1.2.1微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

第1章發(fā)酵工程第2節(jié)一、微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)必備知識(shí)一、培養(yǎng)基二、無(wú)菌技術(shù)三、微生物的純培養(yǎng)拓展延伸高考鏈接模擬演練概述培養(yǎng)基的成分和配制方法區(qū)分消毒和滅菌，掌握不同物品的滅菌方法3.概述微生物純培養(yǎng)的基本操作要求一、培養(yǎng)基1．概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)——培養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。2．種類：培養(yǎng)基種類劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基特點(diǎn)作用固體培養(yǎng)基物理性質(zhì)加凝固劑，如瓊脂微生物的分離與鑒定，活菌計(jì)數(shù)，保藏菌種半固體培養(yǎng)基容器放倒不致流出，劇烈震動(dòng)則破散觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類鑒定液體培養(yǎng)基不加凝固劑常用于工業(yè)生產(chǎn)3．營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：(1)主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：水、碳源(提供碳元素的物質(zhì))、氮源(提供氮元素的物質(zhì))和無(wú)機(jī)鹽。(2)某種常見(jiàn)的細(xì)菌培養(yǎng)基——牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成組分含量提供的主要營(yíng)養(yǎng)牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸鹽和維生素等蛋白胨10g碳源、氮源和維生素等NaCl5g無(wú)機(jī)鹽H2O定容至1000mL水(3)培養(yǎng)基還需滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加維生素；在培養(yǎng)霉菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性；在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性；在培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，需要提供無(wú)氧的條件。無(wú)菌技術(shù)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。無(wú)菌技術(shù)應(yīng)圍繞著如何避免雜菌的污染展開(kāi)，主要包括消毒和_滅菌。1．消毒(1)概念：指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。(2)適用對(duì)象：操作的空間、操作者的衣著和手等。(3)常用方法：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法和紫外線消毒法①煮沸消毒法：100℃煮沸5～6min，可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢。②巴氏消毒法：62～65℃下消毒30min或80～90℃處理30s～1min，適合一些不耐高溫的液體，如牛奶?？梢詺⑺琅Ｄ讨械慕^大多數(shù)微生物，并且不破壞牛奶的營(yíng)養(yǎng)成分。③化學(xué)藥劑消毒法：用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等。④紫外線消毒法：接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)在使用前可用紫外線照射30min。在照射前，適量噴灑石碳酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加強(qiáng)消毒效果。2．滅菌(1)概念：指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。(2)適用對(duì)象：用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等。(3)常用方法：濕熱滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌等。①濕熱滅菌：利用沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。高壓蒸汽滅菌效果最好，100kPa、121℃下維持15～30min，常用于培養(yǎng)基、容器等的滅菌。②干熱滅菌：將滅菌物品放入密閉容器如干熱滅菌箱，在160～170℃的熱空氣中維持2～3h。常用于耐高溫和需要保持干燥的物品（如玻璃器皿、金屬用具等）。③灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如涂布器、接種環(huán)、接種針或其它金屬用具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層（外焰）灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇?。此外，在接種過(guò)程中，試管口、瓶口等容易被污染的部位，也可以通過(guò)灼燒來(lái)滅菌。三、微生物的純培養(yǎng)1．概念(1)培養(yǎng)物：在微生物學(xué)中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物。(2)純培養(yǎng)物：由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體。(3)純培養(yǎng)：獲得純培養(yǎng)物的過(guò)程。2．步驟：微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。3．酵母菌的純培養(yǎng)(1)原理：微生物群體分散或稀釋成單個(gè)細(xì)胞，單個(gè)細(xì)胞繁殖成單個(gè)菌落。菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，這就是菌落。(2)獲得單菌落的方法：采用平板劃線法和稀釋涂布平板法將單個(gè)微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。(3)步驟①配制培養(yǎng)基去皮，切塊的馬鈴薯加熱煮沸至軟爛后，用紗布過(guò)濾，向?yàn)V液中加入適量葡萄糖（也可用蔗糖代替）、瓊脂，用蒸餾水定容。②滅菌轉(zhuǎn)移至錐形瓶中的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌，培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌③倒平板待培養(yǎng)基冷卻到50°C左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板④接種和分離方法：平板劃線法原理：通過(guò)接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落⑤培養(yǎng)將接種后的平板和一個(gè)未接種的平板倒置放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4.平板劃線法操作步驟(1)第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開(kāi)始，這樣做的目的是：能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。