腸屏障功能受損與益生菌的研究進(jìn)展

腸屏障功能受損與益生菌的研究進(jìn)展

0腸屏障功能障礙腸道粘膜屏障是腸道最重要的屏障。它由完整的腸上皮細(xì)胞（iec）組成，并通過相鄰的iec之間的連接組成，以控制水和銅的過渡運(yùn)行。人體腸道中有500-1000多種不同的微生物，尤其是腸內(nèi)的細(xì)菌數(shù)量達(dá)到1-1012g糞便，面臨著最大的細(xì)菌負(fù)荷。臨床上，腸屏障功能障礙在器官功能障礙的病理過程中起著“火花”和“燃料”的作用。在身體接受“第一次攻擊”后，首先天性免疫系統(tǒng)激活，顆粒細(xì)胞釋放，休克和腸粘膜損傷。不必要的液體回流會(huì)導(dǎo)致出血、再注射損傷和全身炎癥反應(yīng)綜合征（ius）。與此同時(shí)，腸粘膜透水性增加導(dǎo)致腸道菌群的位置，即“第三次攻擊”，最終形成腸屏障綜合征。事實(shí)證明，腸屏障功能的研究和早期評估具有十分重要的意義。1乳酸桿菌對梗阻性肝屏障功能障礙腸上皮作為乳酸桿菌最重要和最直接的靶細(xì)胞,可通過多種機(jī)制引起黏液素分泌、加強(qiáng)TJ功能、上調(diào)細(xì)胞保護(hù)性熱休克蛋白和防止IEC凋亡等.乳酸菌黏附于腸上皮樣細(xì)胞,可改善TJ的結(jié)構(gòu)變化和相關(guān)蛋白的表達(dá)分布,對致病性大腸桿菌引起的腸屏障損傷具有保護(hù)作用.研究表明,益生菌不僅能刺激腸道內(nèi)有益菌的生長,且還能經(jīng)多種途徑抑制致病菌的生長、黏附和侵襲,使失調(diào)的菌群正常化;同時(shí),還能增強(qiáng)IEC間的緊密連接,降低腸道通透性,抑制IEC凋亡,改善腸道物理屏障功能.研究發(fā)現(xiàn),益生菌能抑制NF-κB的活化,減少上皮組織內(nèi)T淋巴細(xì)胞的數(shù)量,通過Toll樣受體(Toll-likereceptor,TLR)信號途徑及過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisomeproliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γ)調(diào)節(jié)抗炎作用,上調(diào)抗炎細(xì)胞因子(如IL-21、TGF2β)等的表達(dá),下調(diào)促炎細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β、INF-γ等的表達(dá).乳酸桿菌對梗阻性黃疸所致的肝屏障功能障礙也具有一定的保護(hù)作用,對大鼠膽總管結(jié)扎后所致黃疸具有明顯的緩解作用,不但能減輕其外周血的膽紅素水平,誘導(dǎo)葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶(uridinediphosphateglucuronosyltransferase-1A1,UGT-1A1)合成,而且對肝臟及小腸的通透性和緊密連接具有保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能與IEC內(nèi)蛋白激酶c(proteinkinaseC,PKC)被激活有關(guān).植物乳桿菌下調(diào)黏附分子(mucosaladdressincelladhesionmolecule,MAdCAM-1)和細(xì)胞間黏附分子-1(intercellularadhesionmolecule-1,ICAM-1)在IL-10基因敲除所致的潰瘍性結(jié)腸炎小鼠中的高表達(dá),并降低其腸道炎癥病理學(xué)評分及炎癥因子TNF-α和INF-γ的分泌.近幾年關(guān)于乳酸桿菌黏附機(jī)制的研究認(rèn)為,乳酸桿菌表面蛋白(surfacelayerprotein,SLP)對人類IEC的黏附進(jìn)而發(fā)揮其保護(hù)性生物學(xué)功能起著關(guān)鍵性的作用.SLP不但可以介導(dǎo)細(xì)菌對靶細(xì)胞的黏附,激發(fā)細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,還可通過競爭抑制等機(jī)制阻斷具有相似受體結(jié)構(gòu)的細(xì)菌的黏附活性.