任務3-4 紫外-可見分光光度計

光源單色器樣品吸收池檢測器信號顯示系統在紫外及可見光區(qū)用于測定溶液吸光度的分析儀器稱為紫外-可見分光光度計，型號較多，基本構造相似，包括：項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度2工作原理復合光源經過單色器后，被分成單色光（如254nm、366nm、378nm等波長的光），經過裝有樣品溶液的吸收池，樣品中的吸光質點會吸收掉一部分光，而將剩余的光透射到檢測器（光電管）上，從而測定出樣品的吸收度，樣品的吸收度與樣品的濃度在一定范圍內成正比。光源單色器樣品吸收池檢測器信號顯示系統項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度3在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。

可見光區(qū)：鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在320～2500nm。

紫外區(qū)：氫、氘燈,發(fā)射185～375nm的連續(xù)光譜。氘燈應用最廣泛。1)光源項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度4氙燈氫燈鎢燈氫燈----紫外光源鎢燈、氙燈----可見光源1)光源項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度5作用：將光源發(fā)射的復合光分解成單色光并可從中選出任一波長單色光的光學系統。入射狹縫準直鏡

棱鏡（早期儀器）單色器的組成色散元件

光柵

（目前儀器）

聚焦透鏡出射狹縫2)單色器項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度62)單色器項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度7（2）組成①入射狹縫：光源的光由此進入單色器。②準光裝置：透鏡或反射鏡使入射光變成為平行光。③色散元件：將復合光分解成單色光；棱鏡或光柵。④聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫。⑤出射狹縫。2)單色器項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度8色散元件的類型A、棱鏡：有玻璃和石英兩種材料。色散原理是依據不同波長的光通過棱鏡時有不同的折射率而將不同波長的光分開

入射狹縫準直透鏡棱鏡聚焦透鏡出射狹縫白光紅紫λ1λ22)單色器項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度9A、棱鏡玻璃棱鏡：適用于350～3200nm，可用于可見光區(qū)。玻璃對紫外光有吸收。石英棱鏡：適用于185～4000nm，可用于紫外、可見整個光區(qū)，但主要用于紫外光區(qū)。色散元件的類型2)單色器項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度10色散元件的類型B、光柵M1M2出射狹縫光屏透鏡平面透射光柵光柵衍射示意圖

光柵：在鍍鋁的玻璃表面刻有數量很大的等寬度等間距條痕(300～2000條/mm)。原理：利用光通過光柵時發(fā)生衍射和干涉現象而分光.2)單色器項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度11色散元件的類型B、光柵適用于紫外、可見和近紅外光譜區(qū)域。優(yōu)點：在整個波長區(qū)域中具有良好的、幾乎均勻一致的分辨能力，具有適用波長范圍寬、分辨率高、成本低、便于保存和易于制作等缺點：各級光譜會重疊而產生干擾。2)單色器項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度12樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和相應的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池兩種。吸收池厚度（L）規(guī)格：0.5、1、2、3cm在紫外區(qū)須采用石英池，可見區(qū)一般用玻璃池。3)吸收池項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度13吸收池的配對（P74）在定量分析中，尤其是在紫外光區(qū)測定時，需要對吸收池作校準及配對工作，以消除吸收池的誤差，提高測量的準確度。一般商品吸收池的光程與其標示值常有微小的誤差，即使是同一廠家生產的同規(guī)格的吸收池，也不一定能夠互換使用。根據JJG178-96規(guī)定，石英吸收池220nm處裝蒸餾水；在350nm處裝K2Cr2O70.001mol/LHC1O4溶液；玻璃吸收池在440nm處裝蒸餾水；在400nm處裝K2Cr2O7溶液（濃度同上）。以一個吸收池為參比，調節(jié)τ為100％，測量其他各池的透射比，透射比的偏差小于0.5％的吸收池可配成一套。3)吸收池項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度14在吸收池中分別裝入測定用溶劑（一般是純水），以其中一個為參比，測定其他吸收池的吸光度。若測定的吸光度為零或兩個吸收池吸光度相等，即為配對吸收池。若不相等，可以選出吸光度值最小的吸收池為參比，測定其他吸收池的吸光度，求出修正值。測定樣品時，將待測溶液裝入校正過的吸收池，測量其吸光度，所測得的吸光度減去該吸收池的修正值即為此待測液真正的吸光度吸收池的配對（P74）3)吸收池項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度15作用：將透過吸收池的光信號變成可測的電信號，常用的有光電管或光電倍增管。硒光電池結構圖4)檢測器項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度16作用：將檢測器輸出的微弱電信號加以放大顯示數字顯示顯示方式：透光率、吸光度、濃度、吸光系數直讀檢流計微機自動控制和結果處理5)信號顯示系統項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度17小結項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度18分類1.單光束分光光度計(721型；722型)經單色器分光后得到一束平行光，輪流通過參比溶液和樣品溶液。

簡單，價廉，操作方便，維修容易。適用于常規(guī)分析。項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度192.雙光束分光光度計（UV762）經單色器分光后再經反射鏡分解為強度相等的兩束光，同時分別通過參比池和樣品池能連續(xù)改變波長，自動比較樣品及參比溶液的透光強度，自動消除光源強度變化所引起的誤差?？上庠床环€(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響，儀器復雜，價格較高。項目3測定未知吸光物質的吸光曲線和濃度203.雙波長分光光度計由同一光源發(fā)出的光被分成兩束，分別經過兩個單色器，得到兩束不同波長(λ1、λ2)的單色光