2024屆河北省衡水市深州市長江中學(xué)高二生物第二學(xué)期期末監(jiān)測模擬試題含解析

2024屆河北省衡水市深州市長江中學(xué)高二生物第二學(xué)期期末監(jiān)測模擬試題注意事項(xiàng)：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．以下關(guān)于生物學(xué)的研究方法錯誤的是A．無關(guān)變量是可對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響的可變因素B．沃森和克里克構(gòu)建的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)屬于物理模型C．將完整細(xì)胞放入離心管中，利用不同的離心速度就能將各種細(xì)胞器分離開D．膜成分和結(jié)構(gòu)的初步闡明是先提出假設(shè)，后通過觀察和實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證和完善的過程2．關(guān)于植物細(xì)胞全能性的含義，下列說法正確的是A．體內(nèi)不同細(xì)胞具有相同的遺傳物質(zhì)B．體內(nèi)不同組織細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能各異C．各種細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個體的潛能D．各種細(xì)胞都可以有選擇地表達(dá)細(xì)胞中的某些基因3．下列關(guān)于顯微鏡的敘述錯誤的是A．顯微鏡的放大倍數(shù)等于目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的積B．顯微鏡的放大倍數(shù)指的是面積的放大倍數(shù)C．顯微鏡下所成的像與實(shí)物相比是倒置的D．要將視野右下方的觀察目標(biāo)移至視野中央，應(yīng)將裝片向右下方移4．不同膜結(jié)構(gòu)之間互相轉(zhuǎn)化，以“囊泡”方式進(jìn)行的是（）①核膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜②高爾基體膜和細(xì)胞膜③內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和高爾基體膜④細(xì)胞膜和線粒體膜A．②③ B．②④ C．③④ D．①②5．生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性可分為抵抗力穩(wěn)定性和恢復(fù)力抵抗力。下列生態(tài)系統(tǒng)中恢復(fù)力穩(wěn)定性最強(qiáng)的是A．溫帶草原 B．原始森林 C．北極苔原 D．北溫帶闊葉林6．如圖為人體內(nèi)水分調(diào)節(jié)、體溫調(diào)節(jié)、血糖調(diào)節(jié)示意圖，圖中①②③④為激素。下列敘述不正確的是()A．下丘腦是內(nèi)分泌的樞紐，可控制其他激素的分泌B．血液中③的濃度過低時，①②激素含量增加C．飲水不足時，激素④分泌減少D．下丘腦對胰島細(xì)胞的控制和垂體細(xì)胞的控制方式不同7．生物界在基本組成上的高度一致性表現(xiàn)在（）。①組成生物體的主要化學(xué)元素的種類基本一致②各種生物的核酸都相同③構(gòu)成核酸的堿基都相同④各種生物的蛋白質(zhì)都相同⑤構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸都相同A．①②④ B．①②③ C．③④⑤ D．①③⑤8．（10分）下圖為希望導(dǎo)入植物細(xì)胞的重組DNA分子，箭頭代表PCR擴(kuò)增時子代DNA的延伸方向，T-DNA片段基因序列已知，設(shè)計四段T-DNA的引物A、B、C、D，若利用PCR技術(shù)擴(kuò)增T-DNA片段和未知基因片段，可選擇作為引物的分別是A．A、D，B、CB．A、B，C、DC．B、D，A、CD．C、D，A、B二、非選擇題9．（10分）下列是細(xì)胞的部分結(jié)構(gòu)放大圖，請據(jù)圖回答下列問題：（1）圖中不屬于生物膜系統(tǒng)的是________（填標(biāo)號），其化學(xué)成分是________________；圖中不遵循孟德爾遺傳規(guī)律的遺傳物質(zhì)存在于_______________（填標(biāo)號）中。（2）用含有35S標(biāo)記的氨基酸的培養(yǎng)基培養(yǎng)動物細(xì)胞，該細(xì)胞能合成并分泌一種含35S的蛋白質(zhì)。請寫出35S在細(xì)胞各結(jié)構(gòu)間移動的先后順序（用“→”和序號表示先后順序____________。（3）細(xì)胞的識別與⑥中的[]___________有關(guān)。觀察活細(xì)胞中的②常用的染色劑是_____________，可將其染成_____________（顏色）。（4）信使RNA在細(xì)胞核中合成后由細(xì)胞核進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中并與核糖體結(jié)合，通過的生物膜的層數(shù)是________。