目前乳酸桿菌SLP研究多集中在對相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)直接進(jìn)行研究,其片段較大,結(jié)構(gòu)域不清,作用機(jī)制尚不明了,故其抗病能力仍然較弱.我們的前期研究通過提取、純化及鑒定得到的乳酸桿菌表層黏附蛋白IMP2(序列455-755aa),后者黏附于Caco-2細(xì)胞后,可以改善TJ相關(guān)蛋白的表達(dá)和F-actin形態(tài),同時(shí)抑制了致病性大腸桿菌(enteropathogenicE.coli,EPEC)引起的腸上皮的通透性增加,其中ERK/MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑起到了至關(guān)重要的作用.隨后,通過構(gòu)建突變蛋白得到具有黏附活性的微小片段(microintegralmembraneprotein,MIMP),共包含61個(gè)氨基酸,相對分子質(zhì)量為6950Da,分子式為C315H502N86O87S2,其酸性氨基酸數(shù)量較多,為13.1%,等電點(diǎn)9.90.進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),MIMP受體與位于IEC上的凝集素受體相一致.且MIMP能刺激抗炎因子IL-10,IL-6增加,促炎因子IL-12p70減少,并促進(jìn)T淋巴細(xì)胞分化為更多的輔助性T細(xì)胞1(Thelper1,Th1)細(xì)胞.國內(nèi)外對尋找具有較高效價(jià)和特異性的SLP結(jié)構(gòu)域的片段備受重視.深入開展此方面的分子生物學(xué)研究,可望獲得若干新的發(fā)現(xiàn),有利于從分子水平尋求乳酸桿菌對腸屏障功能障礙防治的新思路和新方法.2體外膜調(diào)節(jié)作用機(jī)制—TJ對維持腸道屏障功能具有重要作用TJ普遍存在于IEC靠近管腔端的相鄰細(xì)胞膜間,是IEC連接的主要形式,其對胃腸道多種病原體均具有選擇性屏障功能.體外研究發(fā)現(xiàn),EPEC能破壞細(xì)胞間TJ,從而損傷IEC的屏障功能,引起炎癥介質(zhì)如TNF-α,INF-γ等的分泌增加.IL-10基因敲除小鼠可導(dǎo)致腸道TJ結(jié)構(gòu)破壞,IEC通透性增加,從而引起腸屏障破壞.TJ本身的信號調(diào)控及信號通路較為復(fù)雜,包括經(jīng)典的PKC,細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellularsignal-regulatedkinase,EK),AHC途徑及特殊的緊密連接蛋白(ZO-1)相關(guān)核酸連接蛋白(ZO1-associatednucleicacidbindingprotein,ZONAB),泛核蛋白NaCo,細(xì)胞周期蛋白,Ras,磷酸化和甲基化調(diào)控途徑等,其中以PKC的可逆性磷酸化調(diào)控為主.近年來研究表明,TJ相關(guān)蛋白的磷酸化對IEC屏障的功能有重要的影響.正常情況下,封閉蛋白o(hù)ccludin的絲氨酸和蘇氨酸位點(diǎn)高度磷酸化,而其酪氨酸位點(diǎn)并未出現(xiàn)明顯的磷酸化,但其磷酸化失活后則會(huì)引起腸道屏障功能的損傷,IEC通透性增加和凋亡加重.另有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),各種致病因子引起PKC激酶或ERK等信號分子激活后,引起骨架蛋白F-actin的收縮,導(dǎo)致occludin磷酸化失活,ZO-1與TJ的相互作用減弱,TJ受損,腸道屏障功能破壞.但對occludin磷酸化位點(diǎn)的報(bào)道并不一致,可能位于人的Tyr-398和Tyr-402蛋白位點(diǎn),也有報(bào)道位于Tyr-403和Tyr-404位點(diǎn).另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),Tyr-402,Tyr-400以及Ser-408也參與TJ的磷酸化調(diào)節(jié),其調(diào)節(jié)可能與磷酸化激酶CK1和CK2有關(guān).occludin磷酸化調(diào)節(jié)與蛋白激酶PKC-η有關(guān),PKC-η能促進(jìn)TJ相關(guān)蛋白o(hù)ccludin的合成,及與ZO-1,ZO-2和ZO-3的相互作用,引起細(xì)胞骨架蛋白,如扣帶蛋白cingulin,Par-3和Par-6的收縮.Claudin轉(zhuǎn)錄后修飾主要包括磷酸化,甲基化,乙?