(2)操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要進(jìn)行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束時(shí)，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的填寫下表：項(xiàng)目第一次操作每次劃線之前劃線結(jié)束目的殺死接種環(huán)上原有的微生物殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目減少殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者(3)平板劃線時(shí)最后一次劃線為不能與第一次劃線相連的原因：最后一次劃線已經(jīng)將酵母菌稀釋成單個(gè)細(xì)胞，如果與第一次劃線相連，則增加了酵母菌數(shù)目，得不到純化的效果。(4)在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線，以免溫度過(guò)高，殺死菌種。5．實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析(1)培養(yǎng)未接種的培養(yǎng)基的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基是否被雜菌污染(或檢查培養(yǎng)基制備是否合格)。未接種的培養(yǎng)基表面若有菌落生長(zhǎng)，則說(shuō)明培養(yǎng)基被污染，應(yīng)該重新制備；若無(wú)菌落生長(zhǎng)，則說(shuō)明未被污染。(2)在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到獨(dú)立的菌落，這些菌落在顏色、形狀和大小上相似，酵母菌菌落一般表面光滑，多呈乳白色。(3)若在培養(yǎng)基中觀察到不同形態(tài)的菌落，原因可能是菌液不純，混入其他雜菌，或在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中被雜菌污染。1.幾種微生物的營(yíng)養(yǎng)和能量來(lái)源微生物碳源氮源能源藍(lán)細(xì)菌CO2NHeq\o\al(＋,4)、NOeq\o\al(－,3)等光能硝化細(xì)菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖類等有機(jī)物N2有機(jī)物大腸桿菌糖類、蛋白質(zhì)等有機(jī)物蛋白質(zhì)等有機(jī)物2.芽孢和孢子芽孢：有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓形的休眠體(不是繁殖體)，叫作芽孢。芽孢的壁很厚，對(duì)干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。例如，有的細(xì)菌的芽孢煮沸3小時(shí)以后才死亡。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜(如溫度、水分適宜)的時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個(gè)細(xì)菌。孢子：細(xì)菌、原生動(dòng)物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有繁殖或休眠作用的生殖細(xì)胞。孢子的特點(diǎn)是能直接長(zhǎng)成新個(gè)體。酵母菌純培養(yǎng)注意的問(wèn)題(1)倒平板時(shí)，要使錐形瓶的瓶口通過(guò)酒精燈火焰。通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。(2)倒平板時(shí)，要用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全打開(kāi)，以免雜菌污染培養(yǎng)基。(3)平板冷凝后，要將平板倒置的原因：因?yàn)槠桨謇淠?，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，平板倒置后，既可避免培養(yǎng)基表面的水分過(guò)快地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(4)倒平板后不需要間歇晃動(dòng)，以保持表面平整。（2020江蘇卷）(5)培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到50°C左右時(shí)，開(kāi)始倒平板，其原因是瓊脂是一種多糖，在98°C以上會(huì)融化，在44°C以下會(huì)凝固，倒平板時(shí)高于50°C會(huì)燙手，低于50°C時(shí)，如不及時(shí)操作，瓊脂會(huì)凝固。(6)在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，那么這個(gè)平板不能用來(lái)培養(yǎng)微生物，因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡茉诿笊w與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。(7)在接種前隨機(jī)取若干個(gè)滅菌后的未接種的平板，先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。【例1】（2023·重慶·統(tǒng)考高考真題）垃圾分類有利于變廢為寶，減少環(huán)境污染。如圖為分類后餐廚垃圾資源化處理的流程設(shè)計(jì)。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．壓榨出的油水混合物可再加工，生產(chǎn)出多種產(chǎn)品B．添加的木屑有利于堆肥體通氣，還可作為某些微生物的碳源C．X中需要添加合適的菌種，才能產(chǎn)生沼氣D．為保證堆肥體中微生物的活性，不宜對(duì)堆肥體進(jìn)行翻動(dòng)【答案】D【分析】生態(tài)系統(tǒng)的功能包括能量流動(dòng)、物質(zhì)循環(huán)和信息傳遞，三者缺一不可；物質(zhì)循環(huán)是生態(tài)系統(tǒng)的基礎(chǔ)，能量流動(dòng)是生態(tài)系統(tǒng)的動(dòng)力，信息傳遞則決定著能量流動(dòng)和物質(zhì)循環(huán)的方向和狀態(tài)；信息傳遞是雙向的，能量流動(dòng)是單向的，物質(zhì)循環(huán)具有全球性?！驹斀狻緼、壓榨出的油水混合物可再加工，生產(chǎn)出多種產(chǎn)品，有利于實(shí)現(xiàn)物質(zhì)的循環(huán)再生和能量的多級(jí)利用，A正確；B、添加的木屑有利于堆肥體通氣，木屑也可作為某些微生物的碳源，B正確；C、X中需要添加合適的菌種，通過(guò)分解有機(jī)物才能產(chǎn)生沼氣，C正確；D、為保證堆肥體中微生物的活性，可以對(duì)堆肥體進(jìn)行翻動(dòng)，D錯(cuò)誤?！咀兪?1】（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）某同學(xué)想從泡菜汁中篩選耐高鹽乳酸菌，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：取泡菜汁樣品，劃線接種于一定NaCl濃度梯度的培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)得到了單菌落。下列敘述正確的是（

