獸醫(yī)微生物學 第二十八章 皰疹病毒目

第二十八章

皰疹病毒目

Herpesvirales皰疹病毒可引起多種動物的疾病。包括：哺乳類（綿羊除外）鳥類爬行類兩棲類昆蟲軟體動物包括三個病毒科皰疹病毒科異樣皰疹病毒科貝類皰疹病毒科皰疹病毒科病毒均為：線狀雙股DNA，20面體對稱，有囊膜。一、分類皰疹病毒甲亞科皰疹病毒乙亞科皰疹病毒丙亞科宿主范圍變化不定，包括大多數(shù)家畜的皰疹病毒；具有高度的細胞致病性；復(fù)制周期短，常在神經(jīng)節(jié)內(nèi)形成潛在感染；DNA分子量80—110×106；多數(shù)成員能引起皮膚皰疹狀病變。宿主范圍狹窄；在成纖維細胞上生長更好,有緩慢的漸進性細胞病原性；體內(nèi)和細胞培養(yǎng)中引起細胞巨大且形成核內(nèi)和胞漿內(nèi)包涵體；引起唾液腺和其他組織的隱性感染DNA分子量130—150×106；宿主范圍狹窄；在成淋巴細胞樣的細胞(尤其T和B細胞)中復(fù)制病毒，且常引起持久的非溶解性細胞感染不過很少發(fā)現(xiàn)病毒的基因組。當細胞溶解死亡時，也可能不產(chǎn)生完全的病毒子；DNA分子量80—110×106；一、分類皰疹病毒甲亞科皰疹病毒乙亞科皰疹病毒丙亞科牛皰疹病毒1型——傳染性鼻氣管炎牛皰疹病毒2型——牛乳腺炎,偽皮膚疙瘩病牛皰疹病毒5型——腦炎山羊皰疹病毒1型——結(jié)膜炎、呼吸道及腸道疾病豬皰疹病毒1型——仔豬全身癥狀,母豬流產(chǎn),

其他宿主致神經(jīng)癥狀(偽狂犬)馬皰疹病毒1型——流產(chǎn)、呼吸道或神經(jīng)系統(tǒng)疾病馬皰疹病毒1型——鼻肺炎犬皰疹病毒1型——犬崽出血癥貓皰疹病毒1型——貓病毒性鼻氣管炎猴皰疹病毒1型——獼猴單純皰疹病毒樣疾病,

人致死性腦炎猴水痘病毒——猴水痘樣疾病禽皰疹病毒1型——雞傳染型喉氣管炎禽皰疹病毒2型——雞馬立克氏病鴨皰疹病毒1型——鴨瘟水痘帶狀皰疹病毒——人水痘皮疹一、分類皰疹病毒甲亞科皰疹病毒乙亞科皰疹病毒丙亞科豬皰疹病毒2型--包涵體鼻炎,

周身性細胞巨化病毒感染一、分類皰疹病毒甲亞科皰疹病毒乙亞科皰疹病毒丙亞科角馬皰疹病毒1型——牛惡性卡他熱馬皰疹病毒2型——馬丙型皰疹病毒感染馬皰疹病毒5型——馬丙型皰疹病毒感染二、主要特征病毒顆粒直徑150nm，有囊膜，20面體對稱，由162個殼粒組成，囊膜上具有許多糖蛋白的纖突?；蚪M由單分子雙股DNA組成，大小為125～235kb，不同成員的基因組組成、大小及結(jié)構(gòu)有很大差異。三個水痘帶狀皰疹病毒顆粒的電鏡照片皰疹病毒

