第八章酶工程

第八章-酶工程2023/12/28第八章酶工程酶工程概述酶的命名和分類酶的化學本質(zhì)、來源和生產(chǎn)酶催化反應(yīng)機理及反應(yīng)動力學酶的固定化和固定化酶反應(yīng)器酶工程的應(yīng)用酶工程的研究進展第八章酶工程一酶和酶工程的概述（一）、酶的概念（二）、對酶的認識和研究歷程（三）、酶工程的概念第八章酶工程（一）、酶的概念酶是生物催化劑，主要是蛋白質(zhì)，也有核酸，能在比較溫和的條件下高效率的起催化作用，使生物體內(nèi)的各種物質(zhì)處于不斷的新陳代謝中。生物體內(nèi)→新陳代謝→各種化學反應(yīng)→條件溫和（37℃，近中性），速度快，有條不紊。第八章酶工程（二）、對酶的認識和研究歷程人們對酶的認識起源于生產(chǎn)實踐，人類幾千年前，都開始制作發(fā)酵及食品。1833年，PagonPersoz從麥芽中得到一種能水解淀粉的物質(zhì)——淀粉酶。1878年，Kühne將這類生物催化劑統(tǒng)稱為“酶”（Enzyme）1887年，Buechner兄弟發(fā)現(xiàn)不含酵母細胞的酵母提取液也能使糖生成酒精，證實了發(fā)酵與細胞活力無關(guān)，并表明了酶能以溶解的、有活性的狀態(tài)從破碎的細胞中分離出來。1926年，Sumner從刀豆中提取脲酶，得到結(jié)晶，證明是蛋白質(zhì)。后來，先后獲得胃蛋白酶，胰蛋白酶的結(jié)晶1969年人工合成牛胰核糖核酸酶。1983年，發(fā)現(xiàn)核酸的催化功能——1989獲諾貝爾獎第八章酶工程（三）、酶工程的概念酶工程：工業(yè)上有目的地設(shè)計一定的反應(yīng)器和反應(yīng)條件，利用酶的催化功能，在常溫常壓下催化化學反應(yīng)，生產(chǎn)人類需要的產(chǎn)品或服務(wù)于其它目的的一門應(yīng)用技術(shù)。廣義地講還包括酶的生產(chǎn)、分離和純化。國際酶工程學會（1971年）定義：是研究和開發(fā)酶的生產(chǎn)、酶的分離純化、酶的固定化、酶及固定化酶的反應(yīng)器、酶與固定化酶的應(yīng)用等的工程科學。第八章酶工程按現(xiàn)代觀點，酶工程主要包括以下內(nèi)容酶的大量生產(chǎn)和分離純化及它們在細胞外的應(yīng)用新穎酶的發(fā)現(xiàn)、研究和應(yīng)用酶的固定化技術(shù)和固定化酶反應(yīng)器基因工程技術(shù)應(yīng)用于酶制劑的生產(chǎn)與遺傳修飾酶的研究酶分子改造與化學修飾以及酶結(jié)構(gòu)與功能之間關(guān)系的研究有機介質(zhì)中酶的反應(yīng)酶的抑制劑、激活劑的開發(fā)及應(yīng)用研究抗體酶、核酸酶的研究模擬酶、合成酶以及酶分子的人工設(shè)計、合成的研究第八章酶工程二酶的命名和分類（一）、習慣命名法（二）、國際系統(tǒng)分類法（三）、國際系統(tǒng)命名法（四）、同工酶（五）、酶的活力和活力單位第八章酶工程（一）、習慣命名慣用名常依據(jù)酶所作用的底物和反應(yīng)類型命名。原則：（1）根據(jù)作用底物：如淀粉酶、蔗糖酶、蛋白酶等。（2）根據(jù)反應(yīng)性質(zhì)：如水解酶、脫氫酶、轉(zhuǎn)氨酶等。（3）二者結(jié)合：如乳酸脫氫酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶等。（4）再加上酶的來源、特性：如木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、酸性磷酸酯酶、堿性磷酸酯酶等。第八章酶工程（二）、國際系統(tǒng)分類法根據(jù)反應(yīng)性質(zhì)分為六大類1、氧化還原酶類：催化氧化還原反應(yīng)，涉及H和電子的轉(zhuǎn)移。如脫氫酶類。