）A．培養(yǎng)基pH需偏堿性 B．泡菜汁需多次稀釋后才能劃線接種C．需在無(wú)氧條件下培養(yǎng) D．分離得到的微生物均為乳酸菌【答案】C【分析】泡菜是利用附生在蔬菜表面的植物乳桿菌、短乳桿菌和明串珠菌等發(fā)酵制成的。這些微生物一般為厭氧、兼性厭氧或微好氧菌。它們的發(fā)酵產(chǎn)物不僅有乳酸，還會(huì)有醇、酯等，因而使泡菜具有特殊的風(fēng)味?！驹斀狻緼、因?yàn)槿樗峋?jīng)過(guò)無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸，故其生活的環(huán)境是酸性，培養(yǎng)基pH需偏酸性，A錯(cuò)誤；B、平板劃線接種時(shí)不需要稀釋，B錯(cuò)誤；C、乳酸菌是厭氧型微生物，所以需在無(wú)氧條件下培養(yǎng)，C正確；D、參與泡菜發(fā)酵的微生物有乳桿菌、短乳桿菌和明串珠菌等，所以分離得到的微生物除了乳酸菌，還會(huì)有其他耐高鹽的微生物，D錯(cuò)誤。故選C?！咀兪?2】（2022·海南·統(tǒng)考高考真題）為探究校內(nèi)植物園土壤中的細(xì)菌種類，某興趣小組采集園內(nèi)土壤樣本并開(kāi)展相關(guān)實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．采樣時(shí)應(yīng)隨機(jī)采集植物園中多個(gè)不同地點(diǎn)的土壤樣本B．培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，可選用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基C．土壤溶液稀釋倍數(shù)越低，越容易得到單菌落D．鑒定細(xì)菌種類時(shí)，除形態(tài)學(xué)鑒定外，還可借助生物化學(xué)的方法【答案】C【分析】1、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。2、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：（1）稀釋涂布平板法（間接）：①當(dāng)樣品的稀釋庋足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌；②通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來(lái)推測(cè)樣品中大約含有的活菌數(shù)。（2）利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。【詳解】A、采集植物園中土壤樣本的原則之一是要隨機(jī)采樣，A正確；B、牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基中含有細(xì)菌生長(zhǎng)所需的碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽等，可用于細(xì)菌的培養(yǎng)，B正確；C、土壤溶液稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，才能將聚集的細(xì)菌分散開(kāi)，有助于在培養(yǎng)基表面形成單菌落，C錯(cuò)誤；D、不同種類細(xì)菌的理化特性一般不同，鑒定細(xì)菌種類時(shí)，除根據(jù)菌落特征進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定外，還可以借助生物化學(xué)的方法進(jìn)行鑒定，D正確?！纠?】（2023·北京·統(tǒng)考高考真題）高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，下列實(shí)驗(yàn)操作能達(dá)成所述目標(biāo)的是（）A．用高濃度蔗糖溶液處理成熟植物細(xì)胞觀察質(zhì)壁分離B．向泡菜壇蓋邊沿的水槽中注滿水形成內(nèi)部無(wú)菌環(huán)境C．在目標(biāo)個(gè)體集中分布的區(qū)域劃定樣方調(diào)查種群密度D．對(duì)外植體進(jìn)行消毒以杜絕接種過(guò)程中的微生物污染【答案】A【分析】成熟的植物細(xì)胞有一大液泡。當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí)，細(xì)胞液中的水分就透過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入到外界溶液中，由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的伸縮性大，當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí)，液泡逐漸縮小，原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁逐漸分離開(kāi)來(lái)，即發(fā)生了質(zhì)壁分離。當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時(shí)，外界溶液中的水分就透過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入到細(xì)胞液中，液泡逐漸變大，整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì)慢慢地恢復(fù)成原來(lái)的狀態(tài)，即發(fā)生了質(zhì)壁分離復(fù)原?！驹斀狻緼、成熟的植物細(xì)胞有中央大液泡，用高濃度蔗糖溶液處理，細(xì)胞會(huì)失水，成熟植物細(xì)胞能發(fā)生質(zhì)壁分離，因此用高濃度蔗糖溶液處理成熟植物細(xì)胞觀察質(zhì)壁分離，A正確；B、向泡菜壇蓋邊沿的水槽中注滿水形成內(nèi)部無(wú)氧環(huán)境，不能創(chuàng)造無(wú)菌環(huán)境，B錯(cuò)誤；C、在用樣方法調(diào)查種群密度時(shí)，應(yīng)該做到隨機(jī)取樣，而不是在目標(biāo)個(gè)體集中分布的區(qū)域劃定樣方調(diào)查種群密度，C錯(cuò)誤；D、對(duì)外植體進(jìn)行消毒可以減少外植體攜帶的微生物，但不能杜絕接種過(guò)程中的微生物污染，D錯(cuò)誤。故選A。【變式21】（2021·天津·統(tǒng)考高考真題）下列操作能達(dá)到滅菌目的的是（

）A．用免洗酒精凝膠擦手 B．制作泡菜前用開(kāi)水燙洗容器C．在火焰上灼燒接種環(huán) D．防疫期間用石炭酸噴灑教室【答案】C【分析】滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過(guò)程，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過(guò)程，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等?！驹斀狻緼、用免洗酒精凝膠擦手屬于消毒，A錯(cuò)誤；B、制作泡菜前用開(kāi)水燙洗容器屬于消毒過(guò)程，B錯(cuò)誤；C、在火焰上灼燒接種環(huán)能達(dá)到滅菌目的，C正確；D、防疫期間用石炭酸噴灑教室，屬于消毒，D錯(cuò)誤?！咀兪?2】（2022·天津·高考真題）下圖所示實(shí)驗(yàn)方法的應(yīng)用或原理，不恰當(dāng)?shù)氖牵?/p>

