第二講藥物分析

第二講藥品檢驗工作的基本規(guī)律

Basicregularityofdruginspection

藥物的鑒別試驗藥物的雜質(zhì)檢查藥物定量分析與分析方法驗證

藥物的鑒別試驗

Identificationtestofdrug

鑒別試驗的項目鑒別試驗的方法鑒別試驗的條件

鑒別試驗的項目

Testitems性狀

description反映該藥物特有的物理性質(zhì)外觀(顏色)、臭、味、溶解度以及物理常數(shù)：m.p.、b.p.、、粘度、比旋度等一般鑒別試驗generalidentificationtest專屬鑒別試驗

specificidentificationtest

FeCl3反應(yīng)加稀HCl，沉淀分解，生成游離白色堿式苯甲酸鐵鹽（赭色沉淀）鑒別試驗的方法化學(xué)鑒別法濕法＊呈色反應(yīng)＊沉淀↓生成反應(yīng)＊熒光反應(yīng)＊氣體↑生成反應(yīng)＊焰色反應(yīng)＊分解反應(yīng)——干法光譜鑒別＊UV＊IR光譜鑒別法

UV-可見光譜法紅外光譜法近紅外光譜法（near-infraredspectrophotometry）原子吸收法（atomicabsorption）質(zhì)譜法

(massspectrometry)核磁共振法（nuclearmagneticresonance，NMR）X射線粉末衍射法（x-raydiffraction）紫外光譜鑒別法

對比吸收光譜特征參數(shù)比較吸收度比值一致性對比吸收光譜一致性

X射線粉末衍射法

X射線是倫琴在1895年發(fā)現(xiàn)的，又曾稱為倫琴射線。本質(zhì)上是波長很短的電磁波，一般認(rèn)為波長為0.01～1nm，較紫外線還短。作為波，就可以產(chǎn)生衍射。所謂衍射，就是繞過障礙物邊緣向前傳播的現(xiàn)象當(dāng)X射線射到晶格排列整齊的晶體上，僅僅在某些方向有光線反射，這就是X射線的衍射。有光線反射的方向可用布拉格方程加以描述

X射線簡介

布拉格方程

式中θ為掠射角；dhkl為晶面間距；hkl為晶面指數(shù)，即晶面與晶軸截距的倒數(shù)之比，也叫密勒指數(shù)······························AOCBdθ圖16-23布拉格方程由布拉格方程，已知晶面間距和入射線波長，即可求出衍射線方向，可見該方程給出了什么條件下衍射的X射線可能從晶體射出。當(dāng)然晶面有若干組，都可產(chǎn)生相應(yīng)衍射，這些衍射均可由X射線衍射儀進行測定

X射線衍射儀的工作原理X射線衍射儀的工作原理一般采用粉末法。粉末衍射儀的構(gòu)成與工作原理見圖X射線管中不同靶材料，如銅、石墨等可發(fā)出各自特征波長

晶體粉末盡可能緊密地裝入玻璃毛細(xì)管，壓成多晶圓柱體。當(dāng)穿過鉛塊狹縫的一細(xì)束X射線射到晶體粉末時，總會有取向合適的微小晶體，使射線在其表面反向最強由反射方向，根據(jù)布拉格方程即可求出晶面間距，進而求出鍵長。本法可同時將各種波長的X射線反射到不同方向，記錄為衍射圖譜在新藥研制過程中，必需對藥物結(jié)構(gòu)進行確證，固體樣品一般要做X射線粉末衍射分析，以便從測定結(jié)果可比較研制品與對照品是否一致。X射線粉末衍射法是藥物晶型進行定性鑒別的重要方法之一應(yīng)用

應(yīng)用示例

西咪替丁的晶型研究

尹華等藥物分析雜志2001，21(1)：39~42測試條件：Cukα（靶），50kV-80mA（工作電壓-電流），8(o)/min，DS=SS=1℃，RS=0.15mm(狹縫)，2θA晶型和B晶型的X射線測定數(shù)據(jù)及圖譜見表

X射線衍射法除了用于晶型鑒別外，也可用于晶型藥物的定量分析

A晶型和B晶型的X射線測定數(shù)據(jù)A晶型B晶型衍射角晶面距豐度比衍射角晶面距豐度比9.380.942169.560.92403512.920.68473513.080.67636114.660.60381813.920.635725

