SN-T 5644.2-2023 出口食品中農(nóng)用化學物質(zhì)的快速檢測方法 拉曼光譜法 第2部分：孔雀石綠和結(jié)晶紫

學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載0ICS67.50學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載0CCSX04中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準2SN/T

5644.—20232出口食品中農(nóng)用化學物質(zhì)的快速檢測方法拉曼光譜法

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-中華人民共和國海關總署 發(fā)

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SN/T5644《出口食品中農(nóng)用化學物質(zhì)的快速檢測方法 拉曼光譜法》的第2部分。SN/T5644已經(jīng)發(fā)布了以下部分:———第1部分:總則;———第2部分:孔雀石綠和結(jié)晶紫;———第3部分:恩諾沙星和環(huán)丙沙星;———第4部分:多菌靈;———第5部分:噻菌靈;———第6部分:腈菌唑;———第7部分:毒死蜱;———第8部分:三唑磷;———第9部分:地蟲硫磷;———第10部分:亞胺硫磷。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由中華人民共和國海關總署提出并歸口。本文件起草單位:上海海關動植物與食品檢驗檢疫技術(shù)中心、上海體育學院、合肥海關技術(shù)中心、上海如海光電科技有限公司、上海安譜實驗科技股份有限公司。本文件起草人:古淑青、李晨、趙靜靜、鄧曉軍、沈辰婷、蔣穎婕、伊雄海、郭德華、韓芳、宋偉、于永愛、江晨舟。學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載2SN/T5644.—2023學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載2引 言出口食品中農(nóng)用化學物質(zhì)的快速檢測方法是為進一步確保出口食品質(zhì)量安全,為農(nóng)用化學物質(zhì)的風險研判提供現(xiàn)場監(jiān)測技術(shù)手段的方法。建立出口食品中農(nóng)用化學物質(zhì)的快速檢測標準方法體系是出口食品監(jiān)管機構(gòu)的重要任務。本系列標準SN/T5644《出口食品中農(nóng)用化學物質(zhì)的快速檢測方法

拉曼光譜法》旨在建立基于拉曼光譜法的出口食品中農(nóng)用化學物質(zhì)的快速定性篩查方法,擬由10個部分組成?！?部分:總則。目的在于為出口食品中農(nóng)用化學物質(zhì)的拉曼光譜快速檢測方法的建立提供通用要求?！?部分:孔雀石綠和結(jié)晶紫。目的在于為出口水產(chǎn)品中的孔雀石綠和結(jié)晶紫提供快速定性篩查方法。———第3部分:恩諾沙星和環(huán)丙沙星。目的在于為出口動物源性食品中的恩諾沙星和環(huán)丙沙星提供快速定性篩查方法?！?部分:多菌靈。目的在于為出口水果、蔬菜中的多菌靈提供快速定性篩查方法?！?部分:噻菌靈。目的在于為出口水果、蔬菜中的噻菌靈提供快速定性篩查方法。———第6部分:腈菌唑。目的在于為出口植物源性食品中的腈菌唑提供快速定性篩查方法?！?部分:毒死蜱。目的在于為出口植物源性食品中的毒死蜱提供快速定性篩查方法?！?部分:三唑磷。目的在于為出口植物源性食品中的三唑磷提供快速定性篩查方法?！?部分:地蟲硫磷。目的在于為出口水果中的地蟲硫磷提供快速定性篩查方法?！?0部分:亞胺硫磷。目的在于為出口水果中的亞胺硫磷提供快速定性篩查方法。學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載10cm ,39cm-1±10cm-1學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載10cm ,39cm-1±10cm-1,

215cm-1±10cm-1,

610cm-1±10cm-1,結(jié)晶紫拉曼特征位移為795cm ±10cm ,39cm-1±10cm-1,610cm-1±10cm-1

處的拉曼特征峰作為孔雀石綠和結(jié)晶2出口食品中農(nóng)用化學物質(zhì)的快速檢測方法拉曼光譜法第2部分:孔雀石綠和結(jié)晶紫1

范圍本文件規(guī)定了水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫快速檢測方法。本文件適用于蝦、蟹、魚、貝類中孔雀石綠及其代謝隱色孔雀石綠及結(jié)晶紫及其代謝隱色紫殘留量的檢測。2

規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對應的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T19857

