醫(yī)學(xué)實驗室中的常見檢測技術(shù)

醫(yī)學(xué)實驗室中的常見檢測技術(shù)匯報人：XX2024-01-24目錄CONTENTS免疫學(xué)檢測技術(shù)生化分析技術(shù)血液學(xué)檢測技術(shù)遺傳學(xué)檢測技術(shù)微生物學(xué)檢測技術(shù)組織細(xì)胞學(xué)檢測技術(shù)01免疫學(xué)檢測技術(shù)03抗原抗體反應(yīng)的特點特異性、比例性、可逆性。01抗原能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答，并能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物抗體和致敏淋巴細(xì)胞在體內(nèi)外結(jié)合，發(fā)生免疫效應(yīng)的物質(zhì)。02抗體機(jī)體在抗原物質(zhì)刺激下，由B細(xì)胞分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白?？乖贵w反應(yīng)原理雙向免疫擴(kuò)散法對流免疫電泳法免疫沉淀法將雙向免疫擴(kuò)散與電泳相結(jié)合的定向加速的免疫擴(kuò)散技術(shù)，在電場作用下，抗原與抗體向相反方向移動，最適比例的抗原抗體復(fù)合物在瓊脂凝膠中沉淀，形成火箭狀的沉淀峰?？扇苄钥乖c相應(yīng)抗體在瓊脂凝膠中彼此擴(kuò)散，在比例處形成沉淀線，觀察有無沉淀線產(chǎn)生及沉淀線的位置，即可對抗原或抗體進(jìn)行定性分析。直接凝集反應(yīng)細(xì)菌、螺旋體和紅細(xì)胞等顆粒性抗原，在適當(dāng)?shù)碾娊赓|(zhì)參與下可直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集。間接凝集反應(yīng)將可溶性抗原或抗體先吸附于適當(dāng)大小的顆粒性載體（如乳膠、明膠等）的表面，使之成為致敏顆粒，然后與相應(yīng)抗體或抗原作用，在有電解質(zhì)存在的條件下，發(fā)生特異性凝集。免疫凝集法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）使抗原或抗體與酶結(jié)合成酶標(biāo)抗原或抗體，通過包被于固相載體上的抗原或抗體與待測物中的相應(yīng)抗體或抗原發(fā)生特異性結(jié)合后，再添加酶底物進(jìn)行顯色反應(yīng)，根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析的方法。放射免疫測定（RIA）以放射性核素標(biāo)記抗原或抗體進(jìn)行的免疫測定。具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、精密度好等優(yōu)點，常用于各種激素、藥物、小分子物質(zhì)的檢測。免疫標(biāo)記法02生化分析技術(shù)紫外-可見光譜法紅外光譜法原子發(fā)射光譜法光譜分析法利用物質(zhì)在紫外和可見光區(qū)的吸收光譜進(jìn)行定性和定量分析。通過測量物質(zhì)在紅外光區(qū)的吸收光譜，研究分子的振動和轉(zhuǎn)動能級，從而確定物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)和化學(xué)鍵信息。通過測量物質(zhì)中原子或離子在受激發(fā)后發(fā)射的特征光譜進(jìn)行元素分析。通過測量化學(xué)電池的電動勢來確定待測物質(zhì)的含量，如pH計測量溶液酸堿度。電位分析法電導(dǎo)分析法庫侖分析法測量溶液的電導(dǎo)或電導(dǎo)率，從而確定溶液中離子的濃度或種類。通過測量電解過程中所消耗的電量來確定待測物質(zhì)的含量。030201電化學(xué)分析法

