組織學與胚胎學緒論實驗

緒論目錄組織學與胚胎學研究內(nèi)容和意義

組織學發(fā)展簡史和當代組織學組織學的學習方法組織學技術簡介一、組織學與胚胎學的研究內(nèi)容組織學（histology）：研究機體微細結(jié)構(gòu)及其相關功能的科學胚胎學（embryology）：研究人體發(fā)生、生長及其發(fā)育機制的一門科學組織學研究內(nèi)容：細胞(cell)細胞間質(zhì)(intercellularsubstance)組織(tissue)上皮組織結(jié)締組織肌肉組織神經(jīng)組織器官和系統(tǒng)人體胚胎學研究內(nèi)容：受精卵胚胎兒（前8周）（9~38周）胚胎早期發(fā)生組織類型胃的大體解剖胃的細微解剖骨骼肌的光鏡圖骨骼肌的電鏡圖顯微結(jié)構(gòu)超微結(jié)構(gòu)學習組織與胚胎學的意義組胚學是生物學和醫(yī)學的基礎課程組胚學與人類社會面臨的眾多實際問題和疾病防治密切相關組胚學與眾多學科交叉，如分子生物學、細胞生物學、生理學、生物化學、免疫學、病理學、組織工程學和環(huán)境毒理學等學科，理論上相互關聯(lián)滲透，技術相互引用促進。

只有了解正常的機體結(jié)構(gòu)、組成及其基本生命現(xiàn)象，才能理解機體異常的病理變化。同時也能將生命科學研究不斷引向深入。二、組織學發(fā)展簡史和當代組織學發(fā)展簡史：從細胞的發(fā)現(xiàn)和細胞學說的建立起始，300余年Hooke、Malpighi、leeuwenhoek、Graaf、Bichat、Meyer、Schleiden和Schwann等人均有所發(fā)現(xiàn)。當代組織學：新儀器和相關技術，如流式細胞儀、圖像分析儀、共焦激光掃描顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交技術等。

組胚學發(fā)展概況

Histology(microanatomy)

細胞發(fā)現(xiàn)和細胞學說的建立組織學說迄今（經(jīng)歷了三百多年）英國Hooke

1635-1703“cell”意大利Malpighi1628-1694脾，肺，腎等組織結(jié)構(gòu)荷蘭Leeuwenhoek1632-1723精子，紅細胞，肌細胞，神經(jīng)細胞法國Bichat1771-1882“tissue”德國Schleiden1838-18?9創(chuàng)立細胞學說

Schwann

19世紀中期組織學

20世紀初組化，組培

20世紀40年代細胞，組織超微結(jié)構(gòu)我國20世紀初從人體解剖學分化出—組織學馬文昭1886-1965細胞水平張作干1907-1969細胞，組織超微結(jié)構(gòu)

三、組織學的學習方法平面與立體結(jié)構(gòu)與功能靜態(tài)與動態(tài)綜合與比較

平面與立體單柱上皮不同方位的切片圖結(jié)構(gòu)與功能舒張狀態(tài)收縮狀態(tài)靜態(tài)與動態(tài)綜合與比較光鏡技術四、組織學技術簡介⒈普通光學顯微鏡術

石蠟切片術：適用于大多數(shù)組織樣品的制作。主要步驟：取材→固定→水洗→脫水→透明→包埋→切片→貼片→染色→封片。其它制片方法：適用于某些特殊樣品的制作，許多步驟與上相同，但某些步驟則有所不同，如：涂片法、鋪片法、磨片法、火棉膠包埋法等。

問題

解決方法

觀察對象太小

放大

顯微鏡

觀察對象無色，無反差

染色（HE染色）

觀察對象生化成分不同

細胞化學、免疫組織化學

觀察對象是活體

培養(yǎng)組織胚胎學研究技術一般光學顯微鏡（lightmicroscope,LM）技術HE染色：蘇木精（Hematoxylin）伊紅（Eosin）染色堿性染料將嗜堿性物質(zhì)（本身酸性）染成藍色酸性染料將嗜酸性物質(zhì)（本身堿性）染成紅色細胞核中的DNA、RNA,細胞質(zhì)中的RNA細胞質(zhì)、膜性結(jié)構(gòu)（線粒體、溶酶體、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）Samplingfixedembeddedstaining光學顯微鏡Lightmicroscope

形態(tài)學研究石蠟切片冰凍切片鋪片磨片涂片

smearGroundsectionStretched電鏡技術（ElectronMicroscopy）

透射電鏡（Transmissionelectronmicroscopy

TEM）:

取材固定包埋超薄切片電子染色透射成像

用途:觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)

掃描電鏡（ScanningelectronmicroscopySEM）:取材固定干燥噴金掃描成像

用途:觀察組織或細胞表面的立體結(jié)構(gòu)

掃描電鏡（Scanningelectronmicroscope,SEM）

觀察細胞或組織的表面結(jié)構(gòu)以電子束穿透樣品,經(jīng)聚合放大后,顯像于熒光屏上進行觀察與攝片

透射電子顯微鏡

Transmissionelectronmicroscope觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)組織塊經(jīng)取材固定后,干燥,在標本表面先后噴一層碳膜和合金膜,鏡下掃描成像冷凍蝕刻復型術(freezeetchreplica)兔胰腺腺細胞的冷凍割斷電鏡像×2000冷凍蝕刻復型術組織化學和細胞化學技術(histochemistry&cytochemistry)

利用化學或物理反應原理顯示組織切片或細胞內(nèi)某種化學成分,進行定位,定量及其與功能相關的研究.

過碘酸Schiff反應(periodicacidSchiffreaction)：簡稱

PAS反應，是確定組織或細胞中有無多糖存在的一種方法。

原理：多糖PA氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀

多糖顯示法—》PAS反應

DNA顯示法------》Feulgen反應免疫細胞（組織）化學:利用抗原（antigen,Ag），抗體（antibody）特異結(jié)合的原理，