2、轉(zhuǎn)移酶類：催化分子間功能基團的轉(zhuǎn)移。如轉(zhuǎn)氨酶類。第八章酶工程3．水解酶類：催化水解反應(yīng)。如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、蔗糖酶等。4．裂合酶類：催化非水解地除去底物分子中的基團及其逆反應(yīng)的酶。如醛縮酶脫氨酶脫羧酶第八章酶工程5．異構(gòu)酶類：催化同分異構(gòu)體的相互轉(zhuǎn)變。6、合成酶：與ATP分解相偶聯(lián)，并由二種物質(zhì)合成一種物質(zhì)。如天冬酰胺合成酶丙酮酸羧化酶第八章酶工程在每一大類酶中，又根據(jù)底物中被作用的基團或鍵的特點分為若干亞類，然后再把屬于某一亞類、亞亞類的酶按順序排好，這樣把已知的酶分門別類地排成一個表，叫做酶表。類亞類亞亞類序號第八章酶工程如EC1.1.1.27為乳酸：NAD+氧化還原酶EC1.1.1.37為蘋果酸：NAD+氧化還原酶EC1.1.1.1為乙醇：NAD+氧化還原酶第八章酶工程（三）、國際系統(tǒng)命名法要求確切表明底物的化學本質(zhì)及酶的催化性質(zhì)。原則如下：1酶的系統(tǒng)命名有兩部分構(gòu)成：底物名稱（底物1：底物2）＋反應(yīng)名稱如果底物2為水，可略去不寫醇脫氫酶為醇：NAD+氧化還原酶L—乳酸：NAD+氧化還原酶。第八章酶工程2不管酶的催化反應(yīng)是正反應(yīng)還是逆反應(yīng)，都用同一個名稱。當只有一個方向的反應(yīng)能夠被證實，或只有一個方向的反應(yīng)有生化重要性時，自然以此方向為命名。NAD+和NADH相互轉(zhuǎn)化的所有反應(yīng)中（DH2+NAD+D+NADH+H+）都命名為：DH2：：

NAD+氧化還原酶第八章酶工程同工酶，指能催化同一種化學反應(yīng)，但其酶蛋白本身的分子結(jié)構(gòu)組成卻有所不同的一組酶。它是研究細胞分化及形態(tài)遺傳的分子學基礎(chǔ)中的重要研究內(nèi)容。如超氧化物歧化酶（SOD）可以分為三大類，如CuZn-SOD,Mn-SOD和Fe-SOD另外，乳酸脫氫酶（LDH）也有5種同工酶，催化同一種反應(yīng)同工酶的命名，在系統(tǒng)或習慣命名中，都是一樣的。第八章酶工程（五）、酶的活力和活力單位酶的活力：指酶催化特定底物轉(zhuǎn)化成產(chǎn)物的速率。酶的活力常常是制訂酶制劑價格的最重要的參考指標影響酶的活力因素，包括環(huán)境條件、底物性質(zhì)、酶本身因素等因素酶活力單位：指單位時間、單位質(zhì)量酶蛋白所催化的底物反應(yīng)或產(chǎn)物生成的物質(zhì)的量（或質(zhì)量）單位質(zhì)量生物催化劑第八章酶工程三、酶化學本質(zhì)、來源和生產(chǎn)（一）酶的化學本質(zhì)（二）酶的來源和生產(chǎn)第八章酶工程（一）酶的化學本質(zhì)除了核酸酶之外，酶都是具有催化功能的蛋白質(zhì)。1蛋白質(zhì)的性質(zhì)第八章酶工程2、酶的化學組成1按組成成分（1）單純酶：其活性僅僅取決于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，如脲酶、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶及核糖核酸酶。（2）結(jié)合酶：只有結(jié)合非蛋白組分后（輔助因子）后才表現(xiàn)出活性全酶=酶蛋白＋輔助因子2、按酶分子大小（1）單體酶：一般有有1條多肽鏈組成，幾乎都是水解E，Mr=13000～35000，不含四級結(jié)構(gòu)，如溶解酶，胰蛋白酶等（2）寡聚酶：由幾個亞基通過非共價鍵結(jié)合，Mr=35000～數(shù)百萬，具有四級結(jié)構(gòu)，如磷酸化酶a和3-磷酸甘油醛脫氫酶（3）多酶復(fù)合體：由幾種酶嵌合而成的復(fù)合體，靠共價鍵連接Mr﹥幾百萬。