脂質(zhì)雙層膜

核衣殼

糖蛋白纖突

外皮tegument水痘帶狀皰疹病毒皰疹病毒3、病毒繁殖、細胞的感染感染的細胞未感染的細胞感染的細胞未感染的細胞感染的細胞未感染的細胞4.感染皰疹病毒感染的共同特點：皰疹病毒在外環(huán)境中不易存在，一般需密切接觸才能傳染，尤其是通過交配、舔等導(dǎo)致的黏膜感染。在集約化養(yǎng)殖的牛、豬、雞場中最易發(fā)生。三、與養(yǎng)殖業(yè)密切相關(guān)的幾個皰疹病毒1.偽狂犬病毒（Pseudorrabiesvirus）2.禽傳染性喉氣管炎病毒（Avianinfectiouslaryngotracheitisvirus，ILTV）3.馬立克病病毒（Marek’sdiseasevirus，MDV）4.鴨瘟病毒（Duckplaguevirus，DPV）5.牛傳染性鼻氣管炎病毒（Infectiousbovinerhinotracheitisvirus）（一）偽狂犬病毒1.屬皰疹病毒甲亞科，又名豬皰疹病毒1型。1）豬為原始宿主，2）也可感染其他動物，如馬、牛、綿羊、山羊等多種動物及多種野生動物2.主要特性：符合甲亞科的特征3.

培養(yǎng)：1.易在雞胚絨毛尿囊膜上生長，接種后34天能形成大小不一的隆起的白色痘斑。2.可在很多種脊椎動物的細胞培養(yǎng)中生長：易在兔、倉鼠和豬的腎細胞、兔和豚鼠睪丸細胞以及雞胚成纖維細胞中生長；但以兔腎細胞最易感?？尚纬杉毎∽兒涂瞻?，感染細胞形成大的包涵體。4、致病性成年豬多為隱性感染，或少數(shù)出現(xiàn)輕微發(fā)熱和神經(jīng)癥狀，不死者可康復(fù)。幼豬感染后呈發(fā)熱、麻痹、昏迷等癥狀，死亡率很高；懷孕母豬能引起流產(chǎn)、死胎或木乃伊胎；其它動物感染后有很高死亡率，最特征癥狀為體軀某部奇癢；4、致病性4)病料皮下接種兔，2～5天死亡，乳鼠腦內(nèi)接種1周左右死亡；5)病毒分布：最初位于扁桃體，感染24小時內(nèi)可從頭部神經(jīng)節(jié)、脊髓及橋腦中分離到病毒；6)排毒：康復(fù)豬可通過鼻腔分泌物及唾液持續(xù)排毒，但糞、尿不帶毒。偽狂犬病毒偽狂犬病毒偽狂犬病毒偽狂犬病毒5、診斷動物試驗：用1～2ml適當稀釋的病腦組織懸液皮下接種兔，2～5天后于接種部位出現(xiàn)奇癢癥狀，最后麻痹致死。病毒分離：常用豬腎細胞系（PK-15），細胞接毒后24～72小時，出現(xiàn)CPE，細胞單層出現(xiàn)折光性細胞，逐漸增多，最后完全脫落，形成合胞體，其形態(tài)和大小各異。病毒鑒定：可用特異性抗血清做中和試驗鑒定病毒，或用免疫熒光試驗鑒定病毒。用PCR技術(shù)鑒定偽狂犬病毒，多用于隱性感染。偽狂犬病毒血清學試驗病毒中和試驗ELISA（國際貿(mào)易指定試驗）：能迅速檢測大量樣品。有些試劑盒還能區(qū)分免疫動物和自然感染動物，多家檢察機構(gòu)明確規(guī)定，凡是運送無偽狂犬病區(qū)的豬，必須用ELISA試驗檢測gE抗體。