江西省上饒市玉山一中等六校2024屆高三第三次測評生物試卷含解析

江西省上饒市玉山一中等六校2024屆高三第三次測評生物試卷注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．人體內(nèi)存在由非糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖的糖異生途徑，據(jù)報道，科學(xué)家已發(fā)現(xiàn)了參與糖異生的一種關(guān)鍵性酶——PEPCKI，其作用過程如下圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）①細(xì)胞中PEPCKI濃度過低可能會導(dǎo)致糖尿病的發(fā)生②PEPCKI基因在細(xì)胞內(nèi)的活躍表達(dá)可能與胰高血糖素的作用有關(guān)③抑制PEPCKI乙?；癁橹委熀皖A(yù)防糖尿病提供可能④血糖濃度過高會抑制糖異生途徑的調(diào)節(jié)方式屬于負(fù)反饋調(diào)節(jié)A．①② B．②③ C．②④ D．③④2．下列關(guān)于細(xì)胞內(nèi)核酸的說法，正確的是（）A．真核細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA的合成都在細(xì)胞核內(nèi)完成B．mRNA和tRNA均為單鏈不含氫鍵C．DNA聚合酶可以與RNA結(jié)合并催化轉(zhuǎn)錄過程D．核酸的多樣性決定了蛋白質(zhì)的多樣性3．如下圖是果蠅染色體上的白眼基因示意圖，下列敘述正確的是（）A．S基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，包括編碼區(qū)和非編碼區(qū)B．白眼基因片段中，含有成百上千個核糖核苷酸C．基因片段中有5種堿基，8種核苷酸D．基因中有一個堿基對的替換就會引起生物性狀的改變4．神經(jīng)元的細(xì)胞膜上有鈉、鉀等離子的“離子通道”，在神經(jīng)沖動的傳導(dǎo)中“離子通道”是“局部電流”產(chǎn)生的重要結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。蝎毒的神經(jīng)毒素能夠?qū)⒃撏ǖ雷枞?，?dǎo)致中毒者興奮傳導(dǎo)和傳遞障礙而麻痹。下圖為突觸結(jié)構(gòu)的示意圖，蝎毒作用的部位應(yīng)該在A．a(chǎn)或b B．c或d C．a(chǎn)或d D．b或c5．哺乳動物胰島B細(xì)胞的代謝活動十分旺盛，下列細(xì)胞結(jié)構(gòu)與對應(yīng)功能表述有誤的是（）A．細(xì)胞核：中心法則中各環(huán)節(jié)發(fā)生的場所B．溶酶體：水解衰老細(xì)胞器和細(xì)胞碎片C．高爾基體：對胰島素前體進(jìn)行加工修飾D．線粒體：丙酮酸徹底氧化分解合成ATP6．如圖為一對近親結(jié)婚的青年夫婦的遺傳分析圖，其中白化病由基因a控制，色盲由基因b控制（不考慮基因突變）。下列有關(guān)敘述錯誤的是A．D細(xì)胞為次級精母細(xì)胞，其中含有兩個B基因B．F細(xì)胞和G細(xì)胞含有的相同致病基因可能來自于家族中的同一祖先C．E細(xì)胞和G細(xì)胞結(jié)合發(fā)育成的個體表現(xiàn)型為正常女性D．這對夫婦所生子女中，患一種病的概率為7/167．下列有關(guān)科學(xué)史中研究材料、方法及結(jié)論的敘述，錯誤的是（）A．孟德爾以豌豆為研究材料，采用雜交等方法，提出了基因的分離和自由組合定律B．摩爾根以果蠅為研究材料，統(tǒng)計分析后代眼色分離比，證明了基因位于染色體上C．赫爾希與蔡斯以噬菌體為研究材料，利用同位素示蹤技術(shù)，證明DNA是噬菌體的遺傳物質(zhì)D．建構(gòu)數(shù)學(xué)模型的方法，可以用于研究種群數(shù)量變化和酶活性變化的規(guī)律8．（10分）二倍體動物某個精原細(xì)胞形成精細(xì)胞過程中，依次形成四個不同時期的細(xì)胞，其染色體組數(shù)和同源染色體對數(shù)如圖所示：下列敘述正確的是A．甲形成乙過程中，DNA復(fù)制前需合成rRNA和蛋白質(zhì)B．乙形成丙過程中，同源染色體分離，著絲粒不分裂C．丙細(xì)胞中，性染色體只有一條X染色體或Y染色體D．丙形成丁過程中，同源染色體分離導(dǎo)致染色體組數(shù)減半二、非選擇題9．