（4）核酶少數(shù)RNA具有自我拼接加工的催化活性。第八章酶工程（二）酶的來源和生產(chǎn)1酶的來源1）直接從動植物獲得，即從生物體中分離和提純不足：生產(chǎn)周期長，來源有限，還要受一些自然條件的限制。2）化學合成方法不足：一般只適用于短肽的生產(chǎn)第八章酶工程3）工業(yè)微生物發(fā)酵，即通過液體深層發(fā)酵或固態(tài)發(fā)酵，是工業(yè)上酶的主要來源。其優(yōu)點如下：微生物種類繁多，制備出的酶種類齊全微生物繁殖快，生產(chǎn)周期長微生物具有較強的適應(yīng)性和應(yīng)變能力，可以通過適應(yīng)、誘導(dǎo)、誘變以及基因工程等方法培育出新的高產(chǎn)酶的菌株。第八章酶工程微生物細胞產(chǎn)生的酶分類結(jié)構(gòu)酶：在細胞的生長過程中出于其自身需要而表達，誘導(dǎo)酶：加入相應(yīng)的誘導(dǎo)劑后才會表達，誘導(dǎo)劑一般是該酶所催化反應(yīng)的底物或產(chǎn)物。一般而言，野生型微生物需要經(jīng)過遺傳改造后，才能變?yōu)楦弋a(chǎn)酶的菌株。其方法包括物理誘變育種化學誘變育種基因工程構(gòu)建第八章酶工程優(yōu)良菌種的條件繁殖快、產(chǎn)酶量高、酶的性質(zhì)符合使用要求，而且最好能產(chǎn)生分泌到胞外的酶，產(chǎn)生的酶容易分離純化菌種不易變異退化，產(chǎn)酶性能穩(wěn)定，不易受噬菌體的感染侵襲易于培養(yǎng)，能夠利用廉價的原料進行酶的生產(chǎn)，并且發(fā)酵周期短。菌種不是致病菌，在系統(tǒng)發(fā)育上與病原體無關(guān)，不產(chǎn)生有毒物質(zhì)和其他生理活性物質(zhì)不產(chǎn)或盡量少產(chǎn)蛋白酶第八章酶工程一些常用微生物及它們所產(chǎn)生的酶第八章酶工程2.酶的生產(chǎn)影響酶生產(chǎn)的主要因素1）培養(yǎng)基設(shè)計：設(shè)計好供微生物生長、繁殖、代謝和合成代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)物質(zhì)和原料。其中誘導(dǎo)酶的生產(chǎn)，需要加入誘導(dǎo)劑2）發(fā)酵方式的選擇：固體發(fā)酵：又稱為表面培養(yǎng)或曲式培養(yǎng)，以麩皮、米糠等為基本原料，加入適量的無機鹽和水作為培養(yǎng)基進行產(chǎn)酶微生物菌種培養(yǎng)的一種培養(yǎng)技術(shù)。特點：設(shè)備簡單、便于推廣，特別適合于霉菌，缺點:發(fā)酵條件不易控制，物料利用不完全，勞動強度大，容易染菌等。液體深層發(fā)酵：又稱浸沒式培養(yǎng)，利用液體培養(yǎng)基，在發(fā)酵罐內(nèi)進行的一種攪拌式通氣培養(yǎng)方式，發(fā)酵過程需要一定的設(shè)備和技術(shù)條件，動力消耗也較大，但是原料的利用率和酶的產(chǎn)量都較高。目前，工業(yè)上主要采用液體深層發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)酶，但是在酒曲培養(yǎng)、食品工業(yè)及一些用于飼料添加劑的酶生產(chǎn)中，仍在應(yīng)用固態(tài)發(fā)酵技術(shù)。第八章酶工程3）發(fā)酵條件控制營養(yǎng)條件環(huán)境條件，注意溶氧濃度、溫度、pH值特別注意剪氣力對蛋白質(zhì)的影響，因為在高剪切力下，蛋白質(zhì)容易失活。注意發(fā)酵的泡沫，因為蛋白質(zhì)是表面活性劑，大量的蛋白質(zhì)積累在發(fā)酵液中使得在鼓泡條件下很容易形成泡沫，影響發(fā)酵正常操作。