲高原蟲血癥諾氏瘧原蟲形態(tài)與惡性瘧、三日瘧原蟲相似經(jīng)吉姆薩染色后諾氏瘧原蟲形態(tài)：被感染的紅細胞不脹大，細胞褪色，瘧色素明顯。紅細胞瘧原蟲感染率較高，一般各期可見，小滋養(yǎng)體與惡性瘧原蟲環(huán)狀體相似，有雙核、3核，1個紅細胞有3個、4個瘧原蟲同時感染的情況，在被感染紅細胞邊緣也可見瘧原蟲寄生。多數(shù)晚期滋養(yǎng)體呈阿米巴樣，有些晚期滋養(yǎng)體小于紅細胞體積的2/3，胞漿致密不變形。也有多數(shù)晚期滋養(yǎng)體有形成帶狀的趨勢，接近三日瘧原蟲的“帶狀〞晚期滋養(yǎng)體。瘧原蟲的成熟裂殖體中央通常聚集著8～16個裂殖子，裂殖體不完全占滿整個紅細胞。晚期滋養(yǎng)體和裂殖體中有濃密的褐色瘧色素。瘧原蟲配子體充滿了紅細胞的絕大局部或者完全充滿，形態(tài)同間日瘧原蟲，但略小。引用自：朱淮民，李軍，鄭徽。諾氏瘧原蟲的人體自然感染[J]，中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志，2006,24〔6〕：70-71.諾氏瘧原蟲(A,B)小滋養(yǎng)體(C)成熟滋養(yǎng)體(D)帶狀滋養(yǎng)體(E,F,G)裂殖體(H)裂殖子(I)配殖體厚血膜形態(tài)厚血膜的鏡檢受到很多因素的影響，如：厚血膜層次多、背景深、透光差，蟲體收縮，瘧原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)遠不如薄血膜上清晰典型；厚血膜中紅細胞重疊和橫豎交替，使瘧原蟲體態(tài)各不相同，并且還會出現(xiàn)折皺疊加的現(xiàn)象；血片制作、染色過程中亦會使原蟲皺縮變形和腐蝕破損，厚血膜中原蟲的形態(tài)與薄血膜相比，差異很大，識別較難；染色過程中血紅蛋白溶解，紅細胞消失而不能像薄血膜那樣可以借助紅細胞特有的改變和瘧原蟲在紅細胞內(nèi)的特點進行識別；厚血膜上還?；祀s一些與原蟲較易混淆的染液殘渣、血小板和血細胞碎片，更增加了鑒別的困難。在厚血膜中，各期瘧原蟲的體積都略為縮小，其中只有大、小滋養(yǎng)體的形態(tài)有較大改變，而裂殖體和配子體的形態(tài)那么無明顯變化。小滋養(yǎng)體：胞漿呈環(huán)狀或向核的一側(cè)或兩側(cè)收縮，使環(huán)的中間斷裂，或圍繞核。間日瘧原蟲的環(huán)較大，常呈分號“；〞和感慨號“！〞狀；而惡性瘧原蟲的環(huán)纖細，常呈冒號“：〞、飛鳥“⌒.⌒〞、V狀和斷環(huán)狀。惡性瘧環(huán)狀體在發(fā)育不同階段，其個體大小有很大變化。注意粗環(huán)與間日瘧環(huán)狀體的區(qū)別。大滋養(yǎng)體：間日瘧大滋養(yǎng)體體呈阿米巴樣運動，胞漿常斷裂幾塊或縮成圓形，核和瘧色素均被包在胞漿之中，著色深，只隱約可見紅色的核和黃綠色的瘧色素。胞漿可皺縮斷裂成幾個塊狀，大小不一，似互不連接。核位于胞漿之中或外邊。瘧色素分布不均勻。有些僅見胞漿和瘧色素而核看不清楚。