；?十六烷?；?Claudin經(jīng)調(diào)控后形成離子通道,從而調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外的離子平衡.Claudin第一個(gè)外環(huán)與其所帶電荷的多少有關(guān),Claudin-3和Claudin-4的第二個(gè)環(huán)與其TJ的形成和維持有關(guān).而Claudin-1的第一個(gè)外環(huán)的后段即Claudin-153-80對TJ的調(diào)節(jié)起著重要的作用,體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明其能夠降低腸道上皮細(xì)胞的通透性,從而發(fā)揮其細(xì)胞保護(hù)作用.氧化應(yīng)激等有害刺激可刺激ZO-1發(fā)生磷酸化,導(dǎo)致腸道上皮細(xì)胞的電阻降低以及occludin-ZO-1和鈣黏附素/連環(huán)素(E-cadherin-beta-catenin)復(fù)合物的重新分布,進(jìn)一步影響腸上皮細(xì)胞TJ的正常結(jié)構(gòu),而加用ZO-1磷酸化阻滯劑后對防治TJ損傷具有重要的作用.但TJ相關(guān)蛋白在維持IEC屏障功能中相關(guān)緊密連接基因表達(dá)及信號調(diào)控的相關(guān)研究仍有待深入.3逆性磷酸化抑制劑的作用機(jī)制研究表明,PP2A對小鼠IEC的生長具有抑制作用,其機(jī)制可能與PKC調(diào)節(jié)真核起始因子4E(eukaryoticinitiationfactor4E,eIF-4E)結(jié)合蛋白1(4Ebindingprotein1,4E-BP1)的去磷酸化有關(guān),PKC可以誘導(dǎo)PP2A成倍增加,從而抑制PKC對4E-BP1的磷酸化作用,并降低細(xì)胞周期素D1的表達(dá),參與對促分裂原活化的蛋白激酶/胞外信號調(diào)節(jié)激酶(MAPK/ERKkinase,MEK)信號通路的調(diào)節(jié),阻斷由死亡受體誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑,并使Bid蛋白(Bcl-家族中促凋亡類的蛋白)活化從而促進(jìn)IEC凋亡增加.氧化應(yīng)激可以增強(qiáng)PP2A與Caco-2細(xì)胞的相互作用,而加用PP2A抑制劑可明顯緩解氧化應(yīng)激對Caco-2細(xì)胞腸屏障功能的損傷,包括增加IEC電阻值,降低其通透性,誘導(dǎo)ZO-1的表達(dá)和重新分布等.PP2A與occludin的作用位點(diǎn)主要集中在其C末端的蛋白片段,此片段受Src信號分子調(diào)控,發(fā)生酪氨酸磷酸化后其作用大增.此外,PP2A可以調(diào)節(jié)IEC胞質(zhì)內(nèi)Akt的活性,使Akt的兩個(gè)活性位點(diǎn)Ser308和Ser473去磷酸化而抑制其活性,從而使RasPI3K-Akt抗凋亡途徑受阻.實(shí)驗(yàn)表明,過氧亞硝酸鹽(peroxynitrite,PN)能激活I(lǐng)EC內(nèi)p38進(jìn)而使PP2A活化,后者再抑制Akt的活性,誘導(dǎo)IEC損傷凋亡.PP2A在調(diào)控IEC胞內(nèi)STAT3的磷酸化、其亞細(xì)胞分布以及其與DNA的結(jié)合中也具有重要作用.PP2A抑制劑能誘導(dǎo)STAT3上絲氨酸、蘇氨酸的磷酸化,與絲氨酸/蘇氨酸激酶共同作用從而保持STAT3的磷酸化水平動(dòng)態(tài)平衡,對修復(fù)腸黏膜具有至關(guān)重要的作用.此外,STAT5b缺失或失活的IEC能夠上調(diào)TLR2而活化NF-κB,導(dǎo)致IEC損傷凋亡增加、腸黏膜免疫炎癥反應(yīng)加重.