因此應(yīng)該考慮除泡裝置，并添加消泡劑。第八章酶工程3.酶的分離和提純1）酶的用途及對酶純度的要求：科學研究——需要最高的純度，必要時需要結(jié)晶醫(yī)用——需要很高的純度，避免不良反應(yīng)食品工業(yè)——在安全性的基礎(chǔ)上，純度可低一些工業(yè)用——在達到一定酶活性的基礎(chǔ)上，對純度要求不高第八章酶工程2）酶的分離提純在酶生產(chǎn)中投入成本很大蛋白酶的濃度很低，而分離提純的費用往往隨著產(chǎn)物初始濃度的下降呈指數(shù)式上升。細胞破碎液或發(fā)酵液存在大量與目標酶蛋白性質(zhì)類似、分子量接近。酶對環(huán)境條件敏感，環(huán)境中的蛋白酶容易作用于目標酶，使其失活。第八章酶工程3）在實現(xiàn)目的的情況，可直接用整個細胞作為生物催化劑細胞內(nèi)目標酶的活性很高，可以滿足工業(yè)過程對酶活的要求胞內(nèi)酶的催化作用必須依賴于輔酶，可以利用細胞內(nèi)的輔酶再生系統(tǒng)所需要的生物轉(zhuǎn)化過程需要細胞內(nèi)幾種酶的共同參與第八章酶工程4）酶的分離提純的步驟在此過程中，保持酶的活性是最為關(guān)鍵的。因此，全部操作必須在低溫下進行，一般在0～5℃間，還要防止重金屬失活、防止－SH被氧化，不能過度攪拌等第八章酶工程細胞破碎的方法：動物細胞比較容易破碎，通過一般的研磨器、勻漿器、搗碎機等可達到目的細菌細胞壁較厚，破碎需要用超聲波、細菌磨、溶菌酶、某些化學溶劑（如甲苯、去氧膽酸納）或凍融等處理破碎后的分離方法：過濾、沉降等第八章酶工程酶的分離純化鹽析法：eg（NH4）SO4、Nacl，Na2SO4、使E↓析出之后需超鹽處有機溶劑沉淀法：用30～60%的乙醇、丙酮、異丙醇等，保持低溫-10～-15℃等電沉淀法：調(diào)節(jié)到PI使之絮聚、沉降。層析法：親和層析，離子交換層析，凝膠過濾曾析，吸附層析等酶的保存：低溫、干燥、避光、避氧。第八章酶工程四、酶催化反應(yīng)機理及反應(yīng)動力學（一）酶催化反應(yīng)的特點（二）酶催化反應(yīng)的機理（三）酶催化反應(yīng)的速率理論（四）酶促反應(yīng)動力學第八章酶工程（一）酶催化反應(yīng)的特點反應(yīng)條件溫和：常溫、常壓、接近中性的pH值催化效率高。以分子比表示，酶催化比非催化的反應(yīng)速度高108－1020倍，比其他催化反應(yīng)高107－1013。

舉例1：H2O2→H2O＋O2（ⅰ）Fe2+催化10-5mol/s（ⅱ）H2O2E催化105mol/sE的催化能力高1010倍

舉例2：已知催化反應(yīng)最快的是碳酸酐酶。CO2＋H2O→H2CO3每個E分子每秒可催化6×105個CO2分子與水堿H2CO3比非酶催化快107倍。第八章酶工程酶的作用專一性。通常把酶作用的物質(zhì)稱為該酶的底物（substrate)。一種酶只作用于一種或一類底物。反應(yīng)專一性（鍵專一性）：這些酶的專一性較低，能夠催化具有相同化學鍵或基團的底物進行某種類型的反應(yīng)。如酯酶底物專一性：只能催化特定底物發(fā)生特定的反應(yīng)。如脲酶只能催化尿素，而且只能是水解反應(yīng)立體化學專一性：表現(xiàn)為對底物的構(gòu)象有特殊的要求。如L－乳酸脫氫酶只能催化L-乳酸的氧化，而對D-乳酸則不起作用。第八章酶工程酶的催化活力與輔酶、輔基及金屬離子有關(guān)。輔助因子分為輔酶和輔基輔酶：與酶蛋白松弛結(jié)合，可以通過透析或其他方法將其從全酶中除去，如NADH，ATP及各種維生素輔基：以共價鍵和酶蛋白質(zhì)結(jié)合，不易透析除去，如Ca2+、Co2+、Zn2+、Mg2+等金屬離子第八章酶工程酶易失活。凡使蛋白質(zhì)變性的因素都能使酶破壞而完全失去活性酶活力的調(diào)節(jié)控制。