高二生物學(xué)案：專題課題土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)含解析

學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)知識點(diǎn)一菌株的篩選與選擇培養(yǎng)基1．篩選菌株(1）原理:人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長。（2)實(shí)例：從熱泉中篩選出Taq細(xì)菌。熱泉70～80℃的高溫條件淘汰了絕大多數(shù)微生物，而使耐熱的Taq細(xì)菌脫穎而出.（3）方法：利用選擇培養(yǎng)基分離。歸納總結(jié)：選擇培養(yǎng)微生物的方法通常有兩種:(1）可利用該分離對象對某一營養(yǎng)物質(zhì)有“嗜好”的原理，專門在培養(yǎng)基中加入該營養(yǎng)物質(zhì),從而使它成為一種加富培養(yǎng)基;（2）可利用該分離對象對某種抑菌物質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑菌物質(zhì)，經(jīng)培養(yǎng)后，其他微生物生長受抑制，而分離對象卻可乘機(jī)大大繁殖，在數(shù)量上占優(yōu)勢.2．選擇培養(yǎng)基（1)概念：選擇培養(yǎng)基指允許特定種類的微生物生長,同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。(2）選擇培養(yǎng)基的制備原理:根據(jù)不同微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某一化學(xué)、物理因素的抗性不同而制備培養(yǎng)基.（3)選擇培養(yǎng)基的制備方法:在培養(yǎng)基中加入某種允許特定種類微生物生長,抑制或阻止其他種類微生物生長的化學(xué)成分。(4）選擇培養(yǎng)基的用途：使混合菌株中的目的菌變成優(yōu)勢菌,提高該菌的篩選率。(5）實(shí)例：在培養(yǎng)基中以尿素為唯一的氮源可得到能利用尿素的微生物；在培養(yǎng)基中加入青霉素可分離得到酵母菌和霉菌。土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)所需培養(yǎng)基配方培養(yǎng)基組成提供的營養(yǎng)或作用KH2PO41.4g、Na2HPO42.1g、MgSO4·7H2O0。2g無機(jī)鹽葡萄糖10.0g碳源尿素1。0g氮源、碳源瓊脂15.0g凝固劑用蒸餾水定容至1000mL氫元素、氧元素本培養(yǎng)基的氮源為尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素為氮源,缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，會因缺乏氮源而不能生長繁殖，所以,用該培養(yǎng)基能夠篩選出可分解尿素的微生物?！镜漕}精練1】應(yīng)用選擇培養(yǎng)基的主要原理是（）A．使微生物大量增殖B．顯現(xiàn)某微生物的特征，以區(qū)別于其他微生物C．抑制不需要的微生物的生長D．適宜野生型微生物的生長【答案】C【解析】同學(xué)們可從選擇培養(yǎng)基的作用原理來區(qū)分各個(gè)選項(xiàng).選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某一化學(xué)物質(zhì)或改變某一理化性質(zhì),使某一微生物正常生長,而其他微生物則被殺滅或生長受到抑制，從而選出所需要的微生物.解題歸納根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)，加入某種物質(zhì)或不加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。常見微生物的分離舉例如下。①酵母菌、霉菌等真菌：用含青霉素的培養(yǎng)基分離；②金黃色葡萄球菌：用含高濃度食鹽水的培養(yǎng)基分離；③固氮微生物：用缺乏氮源的培養(yǎng)基分離；④自養(yǎng)型微生物：用含無機(jī)碳源的培養(yǎng)基分離；⑤厭氧型和兼性厭氧型微生物：用普通培養(yǎng)基在無氧條件下分離?！镜漕}精練2】甲、乙、丙是三種微生物，表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長繁殖，而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生長繁殖,甲、丙都不能.下列說法正確的是（）ⅠⅡⅢ粉狀硫10g＋＋＋K2HPO44g＋＋＋FeSO40.5g＋＋＋蔗糖10g＋－＋（NH4）2SO40.4g－＋＋H2O100mL＋＋＋MgSO49.25g＋＋＋CaCl20。5g＋＋＋注：“＋”表示培養(yǎng)基中加入了這種物質(zhì)，“－"表示培養(yǎng)基中沒有加入這種物質(zhì).A．甲、乙、丙都是異養(yǎng)型微生物B．甲、乙都是自養(yǎng)型微生物,丙是異養(yǎng)型微生物C．甲是異養(yǎng)型微生物，乙是固氮微生物，丙是自養(yǎng)型微生物D．甲是固氮微生物，乙是自養(yǎng)型微生物，丙是異養(yǎng)型微生物【答案】D【解析】Ⅰ培養(yǎng)基缺少氮源，Ⅱ培養(yǎng)基缺少碳源，Ⅲ培養(yǎng)基營養(yǎng)全面。氮元素是微生物生長的必需元素,每一種微生物正常生長都需要氮元素,但自己能夠固氮的微生物可以生活在無氮培養(yǎng)基上。甲能在Ⅰ上正常生長繁殖，而乙、丙都不能,說明甲是能夠固氮的微生物;乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，而甲、丙不能，說明乙不需要培養(yǎng)基為它的正常生命活動提供碳源，乙一定為自養(yǎng)型微生物；丙只能在Ⅲ上正常生長繁殖，為異養(yǎng)型微生物。知識點(diǎn)二統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目1．顯微鏡直接計(jì)數(shù)法（總菌計(jì)數(shù)法）(1）原理：此法利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。(2）方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)板是一塊特制的載玻片，上面有一個(gè)特定的面積為1mm2和高為0。1mm的計(jì)數(shù)室,在1mm2的面積里又被劃分成25個(gè)（或16個(gè)）中格，每個(gè)中格進(jìn)一步劃分成16個(gè)（或25個(gè))小格,但計(jì)數(shù)室都是由400個(gè)小格組成的。如下圖所示.