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血型和交叉配血一、ABO血型系統(tǒng)二、ABO血型鑒定三、Rh血型系統(tǒng)四、交叉配血報(bào)告內(nèi)容
ABO血型和RH血型是紅細(xì)胞的2大血型抗原抗體系統(tǒng),在輸血和血液遺傳學(xué)研究有重大的意義。一、ABO血型系統(tǒng)
1900年美國(guó)免疫學(xué)家Karllandsteiner發(fā)現(xiàn)RBC膜上A、B血型抗原,血清中有抗A、抗B抗體,將血型分為A、B、AB和O型。(一)ABO血型系統(tǒng)抗原
1.ABO血型系統(tǒng)的組成和遺傳是存在于RBC膜上的一種糖蛋白,有多肽和糖鏈組成。A和B基因是顯性基因,O基因是隱性基因,由A,B基因調(diào)控。
2.ABO血型系統(tǒng)抗原的分布A、B、H抗原存在于RBC膜上,也分布于WBC,PLT及其他組織細(xì)胞上。
血型物質(zhì):組織細(xì)胞合成并分泌的水溶性A,B,H血型抗原多為半抗原,主要存在于體液和分泌物中,以唾液中最為豐富。分為分泌型和非分泌型。血型物質(zhì)具有和相應(yīng)的抗體反應(yīng)的性質(zhì)可以協(xié)助鑒定ABO血型和預(yù)測(cè)胎兒的血型。(二)ABO血型系統(tǒng)抗體分為天然抗體和免疫性抗體。天然抗體主要為IGM型抗體。免疫性抗體主要為IGG型抗體。(三)ABO血型系統(tǒng)亞型
A抗原主要亞型:A1和A2,中國(guó)以A1亞型為主。B亞型較少見(jiàn),抗原性較弱。二、ABO血型鑒定
輸血安全是臨床輸血的首要問(wèn)題,正確的血型鑒定是保證輸血安全的前提條件。檢測(cè)原理:血型抗原與相應(yīng)的抗體在介質(zhì)中形成RBC和相應(yīng)血型抗體結(jié)合的免疫復(fù)合物,出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。
正向定型:用已知的特異性血清檢查紅細(xì)胞的未知血型抗原。反向定型:用已知的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查標(biāo)本中未知血型抗體。方法:鹽水凝集法:檢測(cè)IGM型抗體。2.凝膠微柱法方法學(xué)評(píng)價(jià):1.鹽水凝集法分為玻片法和試管法。簡(jiǎn)單易行。2.凝膠微柱法重復(fù)性好,特異性靈敏性高,全自動(dòng)分析儀可以減少人為誤差。缺點(diǎn):成本高,需要特殊設(shè)備。質(zhì)量保證:
1.標(biāo)準(zhǔn)血清:在有效期內(nèi)使用,效價(jià)高,凝集力強(qiáng),嚴(yán)防污染。常用的有:
A、人血清ABO血型抗體:特異性高,凝集效價(jià):抗A不低于1︰128,抗B不低于1︰64,親和力在15秒出現(xiàn)凝集,3分鐘明顯凝集,穩(wěn)定性高,滅活補(bǔ)體。
B、人ABO單克隆抗體:特異性,親和力,凝集效價(jià),穩(wěn)定性高。
2.被檢紅細(xì)胞:
A、標(biāo)本新鮮,嚴(yán)防污染。
B、特殊病人標(biāo)本,加做對(duì)照及正反定型,以及用洗滌紅細(xì)胞做血型鑒定。3.實(shí)驗(yàn)器材:清潔干糙,應(yīng)正反定型,時(shí)間溫度離心時(shí)間均應(yīng)該嚴(yán)格控制。觀察結(jié)果仔細(xì),注意出現(xiàn)弱凝集現(xiàn)象,必要時(shí)在顯微鏡下觀察結(jié)果。4.綜合分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。核實(shí)無(wú)誤時(shí)方可以發(fā)出檢查結(jié)果。臨床意義:
1.輸血
2.器官移植
3.新生兒溶血病
4.其他三、Rh血型系統(tǒng)
1940年,KarlLandsteinerandAlexanderWiener發(fā)現(xiàn)了Rh血型系統(tǒng),是最復(fù)雜的紅細(xì)胞血型系統(tǒng)之一。具有遺傳多態(tài)性,,導(dǎo)致血清學(xué)表現(xiàn)復(fù)雜,表型頻率極不平衡。有3種命名方式。(一)Rh血型系統(tǒng)的命名1.
