微生態(tài)制劑對非酒精性脂肪性肝炎c-Jun氨基末端激酶的影響的開題報(bào)告

微生態(tài)制劑對非酒精性脂肪性肝炎c-Jun氨基末端激酶的影響的開題報(bào)告1.0選題背景與意義非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholicfattyliverdisease，NAFLD）是一種常見的代謝性疾病，其病因尚不十分明確，但與肥胖、2型糖尿病等代謝紊亂的疾病密切相關(guān)。NAFLD可以演變?yōu)榉蔷凭灾拘愿窝祝╪onalcoholicsteatohepatitis，NASH），并伴隨各種肝臟炎癥和纖維化，嚴(yán)重時(shí)可能進(jìn)展為肝硬化和肝癌，對人體健康造成嚴(yán)重威脅。近年來，越來越多的研究表明，腸道微生態(tài)與NAFLD的關(guān)系密切，腸道菌群失調(diào)對NAFLD的發(fā)病和發(fā)展具有重要作用。因此，微生態(tài)制劑已成為防治NAFLD的一種新方法。c-Jun氨基末端激酶（c-JunN-terminalkinase,JNK）是MAPK家族中的一員，被認(rèn)為是NAFLD病理過程中的關(guān)鍵分子。在NAFLD病理過程中，JNK激活可以誘導(dǎo)肝細(xì)胞脂肪酸合成和纖維化，進(jìn)一步通路的激活也可以加劇NAFLD進(jìn)程。因此，JNK已成為針對NAFLD療效的主要靶點(diǎn)。微生態(tài)制劑對JNK的影響是目前尚未得到深入研究的領(lǐng)域。因此，探討微生態(tài)制劑對JNK介導(dǎo)的NAFLD發(fā)病和發(fā)展的影響，對于防治NAFLD具有重要意義。2.0研究內(nèi)容及方法2.1研究內(nèi)容本研究旨在通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，研究微生態(tài)制劑Bifidobacteriumbifidum、Lactobacillusacidophilus和Combination制劑對JNK介導(dǎo)的NAFLD發(fā)病和發(fā)展的影響，探討微生態(tài)制劑在預(yù)防和治療NAFLD中的作用機(jī)制和效果。2.2研究方法2.2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立選擇健康雄性Wistar大鼠60只，隨機(jī)分為正常組、模型組、Bifidobacteriumbifidum組、Lactobacillusacidophilus組和Combination組，每組12只。室溫25-30°C，相對濕度50%左右，日光照明。飼料是標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)飼料。正常組和模型組大鼠每天口服等量無菌生理鹽水，微生態(tài)組分別口服Bifidobacteriumbifidum、Lactobacillusacidophilus和Combination制劑(總量1g/kg.d)，共7周。2.2.2大鼠肝組織病理學(xué)檢測每組3只大鼠隨機(jī)選取，取其肝臟組織進(jìn)行H&E染色檢測，觀察肝臟組織形態(tài)學(xué)變化。2.2.3大鼠JNK信號(hào)通路相關(guān)分子表達(dá)分析所有大鼠肝臟組織提取總蛋白，Westernblot法檢測肝臟組織中JNK、p-JNK、c-JUN、p-c-JUN的表達(dá)水平，以及JNK信號(hào)通路的相關(guān)蛋白表達(dá)水平。2.2.4數(shù)據(jù)分析方法使用SPSS軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用t檢驗(yàn)法、方差分析法進(jìn)行數(shù)據(jù)的比較。3.0預(yù)期結(jié)果及意義通過以上實(shí)驗(yàn)方法，將得到五組大鼠不同處理后的肝臟組織相關(guān)數(shù)據(jù)，預(yù)期結(jié)果為：1.大鼠肝臟組織NAFLD病理形態(tài)學(xué)損害情況：Bifidobacteriumbifidum、Lactobacillusacidophilus和Combination組大鼠肝臟組織中NAFLD的病理形態(tài)學(xué)損害輕，相比于模型組，有一定程度上的保護(hù)作用。2.大鼠肝臟組織中JNK信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)情況：Bifidobacteriumbifidum、Lactobacillusacidophilus和Combination組大鼠肝臟組織中JNK、p-JNK、c-JUN、p-c-JUN的表達(dá)水平均低于模型組，效果最佳的是Combinatio