(3)計(jì)算公式：每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)＝每小格平均細(xì)菌數(shù)×400×10000×稀釋倍數(shù)(4）缺點(diǎn)：不能區(qū)分細(xì)菌的死活。歸納總結(jié)：顯微鏡直接計(jì)數(shù)的操作步驟1．取清潔無油的血球計(jì)數(shù)板，在計(jì)數(shù)室上面加蓋蓋玻片。2．取菌液，搖勻，用滴管吸取菌液在蓋玻片邊緣滴一小滴，使菌液自行滲入,計(jì)數(shù)室內(nèi)不得有氣泡。3．用顯微鏡10×物鏡觀察并將計(jì)數(shù)室移至視野中央。4．在10×物鏡下計(jì)數(shù)：計(jì)數(shù)5個(gè)(或4個(gè))中格的總菌數(shù)，然后求得每個(gè)中格的菌數(shù)的平均值，再乘以16（或25）就得出計(jì)數(shù)區(qū)的總菌數(shù)，最后再換算出每毫升菌液中的含菌數(shù)。5．注意事項(xiàng):計(jì)上不計(jì)下，計(jì)左不計(jì)右.2．間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法）（1）原理:當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活菌。(2）計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V）×M.其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積(mL）,M代表稀釋倍數(shù).（3)統(tǒng)計(jì)方法:統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板，計(jì)算出平板上菌落數(shù)的平均值,然后按公式進(jìn)行計(jì)算。特別提醒：1.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。2．要設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)，且一定要涂布至少3個(gè)平板作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。3．用此種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來表示.3．設(shè)置對照教材所給實(shí)例中,A同學(xué)與其他同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相差很大的原因分析及進(jìn)一步通過對照實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證如下:可能原因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證結(jié)論所取土樣不同其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)若結(jié)果與A同學(xué)的一致,則說明A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)操作沒問題;若結(jié)果與A同學(xué)的不一致，則說明A同學(xué)操作失誤或培養(yǎng)基配制有問題培養(yǎng)基污染或操作失誤將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)，作空白對照若有菌落出現(xiàn)，則說明培養(yǎng)基被污染；若無菌落出現(xiàn),則說明培養(yǎng)基未被污染注意：①牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基應(yīng)各設(shè)一個(gè)空白對照，即不涂布菌液，目的是驗(yàn)證培養(yǎng)基中是否含雜菌；②樣品稀釋度將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。【典題精練3】在做“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)時(shí),甲組實(shí)驗(yàn)用氮源只含尿素的培養(yǎng)基,乙組實(shí)驗(yàn)用氮源除尿素外還含硝酸鹽的培養(yǎng)基，其他成分都相同，在相同條件下操作，培養(yǎng)與觀察，則乙組實(shí)驗(yàn)屬于(）A．空白對照 B．標(biāo)準(zhǔn)對照C．相互對照 D．條件對照【答案】D【解析】上述實(shí)驗(yàn)中,甲組是實(shí)驗(yàn)組,乙組是對照組,給甲組某種處理，給乙組另一種條件的處理，則乙組應(yīng)該是條件對照。解題歸納做該題首先要明確：土壤取樣要求在富含有機(jī)質(zhì)、pH接近中性且潮濕的土壤中采取。分離細(xì)菌時(shí)需要設(shè)置實(shí)驗(yàn)組和對照組，對照組能排除實(shí)驗(yàn)組中非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度.【典題精練4】自然界中的微生物往往是混雜生長的.人們在研究微生物時(shí)一般要將它們分離提純,然后進(jìn)行數(shù)量測定.下面是對某水樣中大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測定的實(shí)驗(yàn)，請回答有關(guān)問題。步驟：①制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液；②用稀釋涂布平板法接種樣品；③在適宜溫度下培養(yǎng).結(jié)果分析：（1)一位同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上測得平板上菌落數(shù)的平均值為43。4，那么每毫升樣品中的菌株數(shù)是(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.2mL）________。(2）用這種方法測定微生物數(shù)量時(shí)，實(shí)際的活菌數(shù)往往要比統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)________，因?yàn)開____________________________________。(3）某同學(xué)在測定大腸桿菌的密度時(shí)發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落,________（填“能”或“不能”)肯定大腸桿菌的品系被污染了。