）實(shí)驗(yàn)方法應(yīng)用原理A．分離綠葉中的色素B．不同色素在層析液中溶解度不同C．細(xì)菌計(jì)數(shù)D．逐步稀釋A．A B．B C．C D．D【答案】C【分析】平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)，在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。【詳解】AB、圖示為分離綠葉中的色素，常用層析法，原理是各色素隨層析液在濾紙上擴(kuò)散速度不同，從而分離色素，溶解度大，擴(kuò)散速度快;溶解度小，擴(kuò)散速度慢，AB正確；CD、圖示為平板劃線法，是分離微生物的一種方法，不能用于細(xì)菌計(jì)數(shù)，是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞，用接種環(huán)在平板表面上作多次由點(diǎn)到線的劃線稀釋而獲得較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，并讓其成長(zhǎng)為單菌落的方法，C錯(cuò)誤，D正確。故選C?！纠?】（2021·北京·統(tǒng)考高考真題）野生草本植物多具有根系發(fā)達(dá)、生長(zhǎng)較快、抗逆性強(qiáng)的特點(diǎn)，除用于生態(tài)治理外，其中一些可替代木材栽培食用菌，收獲后剩余的菌渣可作肥料或飼料。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．種植此類草本植物可以減少水土流失B．菌渣作為農(nóng)作物的肥料可實(shí)現(xiàn)能量的循環(huán)利用C．用作培養(yǎng)基的草本植物給食用菌提供碳源和氮源D．菌渣作飼料實(shí)現(xiàn)了物質(zhì)在植物、真菌和動(dòng)物間的轉(zhuǎn)移【答案】B【分析】能量流動(dòng)的特點(diǎn)：?jiǎn)蜗蛄鲃?dòng)、逐級(jí)遞減。物質(zhì)可以循環(huán)利用，但能量是單向流動(dòng)的，不能循環(huán)利用?！驹斀狻緼、此類草本植物根系發(fā)達(dá)可以固定更多的土壤，故種植此類草本植物可以減少水土流失，A正確；B、能量可多級(jí)利用，但不能循環(huán)利用，B錯(cuò)誤；C、草本植物含有蛋白質(zhì)和纖維素，可給食用菌提供碳源和氮源，C正確；D、草本植物可栽培食用菌，而菌渣可作肥料或飼料，故實(shí)現(xiàn)了物質(zhì)在植物、真菌和動(dòng)物間的轉(zhuǎn)移，D正確。故選B。【變式31】（2011·重慶·高考真題）下列有關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述，正確的是A．在瓊脂固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌B．在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)C．向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長(zhǎng)D．在半固體培養(yǎng)基中接種細(xì)菌培養(yǎng)后可以觀察其運(yùn)動(dòng)【答案】D【詳解】A、由題意可知，在瓊脂固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落含有一種細(xì)菌，A錯(cuò)誤；B、在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，B錯(cuò)誤；C、向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能抑制破傷風(fēng)桿菌的生長(zhǎng)，因?yàn)槠苽L(fēng)桿菌為厭氧菌，C錯(cuò)誤；D、在半固體培養(yǎng)基中接種細(xì)菌培養(yǎng)后可以觀察其運(yùn)動(dòng)，D正確。故選D。【變式32】（2016·江蘇·統(tǒng)考高考真題）漆酶屬于木質(zhì)降解酶類，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過(guò)程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B．篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過(guò)菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C．在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，在通過(guò)劃線進(jìn)一步純化D．在適宜溫度下，接種后的斜面培養(yǎng)基上菌落長(zhǎng)成后，可在低溫下臨時(shí)保存菌株【答案】A【詳解】A、生活污水中含有大量微生物，而漆酶屬于木質(zhì)降解酶類，因此污水中不一定含有產(chǎn)漆酶的菌株，A錯(cuò)誤；B、篩選生活污水中含有大量微生物，篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，只有產(chǎn)生漆酶的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，進(jìn)而通過(guò)菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落，B正確；C、在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，再通過(guò)劃線進(jìn)一步純化，C正確；D、在適宜溫度下，接種后的斜面培養(yǎng)基上菌落長(zhǎng)成后，可在低溫下臨時(shí)保存菌株，D正確。故選A。1．婁底市某中學(xué)為宣傳正確佩戴口罩可降低呼吸道傳染疾病的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基置于距正確佩戴口罩的實(shí)驗(yàn)者口部前方50cm處，然后對(duì)著培養(yǎng)基講話1min或咳嗽2次，再進(jìn)行微生物培養(yǎng)和觀察。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．實(shí)驗(yàn)中牛肉膏蛋白胨應(yīng)為固體培養(yǎng)基，并進(jìn)行嚴(yán)格滅菌B．實(shí)驗(yàn)者對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行處理后，放入20℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1~2dC．實(shí)驗(yàn)中還應(yīng)設(shè)置不戴口罩直接講話或咳嗽進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對(duì)照D．培養(yǎng)結(jié)束后可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征初步區(qū)分不同種的微生物【答案】B【分析】各種培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)?！驹斀狻緼、實(shí)驗(yàn)中牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基應(yīng)為固體培養(yǎng)基，為了防止其他微生物的干擾，應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理，A正確；B、分析題意可知，本實(shí)驗(yàn)是為了確定正確佩戴口罩可降低呼吸道傳染疾病的風(fēng)險(xiǎn)，而人體的體溫約為37℃，因此應(yīng)設(shè)置與人體體溫基本相同的溫度，即在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1~2d，B錯(cuò)誤；C、為宣傳正確佩戴口罩可降低呼吸道傳染疾病的風(fēng)險(xiǎn)，本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)組為佩戴口罩對(duì)著培養(yǎng)基講話1min或咳嗽2次，實(shí)驗(yàn)中還應(yīng)該設(shè)置不戴口罩直接講話或咳嗽進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對(duì)照，C正確；D、不同微生物的菌落具有其特殊的特征，在實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)結(jié)束后，可根據(jù)菌落的形狀、大小、色澤等特征初步區(qū)分不同種的微生物，D正確。故選B。2．