16.440.53882318.480.47976216.740.529234

18.980.467241

26.000.34247526.100.34117526.340.3381526.380.337610027.240.32712728.440.31362828.440.3136372θ／(o)d／nmI／I02θ／(o)d／nmI／I0色譜鑒別法

TLCRfHPLCtrGCtrCEtr

溶液的濃度溶液的溫度溶液的酸堿度試驗時間干擾成分的存在鑒別試驗條件關(guān)鍵：反應(yīng)靈敏度高，專屬性好藥物的雜質(zhì)檢查

Testforpurity概述一般雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查概述☆有效性針對某些藥效進行檢查的項目如Al(OH)3的制酸力，反映主要質(zhì)量；明膠的凝凍度，控制物理性能；利福平的結(jié)晶度，影響生物利用度☆均一性含量均一性如“含量均勻度”試驗☆安全性進行異常毒性、熱原、降壓物質(zhì)和無菌等項目PethidineHydrochloride

鹽酸哌替啶m.p.186~190℃純度要求

雜質(zhì)來源sourceofimpurities酸度：以酸水解Cl-,SO42-：水解試劑帶入乙醇中不溶物：糊精，少量蛋白質(zhì)SO32-：水解試劑，SO42-還原，用H2SO3漂白產(chǎn)品帶入可溶性淀粉：水解不完全＊制備過程中產(chǎn)生＊貯藏過程中產(chǎn)生水解藥物最容易發(fā)生的變質(zhì)反應(yīng)，特別在堿性條件下，或升溫時外界條件影響：日光、空氣、溫度、濕度、微生物等引起藥物產(chǎn)生A晶型：不易被酯酶水解，活性很低易被酯酶水解而吸收，為有效晶型異構(gòu)體和多晶型

無味氯霉素B晶型氧化分解麻醉乙醚醛及有毒的過氧化物

雜質(zhì)限量檢查Limitofimpurites＊檢查意義一般雜質(zhì)：氯化物硫酸鹽鐵鹽

重金屬砷鹽＊雜質(zhì)限量的制訂＊雜質(zhì)限量計算、表示與檢查方法＊雜質(zhì)限量檢查方法取一定量(C·V)與被檢雜質(zhì)相同的純品或?qū)φ掌放涑蓪φ掌啡芤?，與一定量(S)藥物供試溶液在相同條件下處理后，比較反應(yīng)結(jié)果，以確定雜質(zhì)含量是否超過規(guī)定氯化物檢查

以對乙酰氨基酚為例重金屬檢查

以葡萄糖為例取本品2.0g100mlH2O冷卻△過濾取25ml依法檢查AgCl對照管NaCl溶液0.01mgCl/ml

問L?

5.0ml2ml本品4g23ml依法檢查H2OdilHAc含重金屬不得超過百萬分之五，問應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液(0.01mgPb/ml)多少ml?一般雜質(zhì)檢查Detectionofgeneral

impurites

項目氯化物硫酸鹽鐵鹽重金屬條件稀HNO310ml稀HCl2ml稀HCl4ml過硫酸銨pH3.5醋酸鹽Buffer靈敏度0.05~0.08mg/50ml0.1~0.5mg/50ml0.01~0.02mg/35ml標(biāo)準(zhǔn)液濃度0.01mg/ml0.1mg/ml0.01mg/ml0.01mg/ml第一法反應(yīng)試劑AgNO3

BaCl2

NH4SCNHeavymetals:Ag,Pb,Hg,Cu,Bi,Sn,As,Co,Ni,Zn依法檢查取兩倍量供試品標(biāo)準(zhǔn)管樣品管濾液硫代乙酰胺過濾硫代乙酰胺H2OMS＋標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液注意點第二法：含芳環(huán)或雜環(huán)的有機藥物

如苯佐卡因、甲硝唑第三法:溶于堿的藥物或在稀酸產(chǎn)生沉淀的藥物，如磺胺類、巴比妥類第四法：鉛斑法微孔濾膜過濾法檢查重金屬裝置C墊圈(外徑10mm,內(nèi)徑6mm)D濾膜(直徑10mm,孔徑3.0μm)E輔助濾板CDABFE濾器下部濾器上蓋連接頭砷鹽

arsenic國內(nèi)外常用方法：古蔡