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文檔簡介
實驗八:小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象的觀察
【課前預(yù)習(xí)】實驗前給小鼠腹腔注射臺盼蘭淀粉肉湯的目的是什么?實驗?zāi)康?/p>
1、通過對小白鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞活動的觀察,加深理解細(xì)胞吞噬作用的過程及其意義。2、掌握小鼠腹腔注射給藥和頸椎脫臼處死方法。觀察機(jī)體的非特異性免疫現(xiàn)象。3.熟悉細(xì)胞吞噬作用的基本過程實驗原理細(xì)胞吞噬作用原來是單細(xì)胞動物攝取營養(yǎng)物質(zhì)的方式,也是原始防御作用。隨著動物界的進(jìn)化,在高等動物中,則發(fā)展生成大小兩類吞噬細(xì)胞(即巨噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞),專司吞噬作用,成為非特異免疫功能的重要組成部分。巨噬細(xì)胞由骨髓干細(xì)胞分化生成,然后進(jìn)入血液到達(dá)各組織內(nèi),并進(jìn)一步分化為各種巨噬細(xì)胞。當(dāng)病原微生物或其它異物侵入機(jī)體時,能招引巨噬細(xì)胞,而巨噬細(xì)胞又有趨化性,能響應(yīng)招引因子的招引,產(chǎn)生活躍的變形運動,主動向病原體和異物移行,在接觸到病原體或異物時,即‘伸出偽足,將之包圍并內(nèi)吞人胞質(zhì),形成吞噬體,繼而細(xì)胞質(zhì)中的初級溶酶體與吞噬泡發(fā)生融合,形成吞噬性溶酶體,通過其中水解酶等作用下,將病原體殺死,消化分解,最后將不能消化的殘渣排出細(xì)胞外。在機(jī)體的免疫過程中,巨噬細(xì)胞承擔(dān)著噬菌、殺菌、清除體內(nèi)被損傷和衰老的細(xì)胞,以及傳遞抗原信息,巨噬細(xì)胞將捕獲的抗原進(jìn)行加工處理后,把降解的抗原信息傳遞給T、B淋巴細(xì)胞。巨噬細(xì)胞又是天然殺傷細(xì)胞(NKCell)的激活劑,而且對B淋巴細(xì)胞的激活、增殖和分化具有調(diào)節(jié)作用?!緦嶒炗闷贰?.材料:小白鼠、1%雞紅細(xì)胞懸液2.試劑:6%的淀粉肉湯(含臺盼藍(lán)),0.9%生理鹽水3.儀器設(shè)備:顯微鏡、注射器、注射針頭、吸管、試管架、解剖刀、解剖鑷、載玻片、蓋玻片、記號筆5、吸取的腹腔液與Hank’s液1:1混合,并且滴數(shù)滴于載玻片上,37OC溫育30分鐘。6、玻片取出,用生理鹽水沖洗,吹干,甲醇固定5分鐘。7、Gimasa染液染色,干燥后油鏡觀察?!緦嶒灲Y(jié)果】在高倍鏡下可見有許多較大的圓形和形狀不規(guī)則的巨噬細(xì)胞,因未染色細(xì)胞核不易見到,其胞質(zhì)中含有數(shù)量不等的蘭色圓形小顆粒(即吞入的含臺盼蘭的淀粉肉湯所形成);還可見少量黃色橢圓形有明顯細(xì)胞核的雞紅細(xì)胞,慢慢移動玻片標(biāo)本,仔細(xì)觀察視野中的巨噬細(xì)胞表面,有的紅細(xì)胞已部分被吞入;有的巨噬細(xì)胞內(nèi)已吞入了一個或多個紅細(xì)胞形成吞噬泡。
巨噬細(xì)胞吞噬實驗示教照片
雞紅細(xì)胞巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞后的巨噬細(xì)胞
吞噬雞紅細(xì)胞后的巨噬細(xì)胞
【實驗報告】1.鏡
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