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文檔簡介
實驗三、環(huán)境因素對微生物的影響
一、實驗?zāi)康?.了解溫度對微生物生長的影響;2.了解抗生素(青霉素、氨芐青霉素等)的抗菌范圍,學(xué)習(xí)抗菌譜試驗的基本方法。3.了解消毒劑(碘酒或酒精)對微生物分布的影響。4.了解紫外線殺菌對微生物的作用特點二、實驗原理1.
溫度:影響微生物生長與存活的最重要因素。自然界的微生物可根據(jù)對溫度的適應(yīng)性分為低溫型、中溫型和高溫型。但不管哪一種溫度型的微生物,都有生長溫度范圍。分為最高、最適和最低生長溫度。在最適宜溫度里生長良好:超過最高溫度細(xì)胞死亡;低于最低溫度細(xì)胞被抑制或死亡。2.
抗生素對微生物生長的影響:抗生素是某些微生物在生長代謝過程中產(chǎn)生的能抑制或殺死其它微生物的次生代謝產(chǎn)物。每種抗生素都有它固定的抗菌范圍和抗菌譜。例如青霉素只對革蘭氏陽性菌具有抗菌作用;多粘菌素只對革蘭氏陰性菌有作用,這類抗生素稱為窄譜抗生素;另一些抗生素對多種細(xì)菌具有作用,例如四環(huán)素、土霉素對許多革蘭氏陽性菌和陰性菌都有作用稱為廣譜抗生素。二、實驗原理比如氨芐青霉素,對革蘭氏陽性球菌、變形桿菌、沙門氏菌、痢疾桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、大腸桿菌及流感桿菌等都有很好的抗菌效果。二、實驗原理3.化學(xué)消毒劑對微生物分布的影響人體皮膚分布著一定種類與數(shù)量的微生物。使用化學(xué)消毒劑對皮膚進(jìn)行表面消毒是醫(yī)院里進(jìn)行無菌操作常用的方法之一。二、實驗原理四、實驗步驟1.溫度對微生物生長的影響(每組)(1)菌種:大腸桿菌(白葡)、枯草芽孢桿菌。(2)培養(yǎng)基:取肉湯培養(yǎng)基(液體培養(yǎng)基)
5支。(3)接種:分別接種大腸桿菌(白葡)和枯草芽孢桿菌各2支試管,余下1支不接種作陰性對照。(4)加熱:取接種的大腸桿菌(白葡)和枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基各1支,于100℃作用15min后取出,冷水沖涼。5支試管放入37℃溫箱培養(yǎng)。(5)觀察:培養(yǎng)24h后觀察現(xiàn)象,并記錄。2.抗生素對微生物生長的影響(1)菌種:大腸桿菌(G-)、白色葡萄球菌或金黃色葡萄球菌(G+)。(2)接菌用接種環(huán)刮取一環(huán)菌體,輕放在平板上;將無菌的棉簽在無菌水(液體培養(yǎng)基)中潤濕;用濕潤的無菌棉簽將平板上的菌體均勻涂布。(2種不同的菌各做1個平板。)四、實驗步驟(3)放置藥敏片:用無菌鑷子取4種不同的抗生素藥敏片各1個,貼在平板上(每個平板放4個),輕輕壓一下,倒置。
注意:在貼濾紙條時不要在培養(yǎng)基上拖動濾紙片,避免抗生素溶液在培養(yǎng)基中擴散時分布不均勻。(4)培養(yǎng):平板于37℃培養(yǎng)24h后觀察、記錄實驗現(xiàn)象。四、實驗步驟3.化學(xué)消毒劑對微生物分布的影響(1)分區(qū):將1個營養(yǎng)瓊脂平板分為4個區(qū)域;
(2人1個平板,每人2個區(qū))(2)接種:2名同學(xué)直接用手指在平板的2個區(qū)域劃之字形,待用碘酒/酒精棉球消毒后,稍候片刻,再在另外2個區(qū)域劃之字形;
(3)培養(yǎng):平板于37℃培養(yǎng)24h后觀察、記錄實驗現(xiàn)象。四、實驗步驟甲乙4.紫外線的消毒作用(穿透作用)(1)菌種:大腸桿菌、白色葡萄球菌(2)接菌:用接種環(huán)刮取一環(huán)菌體,輕放在平板上;將無菌的棉簽在無菌水(液體培養(yǎng)基)中潤濕;用濕潤的無菌棉簽將平板上的菌體均勻涂布。
【可做1種菌,也可做2種(中間劃線)】。四、實驗步驟4.紫外線的消毒作用(穿透作用)(4)照射:用平皿蓋半遮蓋平板,置于紫外燈照射15min。(5)培養(yǎng):蓋上平皿蓋,于37℃培養(yǎng)24h后觀察實驗現(xiàn)象。四、實驗步驟思考題
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