原因是_________________________________________________________________________________________________________?！敬鸢浮浚?)2。17×108(2）多當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落（3）不能不能確定雜菌的來源【解析】（1)每毫升樣品中的菌株數(shù)為43。4÷0。2×106＝2。17×108。（2）因?yàn)槿庋劭梢姷木淇赡苡蓛蓚€(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起生長而成,所以實(shí)際的活菌數(shù)往往要比統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)多。(3)雜菌的出現(xiàn)可能是由于培養(yǎng)基滅菌不徹底或在培養(yǎng)過程中感染了雜菌。知識點(diǎn)三細(xì)菌分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果評價(jià)1．實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（1）基本思路：明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹鍖?shí)驗(yàn)的原理及相關(guān)的知識點(diǎn)→確立完成實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵條件→考慮每一個(gè)材料用具可能的作用→設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案。(2）實(shí)驗(yàn)流程2．結(jié)果分析與評價(jià)內(nèi)容結(jié)論分析是否有雜菌污染①對照組培養(yǎng)基上無菌落生長→未被雜菌污染；②實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基上菌落數(shù)偏高→被雜菌污染；③實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基上菌落形態(tài)多樣,菌落數(shù)偏高→培養(yǎng)基上可能混入其他氮源選擇培養(yǎng)基是否能篩選出菌落牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目→選擇培養(yǎng)基具有篩選作用樣品的稀釋操作如果得到了2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)在30～300的平板→操作成功重復(fù)組的結(jié)果若選取的是同一種土樣，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果應(yīng)該接近1．分離分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原則（1）設(shè)立重復(fù)組：統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)時(shí),要至少涂布3個(gè)平板，以增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的說服力與準(zhǔn)確性。（2)對照原則①判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染，要將未接種的培養(yǎng)基同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。②判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用，要另外設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行接種后培養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，進(jìn)行比較得出結(jié)論。2．分解尿素的細(xì)菌的進(jìn)一步鑒定（1）原理:CO(NH2）2＋H2Oeq\o(→，\s\up17（脲酶）)CO2＋2NH3。細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨,使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng),pH升高,因此，可通過檢測pH的變化來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。(2）方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌，若指示劑變紅，則pH升高,說明該種菌能分解尿素?！镜漕}精練5】如圖所示是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶的細(xì)菌的過程。（1）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以________為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加________作指示劑，產(chǎn)脲酶的細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成________色。（2）在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0。1mL,培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程采取的接種方法是________，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)為________；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)較________。在實(shí)驗(yàn)中,研究者每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，并選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止________________________________________。為了判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，應(yīng)該增設(shè)________________作為對照.(3）通常,對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的________等特征對細(xì)菌進(jìn)行初步鑒定。