且在T84腸上皮細(xì)胞系中STAT5b的活化能抑制TNF-α介導(dǎo)的胱冬肽酶-3(caspase-3)和NF-κB的活化,從而抑制IEC凋亡.PP2A是Wnt信號傳導(dǎo)系統(tǒng)中主要的負(fù)性調(diào)節(jié)蛋白,可以通過對Wnt信號通路的調(diào)節(jié)影響IEC的增殖與分化.PP2A活性增加可使內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶(endothelialnitricoxidesynthase,eNOS)上的Ser1177脫磷酸化,抑制其活性,從而使NO合成減少,從而調(diào)節(jié)IEC的凋亡.PP2A通過調(diào)控細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(cyclin-dependentkinase,Cdk1)和細(xì)胞分裂周期蛋白(celldivisioncycleprotein25C,Cdc25C)而控制細(xì)胞的有絲分裂,細(xì)胞內(nèi)PP2AB56δ能抑制Cdc25C的活化,阻礙細(xì)胞的正常分裂,促進(jìn)IEC凋亡.當(dāng)IEC胞質(zhì)內(nèi)Ca2+快速增多時(shí)能活化PP2A并使PP2A/C和PP2A/A表達(dá)增多,而PP2A的激活又能抑制NF-κB的活性調(diào)節(jié)IEC的凋亡進(jìn)程,對維持腸黏膜中IEC凋亡與再生的平衡具有重要作用.PP2A與14-3-3蛋白競爭性結(jié)合組蛋白脫乙?；?histonedeacetylases,HDAC)氨基末端具有保守的14-3-3蛋白結(jié)合序列,可其絲氨酸位點(diǎn)去磷酸化,從而抑制PP2A對該位點(diǎn)的去磷酸化作用,使HDACs在細(xì)胞質(zhì)中聚集,降低目的基因的表達(dá),影響IEC的生長增殖與凋亡.此外,PP2A為Ras信號途徑的正調(diào)節(jié)因子,可使Raf-1的Ser259去磷酸化,其PR55能作用于Raf-1的Ser259位點(diǎn),再通過PP2Ac使該位點(diǎn)去磷酸化而消除該位點(diǎn)的自抑制作用,對Raf-1及其下游的ERK起正性調(diào)節(jié)作用,促進(jìn)IEC損傷后的修復(fù).總之,PP2A可逆性磷酸化與IEC凋亡和再生,以及正常腸道屏障功能的維持有著密切的關(guān)系,可作為IEC損傷防護(hù)的一個(gè)重要靶分子.PP2A抑制劑能保護(hù)IEC的正常功能,對腸道屏障功能的防治有著重要的意義.4安全性評價(jià)的意義堿性磷酸酶分布于人體的各個(gè)器官,腸道特異性IAP是傳統(tǒng)腸道成熟標(biāo)志物,但其在腸道生理功能目前尚不清楚.該蛋白定位于小腸上皮絨毛刷狀緣,以表面活性劑樣顆粒的形式分泌入腸腔,受腸道正常菌群內(nèi)毒素的調(diào)控.人體發(fā)育后期腸道菌群建立時(shí),IAP活性急劇增加,可能與腸道的消化和吸收功能有關(guān),對維持正常的腸屏障功能具有重要的意義.雖然IAP缺陷小鼠沒有明顯的消化功能障礙,僅出現(xiàn)因腸壁脂肪滴運(yùn)輸速度加快而導(dǎo)致食欲增加出現(xiàn)肥胖,但I(xiàn)AP對于減輕腸道炎癥反應(yīng),維持正常腸道功能有重要作用.炎癥性腸病患者可出現(xiàn)腸上皮IAPmRNA表達(dá)減少,而口服IAP的大鼠顯著降低了腸道炎癥水平.實(shí)驗(yàn)證明,IAP缺乏的(突變型)斑馬魚對LPS的敏感性增加,通過MyD88的和腫瘤壞死因子受體(tumornecrosisfactorreceptor,TNFR)引起腸道中性粒細(xì)胞聚集及相應(yīng)的炎癥.而在無菌條件下突變型斑馬魚腸道內(nèi)中性粒細(xì)胞則呈缺乏狀態(tài).因此,IAP對于防止炎癥反應(yīng),維持腸道正常菌群及腸道正常的屏障功能起著至關(guān)重要的作用.由于IAP位于刷狀緣,能夠?qū)?nèi)毒素進(jìn)行修飾和滅活,防止細(xì)菌入侵腸道上皮屏障,而當(dāng)LPS及大量炎癥因過度聚積超過一定的閾值濃度則會(huì)抑制IAP的產(chǎn)生,從而導(dǎo)致更加嚴(yán)重的炎癥和抗炎反應(yīng)綜合征.研究表明,腸道pH對于活性有重要的作用,HCO3-可以增加IAP對內(nèi)源性磷酸化合物的水解活性,活化ATP后通過P2受體可進(jìn)一步增加HCO3-的分泌.