（2024·云南大理·統(tǒng)考二模）肺炎支原體是支原體肺炎的主要致病菌，在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)是診斷支原體肺炎的主要方法。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．肺炎支原體是一種無(wú)細(xì)胞壁的原核生物B．培養(yǎng)肺炎支原體的培養(yǎng)基中，一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)C．在對(duì)肺炎支原體進(jìn)行純培養(yǎng)的過(guò)程中需要對(duì)接種環(huán)、培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌D．微生物的純培養(yǎng)物就是不含有代謝廢物的微生物培養(yǎng)物【答案】D【分析】培養(yǎng)基的概念、種類及營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：（1）概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出的供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；（2）種類：固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基；（3）營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求?！驹斀狻緼、肺炎支原體是原核生物，且沒(méi)有細(xì)胞壁，A正確；B、雖然各種培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，B正確；C、在微生物培養(yǎng)前需要對(duì)相關(guān)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌，C正確；D、由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物，而不是不含有代謝廢物的微生物培養(yǎng)物，D錯(cuò)誤。故選D。3．（2024·廣東·一模）超市中酸奶的配料表顯示其有乳桿菌、嗜熱鏈球菌等乳酸菌。研究小組計(jì)劃將酸奶中的不同乳酸菌進(jìn)行分離純化，下列操作的順序正確的是（

）①高壓蒸汽滅菌、倒固體平板②將酸奶進(jìn)行系列稀釋③準(zhǔn)備水、培養(yǎng)皿并配制培養(yǎng)基④挑取單菌落接種到斜面培養(yǎng)基⑤用涂布器涂布并進(jìn)行37℃厭氧培養(yǎng)A．①→②→③→④→⑤ B．③→①→②→⑤→④C．①→③→②→⑤→④ D．②→③→①→④→⑤【答案】B【分析】微生物常見(jiàn)的接種的方法:1、平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種、劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。2、稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)血表面經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！驹斀狻课⑸锏姆蛛x純化的操作順序?yàn)椋簻?zhǔn)備水、培養(yǎng)皿并配制培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌、到固體平板將酸奶進(jìn)行系列稀釋用涂布器涂布并進(jìn)行37℃厭氧培養(yǎng)挑取單菌落接種到斜面培養(yǎng)基。故順序③→①→②→⑤→④，ACD錯(cuò)誤，B正確。故選B。4．（2024·湖南株洲·統(tǒng)考一模）L天冬酰胺酶由細(xì)菌和真菌合成，可分解天冬酰胺釋放出氨，然后與奈斯勒試劑反應(yīng)呈棕色。為篩選獲得L天冬酰胺酶高產(chǎn)菌株，設(shè)計(jì)了如下固體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基：主要成分有牛肉膏、蛋白胨、水、NaCl、瓊脂、奈斯勒試劑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，接種時(shí)采用的是稀釋涂布平板法B．應(yīng)選擇菌落C作為高產(chǎn)L天冬酰胺酶菌株進(jìn)行大量培養(yǎng)C．該培養(yǎng)基從功能來(lái)看屬于選擇培養(yǎng)基，其中充當(dāng)?shù)吹某煞质桥Ｈ飧郉．無(wú)菌技術(shù)還可以避免操作者被有害微生物感染，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的培養(yǎng)基不能直接丟棄【答案】C【分析】微生物常見(jiàn)的接種的方法：①平板劃線法，將已經(jīng)滅菌的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法，將待分離的菌液經(jīng)過(guò)適合的稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！驹斀狻緼、從接種結(jié)果來(lái)看，菌落分布較為均勻，應(yīng)該采用的是稀釋涂布平板法，A正確；B、菌落B和菌落C周圍棕色圈的直徑相同，但C的菌落直徑更小，因此菌落C的單個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的L天冬酰胺酶更多，應(yīng)選擇菌落C作為高產(chǎn)L天冬酰胺酶菌株進(jìn)行大量培養(yǎng)，B正確；C、培養(yǎng)基中加入有奈斯勒試劑，若微生物能產(chǎn)生L天冬酰胺酶則菌落周圍會(huì)出現(xiàn)棕色圈，因此該培養(yǎng)基從功能來(lái)看屬于鑒別培養(yǎng)基，其中充當(dāng)?shù)吹某煞质桥Ｈ飧嗪偷鞍纂?，C錯(cuò)誤；D、無(wú)菌技術(shù)可用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染，還可以避免操作者被有害微生物感染，但實(shí)驗(yàn)結(jié)束后為避免環(huán)境污染，培養(yǎng)基在丟棄前要進(jìn)行滅菌處理，D正確。故選C。5．（2023·貴州黔東南·統(tǒng)考一模）某實(shí)驗(yàn)小組篩選得到塑料降解菌，用來(lái)降解塑料，以解決塑料的污染問(wèn)題。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．培養(yǎng)基滅菌后再依次分裝到各個(gè)培養(yǎng)皿中B．可采用平板劃線法來(lái)統(tǒng)計(jì)樣液中的細(xì)菌數(shù)量C．獲得塑料降解菌純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染D．實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，已使用的培養(yǎng)基要滅菌后才能倒掉【答案】B【分析】微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是防止雜菌污染；培養(yǎng)基制作完成后需要進(jìn)行滅菌處理，培養(yǎng)基通常可以進(jìn)行高壓蒸汽滅菌；倒平板后需要將培養(yǎng)皿倒置?！驹斀狻緼、配制好的選擇培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌，再在無(wú)菌環(huán)境中分裝到培養(yǎng)皿中，A正確；B、采用平板劃線法接種后，菌落一般生長(zhǎng)在劃線的末端，而不是均勻分布，因此可采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣液中細(xì)菌的數(shù)量，B錯(cuò)誤；C、微生物培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，C正確；D、為了防止污染環(huán)境，則實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，已使用的培養(yǎng)基要滅菌后才能倒掉，D正確。故選B。6．（2024·吉林長(zhǎng)春·統(tǒng)考一模）生活飲用水中大腸桿菌超標(biāo)會(huì)引起腸道外感染和急性腹瀉，嚴(yán)重時(shí)會(huì)危及生命。某研究小組利用表中的培養(yǎng)基對(duì)生活飲用水中的大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)和計(jì)數(shù)，下列敘述正確的是（

