漢坦皰疹課件

出血熱病毒（ViralHemorrhagicFever,VHF)

指由節(jié)肢動(dòng)物或嚙齒類動(dòng)物傳播，引起出血熱的一大類病毒。

1、臨床特征：高熱、出血、低血壓和高死亡率；

2、自然疫源性疾病，動(dòng)物傳給人后，通過(guò)人-人傳播，造成流行或暴發(fā)流行；

3、均為有包膜的RNA病毒。1漢坦病毒2

漢坦病毒（Hantavirus）是腎綜合癥出血熱(hemorrhagicfeverwithrenalsyndrome,HFRS)的病原。HFRS于20世紀(jì)30年代在亞洲流行。1978年首次由韓國(guó)學(xué)者李鎬汪從韓國(guó)漢灘河附近疫區(qū)捕獲的黑線姬鼠中分離。是布尼亞病毒科(Bunyaviridae)的一個(gè)新屬。根據(jù)抗原性及基因結(jié)構(gòu)特征，分6個(gè)型。3

黑線姬鼠4Ⅰ型Ⅱ型Ⅲ型Ⅳ型5生物學(xué)特性形態(tài)與結(jié)構(gòu)球形、卵圓形或多形態(tài)，Φ120nm。包膜：雙層脂質(zhì)，兩種糖蛋白刺突（G1、G2），均有血凝素抗原和中和抗原決定簇。核衣殼：螺旋對(duì)稱。核心：（-）ssRNA，含長(zhǎng)、中、短三個(gè)不連續(xù)片段，分別編碼RNA多聚酶（L）、糖蛋白（G1、G2）和核蛋白（N）。

6

漢坦病毒(×200,000)

7

漢坦病毒結(jié)構(gòu)模式圖L、M、S為基因片段G1、G2為包膜糖蛋白N為核蛋白8抗原分型

6個(gè)血清型。WHO認(rèn)定4型：I型漢灘病毒、II型漢城病毒、Ⅲ型普馬拉病毒，Ⅳ型希望山病毒。在我國(guó)為I型（姬鼠型或野鼠型，A型）；II型（家鼠型或大鼠型，R型）。培養(yǎng)特性

在人肺傳代細(xì)胞(A549)、非洲綠猴腎細(xì)胞(VeroE6)等增殖，不引起細(xì)胞病變，IFA查病毒抗原。易感動(dòng)物

黑線姬鼠、長(zhǎng)爪沙鼠、乳鼠、金地鼠等。抵抗力

對(duì)脂溶劑敏感，怕酸（＜pH3）耐堿，怕熱（60℃1h）耐冷（4～20℃）。9

長(zhǎng)爪沙鼠10流行環(huán)節(jié)-1地區(qū)性：與鼠類分布有關(guān)。我國(guó)山西、河南和城市疫區(qū)以褐家鼠為主，林區(qū)以大林姬鼠、農(nóng)村以黑線姬鼠為主。季節(jié)性：四季發(fā)病，但有明顯高峰季節(jié)。以姬鼠傳播者以11～1月為高峰，5～7月為小高峰。家鼠傳播者3～5月為高峰，林區(qū)姬鼠傳播者夏季為流行高峰。周期性：發(fā)病率呈一定周期性波動(dòng)。姬鼠和棕背坪鼠為主要傳染源的疫區(qū)，相隔數(shù)年一次大流行；家鼠為傳染源的疫區(qū)，周期性不明顯。流行高峰之前，主要傳染源密度增高，帶毒率也增高。11流行環(huán)節(jié)-2傳染源:

嚙齒類動(dòng)物，以鼠類為主，既是傳染源又是儲(chǔ)存宿主，通過(guò)唾液、尿和糞便污染環(huán)境。傳播途徑：

（1）呼吸道傳播：通過(guò)氣溶膠傳播；（2）消化道傳播：動(dòng)物排泄物污染食物；（3）接觸傳播：直接接觸或破損皮膚感染；（4）垂直傳播：HFRS可傳給胎兒；（5）蟲(chóng)媒傳播：螨類可能是傳播媒介；易感人群：人類易感，HFRS疫區(qū)隱性感染率3.5-4.3%;與野生動(dòng)物接觸多者感染率高。12