【答案】(1）尿素酚紅紅（2)稀釋涂布平板法1.75×108少因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（3）形狀、大小（答案合理即可）【解析】（1)脲酶能夠催化尿素分解為氨,故圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，鑒別培養(yǎng)基中還需添加酚紅作指示劑，由于尿素被脲酶分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),pH升高，從而使酚紅指示劑變紅.（2)常用于計(jì)數(shù)細(xì)菌菌落數(shù)的方法是稀釋涂布平板法，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，故選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計(jì)數(shù)。每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為(156＋178＋191）÷3÷0.1×105＝1.75×108。用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)細(xì)菌數(shù)量時(shí),當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，往往統(tǒng)計(jì)的是一個(gè)菌落，所以用此計(jì)數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)較少。（3）對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征對細(xì)菌進(jìn)行初步鑒定。解題歸納一般土壤取樣為10g，稀釋液為1mL，梯度稀釋為10mL，因而形成梯度稀釋度差。涂布時(shí)用量為0。1mL，因此在計(jì)算菌落數(shù)目時(shí)，公式為：每克樣品中的菌株數(shù)＝（C÷V)×M。其中,C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。【典題精練6】依據(jù)我國生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),接種1mL水樣到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，在37℃下培養(yǎng)24h后，所生長出的菌落總數(shù)不得大于100。某興趣小組對某蓄水池進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)測定，以了解池水是否符合飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。回答下列問題：(1）用無菌三角瓶取水樣前，取樣器（玻璃制品)可使用________法或________法滅菌。取水前的這種無菌操作的目的是___________________________________________________。(2）該小組通過濾膜法測定細(xì)菌總數(shù)，將10mL水樣進(jìn)行過濾后，將濾膜放在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)應(yīng)將平板倒置，其原因是_____________________________________________________(至少寫出兩點(diǎn)）。（3）分別取10mL水樣，用(2)中方法在37℃下培養(yǎng)24h后，結(jié)果如表所示：平板平板1平板2平板3菌落數(shù)275300280據(jù)表中結(jié)果判斷，所取水樣測定結(jié)果________（填“符合”或“不符合”）飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。(4）該小組若想檢測水樣中大腸桿菌的數(shù)目，可將濾膜放在含________的培養(yǎng)基上,計(jì)算培養(yǎng)基上________（顏色)菌落的數(shù)目?！敬鸢浮?1）高壓蒸汽滅菌干熱滅菌（兩空答案順序可以顛倒）防止外來雜菌污染(2)防止冷凝水滴落，污染培養(yǎng)基，也可避免培養(yǎng)基中水分過快揮發(fā)(答案合理即可)（3)符合（4)伊紅美藍(lán)黑色【解析】（1）用無菌三角瓶取水樣前，取樣器（玻璃制品）需使用高壓蒸汽滅菌（或干熱滅菌)法滅菌.取水前的無菌操作的目的是防止外來雜菌污染。(2）平板倒置既可避免培養(yǎng)基表面的水分過快揮發(fā)，又可防止冷凝水滴落在培養(yǎng)基上，造成污染，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。（3）表格中3個(gè)平板的平均菌落數(shù)為285，則每毫升水樣對應(yīng)菌落數(shù)為28.5，低于國家規(guī)定的飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，因此所取水樣符合飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn).(4）測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目的方法：將已知體積的水過濾后，將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，可根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目，估算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。一、選擇題1．用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需要設(shè)置的對照是(C)A．未接種的選擇培養(yǎng)基B．未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C．接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D．接種了的選擇培養(yǎng)基解析：將菌液稀釋相同的倍數(shù),在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，因此，應(yīng)選擇牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照。對照遵循的原則是單一變量原則。2．