（5）1972年桑格和尼克森提出了___________模型，性激素通過該結(jié)構(gòu)進(jìn)入細(xì)胞的方式是_________。10．（14分）為了檢測高原訓(xùn)練對運(yùn)動員體內(nèi)的血紅蛋白含量的影響，需要對運(yùn)動員訓(xùn)練前后的血紅蛋白進(jìn)行提取和分離，其步驟如下：（1）在紅細(xì)胞的洗滌操作中，血液離心后結(jié)果如圖所示，其中血紅蛋白位于__________（填“上清液”或“沉淀物”）。洗滌紅細(xì)胞時，要用相當(dāng)于紅細(xì)胞液體體積5倍的___________洗滌紅細(xì)胞3次，然后加入蒸餾水到原血液體積，再加40%的_____________，攪拌約10min，使紅細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白。（2）在樣品粗分離操作中，將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進(jìn)行透析。透析的目的是_______________。（3）血紅蛋白的純化是通過凝膠色譜法將雜蛋白除去，最后經(jīng)___________電泳進(jìn)行純度鑒定。研究小組用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時，相對分子質(zhì)量___________（填“較大”或“較小”）的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來。在裝填色譜柱時不得有氣泡存在，原因是_______________________。（4）檢測結(jié)果顯示，經(jīng)過高原訓(xùn)練后，運(yùn)動員體內(nèi)血紅蛋白含量有了明顯升高，試分析其可能的原因______________________。11．（14分）金屬硫蛋白（MT）是一類廣泛存在的金屬結(jié)合蛋白。某研究小組計劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增獲得目的基因，構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌，用于重金屬廢水的凈化處理。PCR擴(kuò)增過程示意圖圖像，請回答下列問題：（1）從高表達(dá)MT蛋白的生物組織中提取mRNA，通過______________獲得cDNA用于PCR擴(kuò)增。（2）設(shè)計一對與MT基因兩端序列互補(bǔ)配對的引物（引物1和引物2），為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒，在引物中需要增加適當(dāng)?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶位點(diǎn)。設(shè)計引物時需要避免引物之間形成______________，而造成引物自連。（3）圖中步驟1代表____________________，步驟2代表退火，步驟3代表延伸，這三個步驟組成一輪循環(huán)。（4）PCR擴(kuò)增時，退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過高會破______________的堿基配對。退火溫度的設(shè)定與引物長度、堿基組成有關(guān)，長度相同但______________的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。（5）如果PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，則可以采取的改進(jìn)措施有______________（填序號：①升高退火溫度②降低退火溫度③重新設(shè)計引物）。12．有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株?；卮饐栴}：（1）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以________________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基土，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。（2）純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即_________和________。（3）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈說明該菌株的降解能力__________。（4）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、__________和____________________。無菌技術(shù)要求試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈________________附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解題分析】