在各種水平上進行，酶水平的調(diào)控方式包括：抑制調(diào)節(jié)、共價修飾調(diào)節(jié)、反饋調(diào)節(jié)、酶原激活及激素調(diào)控等。第八章酶工程（二）酶的催化反應(yīng)機理1酶的活性中心指酶分子中直接和底物結(jié)合，并和酶的催化作用直接有關(guān)的部位。（1）結(jié)合基團：與S結(jié)合的基團。（2）催化基團：直接參與催化反應(yīng)的基團。酶的活性部位，不僅決定酶的專一性，同時對E的催化性質(zhì)起決定作用?；钚圆课坏幕鶊F都是必需基團，必需基團還包括活性部位以外的，對維持空間構(gòu)象必需的基團。第八章酶工程第八章酶工程2關(guān)于酶催化的專一性作用機制假說（1）鎖－鑰匙學說：1890年Fisher提出。該學說認為酶的天然構(gòu)象是剛性的，如果底物分子結(jié)構(gòu)上存在著微小的差別，就不能契入酶分子中，從而不能被酶催化。第八章酶工程（2）誘導(dǎo)－契合假說:Koshland提出當酶分子與底物接近時，酶蛋白受底物分子的誘導(dǎo)，其構(gòu)象發(fā)生了有利于底物結(jié)合的變化，酶與底物在此基礎(chǔ)上互補楔合，進行反應(yīng)。第八章酶工程第八章酶工程3.中間絡(luò)合物學說：底物先與酶結(jié)合成不穩(wěn)定的中間絡(luò)合物，然后再分解釋放出酶與底物證實：H2O2+過氧化物酶（H2O2—過氧化物酶）

（褐色）

（紅色）

645\587\548\498nm

561\550nm（H2O2—過氧化物酶）+AH2過氧化物酶+A+2H2O（紅色）（褐色）

第八章酶工程（三）酶催化反應(yīng)的速率理論1概念：在反應(yīng)體系中，任何反應(yīng)分子都有進行化學反應(yīng)的可能，但只有能量達到或超過某一限度（能閾）的活化分子，才能在碰撞中起化學反應(yīng)。能閾——活化能：活化分子處于活化態(tài)，活化態(tài)與常態(tài)的能量差，也就是分子由常態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榛罨瘧B(tài)所需的能量稱為活化能。達到或超過能閾的分子——活化分子活化分子越多——反應(yīng)速度越快。提高活化分子數(shù)量的途徑①對反應(yīng)體系加熱，照射②降低活化能第八章酶工程2.酶高效催化的理論酶催化能夠降低活化能，是非酶催化1/3以下。第八章酶工程（1）鄰近和定向效應(yīng)鄰近效應(yīng)：指酶、底物結(jié)合形成絡(luò)合物時，底物分子與底物分子之間、酶的催化集團與底物分子之間，絡(luò)合形成“大分子”，局部反應(yīng)基團的有效濃度得到了極大的提高，從而使反應(yīng)速率大大增加定向效應(yīng)：指反應(yīng)物的反應(yīng)基團之間、酶的催化基團之間與底物的反應(yīng)基團之間的正確取向，使反應(yīng)速率增大。第八章酶工程（2）酸堿催化：指通過瞬時地向反應(yīng)物提供質(zhì)子或從反應(yīng)物中汲取質(zhì)子，以穩(wěn)定過度態(tài)、加速反應(yīng)的一類催化反應(yīng)機制。第八章酶工程（3）張變和扭曲效應(yīng)：E與S誘導(dǎo)契合過程中，E受S誘導(dǎo)而變構(gòu)，同時變化的E分子使S分子中的敏感鍵產(chǎn)生“張力”或“變形”，使敏感鍵易于斷裂。第八章酶工程（4）共價催化：E與S形成一個反應(yīng)活性很高的不穩(wěn)定的共價中間產(chǎn)物，加快反應(yīng)。共價催化的最一般形式是催化劑的親核基團對底物中親電子的碳原子進行攻擊，形成共價中間物。第八章酶工程（5）多元催化與協(xié)同效應(yīng)酶的催化作用是一個綜合的結(jié)果，是要通過側(cè)鏈基團協(xié)同作用來完成的。