偽狂犬病毒6、預(yù)防滅活苗弱毒苗基因缺失苗又稱為標記疫苗，缺少一種特異性的糖蛋白基因（Gg、gE、gC），可區(qū)別于野毒感染。在計劃根除偽狂犬病的國家，可選用這類標記疫苗。偽狂犬病毒（二）禽傳染性喉氣管炎病毒—又名禽皰疹病毒1型分類：皰疹病毒甲亞科，傳喉病毒屬，僅1個血清型培養(yǎng)：僅能在發(fā)育雞胚復(fù)制，采用絨毛尿囊膜接種，絨尿膜可見有痘斑樣壞死灶；病毒能在雞胚肝、腎和肺細胞上生長繁殖，并引起CPE。抵抗力：對熱敏感，病毒在-20～-60℃或凍干條件下，可長期保存，至少10年；對一般消毒藥抵抗力不強。在3%來蘇兒或1%苛性鈉溶液中，不到1分鐘即行死亡。4、致病性自然感染對象為雞；各種年齡雞菌可被感染，僅以成年雞的癥狀最典型?？祻?fù)雞可部分成為帶毒雞。此外，接種過傳染性喉氣管炎疫苗的雞能夠在較長的時間內(nèi)散布病毒，成為傳染的來源。禽傳染性喉氣管炎病毒特征是病雞呈現(xiàn)呼吸困難和咳出血性滲出物；病變主要發(fā)生在喉頭和氣管部分，氣管黏膜腫脹、出血、壞死和形成糜爛。禽傳染性喉氣管炎病毒5、微生物學診斷1）病毒分離病料采集：發(fā)病早期的氣管滲出物、氣管粘膜及肺組織。雞胚接種：4～6枚9～10日齡SPF雞胚或非免疫胚絨尿膜接種，從第3天開始形成痘斑。雞胚多在接種后5～6天死亡，初代分離，往往不引起雞胚死亡，須傳代后才出現(xiàn)有規(guī)律死亡。雛雞接種：將分離材料接種5只數(shù)日齡內(nèi)易感雛雞，接種后3～4天出現(xiàn)明顯的癥狀和病變。禽傳染性喉氣管炎病毒2）病毒鑒定病毒中和試驗熒光抗體檢查氣管組織中的病毒。鑒別診斷上應(yīng)注意同傳染性支氣管炎、傳染性鼻炎、雞敗血支原體病相區(qū)別，可采用泄殖腔接種法，即采取病雞的氣管滲出物或其他含病毒的材料，涂擦易感雞的泄殖腔粘膜，4～5天后觀察涂擦部位是否出現(xiàn)紅腫等炎癥反應(yīng)。禽傳染性喉氣管炎病毒應(yīng)用中和試驗或空斑減少試驗來測定病雞血清中是否存在傳染性喉氣管炎病毒抗體。3）血清學試驗6、防治疫苗接種從未發(fā)生過本病的地區(qū)，不宜進行疫苗接種；中等毒力疫苗，采用泄殖腔黏膜涂擦（涂肛免疫）；弱毒疫苗，通過毛囊、滴鼻或滴眼途徑接種；油乳劑滅活苗，80～100日齡接種1次即可。禽傳染性喉氣管炎病毒（三）馬立克病病毒屬于皰疹病毒甲亞科，又名禽皰疹病毒2型。1、形態(tài)裸露的MDV直徑85～100nm，常見于感染細胞的核內(nèi)，胞漿和胞漿中偶爾也可看到。有囊膜的MDV直徑150～160nm，主要見于核膜和核泡，但也有見于胞漿。在羽囊上皮囊膜的病毒子特別大，直徑可達273～400nm，呈不規(guī)則的無定形結(jié)構(gòu)。負染制備中核衣殼呈20面體對稱，有162個中空殼粒，呈圓柱狀，大小為6nm