流行狀況–120世紀(jì)30年代前蘇聯(lián)遠(yuǎn)東地區(qū)發(fā)現(xiàn)“流行性出血性腎炎”，以發(fā)熱、出血和少尿?yàn)橹饕Y狀；1935年黑龍江孫吳地區(qū)，侵華日軍發(fā)現(xiàn)“二道崗病”或“孫吳熱”1942年確定為獨(dú)立疾病，命名為“流行性出血熱”；1951年朝鮮戰(zhàn)場(chǎng)美軍出現(xiàn)“朝鮮出血熱”；1960年日本大阪出現(xiàn)輕型患者，1975年日本發(fā)生實(shí)驗(yàn)室感染；1934年以來(lái)的北歐芬蘭、瑞典、挪威和東歐捷克、匈牙利、保加利亞等多次出現(xiàn)“流行性腎病”的流行。13

流行狀況-2HFRS呈世界性分布，在31個(gè)國(guó)家和地區(qū)流行，主要是我國(guó)和韓國(guó)，次為俄羅斯、芬蘭和前南斯拉夫等。我國(guó)是重災(zāi)區(qū)，發(fā)病人數(shù)占全世界發(fā)病總數(shù)的90%。除青海和新疆尚未發(fā)現(xiàn)外，其余30個(gè)省市和自治區(qū)均有報(bào)道，包括臺(tái)灣。20世紀(jì)50年代報(bào)道病例數(shù)百計(jì)，60年代以千計(jì)，70年代數(shù)以萬(wàn)計(jì)，80年代高達(dá)10萬(wàn)計(jì)，通過(guò)滅鼠等防治措施，90年代以來(lái)病例數(shù)有所下降。病死率為3%～20%不等，一般為5%左右。14流行病學(xué)特征根據(jù)傳染源不同分為3個(gè)類型：①野鼠型：主要由野外黑線姬鼠傳播，多發(fā)生在農(nóng)業(yè)區(qū)，青壯年易感，一般病情較重；②家鼠型：由褐家鼠傳播，農(nóng)村和城市均可發(fā)生，病情較輕，多無(wú)典型的5期經(jīng)過(guò)；③大白鼠型：發(fā)生在以大白鼠或小白鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象的實(shí)驗(yàn)室。15臨床表現(xiàn)潛伏期：1-2周；典型臨床表現(xiàn)：高熱，出血和腎損害。典型臨床過(guò)程：發(fā)熱期，低血壓（休克）期，少尿期，多尿期和恢復(fù)期。16致病機(jī)理可能除病毒直接在胞漿內(nèi)增殖造成細(xì)胞臟器損傷和作用于血管引起血管舒縮、功能障礙、微循環(huán)障礙以及血管通透性增高外，還可能有免疫病理反應(yīng)參與。最近報(bào)道，患者骨髓細(xì)胞中存在病毒抗原，并分離出漢坦病毒。據(jù)此推測(cè)，病毒侵犯骨髓前體細(xì)胞，從而妨礙免疫細(xì)胞的正常發(fā)育，因而導(dǎo)致免疫功能失調(diào)及血小板的嚴(yán)重減少。17易感性：人群普遍易感，流行區(qū)隱性感染率低（3.5%～4.3%）。免疫性：持久免疫（特異性IgM和IgG）。I型特異性IgG可維持1-30年，對(duì)II型病毒有交叉免疫。II型IgG多在2年內(nèi)消失，對(duì)I型病毒有交叉免疫力，但不強(qiáng)。18

