鋅指蛋白ZBTB45基因敲除小鼠模型的建立及其表型分析的開題報告

鋅指蛋白ZBTB45基因敲除小鼠模型的建立及其表型分析的開題報告論文題目：鋅指蛋白ZBTB45基因敲除小鼠模型的建立及其表型分析一、研究背景和意義鋅指蛋白家族成員是一類廣泛存在于細胞中的重要轉錄因子，其作用于基因的調控和表達。在這個家族中，ZBTB45作為一種C2H2型鋅指蛋白，參與了多個生物學過程，例如細胞增殖、分化、凋亡和腫瘤形成等。研究表明，ZBTB45在腫瘤生長中扮演了非常重要的角色，抑制細胞的增殖和促進凋亡，因此，對其研究有利于深入了解腫瘤的發(fā)生機理，并且可以為腫瘤治療提供一定的理論基礎。因此，本研究擬建立ZBTB45基因敲除小鼠模型，以深入了解其在腫瘤中的作用機理，并進一步分析其體內(nèi)表型變化，探尋其受體細胞分化、基因調控等方面的生物學意義。二、研究目的1、建立ZBTB45基因敲除小鼠模型；2、對敲除小鼠進行生物學鑒定，分析其表型變化；3、深入研究ZBTB45基因敲除對動物生長發(fā)育和腫瘤生長等的影響機制。三、研究方法1、基因敲除小鼠模型建立。采用CRISPR/Cas9技術生成ZBTB45敲除小鼠，并使用PCR、Westernblot、代表性克隆等方法鑒定小鼠模型；2、生物學鑒定和表型分析。對ZBTB45敲除小鼠及其野生型小鼠進行生長發(fā)育體重、組織學結構、生殖功能等方面的比較；3、基因表達分析。使用轉錄組測序技術，對野生型小鼠和ZBTB45基因敲除小鼠模型的基因表達進行比較，尋找差異基因和通路，并進一步分析其生物學意義。四、研究預期成果1、成功建立ZBTB45基因敲除小鼠模型；2、對敲除小鼠進行生物學鑒定，發(fā)現(xiàn)其體重、組織結構、生殖功能等表型變化；3、探究ZBTB45在發(fā)育成熟和腫瘤生長中的作用機理；4、通過基因表達分析，尋找ZBTB45相關的基因和通路，并進一步了解其在細胞分化、基因調控等方面的生物學意義。五、研究難點1、CRISPR/Cas9技術的選擇和應用；2、基因敲除小鼠模型的驗證和鑒定；3、組織和細胞水平的生物學數(shù)據(jù)收集與分析。六、研究進度安排1月-3月：文獻調研和實驗準備；4月-6月：ZBTB45基因敲除小鼠模型建立和鑒定；7月-9月：小鼠表型分析和生物學鑒定；10月-12月：基因表達分析和結果分析、撰寫論文。七、參考文獻1.ChenXJ,etal.ZBTB45repressestranscriptionofgenesassociatedwithcellularstressresponseandcellsurvival.FEBSJ.2019;286(23):4685-4702.2.LiC,etal.ZincfingerproteinZBTB45isanessentialtranscriptionalregulatorspecificallyrequiredforthelate-stagematurationofBcells.MolCellBiol.2019;39(19):e00086-19.3.LiS,etal.GenerationofknockoutmiceusingCRISPR/Cas9-mediatedgenetargeting.BiolProcedOnline.2016;18:17.4.YangH,etal.Transcriptomeanalysisidentifiesnovelgenesignaturesfamoufostatin-inducedcellcy