本題考查了生物學(xué)的研究方法的有關(guān)知識，結(jié)合所學(xué)的相關(guān)知識即可判斷?！绢}目詳解】A、無關(guān)變量是指實(shí)驗(yàn)中除實(shí)驗(yàn)變量以外的影響實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或結(jié)果的因素或條件，A正確；B、沃森和克里克構(gòu)建的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型屬于物理模型，B正確；C、應(yīng)該將破碎的細(xì)胞放入離心管，通過差速離心法分離各種細(xì)胞器，C錯誤；D、膜的成分和結(jié)構(gòu)的初步闡明，最初都是先根據(jù)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和有關(guān)知識提出假說，假說需要通過觀察和實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證和完善，D正確。故選C。2、C【解題分析】

細(xì)胞的全能性是指已分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能；細(xì)胞有全能性的原因是因其含有生物全部的遺傳物質(zhì)；細(xì)胞表現(xiàn)全能性的條件：離體、適宜的營養(yǎng)條件、適宜的環(huán)境條件?！绢}目詳解】A.、體內(nèi)不同細(xì)胞具有相同的遺傳物質(zhì)是表達(dá)全能性的基礎(chǔ)，不是細(xì)胞全能性的含義，A錯誤；B、體內(nèi)不同組織細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能各異不是細(xì)胞全能性的含義，B錯誤；C、根據(jù)全能性的概念可知：各種細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個體的潛能，C正確；D、各種細(xì)胞都可以有選擇地表達(dá)細(xì)胞中的某些基因?qū)儆诩?xì)胞的分化，不是細(xì)胞全能性的含義，D錯誤。故選C。3、B【解題分析】顯微鏡放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù)，A正確；放大倍數(shù)是指放大的長度或?qū)挾?，不是面積或體積，B錯誤；顯微鏡觀察的物像是倒像，C正確；將視野右下方的觀察目標(biāo)移至視野中央，物像應(yīng)該向左上方移動，則裝片向右下方移，D正確?！究键c(diǎn)定位】細(xì)胞觀察實(shí)驗(yàn)【名師點(diǎn)睛】顯微鏡放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù)，放大倍數(shù)是指放大的長度或?qū)挾?，不是面積或體積；顯微鏡觀察的物像是倒像，物像移動的方向與玻片移動的方向相反。4、A【解題分析】細(xì)胞內(nèi)的膜結(jié)構(gòu)之間存在直接或間接的聯(lián)系。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜與核膜直接相連，①錯誤；高爾基體膜與細(xì)胞膜間通過形成囊泡進(jìn)行相互轉(zhuǎn)化，②正確；內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜與高爾基體膜之間通過形成囊泡進(jìn)行相互轉(zhuǎn)化，③正確；細(xì)胞膜和線粒體膜不通過囊泡相連，④錯誤。綜上分析，A正確，B、C、D均錯誤?！绢}目點(diǎn)撥】生物膜在結(jié)構(gòu)上的聯(lián)系：5、A【解題分析】

1、抵抗力穩(wěn)定性：指生態(tài)系統(tǒng)抵抗外界干擾并使自身的結(jié)構(gòu)與功能保持原狀的能力；恢復(fù)力穩(wěn)定性：指生態(tài)系統(tǒng)在受到外界干擾因素的破壞后恢復(fù)到原狀的能力影響。

2、生態(tài)系統(tǒng)中的組成成分越多，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)就越復(fù)雜，生態(tài)系統(tǒng)的自動調(diào)節(jié)能力就越強(qiáng)，其抵抗力穩(wěn)定性就越強(qiáng)，相反的其恢復(fù)力穩(wěn)定性就越弱?！绢}目詳解】A、上述群落中溫帶草原中生物種類最少，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)最簡單，恢復(fù)力穩(wěn)定性最強(qiáng)，環(huán)境條件適宜，遭到破壞后最容易恢復(fù)，A正確；B、原始森林生物種類最多，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)最復(fù)雜，所以抵抗力穩(wěn)定性很強(qiáng)，恢復(fù)力穩(wěn)定性較弱，B錯誤；C、北極苔原生物種類最少，環(huán)境條件惡劣，抵抗力穩(wěn)定性和恢復(fù)力穩(wěn)定性都最弱，C錯誤；北溫帶闊葉林生物種類較多，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，恢復(fù)力穩(wěn)定性較弱，D錯誤。故選：A?！绢}目點(diǎn)撥】易錯點(diǎn)：區(qū)分關(guān)于抵抗力穩(wěn)定性和恢復(fù)力穩(wěn)定性的差別，一個是抵抗干擾的能力，一個是恢復(fù)能力，一般情況下兩者成反比。6、C【解題分析】分析圖示可知：①是促甲狀腺激素釋放激素，②是促甲狀腺激素，③是甲狀腺激素，④是抗利尿激素。下丘腦是內(nèi)分泌的樞紐，可控制其他內(nèi)分泌腺分泌相應(yīng)的激素，A項(xiàng)正確；血液中③的濃度過低時，通過反饋調(diào)節(jié)，對下丘腦和垂體的抑制作用減弱，導(dǎo)致①②激素含量增加，B項(xiàng)正確；飲水不足時細(xì)胞外液滲透壓升高，導(dǎo)致抗利尿激素的分泌增加，C項(xiàng)錯誤；下丘腦對胰島細(xì)胞的控制是通過神經(jīng)調(diào)節(jié)實(shí)現(xiàn)的，而對垂體細(xì)胞的控制則是通過激素調(diào)節(jié)實(shí)現(xiàn)的，D項(xiàng)正確。7、D【解題分析】試題分析：生物界在基本組成上的高度一致性表現(xiàn)在：組成生物體的主要化學(xué)元素的種類基本一致，①正確。各種生物的核酸都不相同，體現(xiàn)生物多樣性，②錯。組成DNA都是ATCG4種堿基，RNA都是AUCG4種堿基，③正確。各種生物的蛋白質(zhì)都不相同，體現(xiàn)生物多樣性，④錯。構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸都是20種氨基酸，⑤正確。D正確?？键c(diǎn)：本題考查生物的一致性相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能力。8、A【解題分析】