9nm，相鄰殼粒中心之間距離為10nm。2、基因組特性線狀雙股DNA，大小166~184kb；MDVDNA為傳染性核酸；基因組由一長獨特區(qū)和一短獨特區(qū)，每一區(qū)都與反轉(zhuǎn)重復(fù)序列鄰接；目前，與MDV致病力相關(guān)的重要基因已經(jīng)鑒定和定位。馬立克病病毒3、毒株分類1）根據(jù)毒株的差異，將MDV可分為血清1、2、3型，血清型和生物學特性相一致血清1型：包括所有致瘤強弱不同的致瘤毒株，如：JM，GA，MD5和京-1等血清2型：包括所有的不致瘤毒株，如：SB1，301B/1，Z4等血清3型：包括所有的火雞皰疹病毒，如：FC-126，LS等馬立克病病毒3、毒株分類2）根據(jù)毒力來分，1型MDV又分為mMDV（mild,弱毒）vMDV（virulent,強毒）vvMDV（veryvirulent,超強毒）vv+MDV（veryvirulentplus,特超強毒）vv++MDV？Orvvv+MDV？4、培養(yǎng)病毒可在雛雞、組織培養(yǎng)和發(fā)育雞胚中生長繁殖；人工接種1周齡以內(nèi)的SPF雞胚或易感雞，一般經(jīng)2～4周可在雞的神經(jīng)節(jié)、神經(jīng)和某些臟器中出現(xiàn)病變。馬立克病病毒3）接種4日齡雞胚卵黃囊，18日齡左右可以看到絨毛尿囊膜上形成白色痘皰，從針尖大到直徑1～2mm不等；4）雛雞腎細胞（CK）和鴨胚成纖維細胞（DEF）適于MDV1型的初次分離，適應(yīng)后亦可在雞胚成纖維細胞（CEF）上生長，并產(chǎn)生細胞病變，2型和3型MDV在CEF上生長良好。馬立克病病毒5、傳染性感染雞群的墊料和羽毛（含有從羽囊上皮細胞來的病毒）具有傳染性。這些材料的傳染性在室溫可保持4～8個月，在4℃至少保持10年，但常用化學消毒劑作用10min就能使之滅活。不能垂直傳播。6、致病性1）MDV為細胞結(jié)合性病毒，靶細胞為T淋巴細胞。2）主要感染雞和火雞，以淋巴細胞增生和腫瘤形成為特征，從感染到發(fā)病有較長的潛伏期。一般以2～3月齡的雞發(fā)病最為嚴重，鵪鶉、稚雞、鷓鴣也能感染。馬立克病病毒6、致病性3）本病根據(jù)病變發(fā)生的主要部位和臨診癥狀，可分為4種類型，即神經(jīng)型（古典型）內(nèi)臟型（急性）眼型和皮膚型：馬立克病病毒神經(jīng)型（古典型）馬立克病病毒內(nèi)臟型（急性）眼型馬立克病病毒皮膚型馬立克病病毒7、微生物學診斷采集病料病毒分離用病雞的腫瘤組織、抗凝血或含血液淋巴細胞的懸液作為接種材料接種CEF，或接種4日齡雞胚卵黃囊或絨毛尿囊膜。血清學試驗瓊擴試驗本病流行期，常用高免血清檢測病雞羽囊上皮中的病毒抗原本病流行后期，可用已知病毒抗原檢查病雞血清中的抗體熒光抗體試驗馬立克病病毒8、免疫預(yù)防1日齡雛雞免疫接種。HVT凍干疫苗從感染細胞抽提的無細胞病毒凍干制品二價苗HVT+MDVⅡ組成的雙價疫苗CVI988疫苗（液氮苗）人工致弱的1型MDV馬立克病病毒（四）鴨瘟病毒1、分類：屬皰疹病毒甲亞科，鴨皰疹病毒1型2、形態(tài)：鴨瘟病毒具有皰疹病毒的典型形態(tài)結(jié)構(gòu)，直徑160～180nm。3、培養(yǎng)特性能在8～14日齡鴨胚中生長和傳代，接種后4天死亡，胚體表面輕度充血和小點出血，絨尿膜水腫增厚并有灰白色壞死灶，肝臟表面有特征性灰白色或灰黃色針頭大壞死灶，后者是判定DPV存在的一個重要依據(jù)。還能在鴨胚、雞胚成纖維細胞培養(yǎng)中生長，自第6代起可引起明顯的細胞病變，形成核內(nèi)包涵體和空斑。鴨瘟病毒4、致病性鴨瘟是鴨、鵝和其他雁形目禽類的一種急性、熱性、敗血性傳染病。臨疹特點是體溫升高，腫頭流淚，兩腳麻痹和排出綠色稀糞。主要引起1月齡以上的成年鴨的鴨瘟，臨疹特征為發(fā)高熱，兩腳發(fā)軟、腹瀉，糞便呈綠色，流淚和頭頸部腫大，俗稱“大頭瘟”，自然感染以消化道為主，病鴨肝、脾、腦、食道和泄殖腔等組織含毒量最高。病鴨表現(xiàn)為腸炎、脈