）成分蛋白胨蔗糖乳糖K2HPO4顯色劑（伊紅—亞甲藍(lán)）瓊脂含量10.0g5.0g2.0g2.0g0.2g12.0g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mLA．按照用途劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基B．配置培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先進(jìn)行滅菌后再調(diào)節(jié)pH值C．計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種D．為防止雜菌污染，應(yīng)向培養(yǎng)基中添加適量抗生素【答案】C【分析】分析表格可知，該培養(yǎng)基中加入了顯色劑，屬于鑒別培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中的碳源有蔗糖、乳糖和蛋白胨，蛋白胨還可提供氮源，在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，再滅菌后倒平板，若先滅菌，后調(diào)pH，可能在調(diào)pH的過(guò)程中再次引發(fā)雜菌污染。【詳解】A、該培養(yǎng)基中含伊紅—亞甲藍(lán)顯色劑，根據(jù)用途劃分該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；B、在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)節(jié)pH值，再滅菌后倒平板，B錯(cuò)誤；C、稀釋涂布平板法進(jìn)行接種可以用來(lái)計(jì)數(shù)，C正確；D、不可以在培養(yǎng)基中添加抗生素，以免影響大腸桿菌的生長(zhǎng)，D錯(cuò)誤。故選C。7．下列有關(guān)食品保存和發(fā)酵食品制作的敘述，正確的是（

）A．巴氏消毒法是將牛奶煮沸以殺死雜菌B．低氧保存果蔬可抑制微生物的細(xì)胞呼吸C．制作泡菜時(shí)需要先通入空氣然后再密封D．通過(guò)細(xì)菌的發(fā)酵作用可將豆腐變成腐乳【答案】B【分析】制作泡菜利用了乳酸菌發(fā)酵的原理，乳酸菌是厭氧菌，需要在無(wú)氧環(huán)境下生活，泡菜制作的過(guò)程中應(yīng)一直密封。【詳解】A、巴氏消毒法是指在62~65℃消毒30min，或80~90℃處理30s~1min，A錯(cuò)誤；B、低氧保存果蔬的原理是低氧狀態(tài)下微生物的細(xì)胞呼吸被抑制，有機(jī)物消耗減少，B正確；C、制作泡菜時(shí)依賴乳酸菌，而乳酸菌是厭氧菌，不能通入空氣，C錯(cuò)誤；D、腐乳發(fā)酵主要是依賴毛霉，不是細(xì)菌，D錯(cuò)誤。故選B。8．某研究小組設(shè)計(jì)了一個(gè)利用作物秸稈生產(chǎn)燃料乙醇的小型實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)流程如圖所示(清水淋洗時(shí)菌T不會(huì)流失)。下列分析錯(cuò)誤的是（

）A．在粉碎的秸稈中接種菌T是為了將秸稈中的纖維素大量分解B．淋洗液主要為酵母菌的生長(zhǎng)繁殖提供碳源、能源等C．采用濕熱滅菌法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)需控制壓力為100kPa，溫度為100℃D．與以糧食為原料發(fā)酵生產(chǎn)乙醇相比，圖中方式能節(jié)約糧食和提高能量利用率【答案】C【分析】果酒的制作離不開(kāi)酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水，在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精，酵母菌最適宜生長(zhǎng)繁殖的溫度范圍是18~30℃；生產(chǎn)中是否有酒精的產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn)，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色?！驹斀狻緼、菌T能夠分泌纖維素酶，纖維素酶能將纖維素最終分解為葡萄糖，因此在粉碎的秸桿中接種菌T，培養(yǎng)一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)菌T能夠?qū)⒔蹢U中的纖維素大量分解，A正確；B、采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌，可以用淋洗液為原料制備培養(yǎng)基，淋洗液主要為酵母菌的生長(zhǎng)繁殖提供碳源、能源等，B正確；C、采用濕熱滅菌法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)需控制壓力為100kPa，溫度為121℃，C錯(cuò)誤；D、利用作物秸稈生產(chǎn)燃料乙醇與以糧食為原料發(fā)酵生產(chǎn)乙醇相比，能節(jié)約糧食和提高能量利用率，D正確。故選C。9．原油中含有大量有害的、致癌的多環(huán)芳烴，土壤中有些細(xì)菌可以利用原油中的多環(huán)芳烴作為碳源，在培養(yǎng)基中形成分解圈。為篩選出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小組同學(xué)設(shè)計(jì)了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確的是（

）A．應(yīng)配制來(lái)源于被原油污染土壤的土壤稀釋液備用B．配制以多環(huán)芳烴為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基C．將土壤稀釋液滅菌后接種到選擇培養(yǎng)基上D．在選擇培養(yǎng)基上能形成分解圈的可能為所需菌種【答案】C【分析】篩選分離目的微生物的一般步驟是：樣品取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。選擇培養(yǎng)基是指通過(guò)培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。篩選分離能夠利用原油中的多環(huán)芳烴為碳源的細(xì)菌需要以原油（多環(huán)芳烴）為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，用稀釋涂布平板法或平板劃線法接種分離?！驹斀狻緼、篩選能夠利用多環(huán)芳烴為碳源的菌種，應(yīng)在被原油污染的土壤中獲取，所以應(yīng)配制來(lái)源于被原油污染的土壤稀釋液作為菌液進(jìn)行接種，A正確；B、配制選擇性培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基與通用培養(yǎng)基成分的主要區(qū)別應(yīng)該是以原油（多環(huán)芳烴）為唯一碳源，這樣在該培養(yǎng)基上只有能分解原油的微生物能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，而其他微生物的生長(zhǎng)被抑制，B正確；C、在無(wú)菌環(huán)境下，將土壤稀釋液接種到選擇培養(yǎng)上，若將土壤稀釋液滅菌后會(huì)殺死原有菌種，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，C錯(cuò)誤；D、題意顯示，有些細(xì)菌可以利用原油中的多環(huán)芳烴為碳源，在培養(yǎng)基中形成分解圈”，據(jù)此可知，在選擇性培養(yǎng)基上能形成分解圈的即為所需菌種，D正確。故選C。10．垃圾的生物處理是指利用生物（主要是微生物），將垃圾中的有機(jī)物轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的產(chǎn)物、能源和其他有用的物質(zhì)的一種處理技術(shù)。下列有關(guān)敘述不合理的是（