DNA聚合酶不能直接啟動DNA新鏈的合成，即不能從頭合成DNA，只能在有引物的3’－OH上聚合核苷酸來延伸DNA鏈。原因是在新鏈的延伸過程中，只有新添加的堿基與模板鏈形成雙螺旋才能繼續(xù)鏈的延伸，否則延伸終止，啟動切除修復(fù)機(jī)制，直至添加正確的堿基，也即是在DNA聚合酶的上游位置一定要互補(bǔ)形成雙鏈（可以是RNA－DNA）才能繼續(xù)下游DNA的合成，這是它的忠實(shí)性和高保真系統(tǒng)決定的。DNA的復(fù)制必須先借助于RNA聚合酶以DNA為模板合成一小段引物RNA，然后DNA聚合酶再接著進(jìn)行DNA合成。最后，引物RNA由DNA聚合酶水解后，替換上相應(yīng)的DNA片段，最后由DNA連接酶把片段完整連接起來?！绢}目詳解】DNA的兩條鏈為反向平行螺旋在一起，由于DNA聚合酶只能在有引物的3’端上聚合核苷酸來延伸DNA鏈，而圖示中箭頭代表PCR擴(kuò)增時子代DNA的延伸方向，所以引物A是順時針方向，那么，C也是順時針方向，B、D就是逆時針方向。所以利用PCR技術(shù)擴(kuò)增T-DNA片段時需要的引物為A、D,而擴(kuò)增被插入的基因片段需要利用B、C這對引物，綜上分析，A正確，BCD錯誤。故選A。二、非選擇題9、（1）⑤rRNA（或RNA）和蛋白質(zhì)②、④（2）⑤→③→①→⑥（3）a糖蛋白健那綠染液藍(lán)綠色（4）0（5）流動鑲嵌自由擴(kuò)散【解題分析】

（1）由圖可知，⑤核糖體沒有膜結(jié)構(gòu)，不屬于生物膜系統(tǒng)，其化學(xué)成分是rRNA（或RNA）和蛋白質(zhì)。④葉綠體和②線粒體都有DNA，且葉綠體和線粒體的遺傳不遵循遺傳規(guī)律。（2）分泌蛋白質(zhì)在核糖體上合成，通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體修飾加工，最后通過細(xì)胞膜分泌到細(xì)胞外，所以順序是⑤→③→①→⑥。（3）糖蛋白質(zhì)具有識別作用，⑥上的a表示糖蛋白。線粒體染色常用健那綠染液,染成藍(lán)綠色.（4）信使RNA由細(xì)胞核通過核孔進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，所以通過的生物膜是0。（5）1972年桑格和尼克森提出了流動鑲嵌模型，性激素是脂質(zhì)，進(jìn)入細(xì)胞的方式是自由擴(kuò)散?！究键c(diǎn)定位】本題主要考查對細(xì)胞結(jié)構(gòu)圖像的識別、生物膜系統(tǒng)、分泌蛋白的合成和分泌、生物膜的流動鑲嵌模型等知識。10、沉淀物生理鹽水甲苯去除分子量較小的雜質(zhì)SDS—聚丙烯酰胺凝膠較大氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，使得到的紅色帶區(qū)歪曲、散亂，降低分離效果高原環(huán)境空氣稀薄，氧氣含量低，血紅蛋白含量會增加【解題分析】

