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關(guān)于食源性疾病主動監(jiān)測生物樣本介紹主要內(nèi)容一、概述-為什么做?檢什么菌?采什么標(biāo)本?如何鑒定?如何報送菌株?(網(wǎng)報另講)二、實驗室檢測技術(shù)-沙門氏菌、志賀氏菌三、實驗室檢測技術(shù)-致瀉大腸埃希氏菌四、實驗室檢測技術(shù)-副溶血性弧菌以上菌株鑒定均安排了實驗室演示課第2頁,共42頁,2024年2月25日,星期天1、疑似食源性異常病例/異常健康事件監(jiān)測2、食源性疾病主動監(jiān)測3、食源性疾?。òㄊ澄镏卸荆﹫蟾姹O(jiān)測食源性疾病監(jiān)測內(nèi)容第3頁,共42頁,2024年2月25日,星期天2013年我省食源性疾病監(jiān)測食源性疾病主動監(jiān)測2012年8家醫(yī)院和4家疾控機構(gòu)2013年11家醫(yī)院和11家疾控機構(gòu)
第4頁,共42頁,2024年2月25日,星期天2013年食源性疾病主動監(jiān)測單位第5頁,共42頁,2024年2月25日,星期天實驗室檢測(一)目的為食源性疾病診斷提供病原學(xué)確證,通過對病原體進行深入的分析,從病原學(xué)上提供病因相關(guān)性的實際證據(jù),結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查,分析污染食品的來源、證實污染食品在暴發(fā)流行中的作用。建立我國食源性致病菌分子分型溯源數(shù)據(jù)庫,提高早期發(fā)現(xiàn)食源性疾病暴發(fā)的能力;同時,對食源性致病菌分離株開展藥敏試驗,為食源性疾病治療、預(yù)防和控制措施提供指導(dǎo)。第6頁,共42頁,2024年2月25日,星期天實驗室檢測(二)檢測項目(檢哪幾種病菌?)對標(biāo)本進行可疑食源性致病菌菌株(沙門氏菌、致瀉大腸埃希氏菌、志賀氏菌、副溶血性弧菌)實驗室檢測分離,向“國家食源性疾病主動監(jiān)測網(wǎng)”報送數(shù)據(jù)、信息,省疾控審核認可后上報。原則上每家主動監(jiān)測點醫(yī)院每周提供不少于10份病歷信息和標(biāo)本,全年提供不少于500份。第7頁,共42頁,2024年2月25日,星期天實驗室檢測(三)標(biāo)本采集(如何采樣?)監(jiān)測病例為以腹瀉癥狀為主訴(吃了食品引起的)就診的門診和住院病例,每日排便3次或3次以上,且糞便性狀異常(稀便、水樣便、粘液便或膿血便等)。病人排出新鮮糞便于無菌容器內(nèi),用2支無菌棉拭子多點采集糞便樣本(如有膿血或黏液應(yīng)挑取膿血、黏液部分,液體糞便應(yīng)取絮狀物,使棉拭子表面蘸滿糞便),插入Cary-Blair運送培養(yǎng)基內(nèi)。第8頁,共42頁,2024年2月25日,星期天實驗室檢測(三)標(biāo)本收集標(biāo)本包括新鮮的或轉(zhuǎn)移至Cary-Blair運送培養(yǎng)基的糞便或肛拭子。最優(yōu)標(biāo)本是轉(zhuǎn)移至Cary-Blair運送培養(yǎng)基的糞便拭子。肛拭子不是最佳標(biāo)本,僅在病人無糞便標(biāo)本時采用。肛拭子收集后應(yīng)當(dāng)目測,需要在拭子上明顯見到糞便。所采集的標(biāo)本盡快檢驗,放入Cary-Blair運送培養(yǎng)基中的標(biāo)本應(yīng)在冷藏條件下24h內(nèi)送檢。新鮮的糞便標(biāo)本置于清潔、干燥、無肥皂或消毒液殘留的容器中,冷藏條件下8h內(nèi)送檢。
第9頁,共42頁,2024年2月25日,星期天糞便樣本的保存、運送和檢測培養(yǎng)條件mEC:新生霉素增菌肉湯SBG磺胺增菌液MAC麥康凱瓊脂平板木糖賴氨酸脫氧膽鹽(XLD)改良CCD瓊脂基礎(chǔ)(mCCD)致病性大腸桿菌(EPEC)腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)腸出血性大腸桿菌(EHEC)腸黏附性大腸桿菌(EAEC)硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂培養(yǎng)基TCBS第10頁,共42頁,2024年2月25日,星期天四、檢驗程序(如何鑒定?)第11頁,共42頁,2024年2月25日,星期天五、結(jié)果與報告(如何報?)
當(dāng)檢出的可疑菌落生化性狀符合致病菌主要生化特征,結(jié)合血清學(xué)和毒力基因鑒定結(jié)果,報告糞便標(biāo)本中是否檢出所規(guī)定的致病菌。通過“國家食源性疾病主動監(jiān)測網(wǎng)”報送數(shù)據(jù)、信息,省疾控審核認可后上報。第12頁,共42頁,2024年2月25日,星期天
六菌株的保存和上送(如何送?)
培養(yǎng)物穿刺接種3%氯化鈉半固體培養(yǎng)基,輕擰管蓋,36℃±1℃培養(yǎng)24h,蓋緊管蓋。也可以在動力試驗培養(yǎng)基24h培養(yǎng)物上加入一層滅菌礦物油。(副溶弧菌室溫貯存培養(yǎng)物,不要冷藏。)
如果需要長期保存菌株,將0.7mL3%氯化鈉腦心浸液肉湯6h~12h培養(yǎng)物和0.3mL滅菌甘油加入滅菌菌種管,立即放置-70℃保存。按照方案要求定期上送。
第13頁,共42頁,2024年2月25日,星期天二、實驗室檢測技術(shù)-沙門氏菌、志賀氏菌第14頁,共42頁,2024年2月25日,星期天SBG磺胺增菌液MAC麥康凱瓊脂平板木糖賴氨酸脫氧膽鹽(XLD)動力-靛基質(zhì)-鳥氨酸瓊脂(MIO)第15頁,共42頁,2024年2月25日,星期天二、實驗室檢測技術(shù)-沙門氏菌、志賀氏菌第16頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第17頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第18頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第19頁,共42頁,2024年2月25日,星期天二、實驗室檢測技術(shù)-沙門氏菌、志賀氏菌第20頁,共42頁,2024年2月25日,星期天三、實驗室檢測技術(shù)-致瀉大腸埃希氏菌第21頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第22頁,共42頁,2024年2月25日,星期天致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)第23頁,共42頁,2024年2月25日,星期天致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)第24頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第25頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第26頁,共42頁,2024年2月25日,星期天致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)第27頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第28頁,共42頁,2024年2月25日,星期天致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)第29頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第30頁,共42頁,2024年2月25日,星期天三、實驗室檢測技術(shù)-副溶血性弧菌第31頁,共42頁,2024年2月25日,星期天硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂培養(yǎng)基TCBS第32頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第33頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第34頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第35頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第36頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第37頁,共42頁,2024年2月25日,星期天第38
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