色譜分析法薄層色譜法在薄層板上進(jìn)行色譜分離和定性定量分析的方法，具有快速、簡便、靈敏度高等優(yōu)點。高效液相色譜法采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，實現(xiàn)各成分分離。氣相色譜法利用氣體作為流動相，將樣品帶入色譜柱進(jìn)行分離和分析的方法，適用于揮發(fā)性有機(jī)物的分析。123介紹質(zhì)譜儀的主要組成部分，如離子源、質(zhì)量分析器、檢測器等，并闡述其工作原理。質(zhì)譜儀的組成和工作原理詳細(xì)解釋質(zhì)譜圖的含義和解析方法，包括分子離子峰、碎片離子峰、同位素峰等的識別和分析。質(zhì)譜圖的解析列舉質(zhì)譜法在醫(yī)學(xué)實驗室中的常見應(yīng)用，如蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、藥物分析等領(lǐng)域的應(yīng)用實例。質(zhì)譜法在醫(yī)學(xué)實驗室中的應(yīng)用質(zhì)譜分析法03血液學(xué)檢測技術(shù)血液常規(guī)檢測紅細(xì)胞計數(shù)（RBC）和血紅蛋白濃度（Hb）用于評估貧血或紅細(xì)胞增多癥。紅細(xì)胞壓積（Hct）和平均紅細(xì)胞體積（M…用于鑒別貧血類型。白細(xì)胞計數(shù)（WBC）和分類用于評估感染、炎癥或白血病。血小板計數(shù)（PLT）用于評估出血傾向或血栓形成風(fēng)險。1234血糖（Glu）電解質(zhì)（如鉀、鈉、氯）血脂（包括膽固醇和甘油三酯）肝功能指標(biāo)（如谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶）血液生化檢測用于評估糖尿病或低血糖癥。用于評估心血管疾病風(fēng)險。用于評估水電解質(zhì)平衡。用于評估肝臟功能或損傷。血液免疫學(xué)檢測免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）用于評估免疫功能或免疫缺陷病。補(bǔ)體（C3、C4）用于評估免疫系統(tǒng)疾病活動度。自身抗體（如抗核抗體、類風(fēng)濕因子）用于診斷自身免疫性疾病。細(xì)胞免疫指標(biāo)（如T細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞活性）用于評估細(xì)胞免疫功能。血液微生物學(xué)檢測用于診斷敗血癥等嚴(yán)重感染。如凝集試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA），用于診斷感染性疾病。如PCR技術(shù)，用于快速、靈敏地檢測病原微生物。用于指導(dǎo)臨床抗生素使用，提高治療效果。血培養(yǎng)血清學(xué)試驗分子生物學(xué)方法藥物敏感試驗04遺傳學(xué)檢測技術(shù)123第二代測序技術(shù)Sanger測序法第三代測序技術(shù)DNA測序技術(shù)利用DNA聚合酶和特異性引物進(jìn)行DNA鏈的延伸，通過熒光標(biāo)記的ddNTP終止反應(yīng)，得到不同長度的DNA片段，再通過毛細(xì)管電泳分離和熒光檢測，得到DNA序列信息。也稱為高通量測序技術(shù)，采用邊合成邊測序的原理，利用熒光標(biāo)記的dNTP和DNA聚合酶進(jìn)行DNA鏈的合成，同時捕捉熒光信號并轉(zhuǎn)化為堿基序列信息。具有高通量、高靈敏度、低成本等優(yōu)點。也稱為單分子測序技術(shù)，無需PCR擴(kuò)增，直接對單個DNA分子進(jìn)行測序。具有讀長長、錯誤率低、可檢測表觀遺傳修飾等優(yōu)點。SNP芯片用于檢測單核苷酸多態(tài)性（SNP），將特異性寡核苷酸固定在芯片上，通過與樣本中DNA的雜交，檢測SNP位點的變異情況?；虮磉_(dá)譜芯片用于檢測細(xì)胞中基因表達(dá)的差異，將cDNA或寡核苷酸片段固定在芯片上，通過與樣本中RNA的雜交，檢測基因的表達(dá)水平?；蚪M重測序芯片用于全基因組范圍內(nèi)的重測序，通過將基因組DNA打斷成小片段并固定在芯片上，再與熒光標(biāo)記的探針雜交，實現(xiàn)基因組序列的高通量檢測?；蛐酒夹g(shù)單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序01用于研究單個細(xì)胞的基因表達(dá)情況，通過將單個細(xì)胞分離并進(jìn)行RNA提取、反轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增，再進(jìn)行高通量測序，得到單細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組信息。單細(xì)胞基因組測序02用于研究單個細(xì)胞的基因組變異情況，通過將單個細(xì)胞分離并進(jìn)行DNA提取、擴(kuò)增和建庫，再進(jìn)行高通量測序，得到單細(xì)胞的基因組信息。單細(xì)胞表觀遺傳組測序03用于研究單個細(xì)胞的表觀遺傳修飾情況，如DNA甲基化、組蛋白修飾等。