全自動封閉型發(fā)光免疫分析儀校準規(guī)范

JJF1752—20191全自動封閉型發(fā)光免疫分析儀校準規(guī)范1范圍本規(guī)范適用于化學發(fā)光、電化學發(fā)光原理的全自動封閉型發(fā)光免疫分析儀的校準。2引用文件本規(guī)范引用了下列文件:JJF1001—2011通用計量術語及定義JJF1059.1測量不確定度評定與表示YY/T1155—2019全自動發(fā)光免疫分析儀凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本規(guī)范;凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本規(guī)范。3概述全自動封閉型發(fā)光免疫分析儀(以下簡稱免疫分析儀)是采用免疫分析方法檢測樣本中特定靶標的分析儀器。免疫分析儀通常由計算機系統(tǒng)、內部伺服系統(tǒng)、加樣單元、清洗單元、孵育單元及檢測單元構成(見圖1),通常只能與廠商配套提供的試劑盒組成檢測系統(tǒng)完成特定靶標的分析,具有封閉性。免疫分析儀可按照設定的程序自動完成加樣、清洗、孵育、檢測等整個分析過程,通過檢測免疫反應時產(chǎn)生的化學發(fā)光或電化學發(fā)光信號實現(xiàn)特定靶標定性或定量檢測。圖1免疫分析儀結構示意圖4計量特性4.1示值誤差以5.2.1中規(guī)定的標準物質的測量結果表示,示值誤差不大于±15%,也可參照廠商給出的技術要求。4.2重復性JJF1752—20192測量重復性不大于8%。4.3攜帶污染率攜帶污染率不大于1%。4.4線性線性相關性系數(shù)r不小于0.99。注:以上技術指標不是用于合格性判別,僅供參考。5校準條件5.1環(huán)境條件5.1.1環(huán)境溫度:(10~30)℃。5.1.2相對濕度:≤70%。5.1.3室內應具備良好的防塵措施,免疫分析儀應遠離振動、電磁干擾。5.2校準用標準物質和試劑5.2.1校準用標準物質:人胰島素、生長激素或甲胎蛋白等有證標準物質,相對擴展質的選擇原則參照附錄A。6校準項目和校準方法6.1示值誤差示值誤差的校準宜采用免疫分析儀規(guī)定檢測項目的有證標準物質。通常情況下,檢測項目的校準點至少應當包括1個低值點和1個高值點,低值點和高值點至少應相差1個數(shù)量級,且低值點和高值點應當覆蓋客戶要求的校準點或校準區(qū)間;當客戶要求時,也可進行單點校準。分別測量選定檢測項目的校準點,每個校準點分別重復測量3次,計算3次測量結果的平均值。根據(jù)公式(1)計算示值誤差:Δc=c-cs(1)式中:Δc—示值誤差;c—3次測量結果的平均值;cs—標準值。單位與標準物質標準值的單位一致。6.2重復性對低值點重復測量6次,根據(jù)公式(2)計算相對實驗標準偏差srel作為重復性的表征:srel=(xi-x)2i=16-11×x(2)JJF1752—20193式中:srel—相對標準偏差;xi—第i次標準物質的測量值; x—6次測量結果平均值;i測量序號。6.3攜帶污染率按照從高值到低值的測量順序,分別連續(xù)測量高值和低值各3次,測量值分別記為i1、i2、i3和j1、j2、j3。以CO來表征免疫分析儀的攜帶污染率,見公式(3):CO= (3)式中:CO—攜帶污染率;j1—低值標準物質第1次測量值;j3—低值標準物質第3次測量值;i3—高值標準物質第3次測量值。6.4線性在低值至高值范圍內,對至少5個濃度的標準物質(或配制的校準溶液)進行測量,重復測量3次,取其平均值。將測量結果的平均值與標準物質的標準值(或校準溶液的配制值)進行線性回歸,按公式(4)~公式(7)計算相關系數(shù)r:Sxx=∑c- -Syy=∑2-()2 -Sxy=∑cs-∑c∑c√SxxSyyr=√SxxSyy式中:cs—每個水平標準物質的標準值,單位為標準物質標準值的單位;—每個水平3次測量結果平均值,單位為標準物質標準值的單位;n—標準物質濃度水平的個數(shù);r—相關系數(shù)。(4)(5)(6)(7)7校準結果表達校準記錄應盡可能詳盡地記載測量數(shù)據(jù)和計算結果,推薦的校準記錄格式見附錄B。