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文檔簡介
實驗37有機磷農(nóng)藥中毒及其解救
【目的和原理】(1)觀察有機磷農(nóng)藥中毒癥狀,根據(jù)阿托品和解磷定對有機磷中毒解救的效果及血中膽堿酯酶(ChE)活性的變化,初步分析兩藥的解救原理。
(2)學習復制有機磷農(nóng)藥中毒模型。
(3)學習全血ChE活性測定法(三氯化鐵比色法)。
【實驗步驟及觀察項目】(1)取25~35g小白鼠1只,稱重后觀察其唾液分泌,大小便及有無肌顫等各項指標。然后從一側(cè)眼球取血100μl,作為標準管和用藥前正常ChE活力。
(2)按20mg/kg(0.08~0.09ml/10g)腹腔注射0.25%敵敵畏,觀察并記錄上述各項指標,待中毒癥狀(流涎、呼吸困難、大小便失禁、毛色濕潤、震顫)明顯后(6~10min)眼球取血50μl,然后立即腹腔注射0.05%阿托品0.1m1/10g,觀察癥狀的改變,5min后眼球取血50μl。
(3)腹腔注射2.5%解磷定0.06~0.08ml/10g,觀察癥狀的改變,10min后眼球取血50μl。
(4)另取小鼠1只,按0.15ml/10g腹腔注射0.25%敵敵畏,觀察小鼠中毒癥狀。(5)ChE活性測定:按表10-3全血膽堿酯酶活性測定步驟(P133)加入各種試劑,混勻,過濾,用721型分光光度計于525nm處測各樣品吸收度,根據(jù)結(jié)果計算ChE活力?!咀⒁馐马棥?.敵敵畏中毒的小白鼠極易死亡,注射后嚴密觀察中毒癥狀,一旦癥狀明顯后立即取血并搶救。
2.每次取血均應在眼球或取血皿上擦上肝素抗凝。
3.每次取血后,應立即放入已加有0.5ml磷酸緩沖液的試管中,按下述方法測定膽堿酯酶(ChE)活力。
4.為了防止光電管疲勞,分光光度計在不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷,以延長光電管的使用壽命。
5.取比色皿時,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,而不要碰比色皿的光學表面,以免受污染。
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