（10分）城市濕地公園具有調(diào)節(jié)氣候、凈化污水等功能。濕地公園內(nèi)由近水邊到陸地可分為光灘區(qū)、近水緩沖區(qū)、核心區(qū)等區(qū)域?；卮鹣铝袉栴}：（1）濕地公園中的某種植物由近水邊到陸地沿地表隨機分布，這_______(填屬于或不屬于)群落的水平結(jié)構(gòu)，理由是_______________________________________________。（2）區(qū)別兩個不同群落的重要依據(jù)是________________濕地受到輕度污染時，能夠保持相對穩(wěn)定狀態(tài)，這說明生態(tài)系統(tǒng)具有________________________________________________。（3）濕地中以草籽和食草昆蟲為食的某種鳥類屬于第______營養(yǎng)級，食草昆蟲同化的能量不能全部傳遞給下一營養(yǎng)級，原因是_________________。（4）在濕地群落發(fā)生的演替類型為______________________。10．（14分）某實驗基地水庫中放養(yǎng)了一批羅非魚?之后有人在該水庫中放生了一種大型肉食性魚，一段時間后，羅非魚種群數(shù)量達(dá)到了相對穩(wěn)定狀態(tài)?K0是沒釋放大型肉食性魚前的理想環(huán)境容納量?請回答下列問題：（1）水庫中的所有羅非魚形成一個_____________，其特征包括數(shù)量特征?____________等，調(diào)查羅非魚的數(shù)量可以采用___________________?（2）據(jù)圖判斷，羅非魚在a~c段大致呈___________型增長，大型肉食性魚最可能是_____________時間點放入水庫的，判斷依據(jù)是______________________________。（3）在捕食等壓力下，羅非魚種群的環(huán)境容納量更接近____________________________。11．（14分）基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。（1）將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機會發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時不用的細(xì)胞進(jìn)行__________保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細(xì)胞”或“生殖細(xì)胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。12．研究生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與功能的重要意義在于維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性、提高能量的利用率。某農(nóng)場在蘋果種植園中采取了一系列措施，以提高蘋果的產(chǎn)量?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問題：（1）蘋果樹整形可以提高蘋果產(chǎn)量，你認(rèn)為下列兩種樹形中產(chǎn)量較高的是________，從光合作用的角度分析，其原因是_____________________。從植物生命活動調(diào)節(jié)的角度看，這樣整形應(yīng)用的原理是_________________________________。（2）果農(nóng)通過長期探索發(fā)現(xiàn)，在樹檔之間種植薄荷、蒿子、大蒜等有特殊氣味的植物，可有效驅(qū)除果樹、田間的害蟲。從信息傳遞的角度看，利用薄荷、蒿子、大蒜等驅(qū)蟲借助的是________信息，其作用是________。從生物多樣性價值的角度來看，用薄荷、蒿子、大蒜等驅(qū)蟲是利用了其________________價值。（3）除上述實例外，列舉出利用信息傳遞提高蘋果產(chǎn)量的相關(guān)措施________________________________（至少說出2項）。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解題分析】