）A．降解塑料（成分是聚乙烯）垃圾，需用聚乙烯作唯一碳源的培養(yǎng)基篩選菌種B．篩選降解石油的細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基及接種工具分別需要干熱滅菌和灼燒滅菌C．厭氧技術(shù)處理生活垃圾，產(chǎn)生沼氣，實(shí)現(xiàn)了生活垃圾的能源化D．春季播種前利用微生物堆肥處理農(nóng)田秸稈，有利于提高土壤儲(chǔ)碳量【答案】B【分析】選擇培養(yǎng)基是指允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。獲得純凈的培養(yǎng)物關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵。微生物接種常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。【詳解】A、降解塑料（成分是聚乙烯）垃圾，需用聚乙烯作唯一碳源的選擇培養(yǎng)基篩選菌種，能在該選擇培養(yǎng)基生存的菌種才能降解塑料垃圾，A不符合題意；B、微生物的培養(yǎng)基的滅菌方式是濕熱滅菌，接種工具可灼燒滅菌，B符合題意；C、厭氧技術(shù)處理生活垃圾，產(chǎn)生沼氣，沼氣可以作為燃料或發(fā)電，實(shí)現(xiàn)了生活垃圾的能源化，C不符合題意；D、春季播種前利用微生物堆肥處理農(nóng)田秸稈，將秸稈中的纖維素等有機(jī)物分解為小分子有機(jī)物，有利于提高土壤儲(chǔ)碳量，D不符合題意。故選B。11．熔噴布是生產(chǎn)口罩的重要材料，主要成分是聚丙烯，廢棄口罩會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。某人從土壤中分離到一種能分解聚丙烯的細(xì)菌。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．制備培養(yǎng)基時(shí)需要先將培養(yǎng)基的pH調(diào)節(jié)至中性或弱堿性，再滅菌、倒平板B．以聚丙烯為唯一碳源的培養(yǎng)基，按功能劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基C．從土壤中分離能分解聚丙烯的細(xì)菌，可采用平板劃線法、稀釋涂布平板法接種D．對(duì)該菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)持續(xù)增加培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度，以提高菌種密度【答案】D【分析】1、稀釋涂布平板法：將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開(kāi)，使成單個(gè)細(xì)胞存在，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。2、平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞，用接種環(huán)在平板表面上作多次由點(diǎn)到線的劃線稀釋而獲得較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，并讓其成長(zhǎng)為單菌落的方法?！驹斀狻緼、培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，需將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性，A正確；B、用以聚丙烯為唯一碳源的培養(yǎng)基來(lái)篩選能分解聚丙烯的細(xì)菌，按功能劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，B正確；C、從土壤中分離能分解聚丙烯的細(xì)菌，可采用的接種法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，C正確；D、在對(duì)該菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)，不能持續(xù)增加培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度，因?yàn)槌掷m(xù)增加培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度，細(xì)菌會(huì)滲透失水，影響其生長(zhǎng)繁殖，D錯(cuò)誤。故選D。12．（2023·湖南婁底·漣源市第一中學(xué)校聯(lián)考模擬預(yù)測(cè)）某培養(yǎng)基成分如下：葡萄糖4～10g，（NH4）2SO44g，K2HPO47g，KH2PO42g，MgSO41g，CaCl20．02g，微量元素（Fe、Co、Mn、Zn、Cu、Ni、Mo）各2～10μg，蒸餾水1000mL，pH7．2．下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．從培養(yǎng)基組成來(lái)看，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基B．從培養(yǎng)基的pH分析該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)霉菌C．去掉（NH4）2SO4，該培養(yǎng)基可用于選擇培養(yǎng)固氮微生物D．微量元素在生物體中含量很少，培養(yǎng)基中可以不加或少加【答案】C【分析】人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)—培養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。【詳解】A、從培養(yǎng)基組成來(lái)看，該培養(yǎng)基屬于合成培養(yǎng)基，因其不含凝固劑瓊脂，屬于液體培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；B、該培養(yǎng)基的pH為7.2是弱堿性，適于細(xì)菌的培養(yǎng)，霉菌培養(yǎng)需將pH調(diào)至酸性，B錯(cuò)誤；C、去掉（NH4）2SO4后，培養(yǎng)基成分缺乏氮源，只有固氮微生物能生長(zhǎng)，故可用于固氮微生物的培養(yǎng)，C正確；D、微量元素在生物體內(nèi)的含量少，但作用很重要，是生物體必不可少的成分，培養(yǎng)基中必須添加，D錯(cuò)誤。13．（2024·陜西榆林·統(tǒng)考一模）固氮菌X廣泛分布于富含有機(jī)質(zhì)的土壤中，具有生物固氮能力，可以將空氣中的氮?dú)廪D(zhuǎn)化為植物能夠利用的氨態(tài)氮等，從而促進(jìn)植物的生長(zhǎng)發(fā)育。從土壤中分離固氮菌X的過(guò)程如圖所示，回答下列問(wèn)題：(1)為了從土壤中獲取高效固氮的固氮菌X，科研人員常從的土壤中采樣。獲取到的土壤樣品，能不能進(jìn)行滅菌?，理由是。(2)根據(jù)固氮菌X的特性進(jìn)行培養(yǎng)基的配制時(shí)，需要用（填“不含氮源”或“富含氮源”）培養(yǎng)基。然后將土壤樣品進(jìn)行圖中過(guò)程①的選擇培養(yǎng)，其目的是。再對(duì)固氮菌X進(jìn)行過(guò)程②中的純培養(yǎng)，據(jù)圖分析，所采用的接種方法是。