惡性瘧原蟲大滋養(yǎng)體，與薄血膜形態(tài)相似，常呈圓形，體小結(jié)實，瘧色素細小，金黃色，結(jié)成塊狀后，呈黑褐色。厚血膜惡性瘧環(huán)狀體特點：“滿天星”，“！”狀等。厚血膜惡性瘧配殖體與薄血膜形態(tài)差別不大。厚血膜間日瘧滋養(yǎng)體，胞漿連續(xù)或斷開，有或沒有紅細胞影子。厚血膜間日瘧裂殖體與薄血膜形態(tài)差異不大。惡性瘧原蟲環(huán)狀體、大滋養(yǎng)體裂殖體、配殖體厚、薄血膜涂片的優(yōu)缺點薄血膜：瘧原蟲形態(tài)典型，易識別，較易鑒別種類，原蟲分散難于發(fā)現(xiàn)，檢查效率低，費時間。厚血膜：血量多，面積小，瘧原蟲檢出率高，瘧原蟲容易發(fā)現(xiàn)，省時間，但瘧原蟲形態(tài)改變，紅細胞輪廓消失，不易識別，鑒別原蟲困難?；旌闲透腥炯先旧Ч幒蟑懺x形態(tài)抗瘧藥物可以使瘧原蟲的形態(tài)發(fā)生各種變化。同一類型的藥物對瘧原蟲的形態(tài)引起的變化大致相同。一般說，藥物作用對大、小滋養(yǎng)體和裂殖體前期的形態(tài)變化較大，配子體的形態(tài)變化較小，最明顯的變化有外觀破碎、色素早期凝集和裂殖體縮小等，如核疏松，核著色深，胞漿稀少或破碎，色素凝結(jié)，成粗大顆粒，裂殖體核常裂成碎塊，大小不一等。瘧原蟲與其它物體的鑒別

厚血膜可因染液的酸堿度影響，或只看到小滋養(yǎng)體的核、或只看到瘧色素、或者只見胞漿斷裂的殘塊。這樣，它與涂片和染色過程所沾污的雜質(zhì)包括來自空氣的灰塵、真菌、孢子，來自取血時沾污的污垢、細菌，染料殘渣，白細胞裂后散出之顆粒，碎片，網(wǎng)狀紅細胞的殘骸中等，皆易混淆，血小板等誤為瘧原蟲。疑似瘧色素：血膜上的染料殘渣及灰塵，有時可誤為瘧色素，此時可依據(jù)其顆粒大小，色澤及分布范圍加以區(qū)別。轉(zhuǎn)動微螺旋時，可見它浮于紅細胞之上，與原蟲不在一平面上。疑似瘧原蟲核：細菌尤其是球菌或白細胞破裂后散出的顆粒，皆為紅色小點，與瘧原蟲的核相似，最易混淆。但球菌形體較大，邊線光滑，常見許多個聚集一處，分布廣。中性和酸性白細胞的顆粒，著色較淡，邊緣整齊，附近常有白細胞的碎屑。疑似瘧原蟲胞漿：網(wǎng)狀紅細胞殘骸和白細胞殘骸通常為蘭色，與瘧原蟲的胞漿相似，有時因與上述紅點巧合一起，而容易誤為瘧原蟲。鑒別時如形同大滋養(yǎng)體，可依據(jù)瘧色素的特點加以區(qū)別；如形同小滋養(yǎng)體，可依據(jù)蟲體大小、折光是否均勻以及核與胞漿是否在一個平面上加以區(qū)別。六、血液細胞嗜中性粒細胞：是白細胞中數(shù)量最多的，約占全部白細胞的53％左右，呈圓形，胞質(zhì)淡紅色，內(nèi)含有多量的紫紅色微粒〔不易看清〕。胞核隨細胞成熟的程度而不同，幼稚型的呈桿狀或馬蹄形，成熟的呈分葉狀，三葉的較多見，老齡的有8～9葉或更多。嗜酸性粒細胞：細胞質(zhì)內(nèi)含深紅色大型顆粒，顆粒內(nèi)含有過氧化物酶和酸性磷酸酶。其細胞核的形狀與嗜中性白細胞相似，通常有2～3葉，約占白細胞總數(shù)的4％。嗜堿性粒細胞：數(shù)量很少，約占0.6％