通過將單個細(xì)胞分離并進(jìn)行相應(yīng)的處理和分析，得到單細(xì)胞的表觀遺傳組信息。單細(xì)胞測序技術(shù)遺傳性疾病的產(chǎn)前診斷利用遺傳學(xué)檢測技術(shù)對胎兒進(jìn)行遺傳性疾病的產(chǎn)前診斷，以避免嚴(yán)重遺傳性疾病患兒的出生。遺傳咨詢與風(fēng)險評估結(jié)合遺傳學(xué)檢測結(jié)果和家族史等信息，為個體或家庭提供遺傳咨詢和風(fēng)險評估服務(wù)，幫助了解自身遺傳背景和潛在風(fēng)險。基因突變篩查通過遺傳學(xué)檢測技術(shù)對特定基因或基因區(qū)域進(jìn)行突變篩查，以預(yù)測或診斷遺傳性疾病的風(fēng)險或發(fā)生情況。遺傳性疾病的篩查與診斷05微生物學(xué)檢測技術(shù)選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，根據(jù)細(xì)菌的生長特性和營養(yǎng)需求進(jìn)行制備。培養(yǎng)基制備將待檢樣本接種到培養(yǎng)基上，提供適宜的溫度、濕度和氣體環(huán)境，促進(jìn)細(xì)菌生長。接種與培養(yǎng)通過觀察菌落形態(tài)、革蘭染色、生化反應(yīng)等方法對細(xì)菌進(jìn)行鑒定。細(xì)菌鑒定細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定技術(shù)采用細(xì)胞培養(yǎng)或動物接種等方法，將病毒從樣本中分離并進(jìn)行培養(yǎng)。病毒分離與培養(yǎng)利用抗原抗體反應(yīng)原理，通過酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、免疫熒光等方法檢測病毒抗原或抗體。免疫學(xué)方法采用PCR、基因測序等技術(shù)，對病毒核酸進(jìn)行檢測和分析。分子生物學(xué)方法病毒檢測技術(shù)通過顯微鏡直接觀察樣本中的真菌形態(tài)和結(jié)構(gòu)。直接鏡檢將樣本接種到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上，培養(yǎng)真菌并進(jìn)行鑒定。培養(yǎng)法利用真菌特異性抗原，通過免疫學(xué)方法檢測患者血清中的真菌抗體。血清學(xué)方法真菌檢測技術(shù)顯微鏡檢查通過顯微鏡觀察樣本中的寄生蟲蟲體或蟲卵。免疫學(xué)方法利用寄生蟲特異性抗原或抗體，通過免疫學(xué)方法進(jìn)行檢測。分子生物學(xué)方法采用PCR、基因測序等技術(shù)，對寄生蟲核酸進(jìn)行檢測和分析。寄生蟲檢測技術(shù)06組織細(xì)胞學(xué)檢測技術(shù)將組織經(jīng)固定、脫水、透明、浸蠟等步驟后，用石蠟包埋并切片，用于組織學(xué)觀察和病理診斷。石蠟切片技術(shù)將新鮮組織快速冷凍后切片，適用于需要快速制片和觀察的情況，如術(shù)中病理診斷。冰凍切片技術(shù)利用超薄切片機(jī)將組織切成極薄的片層，用于電子顯微鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。超薄切片技術(shù)組織切片技術(shù)細(xì)胞系培養(yǎng)通過傳代培養(yǎng)建立的具有穩(wěn)定生長特性和特定功能的細(xì)胞群體，用于長期實驗和大量生產(chǎn)。細(xì)胞觀察技術(shù)包括普通光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡等多種觀察手段，用于觀察細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能。原代細(xì)胞培養(yǎng)直接從機(jī)體取出的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，用于研究細(xì)胞的正常生理功能及藥物等作用對細(xì)胞的影響。細(xì)胞培養(yǎng)與觀察技術(shù)通過標(biāo)記DNA斷裂點的末端來檢測細(xì)胞凋亡，適用于石蠟切片和冰凍切片。TUNEL法利用AnnexinV與磷脂酰絲氨酸的特異性結(jié)合來檢測細(xì)胞凋亡，適用于流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡觀察。AnnexinV法通過檢測Caspase酶的活性來反映細(xì)胞凋亡的程度，適用于細(xì)胞裂解液和組織勻漿