(3)研究人員分離得到甲、乙、丙三株固氮菌X，并進(jìn)行了固氮能力的鑒定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。固氮菌X甲乙丙氨態(tài)氮相對(duì)含量0.750.600.93據(jù)表分析，若要增強(qiáng)某片土壤的肥力，可選擇的菌種最好是，依據(jù)是。【答案】(1)富含有機(jī)質(zhì)不能對(duì)土壤樣品進(jìn)行滅菌，會(huì)殺死土壤樣品中的目的菌種(2)不含氮源篩選并增加固氮菌X的數(shù)量稀釋涂布平板法(3)丙丙產(chǎn)生的氨態(tài)氮的相對(duì)含量顯著高于甲、乙的【分析】1、培養(yǎng)基的分類：（1）按物理性質(zhì)，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基；（2）按化學(xué)成分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)；（3）按用途，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基：允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。2、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽?！驹斀狻浚?）高效固氮的固氮菌X為需氧細(xì)菌,所以在富含有機(jī)質(zhì)的土壤中數(shù)量多。對(duì)土壤樣品進(jìn)行滅菌，會(huì)殺死土壤樣品中的目的菌種，所以不能進(jìn)行滅菌。（2）固氮細(xì)菌能夠進(jìn)行生物固氮,將空氣中的氮?dú)廪D(zhuǎn)化為氨,因此能在不含氮源的選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，土壤中的其他細(xì)菌不能進(jìn)行生物固氮，必須在含氮源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，所以用不含氮源的選擇培養(yǎng)基就可以將固氮菌X篩選出來(lái)。進(jìn)行圖中過(guò)程①的選擇培養(yǎng)，其目的是篩選并增加固氮菌X的數(shù)量。圖中所采用的接種方法是稀釋涂布平板法。（3）丙產(chǎn)生的氨態(tài)氮的相對(duì)含量顯著高于甲、乙的，因此可選擇的菌種最好是丙。14．（2024·上海黃浦·統(tǒng)考一模）深海微生物研究：開(kāi)展深海微生物研究對(duì)于開(kāi)發(fā)海洋資源具有重要意義。我國(guó)研究人員采集了深海冷泉附近的沉積物樣品，采用新型分離策略，純化、鑒定得到了全新的擬桿菌菌株，并進(jìn)一步研究了其生物學(xué)特性，具體過(guò)程如圖1所示，圖中I~V是操作步驟。(1)擬桿菌是厭氧生物，細(xì)胞呈彎曲桿狀，透射電鏡觀察細(xì)胞長(zhǎng)2.0~6.0μm，寬0.5~0.8μm。擬桿菌一定具有的細(xì)胞結(jié)構(gòu)是_____。（單選）A．線粒體 B．內(nèi)質(zhì)網(wǎng) C．細(xì)胞核 D．核糖體(2)研究人員經(jīng)基因組測(cè)序發(fā)現(xiàn)擬桿菌中與藻類多糖降解有關(guān)的基因數(shù)量明顯高于其他菌種，因此向基本培養(yǎng)基中分別添加不同藻類多糖來(lái)配制系列培養(yǎng)基①，并以此對(duì)菌種進(jìn)行分離?；九囵B(yǎng)基中應(yīng)該含有的營(yíng)養(yǎng)成分包括。（編號(hào)選填）①碳源

②氮源

③生長(zhǎng)因子

④無(wú)機(jī)鹽

⑤水(3)圖1步驟I~V中，須無(wú)菌操作的是；須對(duì)菌株進(jìn)行培養(yǎng)的是。(4)結(jié)合實(shí)驗(yàn)?zāi)康模铝嘘P(guān)于培養(yǎng)基①~③的敘述正確的是_____。（多選）A．①是固體培養(yǎng)基 B．①~③的碳源種類可以完全相同C．②是液體培養(yǎng)基 D．③的碳源濃度可以與①的不同純化獲得的擬桿菌經(jīng)基因組測(cè)序鑒定得到了全新菌株WC007。該菌株在含不同藻類多糖的培養(yǎng)基中測(cè)定的生長(zhǎng)曲線如圖2所示。(5)據(jù)圖2，比較各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果的異同。(6)藻類細(xì)胞解體后的多糖物質(zhì)難降解，通常會(huì)聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成的角度分析，WC007菌株對(duì)深海生態(tài)系統(tǒng)主要價(jià)值在于。【答案】(1)D(2)②③④⑤(3)I、II、III、IV、VII、III、IV(4)BD(5)相同點(diǎn)：WC007菌株在含各種藻類多糖的培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線均呈現(xiàn)S型變化趨勢(shì)；不同點(diǎn)：WC007菌株在含纖維素的培養(yǎng)基中，整體生長(zhǎng)速度快于在含木聚糖、果膠和淀粉的培養(yǎng)基中。(6)作為分解者【分析】培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。不同的培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源?！驹斀狻浚?）擬桿菌是一種細(xì)菌，屬于原核生物，與真核生物的根本區(qū)別在于，沒(méi)有以核膜為界限的細(xì)胞核，只含有唯一的一種細(xì)胞器，核糖體，D正確，ABC錯(cuò)誤。故選D。（2）微生物培養(yǎng)基的成分主要包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源，除此之外，很多微生物中還含有生長(zhǎng)因子。依據(jù)題干信息，“向基本培養(yǎng)基中分別添加不同藻類多糖來(lái)配制系列培養(yǎng)基①”，藻類多糖已經(jīng)提供了碳源，所以，在基本培養(yǎng)基中應(yīng)該含有的成分應(yīng)該包括氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子，②③④⑤正確，①錯(cuò)誤。故選②③④⑤。（3）防止雜菌污染，獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是研究和應(yīng)用微生物的前提，故I、II、III、IV、V均需在無(wú)菌條件下操作；依據(jù)圖1可知，使用培養(yǎng)基①、②、③分別是對(duì)菌株進(jìn)行接種、轉(zhuǎn)接和再轉(zhuǎn)接操作，須對(duì)菌株進(jìn)行培養(yǎng)，對(duì)應(yīng)的操作步驟分別是II、III、IV。（4）AC、經(jīng)過(guò)培養(yǎng)基②的培養(yǎng)后，要挑取單菌落并轉(zhuǎn)接，所以可以推知②為固體培養(yǎng)基，①為液體培養(yǎng)基，AC錯(cuò)誤；BD、依據(jù)題干信息可知，本實(shí)驗(yàn)的目的是純化、鑒定得到了全新的擬桿菌菌株，所以①~③的碳源種類可以完全相同，但是不同的階段，擬桿菌菌種的濃度不同，所以，①~③的碳源種類可以完全相同，BD正確；故選BD。（5）依據(jù)圖2可知，相同點(diǎn)為：WC007菌株在含各種藻類多糖的培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線大體相同，均呈現(xiàn)S型；不同點(diǎn)是：生長(zhǎng)速度不同，WC007菌株在含纖維素的培養(yǎng)基中，整體生長(zhǎng)速度快于在含木聚糖、果膠和淀粉的培養(yǎng)基中。（6）擬桿菌為異養(yǎng)生物，能將沉降到深海底部，從生態(tài)系統(tǒng)組成的角度分析，主要是作為該生態(tài)系統(tǒng)的分解者，將難降解多糖物質(zhì)分解為無(wú)機(jī)物，歸還到無(wú)機(jī)環(huán)境中，有利于