據(jù)圖分析：PEPCKI是參與糖異生的一種關(guān)鍵性酶，血糖濃度升高，可促進(jìn)PEPCKI乙?；?，從而加速PEPCKI的水解，使糖異生途徑受阻，從而減少血糖的來源。【題目詳解】①PEPCKI是參與糖異生的一種關(guān)鍵性酶，細(xì)胞中PEPCKI濃度過高會導(dǎo)致血糖濃度過高，可能會導(dǎo)致糖尿病發(fā)生，①錯誤；②胰高血糖素能使非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖，而PEPCKI能使糖異生為葡萄糖，所以PEPCKI基因在細(xì)胞內(nèi)的活躍表達(dá)可能與胰高血糖素的作用有關(guān)，②正確；③加快PEPCKI乙酰化可促進(jìn)PEPCKI的水解，使糖異生途徑受阻，可以為預(yù)防和治療糖尿病提供可能，③錯誤；④血糖濃度升高后通過促進(jìn)PEPCKI乙?；瘡亩种铺钱惿饔?，該過程屬于負(fù)反饋調(diào)節(jié)，④正確。綜上分析，C正確，ABD錯誤。故選C。2、D【解題分析】

1、核酸是遺傳信息的攜帶者，是一切生物的遺傳物質(zhì)，在生物體的遺傳、變異和蛋白質(zhì)的生物合成中具有重要作用；細(xì)胞中的核酸根據(jù)所含五碳糖的不同分為DNA（脫氧核糖核酸）和RNA（核糖核酸）兩種，構(gòu)成DNA與RNA的基本單位分別是脫氧核苷酸和核糖核苷酸，每個脫氧核苷酸分子是由一分子磷酸、一分子脫氧核糖和一分子含氮堿基形成，每個核糖核苷酸分子是由一分子磷酸、一分子核糖和一分子含氮堿基形成。2、構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性的直接原因與構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類、數(shù)目、排列順序和肽鏈盤曲折疊形成的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)千差萬別有關(guān)?！绢}目詳解】A、真核細(xì)胞的線粒體和葉綠體中都有環(huán)狀的DNA，都可以進(jìn)行復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，所以DNA和RNA的合成不一定都在細(xì)胞核里進(jìn)行，A錯誤；B、tRNA為三葉草形狀，部分區(qū)域堿基互補配對形成雙鏈結(jié)構(gòu)，含有氫鍵，B錯誤；C、DNA聚合酶與DNA結(jié)合并催化DNA的復(fù)制過程，RNA聚合酶與DNA結(jié)合并催化轉(zhuǎn)錄過程，C錯誤；D、蛋白質(zhì)是基因表達(dá)的結(jié)果，其多樣性取決于核酸的多樣性，D正確。故選D。3、A【解題分析】

基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA片段，含有成百上千個脫氧核苷酸，DNA分子是以4種脫氧核苷酸為單位連接而成的長鏈，這四種脫氧核苷酸分別含有A、T、C、G四種堿基。【題目詳解】A、基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA片段，包括編碼區(qū)和非編碼區(qū)，A正確；

B、基因中含有成百上千個脫氧核苷酸，B錯誤；

C、由于密碼子的簡并性等，基因中有一個堿基對的替換不一定會引起生物性狀的改變，C錯誤；

D、組成基因片段中的基本單位是脫氧核苷酸，有4種堿基，4種脫氧核苷酸，D錯誤。

故選A。【題目點撥】熟悉基因的本質(zhì)與結(jié)構(gòu)組成是分析判斷本題的關(guān)鍵。4、C【解題分析】

從圖中可知a為軸突、b為突觸小泡、c為突觸間隙、d為突觸后膜【題目詳解】從題干中又知蝎毒阻塞“離子通道”，所以可推知其作用于神經(jīng)元的細(xì)胞膜上，所以作用部位應(yīng)為a、d，故選C。5、A【解題分析】

1、動物細(xì)胞中，高爾基體對來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工、分類和包裝，發(fā)送蛋白質(zhì)；植物細(xì)胞中高爾基體與細(xì)胞壁的合成有關(guān)。

2、溶酶體內(nèi)含有多種水解酶；膜上有許多糖，防止本身的膜被水解，能分解衰老、損傷的細(xì)胞器，吞噬并殺死侵入細(xì)胞的病毒或病菌。

3、細(xì)胞核是遺傳信息庫，是細(xì)胞代謝和遺傳的控制中心?！绢}目詳解】A、哺乳動物胰島B細(xì)胞高度分化，細(xì)胞核不能進(jìn)行DNA的復(fù)制、翻譯，只能進(jìn)行DNA的轉(zhuǎn)錄，A錯誤；B、溶酶體中含有多種水解酶，能水解衰老細(xì)胞器和細(xì)胞碎片，B正確；C、高爾基體可對胰島素前體進(jìn)行加工修飾，使其成為成熟的蛋白質(zhì)，C正確；D、葡萄糖在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中分解為丙酮酸，丙酮酸進(jìn)入線粒體徹底氧化分解，釋放能量并合成ATP，D正確。故選A。6、D【解題分析】