癥狀典型的患者，根據(jù)臨床癥狀即可診斷。但非典型患者在疾病早期癥狀類似流感，不易做出確診，故用微生物學(xué)檢查方法進(jìn)行輔助診斷，甚為重要。

微生物學(xué)檢查原則主要為病毒分離及血清學(xué)檢查，近年又相繼建立了敏感、特異的病毒抗原檢測(cè)法及病毒核酸檢查法。

微生物學(xué)檢查法19微生物學(xué)檢查

病毒的分離及鑒定：用VeroE6單層細(xì)胞培養(yǎng)法或動(dòng)物接種法(2～4d齡乳鼠、黑線姬鼠等)分離病毒。

血清學(xué)診斷：恢復(fù)期血清較急性期血清抗體效價(jià)升高4

倍以上即有診斷意義。特異抗原檢查：用免疫熒光法或酶標(biāo)抗體法檢測(cè)白細(xì)胞或尿沉渣細(xì)胞內(nèi)的特異抗原。也可用ELISA法檢測(cè)病人尿中病毒抗原。病毒核酸檢查：用PCR、核酸雜交試驗(yàn)檢測(cè)病毒核酸。20防治原則消滅傳染源：采取有效措施滅鼠，并注意處理鼠的排泄物，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的管理。切斷傳播途徑：加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)，避免呼吸道及接觸感染。并保證食品和個(gè)人衛(wèi)生。對(duì)高發(fā)病地區(qū)及其他疫區(qū)的高危人群應(yīng)推行疫苗接種。21我國(guó)研制成功的①金黃地鼠腎細(xì)胞滅活疫苗，②長(zhǎng)爪沙鼠腎細(xì)胞滅活疫苗，③純化乳鼠腦滅活疫苗,前二者保護(hù)率達(dá)93-97%。疫苗接種應(yīng)在流行高峰季節(jié)前半～1個(gè)月內(nèi)完成。初次免疫一年后應(yīng)加強(qiáng)接種一次。鑒于我國(guó)疫區(qū)多為混合型等特點(diǎn)，建議以接種雙價(jià)疫苗為宜。預(yù)防22治療早期患者，一般采用臥床休息“液體療法”（輸液調(diào)節(jié)水和電解質(zhì)平衡）病毒唑具有一定療效。23一級(jí)恐怖：埃博拉病毒狂奪人命24埃博拉病毒（EbolafeverVirus）

非洲出血熱(Africahaemorrhagicfever)包括埃博拉熱(Ebolafever)和馬堡熱(Marburgfever)，前者由埃博拉病毒引起，后者由馬堡病毒所致。兩者均為RNA病毒。非洲出血熱病毒的儲(chǔ)存宿主是嚙齒類動(dòng)物。偶然經(jīng)接觸傳播給人。人與人的傳播主要是密切接觸以及體液(唾液、尿、糞便)等的污染。25非洲出血熱的主要特點(diǎn)是高熱、皮膚瘀血、紫癜、鼻衄、消化道和泌尿生殖道出血、血小板減少和明顯的全身中毒癥狀，常導(dǎo)致休克和死亡。尚無(wú)特異性防治措施，以維持腎功能和水電解質(zhì)平衡、積極控制出血和休克等支持療法為主。26生物學(xué)性狀

病毒顆粒具有多形性，呈管狀、絲狀或索狀等，直徑為

80nm。病毒的核酸為-ssRNA。核衣殼呈螺旋對(duì)稱。外有脂蛋白包膜，有刺突。病毒在人、猴、豚鼠等哺乳動(dòng)物細(xì)胞中增殖，在感染的細(xì)胞內(nèi)能形成包涵體。27臨床特點(diǎn)

經(jīng)過(guò)3-7天的潛伏期，突然發(fā)病。早期出現(xiàn)流感樣非特異癥狀，發(fā)病后5-7

天出現(xiàn)嚴(yán)重的出血。發(fā)病后7-16天出現(xiàn)死亡。死亡的主要原因是出血性休克。死亡率為

50%-90%。28致病性與免疫性

在致命性感染中，表現(xiàn)為嚴(yán)重的體液免疫反應(yīng)受損；測(cè)不到病毒特異性IgG和IgM抗體；誘導(dǎo)免疫抑制是病毒感染具有高度致死性的原因之一。29微生物學(xué)檢查法