在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)又能抑制或者阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱作(C)A．鑒別培養(yǎng)基 B．加富培養(yǎng)基C．選擇培養(yǎng)基 D．基礎(chǔ)培養(yǎng)基解析：基礎(chǔ)培養(yǎng)基是含有一般微生物生長繁殖所需基本營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基，例如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基;加富培養(yǎng)基一般用來培養(yǎng)營養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物；鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種特殊的化學(xué)物質(zhì)，微生物的代謝產(chǎn)物能與該物質(zhì)產(chǎn)生特定的化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生明顯的特征變化，如出現(xiàn)某種特定顏色等，從而鑒別出微生物種類；選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)，促進(jìn)需要的微生物生長、抑制不需要的微生物生長，從而選擇出某種微生物。3．關(guān)于微生物的培養(yǎng)，敘述錯(cuò)誤的是(D)A．霉菌一般在25～28℃的溫度下培養(yǎng)3～4dB．不同種類的微生物,一般來說培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間不相同C．一般來說，在相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間等條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征D．一個(gè)菌落就是單個(gè)微生物在固體培養(yǎng)基上迅速生長繁殖，并以此母細(xì)胞為中心形成的子細(xì)胞集團(tuán)解析：不同種類的微生物，培養(yǎng)溫度和時(shí)間一般不相同，霉菌一般在25～28℃下培養(yǎng)3～4d，細(xì)菌一般在30~37℃下培養(yǎng)1～2d，放線菌一般在25～28℃下培養(yǎng)5～7d。菌落形成后，母細(xì)胞因分裂產(chǎn)生了子細(xì)胞群體而不復(fù)存在了。4．下列關(guān)于測定土壤中微生物數(shù)量的敘述，正確的是（B）A．一般選用103～107倍的稀釋液分別涂布B．測定放線菌的數(shù)量，一般選用103、104和105倍稀釋C．測定真菌的數(shù)量，一般選用103、104和105倍稀釋D．當(dāng)?shù)谝淮螠y量某種細(xì)菌的數(shù)量時(shí)，可以將101～107倍的稀釋液分別涂布到平板上培養(yǎng)解析：由于土壤中各類微生物的數(shù)量不同，在進(jìn)行分離與計(jì)數(shù)時(shí)，就需要按照不同的稀釋度分別進(jìn)行涂布.測定細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104、105、106倍稀釋；測定真菌的數(shù)量，一般選用102、103、104倍稀釋;測定放線菌的數(shù)量，一般選用103、104和105倍稀釋,而首次做實(shí)驗(yàn)時(shí),可將范圍放寬點(diǎn)，可以將103～107倍的稀釋液分別涂布到平板上培養(yǎng)。5．下列有關(guān)微生物的利用的敘述，正確的是（B）A．用于制果酒、果醋的微生物都含有線粒體B．分離能分解尿素的細(xì)菌,尿素應(yīng)作為培養(yǎng)基中唯一的氮源C．可采用干熱滅菌法對微生物培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D．平板計(jì)數(shù)法是測量微生物數(shù)量唯一且準(zhǔn)確的方法解析：果醋發(fā)酵利用的是醋酸菌,為原核生物，無線粒體；培養(yǎng)基滅菌通常用的是高壓蒸汽滅菌法,而干熱滅菌法通常適用玻璃器皿、金屬用具等耐高溫且不適合其他方法的物品；平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)的是活菌數(shù)，而且有一定的誤差。分離能分解尿素的細(xì)菌，用的選擇培養(yǎng)基里尿素是唯一的氮源，這樣才能分離出分解尿素的細(xì)菌。6．為了判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染和選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需要設(shè)置的對照組的培養(yǎng)基分別是(B)A．未接種的選擇培養(yǎng)基,未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基B．未接種的培養(yǎng)基,接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C．接種了的選擇培養(yǎng)基,接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D．接種了的培養(yǎng)基，未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基解析：若要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染，可將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)，一段時(shí)間后若有菌落產(chǎn)生,說明培養(yǎng)基被污染，若無菌落產(chǎn)生，說明培養(yǎng)基沒有被污染。要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，接種了的選擇培養(yǎng)基是實(shí)驗(yàn)組,將等量的稀釋相同倍數(shù)的菌液接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，作為對照組，在相同的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，觀察比較對照組和實(shí)驗(yàn)組中的菌落數(shù),在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，綜上所述，B正確，A、C、D錯(cuò)誤。7．下列有關(guān)微生物分離、培養(yǎng)和計(jì)數(shù)的敘述，正確的是（D)A．