饑餓和疾病狀態(tài)能夠引起腸道屏障功能損害,而正常的腸內(nèi)營養(yǎng)對維持IAP功能有重要作用,饑餓狀態(tài)下IAP的表達(dá)可能被沉默,是導(dǎo)致危重患者腸道黏膜屏障功能障礙重要原因.體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均表明,加用IAP能夠抑制NF-κB的活性,從而解除LPS對IEC的毒性,抑制致病菌對IEC的侵襲和移位,維持正常的腸屏障功能,而IAP敲除小鼠則對LPS的毒性較為敏感,服用外源性IAP后LPS的毒性則明顯緩解.病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)IAP敲除小鼠經(jīng)糖酐酯鈉處理后,腸道組織明顯受到慢性炎癥侵害,而其飲用水中加用外源性IAP后腸道炎癥得到明顯緩解,并緩解炎癥因子及髓過氧化物酶的水平.應(yīng)激狀態(tài)如氧化應(yīng)激,毒素等能刺激Caco-2,HT29和IEC18xc細(xì)胞IAP的分泌并增強(qiáng)其活性,其機(jī)制與MAPK,NF-κB,calcium,以及環(huán)磷酸腺苷(cyclicadenosinemonophosphate,cAMP)信號通路無關(guān),其作用可被放線菌素D(actinomycinD,AMD)增強(qiáng).因此,IAP對維持正常腸道屏障功能有重要的作用,對腸屏障功能障礙的防治具有潛在的意義.5其他細(xì)胞因子近年來,腸免疫屏障的研究也取得了一定進(jìn)展.IEL是位于腸道黏膜上皮組織細(xì)胞間或上皮細(xì)胞與基底膜相接處的一群異質(zhì)性淋巴細(xì)胞,在腸免疫屏障中起著重要的作用,主要見于小腸黏膜絨毛基底部上皮細(xì)胞之間,表達(dá)γ-δ異二聚體,包括γ-δT淋巴細(xì)胞受體,而缺乏CD4+和CD8+標(biāo)志.Hayday等將腸道IEL分為兩種細(xì)胞類型.A型細(xì)胞發(fā)育和抗原識別等特點(diǎn)與外周淋巴樣組織中的T淋巴細(xì)胞類似,包括CD8-α-βTCR-α-βIEL;B型淋巴細(xì)胞在發(fā)育場所、細(xì)胞表型、抗原識別和生物學(xué)功能等方面均有別于普通的外周T淋巴細(xì)胞,主要包括CD8-α-αTCR-α-βIEL和TCR-γ-δIEL,這群細(xì)胞在機(jī)體其他部位極其少見.小鼠外周循環(huán)中TCR-γ-δIEL只占T淋巴細(xì)胞總數(shù)的1%-5%,而在腸道,TCR-γ-δIEL可高達(dá)30%-40%.IEL具有重要的免疫監(jiān)視和防御功能,不但能夠輔助B淋巴細(xì)胞的體液免疫功能,而且在受到體內(nèi)外刺激時(shí)能分泌多種細(xì)胞因子,如IL-2、IL-4、IL-3、IL-5、IL-6、IL-10、INF-γ,TNF-α、TGF-β等.此外,IEL還有不同的細(xì)胞毒作用,包括異常反應(yīng)和病毒特異性的細(xì)胞毒作用,NK細(xì)胞活性以及自發(fā)的細(xì)胞毒作用,對于維持腸道正常的屏障功能具有重要的作用.γ-δIEL可產(chǎn)生IL-5,INF-γ,TNF-α,TGF-β等細(xì)胞因子,具有溶細(xì)胞活性,而Fas和穿孔素則可介導(dǎo)α-βIEL和α-αIEL的細(xì)胞毒作用.研究發(fā)現(xiàn),IEL可以表達(dá)緊密連接蛋白分子ZO-1,occludin,以及縫隙連接分子connexin26,表達(dá)CD3抗體可以刺激occludin的合成,有助于保護(hù)腸屏障功能.CD4-Cre重組酶能夠調(diào)節(jié)c-Myc的失活,減少小腸上皮CD8-α-βTCR-α-β的IEL細(xì)胞的成熟,其胸腺中的前體中存在CD8-α-βTCR-α-β的IEL細(xì)胞,但并不能發(fā)揮其可遺傳的免疫活性,其增殖能力下降,凋亡率增加,其機(jī)制可能與IL-15受體亞單位降低和抗凋亡蛋白Bcl-2的減少有關(guān),因?yàn)閷CL-2基因轉(zhuǎn)導(dǎo)入c-Myc缺陷細(xì)胞中,CD8-α-βTCR-α-β的IEL數(shù)量增加.IEL與IEC關(guān)系密切,對腸上皮屏障功能具有重要的調(diào)節(jié)作用,T淋巴細(xì)胞受體γ-δ亞型的IEL能夠保護(hù)腸屏障的抗損傷能力,TCR-α-βCD8-α-βIEL細(xì)胞活化后能分泌IFN-γ能損傷腸上皮屏障功能,包括降低電阻值,增加對大分子物質(zhì)甘露醇的通透性,而其作用對IFN-γ敲除小鼠則不明顯.