根據(jù)蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì)：形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別，由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有：（1）樣品處理：①紅細(xì)胞的洗滌（低速短時間離心），②血紅蛋白的釋放（需要加入蒸餾水和甲苯），③分離血紅蛋白（中速長時間離心）。（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析。（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。凝膠色譜法（分配色譜法）：①原理：分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流動快；分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程長，流動慢。②凝膠材料：多孔性，多糖類化合物，如葡聚糖、瓊脂糖。③分離過程：混合物上柱→洗脫→大分子流動快、小分子流動慢→收集大分子→收集小分子。洗脫：從色譜柱上端不斷注入緩沖液，促使蛋白質(zhì)分子的差速流動。④作用：分離蛋白質(zhì)，測定生物大分子分子量，蛋白質(zhì)的脫鹽等?！绢}目詳解】（1）血紅蛋白在紅細(xì)胞內(nèi)，而血液離心后的各種血細(xì)胞主要存在于沉淀物中，因此血紅蛋白位于沉淀物中。洗滌紅細(xì)胞時，生理鹽水可以保持紅細(xì)胞不破裂，而5倍體積洗滌3次可以去除雜蛋白，得到更純的紅細(xì)胞。加入蒸餾水，紅細(xì)胞吸水破裂，加入40%的甲苯，溶解紅細(xì)胞膜，最終使紅細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白。（2）透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)，因此透析可以去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。（3）血紅蛋白的純化是通過凝膠色譜法將雜蛋白除去，最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流動快；分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程長，流動慢。因此，研究小組用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻，就會在色譜柱內(nèi)部形成無效的空隙，使本該進(jìn)入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過，攪亂洗脫液的流動次序，影響分離的效果，因此在裝填色譜柱時不得有氣泡存在。（4）高原空氣稀薄，氧氣含量低，為了利用更多的氧氣進(jìn)行有氧呼吸，運(yùn)動員體內(nèi)血紅蛋白含量有了明顯升高。【題目點(diǎn)撥】本題結(jié)合圖解，考查蛋白質(zhì)的提取和分離，對于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)步驟，實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查。11、逆轉(zhuǎn)錄堿基互補(bǔ)配對變性引物與模板GC含量高②③【解題分析】

PCR技術(shù)：

1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2、原理：DNA復(fù)制。

3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈；PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開?！绢}目詳解】（1）PCR擴(kuò)增目的基因，首先要有目的基因作為模板，所以從高表達(dá)MT

蛋白的生物組織中提取mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，從而用于PCR擴(kuò)增。（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒，首先要用限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，所以位于目的基因兩端的引物中需要增加適當(dāng)?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶位點(diǎn)，設(shè)計的引物之間不能有堿基互補(bǔ)配對，否則引物自連，而不能與模板相連。

（3）圖中步驟1、2、3分別代表變性、退火、延伸，這三個步驟組成一輪循環(huán)。

（4）退火表示引物與模板相連，若退火溫度過高會破壞引物與模板的堿基配對；由于G-C之間有三個氫鍵，A-T之間有兩個氫鍵，所以G-C含量越高的引物，退火溫度越高。

（5）PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，可能是退火溫度過高，導(dǎo)致引物與模板不能相連或引物間相互配對，引物自連，不能與模板相連，因此，可通過②降低退火溫度或③重新設(shè)計引物進(jìn)行改進(jìn)。【題目點(diǎn)撥】易錯點(diǎn)：PCR技術(shù)的核心部分就是Taq酶，這種酶可以忍耐較高的溫度而不至于在高溫變性過程中失活而無法發(fā)揮作用；PCR技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。12、原油選擇平板劃線法稀釋涂布平板