Fisher-Race命名法(CDE命名法)A、遺傳基因位于1號(hào)染色體短臂上的連鎖基因,每條有三個(gè)基因位點(diǎn),依次排為CDE。
B、各基因位點(diǎn)由一對(duì)等位基因組成。CCDE以復(fù)合體的形式遺傳D可有8種基因組合和36種遺傳型。2.ISBT命名法。3.Rh血型系統(tǒng)表型及基因型。根據(jù)紅細(xì)胞上有無(wú)D抗原為Rh陽(yáng)性和Rh陰性。(二)Rh血型系統(tǒng)抗原及抗體
1.Rh血型系統(tǒng)抗原僅次于ABO血型系統(tǒng)的A、B抗原。與人類密切的是D、E、C、c、e。
2.Rh血型系統(tǒng)抗體天然抗體極少,由輸血或妊娠刺激產(chǎn)生的IGG型免疫性抗體。以抗D最為常見(jiàn)。(三)Rh血型鑒定常用方法有酶介質(zhì)法,低離子強(qiáng)度溶液試驗(yàn),抗人球蛋白試驗(yàn),凝集胺試驗(yàn)及人源鹽水介質(zhì)抗D試驗(yàn)。
檢測(cè)原理
1.酶介質(zhì)法:用木瓜酶或菠蘿酶破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸,降低紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷,減少排斥力,促進(jìn)Rh抗原與抗體的結(jié)合而產(chǎn)生紅細(xì)胞凝集。2.聚凝胺試驗(yàn):聚凝胺是帶高價(jià)陽(yáng)離子的季胺鹽,有利于紅細(xì)胞凝集。由Rh抗體致敏的紅細(xì)胞產(chǎn)生凝集是特異性的不可逆凝集,非抗體致敏的凝集為可逆性凝集。3.抗球蛋白試驗(yàn)(CoombsTest):是檢測(cè)紅細(xì)胞上不完全抗體的經(jīng)典方法。利用抗球蛋白抗體作為第二抗體,通過(guò)連接致敏紅細(xì)胞表面的特異性Rh抗體,出現(xiàn)特異性凝集。4.人源鹽水介質(zhì)抗D試驗(yàn):利用免疫球蛋白變性劑處理,使IGG變?yōu)镮GM類抗體,能在鹽水介質(zhì)中發(fā)生凝集現(xiàn)象,用于快速鑒定。5.低離子強(qiáng)度溶液試驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià)
質(zhì)量保證
1.檢測(cè)前:標(biāo)本新鮮,嚴(yán)防污染,被檢紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌。試劑器材要在有效期內(nèi)的合格試劑,器材清潔干燥。
2.檢測(cè)中:A、嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。B、嚴(yán)格控制抗原抗體比例、介質(zhì)濃度、反應(yīng)時(shí)間溫度以及離心條件等關(guān)鍵因素。C、每次均需陰性陽(yáng)性和試劑對(duì)照。D、觀察結(jié)果不可用力震搖,結(jié)果可疑用顯微鏡觀察確認(rèn)。3.檢測(cè)后:復(fù)查實(shí)驗(yàn)全過(guò)程,填寫報(bào)告并于4度保存標(biāo)本一周以上。臨床意義1.
Rh血型鑒定及交叉配血2.新生兒溶血病的診斷四、交叉配血
交叉配血實(shí)驗(yàn)是在現(xiàn)象鑒定的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步檢測(cè)受血者和供血者血液中是否含有不相配合的成分。主側(cè):受血者血清與供血者紅細(xì)胞;次側(cè):受血者紅細(xì)胞與供血者血清。
檢測(cè)原理常用鹽水配血試驗(yàn)。方法學(xué)評(píng)價(jià)
質(zhì)量保證1.檢測(cè)前:A、建立標(biāo)本簽收制度。B、標(biāo)本新鮮,無(wú)溶血,嚴(yán)防污染,有輸血或妊娠史的應(yīng)在48小時(shí)內(nèi)留取。C試劑器材要在有效期內(nèi)的合格試劑。D、器材清潔干燥,嚴(yán)防溶血。2.檢測(cè)中:A、高度責(zé)任感。B、器材標(biāo)記清楚,吸管等均專用。C、被檢紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌,濃度與標(biāo)準(zhǔn)血清的比例恰當(dāng)。D、嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)間溫度和離心條件。
E、配血試驗(yàn)陰性但有反復(fù)輸血史和妊娠史的應(yīng)用多種方法檢測(cè)交叉配血。
F、
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