檢測(cè)病毒特異性IgG、IgM

檢測(cè)病毒抗原檢測(cè)病毒核酸:RT-PCR30預(yù)防原則目前尚無(wú)有效的疫苗主要防治措施是：加強(qiáng)對(duì)感染者的隔離以及對(duì)實(shí)驗(yàn)室和醫(yī)護(hù)人員的保護(hù)。31引起人類疾病的病毒單純皰疹病毒

(Herpessimplexvirus)32

分科（亞科）α皰疹病毒（HSV，VZV）：迅速增殖，產(chǎn)生細(xì)胞病變，宿主范圍廣，引起神經(jīng)組織潛伏感染；β皰疹病毒（CMV）：宿主范圍窄，生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)，致感染細(xì)胞形成巨細(xì)胞；造成唾液腺、腎和單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)潛伏感染；γ皰疹病毒（EBV）：宿主最窄，靶細(xì)胞為B細(xì)胞，長(zhǎng)期潛伏。

33

皰疹病毒科中人類皰疹病毒家系α皰疹病毒亞科β皰疹病毒亞科γ皰疹病毒亞科3435皰疹病毒特點(diǎn)球形，直徑為120-300nm；外有脂蛋白包膜,上有糖蛋白刺突；核衣殼為20面體立體對(duì)稱(120nm,162個(gè)殼粒)，周圍有一層厚薄不等的非對(duì)稱性披膜,內(nèi)為雙股線狀DNA。在人二倍體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制(除EBV)，并出現(xiàn)明顯細(xì)胞病變,核內(nèi)嗜酸性包涵體；細(xì)胞融合形成多核巨細(xì)胞（通過(guò)細(xì)胞間橋直接擴(kuò)散）。病毒感染宿主細(xì)胞后，可引起多種感染類型：36感染類型

顯性感染:病毒大量增殖，破壞細(xì)胞，出現(xiàn)臨床癥狀；潛伏感染:病毒不增殖，也不破壞細(xì)胞，病毒與宿主細(xì)胞處于暫時(shí)平衡狀態(tài)，病毒基因組的表達(dá)受到抑制。一旦病毒被激活，可轉(zhuǎn)為顯性感染；

整合感染:病毒基因組的一部分可整合于宿主細(xì)胞的DNA中，導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化。與某些皰疹病毒的致癌機(jī)理密切相關(guān)；先天性感染:病毒經(jīng)胎盤感染胎兒，可引起先天畸形。37單純皰疹病毒（Herpessimplexvirus,HSV）引起單純皰疹，一種常見(jiàn)且歷史古老的傳染性皮膚病，最早記載見(jiàn)于古希臘。18世紀(jì)出現(xiàn)臨床病例；由于工業(yè)革命促使人口居住密集，通過(guò)性傳播的機(jī)會(huì)增加，導(dǎo)致臨床病例增多，直到19世紀(jì)才認(rèn)識(shí)其傳染性。20世紀(jì)30年代，發(fā)現(xiàn)單純皰疹的抗體不能阻止其復(fù)發(fā)，提出皰疹病毒潛伏感染的概念。38生物學(xué)特性-11.病毒的結(jié)構(gòu)

3種形態(tài)衣殼：A型空衣殼；B型含特殊衣殼蛋白VP22a，很少或無(wú)DNA；C型成熟核衣殼，無(wú)VP22a；10種包膜糖蛋白：gB(與吸附融合有關(guān))，gC(補(bǔ)體C3的受體)、gD(刺激產(chǎn)生強(qiáng)中和抗體，研制亞單位疫苗)，gE(與gI復(fù)合物是IgGFc受體)、gG(型特異性抗原)、gH、gI、gJ、gL和gM。4種內(nèi)膜蛋白：與激活病毒DNA、啟動(dòng)基因組轉(zhuǎn)錄和抑制宿主細(xì)胞蛋白合成有關(guān)。39

單純皰疹病毒結(jié)構(gòu)示意圖40生物學(xué)特性-22.基因組DNA:長(zhǎng)片段(L)和短片段(S)共價(jià)連接，L和S片段兩端均有反向重復(fù)序列；L和S可以正向和反向方式互相連接，形成4種異構(gòu)體。3.血清型:根據(jù)型特異性抗原gG分HSV-1和HSV-2，兩型病毒基因組DNA有50%的同源性。41