水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法3

術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4

方法提要不同物質(zhì)具有與其分子結(jié)構(gòu)相對應的特征拉曼光譜。試樣經(jīng)過超聲萃取,離心,反萃取后,通過表面增強納米粒子進行拉曼信號增強后,進行拉曼光譜掃描。以孔雀石綠拉曼特征位移為795cm-1±-1-1 -1紫特征峰進行快速篩查定性分析。5

試劑和材料除另有規(guī)定外,本方法所用試劑均為分析純或以上,水為

GB/T6682規(guī)定的一級水。15. 試劑1115.. 乙腈(色譜純)。11125.. 乙酸乙脂(色譜純)。1213145.. 石油醚(沸程60℃~90℃)。13145.. 無水硫酸鈉。1中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子質(zhì)量隱色孔雀石綠LeucomalachiteGreen129-73-7C23H26N2330.4659隱色結(jié)晶紫LeucocrystalViolet603-48-5C25H31N3.373.5337注:或等同可溯源物質(zhì)。．ｂｚｆｗｗｘｗ．ｃｏｍ標準學兔兔ｗ下載2SN/T5644.—2023．ｂｚｆｗｗｘｗ．ｃｏｍ標準學兔兔ｗ下載215165.. 氫氧化鉀。15165.. 硼氫化鉀。175.. 二氯二氰對苯醌。17185.. 濃鹽酸(質(zhì)量濃度37%)。18195.. 二氯二氰對苯醌0.1%(DDQ):取0.1g二氯二氰對苯醌溶于10ml乙酸乙脂,加入適量無水19硫酸鈉,于4℃避光保存。 ( 811 (

1 1 2115..0

鹽酸

0.01mol/L):量取0.3ml ( 811 (

1 1 2115..1

硼氫化鉀

0.

mol/L):取0.

g氫氧化鉀溶于50ml水中,再加入0.697g硼氫化鉀,于4℃避光保存,可保存1周。115..2

表面增強試劑:納米金溶膠或相當者。114表面增強試劑的參考配制方法:納米金溶膠在100mL圓底燒瓶中加入聚四氟乙烯磁力攪拌子和450mL的0.1%氯金酸溶液,將圓底燒瓶中溶液加熱至沸騰后迅速加入0.

mL的1%檸檬酸三鈉水溶液,保持沸騰狀態(tài),加熱回流30min即可制得金納米粒子,反應結(jié)束后冰浴冷卻,裝入棕色試劑瓶中,0℃~4℃冷藏保存,有效期1個月。 8115..3

促凝劑:稱取5.5g碘化鉀,溶于100mL水中,搖勻,備用,或配制成其他相當?shù)臒o機鹽溶液 811注:本方法所述納米表面增強試劑及促凝劑信息及操作步驟是為給方法使用者提供方便,在使用本方法時不做限定。方法使用者在使用替代試劑或操作步驟前,對其進行考察,滿足本方法規(guī)定的各項性能指標。25. 參考物質(zhì)2215.. 標準物質(zhì)21C隱色孔雀石綠、隱色結(jié)晶紫和參考物質(zhì)中文名稱、英文名稱、AS號、分子式、相對分子質(zhì)量見表1,C純度≥99%。C表1

隱色孔雀石綠和隱色結(jié)晶紫中文名稱、英文名稱、AS號、分子式、相對分子質(zhì)量225.. 標準溶液配制1隱色孔雀石綠標準液(

mg/L):精密稱取隱色孔雀石綠標準品,用乙腈溶C表1

隱色孔雀石綠和隱色結(jié)晶紫中文名稱、英文名稱、AS號、分子式、相對分子質(zhì)量225.. 標準溶液配制1容量瓶中定容。制成濃度為1mg/L的標準儲備液。于4℃避光保存。( 1 1隱色孔雀石綠工作液

0.01mg/L):取隱色孔雀石綠標準液(

mg/L)

ml,乙腈溶解并稀釋( 1 1100mL容量瓶中定容,現(xiàn)用現(xiàn)配。1隱色結(jié)晶紫標準液(

mg/L):精密稱取隱色結(jié)晶紫標準品,用乙腈溶解并稀釋,置于100mL容量1瓶中定容。制成濃度為1mg/L的標準儲備液。于4℃避光保存。( 1 1隱色結(jié)晶紫工作液

0.01mg/L):取隱色結(jié)晶紫標準液(

mg/L)

ml,乙腈溶解并稀釋( 1 1100mL容量瓶中定容,現(xiàn)用現(xiàn)配。2學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載2SN/T5644.—2023學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載26

儀器和設備1 16. 便攜式拉曼光譜儀。穩(wěn)頻激光光源:發(fā)射波長為785nm±1nm,線寬<0.nm,能量≥2501 1光譜分辨率≤15cm-1;光譜響應范圍300cm-1~1800cm-1,或大于該響應范圍。2 1 236. 移液器:2 1 236.