第八章酶工程（四）酶催化反應(yīng)動力學1概念熱力學：研究一個反應(yīng)能否進行，進行的程度（反應(yīng)物轉(zhuǎn)化成產(chǎn)物的多少），只考慮始態(tài)、終態(tài)，不考慮歷程（如何反應(yīng)）?；瘜W動力學：研究（1）反應(yīng)速度（2）反應(yīng)條件對速度的影響（3）反應(yīng)步驟（4）反應(yīng)機理（以便估價、控制、應(yīng)用）。酶促反應(yīng)動力學：研究酶促反應(yīng)的速度和影響此速度的各種因素以及反應(yīng)歷程。第八章酶工程2底物濃度[S]對酶促反應(yīng)速度V與底物濃度[S]的關(guān)系Michaelis&Menten提出的著名的米氏方程根據(jù)如下現(xiàn)象的觀測當?shù)孜餄舛容^低時候，反應(yīng)速率與底物濃度成正比，即符合一級反應(yīng)動力學；當?shù)孜餄舛容^高時，反應(yīng)速率與底物濃度無關(guān)，即符合零級反應(yīng)動力學當酶的濃度大大小于底物濃度時，反應(yīng)速率與酶的加入量成正比第八章酶工程根據(jù)中間絡(luò)合物假說，Michaelis&Menten提出單底物酶催化的反應(yīng)機理如下：式中，E代表游離酶，ES為酶與底物的復(fù)合物；S為底物；P為產(chǎn)物；k+1,K-1,k+2為相應(yīng)各步反應(yīng)的反應(yīng)速率常數(shù)。第八章酶工程Michaelis&Menten進一步假設(shè)：與底物濃度[S]相比，酶的濃度[E]很小，因而可忽略由于生成中間復(fù)合物ES而消耗的底物考慮反應(yīng)的初始狀態(tài)，此時產(chǎn)物P的濃度為零，可忽略反應(yīng)的逆反應(yīng)的存在假設(shè)基元反應(yīng)ESE+P的反應(yīng)速率最慢，為上述步驟的控制步驟，而S+EES的反應(yīng)速率很快，可快速達到平衡狀態(tài)。在此基礎(chǔ)二人提出了“米氏方程”：第八章酶工程3溫度對酶催化反應(yīng)速率的影響在Topt之前，T↑、V↑△T=10℃，反應(yīng)速度增加1～2倍在Topr之后，T↑、V↓注意：（1）動物體內(nèi)最適T一般30-50℃，植物40-60℃，有少數(shù)酶能耐較高的溫度，如某些細菌中分離的DNA聚合酶，最適溫度可達70℃，細菌淀粉酶在93℃下活力最大。（2）最適T，不是酶的特征常數(shù)，它與酶作用時間的長短、底物種類以及PH有關(guān)。第八章酶工程4pH對酶催化反應(yīng)速率的影響每一種酶只能在一定pH下才能表現(xiàn)酶反應(yīng)的最大速度，高于或低于此值，反應(yīng)速度都會下降，通常稱此PH值為酶反應(yīng)的最適PH值。（1）一般酶最適PH4－8，植物5－6.5動物6.5－8（3）最適PH與等電點不一定例如：胰pr.E：Phopt=7.7～8.1蔗糖E：pr.E：Phopt=3.0～7.5胃pr.E：Phopt=1.5～2.2酶有最適PH的原因（1）pH影響E結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，過酸、過堿會強烈影響酶蛋白的構(gòu)象，甚至使E變性失活。（2）PH影響E分子上某些基團的解離狀態(tài)（3）PH影響S分子某些基團的解離狀態(tài)。第八章酶工程4激活劑對酶催化反應(yīng)速率的影響定義：凡能提高酶活的物質(zhì)均為激活劑種類：（1）無機離子：金屬離子：K+、Na+、Ca2+、Mg2+、Cu2+、Zn2+、Fe2+、Mn2+、Mo2+。陰離子：Cl—、Br—（2）有機小分子：Vc、Cys、GSH可使含E—SH處于還原態(tài)。第八章酶工程5.抑制劑對酶催化反應(yīng)速率的影響1）抑制的作用失活作用：凡使酶蛋白變性而引起酶活力喪失的作用。抑制作用：使酶活力下降，但并不引起酶蛋白變性的