研究表明,IL-15能夠通過信號通路IL-15Rβ,Jak3和STAT5的可逆性磷酸化調(diào)節(jié)抗凋亡因子Bcl-2和Bcl-x的作用,而與PI3K、ERK和STAT3無關(guān),從而調(diào)節(jié)腸道的炎癥反應(yīng)及屏障功能.因此,IEL對維持正常的腸道屏障功能,及保護(hù)IEC不受損傷均具有重要的作用,IEL及相關(guān)細(xì)胞因子也可能作用腸道屏障功能障礙治療的方向之一.6小鼠腸道屏障并發(fā)癥的治療ISC是位于腸黏膜隱窩內(nèi)的具有自我更新和增殖分化為成熟IEC功能的細(xì)胞.ISC存在于小腸上皮基質(zhì)中,能夠分化成各種不同細(xì)胞類型,在遇到外界有害刺激可能發(fā)生凋亡,而其子代細(xì)胞很難再發(fā)揮其多源性分化潛能.ISC是一種多能干細(xì)胞,一個(gè)隱窩內(nèi)各種表型已分化細(xì)胞的數(shù)量及比例是恒定的,其作為治療腸屏障功能障礙的新方法已經(jīng)有了初步的研究.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明,小腸造血ISC移植能夠減少病理性T淋巴細(xì)胞的數(shù)量,通過與IEC相互作用,保護(hù)腸屏障功能.且小腸ISC能夠下調(diào)博來霉素誘發(fā)的小鼠腸道和肝臟炎癥反應(yīng)及纖維化反應(yīng),并能抑制自身免疫性T淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生,而對小鼠腎臟則無明顯作用.臨床病例報(bào)告及相關(guān)臨床試驗(yàn)表明,腸道屏障功能障礙的患者如炎癥性腸病的患者在接受小腸ISC移植后腸道感染得到一定的控制,但也有少數(shù)患者在接受移植后發(fā)生較為嚴(yán)重的腸道感染,而出現(xiàn)這種不良反應(yīng)的患者可能與其腸道的手術(shù)史有關(guān).Ⅰ期臨床試驗(yàn)證明,輸注外源性小腸ISC無明顯不良反應(yīng)出現(xiàn),其在血液中存在的時(shí)間<1h,并能通過旁分泌刺激生長因子的產(chǎn)生,并能抑制自身免疫反應(yīng),對改善腸道與肝臟功能具有一定的幫助.研究表明,ISC的分化成熟與Snai1基因的表達(dá),定位以及Wnt信號通路的調(diào)控有關(guān),其可以調(diào)節(jié)成纖維細(xì)胞生長因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF),TGF-β,TNF-α,以及肝細(xì)胞生長因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)的合成與分泌,以及參與p53,c-fos,c-jun,p38和wtp53等的表達(dá)與調(diào)控,從參與對IEC損傷的修復(fù).通過干細(xì)胞技術(shù)和組織工程技術(shù)定向誘導(dǎo)ISC使其分化為特定的細(xì)胞或組織替代功能障礙的細(xì)胞或組織缺損,或通過ISC直接直接促進(jìn)傷口局部細(xì)胞創(chuàng)傷修復(fù)能力是ISC對IEC損傷修復(fù)的重要途徑.通過干細(xì)胞技術(shù)和組織工程定向誘導(dǎo)腸道干細(xì)胞使其分化成為特定的細(xì)胞以替代功能障礙的細(xì)胞或組織缺損,可能成為治療腸屏障功能障礙的有效方法.總之,小腸干細(xì)胞對腸道屏障功能障礙的防治有一定的作用,但目前相關(guān)研究仍處于起步階段,其作用及機(jī)制仍需要進(jìn)一步深入研究.7主要細(xì)胞的功能變化腸道屏障功能受損與臨床多種疾病有密切的關(guān)系,其發(fā)生、發(fā)展及調(diào)控機(jī)制較為復(fù)雜,各種信號分子之間存在著復(fù)雜的作用關(guān)系.目前腸屏障功能的相關(guān)研究從腸腔內(nèi)微生態(tài)的改變和致病菌的調(diào)控研究逐漸過渡到腸上皮自身實(shí)體功能的研究.相信隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,腸屏障功