渦旋振蕩器。46. 離心機:轉(zhuǎn)速≥4000r/min。456 :

5 56. 電子天平:感量為0.56 :

5 56. 塑料具塞離心管

1.

mL、

mL。7

測定步驟17. 試樣制備1魚去鱗、去皮,取可食用部分;蝦、蟹、貝去殼、腸腺,取可食用部分。切成可處理小塊,勻制成糜狀。27. 提取241g勻漿樣品于5mL離心管中,加2mL乙腈,再加1mL水,超聲3min,放入離心機,000r/min4轉(zhuǎn)速率心3min。取全部上層清液于5ml離心管待凈化。37. 凈化3( 55 95 (加硼氫化鉀

5.1.1)0μL,( 55 95 (1.

mL離心管,加DDQ(5.1.)0μL,加200μl鹽酸

5.1.0),搖勻震蕩,靜置取下層清液測定步驟。2注1:在7.

步驟中,離心后,可能會出現(xiàn)油脂層,取液時切勿帶入。2注2:以上步驟均因在通風櫥里進行。47. 測定4417.. 拉曼光譜儀器參考條件41拉曼光譜儀器參考條件包括激光能量和數(shù)據(jù)采集時間等,可以根據(jù)實際情況參考以下條件:a)

激光能量:≥250mW;b)

數(shù)據(jù)采集時間:≥1s;c)

采集次數(shù):平均次數(shù)2次。427.. 表面增強和測定424 3在儀器樣品池中依次加入40μL促凝劑,0μL樣品見(見7.),混勻靜置5min后,加入4 3納米表面增強試劑,快速搖晃均勻,上機檢測。437.. 質(zhì)控試驗434317... 陰性對照4312 3稱取空白試樣,按照7.

和7.

2 33學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載10cm 、610cm-1±10cm學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載10cm 、610cm-1±10cm-1),光譜圖見附錄

A中圖

A.,結(jié)晶紫表面增強拉曼光譜(拉曼特征位移為795cm ±10cm 、39cm ±10cm 、610cm ±10cm ),光譜圖見圖

A.。24327... 陽性對照432((( ( 5準確稱取空白試樣1g置于5mL離心管中,加入100μL隱色孔雀石綠標準工作液

((( ( 5或隱色結(jié)晶紫工作液

0.01mg/L),使為1μg/kg(蝦、蟹)。加入50μL隱色孔雀石綠標準工作液0.01mg/L)或隱色結(jié)晶紫工作液

0.01mg/L),使為0.

μg/kg(魚、貝),按照第7章樣品處理同法操作。8

結(jié)果計算和表述18.定性1儀器軟件將測試結(jié)果與標準譜圖庫中的孔雀石綠或結(jié)晶紫進行匹配計算,根據(jù)譜圖特征拉曼光譜特征峰,對樣品中的孔雀石綠或結(jié)晶紫判定:顯示測試結(jié)果并判定陰性或陽性。陰性代表該樣品含有的5孔雀石綠或結(jié)晶紫低于檢出限,蝦、蟹低于1μg/kg,魚、貝類低于0.

μg/kg。559 1陽性則代表該樣品含有孔雀石綠或結(jié)晶紫高于檢出限,蝦、蟹高于1μg/kg,魚、貝類高于0.59 1孔雀石綠表面增強拉曼光譜(拉曼特征位移為795cm-1±10cm-1、39cm-1±10cm-1、215cm-1±-1-1 -1 -1 -1 -1 -128. 確證2本方法為初篩方法,當檢測結(jié)果為陽性時,應采用參比標準方法進行確證。本方法參比標準為

GB/T19857。9

性能指標19. 檢測限15檢測限:蝦、蟹類1μg/kg;魚、貝類0.

μg/kg。529. 靈敏度2靈敏度應≥95%。39. 特異性3特