根據(jù)兩對基因在染色體上的位置分析題圖，左圖表示精原細(xì)胞（AaXBY）形成精子的過程，右圖中表示卵原細(xì)胞（AaXBXb）形成卵細(xì)胞的過程。又因為圖中子代是白化病色盲，所以子代的基因型是aaXbY，則卵細(xì)胞F的基因型是aXb，進(jìn)一步判斷E的基因型(AXB)，進(jìn)一步可以得到G的基因型(aXb)，最后可以得到H的基因型(AXB)。【題目詳解】A、根據(jù)題意分析，已知左圖表示精原細(xì)胞（AaXBY）形成精子的過程，C細(xì)胞為初級精母細(xì)胞，D細(xì)胞為次級精母細(xì)胞,因為F細(xì)胞的基因型為（aY），故D細(xì)胞的基因型為(AXB)，其中含有兩個B基因是通過間期DNA復(fù)制而來，A正確；B、因為這對青年夫婦是近親結(jié)婚，F(xiàn)細(xì)胞和G細(xì)胞含有的相同致病基因可能來自于家族中的同一祖先，B正確；C、E細(xì)胞的基因型為(AXB)，G細(xì)胞的基因型為(aXb)，結(jié)合后的基因為（AaXBXb），表現(xiàn)型為正常女性，C正確；D、已知父本和母本的基因型分別是（AaXBY）和（AaXBXb），則后代患白化病的概率是1/4，患色盲的概率也是1/4，所以后代完全正常的概率是（1-1/4）×(1-1/4)=9/16，后代患一種病的概率為1/4+1/4-2×1/4×1/4=3/8，D錯誤。故選D。7、A【解題分析】

孟德爾以豌豆為實驗材料，應(yīng)用雜交、自交和測交的手段，通過假說演繹法提出了分離定律和自由組合定律。摩爾根證明基因在染色體上，是通過果蠅的雜交和測交實驗去驗證的，識記各生物實驗的實驗材料和實驗方法是本題的解題關(guān)鍵?！绢}目詳解】A、孟德爾提出分離定律和自由組合定律時還沒有對基因進(jìn)行了解，所以不能說基因的分離定律和自由組合定律，A錯誤；B、摩爾根通過白眼果蠅和紅眼果蠅的雜交，統(tǒng)計后代眼色的性別和性狀的比例，證明了基因在染色體上，B正確；C、赫爾希和蔡司提出DNA是遺傳物質(zhì)的實驗過程主要采用了T2噬菌體和大腸桿菌為實驗材料，利用同位素示蹤法將DNA和蛋白質(zhì)分開研究，從而得出了該結(jié)論，C正確；D、種群的數(shù)量變化和酶活性變化都采用了繪制曲線這一數(shù)學(xué)模型來表示，D正確；故選A。8、A【解題分析】

根據(jù)題圖分析可知，精原細(xì)胞形成精細(xì)胞的過程中，S期、減數(shù)第一次分裂的前、中、后期均滿足甲乙兩圖中表示的2組染色體組和2N對同源染色體對數(shù)；圖丙表示減數(shù)第二次分裂后期著絲粒斷裂后，同源染色體消失，染色體組數(shù)暫時加倍的細(xì)胞；圖丁則表示減數(shù)第二次分裂末期形成精細(xì)胞后，細(xì)胞中的染色體組數(shù)和同源染色體對數(shù)?！绢}目詳解】DNA復(fù)制前需要合成rRNA參與氨基酸的運輸，需要合成一些蛋白質(zhì)，如DNA復(fù)制需要的酶等，A選項正確；乙形成丙過程中，同源染色體消失則必然伴隨著絲粒的分裂，B選項錯誤；丙圖表示圖丙表示減數(shù)第二次分裂后期著絲粒斷裂后，同源染色體消失，染色體組數(shù)暫時加倍的細(xì)胞，則性染色體應(yīng)該是兩條X染色體或兩條Y染色體，C選項錯誤；丙形成丁的過程中，為減數(shù)第二次分裂，已經(jīng)不存在同源染色體，是由于細(xì)胞分裂成兩個而導(dǎo)致的染色體組數(shù)減半，D選項錯誤。二、非選擇題9、不屬于該現(xiàn)象描述的是種群的空間特征物種組成(物種豐富度)自我調(diào)節(jié)能力(或抵抗力穩(wěn)定性)二、三其同化量一部分通過呼吸作用消耗，一部分流向分解者次生演替【解題分析】