分離土壤中微生物時(shí)，需要先對土壤滅菌，再進(jìn)行培養(yǎng)B．測定土壤中細(xì)菌數(shù)量時(shí)，一般選用103～107倍的稀釋液C．測定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用稀釋涂布平板法或平板劃線法進(jìn)行計(jì)數(shù)D．統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),一個(gè)活菌會形成一個(gè)菌落解析：分離土壤中微生物時(shí)，需要對培養(yǎng)基滅菌,但不能對土壤樣品進(jìn)行滅菌,A錯(cuò)誤;由于土壤中各類微生物的數(shù)量不同,在進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)時(shí)，就需要按照不同的稀釋度分別進(jìn)行涂布，測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量一般選擇104、105、106倍的稀釋液,B錯(cuò)誤;測定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目常用稀釋涂布平板法，平板劃線法不能用于計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤;統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，一個(gè)活菌會形成一個(gè)菌落，D正確。二、非選擇題8．在探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量變化的實(shí)驗(yàn)中,需利用計(jì)數(shù)板對微生物細(xì)胞進(jìn)行直接計(jì)數(shù).計(jì)數(shù)板是一個(gè)特制的可在顯微鏡下觀察的玻片，樣品就滴在計(jì)數(shù)室內(nèi)。計(jì)數(shù)室由25×16＝400個(gè)小室組成，容納液體總體積為0。1mm3。某同學(xué)操作時(shí)將1mL酵母菌樣品加99mL無菌水稀釋,用無菌吸管吸取少許使其自行滲入計(jì)數(shù)室，蓋上蓋玻片并用濾紙吸去多余菌液,進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。(1）在實(shí)驗(yàn)中，某同學(xué)的部分實(shí)驗(yàn)操作過程是這樣的:①從靜置試管中吸取酵母菌培養(yǎng)液加入計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并記錄數(shù)據(jù)；②把酵母菌培養(yǎng)液放置在冰箱中;③第七天再取樣計(jì)數(shù)，記錄數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)分析繪成曲線.請糾正該同學(xué)實(shí)驗(yàn)操作中的3處錯(cuò)誤：①應(yīng)將試管輕輕振蕩幾次再吸取酵母菌培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù);②應(yīng)將酵母菌培養(yǎng)液放置在適宜溫度下培養(yǎng);③應(yīng)連續(xù)七天，每天觀察、取樣計(jì)數(shù)并記錄數(shù)據(jù)。(2）在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)該對計(jì)數(shù)板、吸管等器具進(jìn)行滅菌處理.(3)如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)采取的措施是適當(dāng)稀釋。(4)如果觀察到如圖所示a、b、c、d、e5個(gè)大格共80個(gè)小室內(nèi)共有酵母菌48個(gè),則上述1mL酵母菌樣品中約有酵母菌2。4×108個(gè);要獲得較為準(zhǔn)確的數(shù)值，減少誤差,你認(rèn)為該怎么做？多次計(jì)數(shù)，求平均值。解析：(1)在從試管中吸取酵母菌之前，應(yīng)將試管輕輕振蕩幾次,目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中均勻分布。酵母菌的培養(yǎng)液應(yīng)置于適宜條件下，并且每隔24小時(shí)就要統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目。(2）為了避免雜菌污染，實(shí)驗(yàn)中所用吸管、計(jì)數(shù)板等器具需進(jìn)行滅菌處理.(3)（4)解答時(shí)要注意以下兩點(diǎn)：①統(tǒng)一單位；②注意體積的變化。400個(gè)小室共容納液體總體積為0。1mm3，則80個(gè)小格容納體積為：2×10－2mm3，含酵母菌48個(gè),又因酵母菌培養(yǎng)液總體積為100mL,統(tǒng)一單位后即可求出酵母菌個(gè)數(shù)。9．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多,同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌）.培養(yǎng)基成分如下表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如下圖所示。請分析回答問題。（1)此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)？不能，缺少植物激素（或缺少植物需要的各種營養(yǎng))。(2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選目的菌，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基.（3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的尿素和葡萄糖,實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因是為目的菌提供氧氣.（4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí),常采用稀釋涂布平板法(平板劃線法）(方法）接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。（5)下列材料或用具中：①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管；③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。需要滅菌的是①②；需要消毒的是③.(填序號)(6）