HSV基因組的4種異構(gòu)體

原型S段倒置S、L段倒置L段倒置b’

a’

ab

a’c’

caacc’a’caa’c’a’b’baa’b’baacc’a’

ab

b’

a’

42致病性與免疫性全世界約1/3人口患過(guò)單純皰疹。臨床特征為皮膚粘膜成簇出現(xiàn)單房性小水皰，主要發(fā)生在面部或生殖器等局部，易于復(fù)發(fā)。如發(fā)生皰疹性腦炎或全身播散性皰疹時(shí)，病情嚴(yán)重，可危及生命。HSV可導(dǎo)致宮內(nèi)感染，造成胎兒畸形。43傳染源：患者和健康帶毒者。傳播途徑：直接密切接觸、性接觸（為主要)，呼吸道（HSV-1）和消化道；垂直傳播。易感人群：人群普遍易感，成人抗體檢出率高（多為隱性感染獲得）。居住擁擠集中的人群或營(yíng)養(yǎng)不良者易發(fā)；性亂者為重要高危人群之一。

44先天性和新生兒感染孕婦因HSV-1原發(fā)感染或潛伏感染的病毒被激活，可經(jīng)胎盤感染胎兒，造成流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎或先天性畸形。分娩時(shí)造成新生兒皰疹感染。45

原發(fā)感染：HSV-1：半歲以上嬰兒；粘膜,角膜，結(jié)膜,皮膚和腦；HSV-2：生殖器粘膜。

潛伏感染：再發(fā)感染：增殖性感染HSV-1：三叉N節(jié)，頸上N節(jié)；HSV-2：骶N節(jié)。理化因素、病原感染或激素和免疫力↓

HSV沿感覺(jué)N纖維軸索下行至N末梢皮膚上皮細(xì)胞增殖，復(fù)發(fā)性局部皰疹。46HSV潛伏感染發(fā)生示意圖在感覺(jué)神經(jīng)節(jié)內(nèi)復(fù)制后以核衣殼形式潛伏感覺(jué)神經(jīng)節(jié)感覺(jué)神經(jīng)節(jié)在感覺(jué)神經(jīng)節(jié)內(nèi)激活后病毒復(fù)制增殖47原發(fā)感染唇皰疹膿性指頭炎生殖器皰疹齒齦炎48HSV-2與子宮頸癌的關(guān)系

關(guān)系密切,其根據(jù)是：

①患過(guò)生殖器皰疹的婦女，宮頸癌的發(fā)病率高；

②宮頸癌患者抗HSV-2抗體陽(yáng)性率高，效價(jià)也高；

③用免疫熒光檢查子宮頸癌脫落細(xì)胞涂片，可在細(xì)胞中查到HSV-2抗原；

④HSV-2作用于地鼠胚成纖維細(xì)胞可引起細(xì)胞轉(zhuǎn)化，將轉(zhuǎn)化細(xì)胞注射地鼠可誘生腫瘤；

⑤宮頸皰疹與宮頸癌好發(fā)部位相似，都在鱗狀上皮和柱狀上皮交界處；

⑥分子雜交試驗(yàn)證明宮頸癌細(xì)胞中有HSV-2的基因片段并有特異性mRNA存在。49免疫性原發(fā)感染后1周左右血中可出現(xiàn)中和抗體3-4周達(dá)高峰，可持續(xù)多年。中和抗體(中和游離病毒，阻止擴(kuò)散),但不能消除潛伏在神經(jīng)節(jié)中的病毒和阻止復(fù)發(fā)，只能減輕癥狀。細(xì)胞免疫可清除細(xì)胞內(nèi)病毒，更重要。

50HSV培養(yǎng)特性

HSV可在多種細(xì)胞中增殖，常用原代新生兔腎、人胚肺、人胚腎、人羊膜等細(xì)胞培養(yǎng)。病毒感染細(xì)胞后，CPE發(fā)展迅速，表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹、變圓和細(xì)胞核