1、群落的結(jié)構(gòu)：垂直結(jié)構(gòu)：在垂直方向上，大多數(shù)群落具有明顯的分層現(xiàn)象；植物主要受陽光的影響，動物主要受食物和棲息空間的影響；水平結(jié)構(gòu)：由于地形的變化、土壤濕度和鹽堿的差異、光照強度的不同等因素，不同地段往往分布著不同的種群，同一地段上種群密度也有差異。2、群落的演替：隨著時間的推移，一個群落被另一個群落代替的過程。初生演替：是指一個從來沒有被植物覆蓋的地面，或者是原來存在過植被，但是被徹底消滅了的地方發(fā)生的演替；次生演替：原來有的植被雖然已經(jīng)不存在，但是原來有的土壤基本保留，甚至還保留有植物的種子和其他繁殖體的地方發(fā)生的演替?！绢}目詳解】（1）公園中的某種植物由近水邊到陸地沿地表隨機分布，體現(xiàn)的是種群的空間特征，而不是不同種群在水平方向上的分布。（2）區(qū)別不同群落的重要特征是群落的物種組成。受到輕度污染時，能夠保持相對穩(wěn)定狀態(tài)，這說明濕地生態(tài)系統(tǒng)具有自我調(diào)節(jié)能力或抵抗力穩(wěn)定性。（3）該種鳥類以草籽和食草昆蟲為食物，因此屬于第二、第三營養(yǎng)級。食草昆蟲的同化量一部分通過呼吸作用消耗，一部分流向分解者。（4）在原有植被雖已不存在，但原有土壤條件基本保留，甚至還保留了植物的種子或其他繁殖體的地方發(fā)生的演替稱為次生演替。【題目點撥】本題考查種群和群落的相關(guān)知識，意在考查考生理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；理論聯(lián)系實際，綜合運用所學(xué)知識解決自然界和社會生活中的一些生物學(xué)問題。10、種群空間特征標(biāo)志重捕法“J”cc時間點之后羅非魚種群的環(huán)境阻力增大，增長速率變慢使種群數(shù)量的最高點沒有達(dá)到K0K2【解題分析】

據(jù)圖分析，a~b種群數(shù)量呈“J”型增長：此時食物、空間充足，無天敵，生物無限增長；c-d種群數(shù)量增加緩慢；e以后種群數(shù)量處于相對穩(wěn)定狀態(tài)?！绢}目詳解】（1）所有羅非魚形成一個種群；種群的特征包括數(shù)量特征和空間特征；魚類活動能力強，活動范圍廣，所以采用標(biāo)志重捕法調(diào)查種群密度。（2）羅非魚在a~c段大致呈“J”型增長，c時間點之后羅非魚種群的環(huán)境阻力增大，增長速率變慢，使種群數(shù)量的最高點沒有達(dá)到K0，所以推測在c點放入了大型肉食性魚。（3）羅非魚種群數(shù)量在K2附近波動，所以推測羅非魚種群的環(huán)境容納量更接近K2?！绢}目點撥】本題考查種群數(shù)量的數(shù)量變化的相關(guān)知識，難點是（2）題需要考生分析曲線的斜率，從而得出增長速率降低的結(jié)論。11、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細(xì)胞【解題分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】（1）分析題圖可知，將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術(shù)鑒定同源