示值誤差測量結果的測量不確定度應按JJF1059.1的要求評定,不確定度評定示例見附錄C。經(jīng)校準的免疫分析儀應出具校準證書,校準證書應符合JJF1071—2010中5.12的要求。JJF1752—201948復校時間間隔由于復校時間間隔的長短是由免疫分析儀的使用情況、使用者、儀器本身質量等諸因素所決定的,因此,送校單位可根據(jù)實際使用情況自主決定復校時間間隔,建議不超過1年。5附錄A校準用標準物質的選擇原則A.1標準物質的選擇人胰島素、生長激素或甲胎蛋白有證標準物質不可獲得或客戶要求時,可選用其他檢驗項目的有證標準物質進行校準。A.2校準示值誤差的標準物質校準示值誤差的標準物質應具有互換性*,由于免疫分析存在基質效應,校準示值誤差時不建議將有證標準物質稀釋使用,否則可能影響互換性。*互換性指對于給定標準物質的規(guī)定量,由兩個給定測量程序所得測量結果之間關系與另一個指定物質所得測量結果之間關系一致程度表示的標準物質特性。[JJF1001—2011,定義8.16]A.3校準重復性、攜帶污染率和線性的標準物質校準重復性、攜帶污染率和線性時可采用高純有證標準物質按照重量-容量法配制校準溶液,但此時應當考慮配制過程中引入的不確定度;用于攜帶污染率校準的兩個標準物質濃度應至少相差一個數(shù)量級;用于線性校準的標準物質的最高濃度與最低濃度應至少相差一個數(shù)量級。JJF1752—20196附錄B校準記錄及校準證書的內容及格式推薦的全自動封閉型發(fā)光免疫分析儀校準記錄、校準證書內容及格式分別見圖B.1和圖B.2。共2頁,第1頁儀器名稱型號制造廠商出廠編號委托單位名稱聯(lián)系人地址電話溫濕度校準日期記錄編號證書編號校準員核驗員一、示值誤差標準物質測定值平均值標準值示值誤差低值高值二、重復性標準物質測定值低值平均值相對標準偏差/%圖B.1校準記錄的內頁格式及內容JJF1752—20197三、攜帶污染率共2頁,第2頁標準物質測定值攜帶污染率/%低值高值四、線性相關性標準物質測定值平均值標準值線性相關系數(shù)123456圖B.1(續(xù))8共頁,第頁序號校準項目校準結果1示值誤差2重復性3攜帶污染率4線性附注:1.示值誤差校準結果測量不確定度:2.線性范圍:3.校準技術依據(jù):4.校準的環(huán)境條件及地點:環(huán)境溫度:℃,相對濕度:%校準地點:校準員:核驗員:圖B.2校準證書的內容及格式JJF1752—2019附錄C示值誤差測量結果的不確定度評定示例C.1測量方法采用免疫分析儀測定有證標準物質,并與標準物質標準值進行比較。C.2測量模型示值誤差可由公式(C.1)給出:(C.1)Δc=c-cs(C.1)式中:Δc—示值誤差,單位為標準物質標準值的單位;c—3次測定結果的算術平均值,單位為標準物質標準值的單位;cs—標準物質的標準值。C.3不確定度來源不確定度來源包括:a)免疫分析儀測量重復性引入的標準不確定度u(c); b)標準物質引入的標準不確定度u(cs)。 C.4合成標準不確定度計算公式依據(jù)不確定度傳播律,免疫分析儀測量重復性引入的標準不確定度u(c)與標準物質引入的標準不確定度u(cs)不相關,故輸出量估計方差的完整表達式應為:u=u(c)2+u(cs)2(C.2)由公式(C.2)得:uc=u(c)2+u(cs)2(C.3)下面以一次免疫分析儀校準為例具體分析其測量不確定度。在校準中胰島素標準物質3次測定的結果分別為152pmol/L、160pmol/L和156pmol/L;該標準物質的標準值為(148±7)pmol/L(k=2)。C.5標準不確定度一覽表標準不確定度一覽表見表C.1。表C.1免疫分析儀測定胰島素標準物質的標準不確定度一覽表不確定度來源輸入量的標準不確定度pmol/L靈敏系數(shù)標準不確定度分量pmol/L u(c) 測量重復性3.013.0u(cs)標準物質3.5-13.5uc=4.6pmol/LJJF1752—2019C.6標準不確定度分量計算C.6.1測量重復性引入的標準不確定度分量u(c)選定一臺全自動封閉型發(fā)光免疫分析儀,對該胰島素標準物質連續(xù)測量10次,得到一組測量值:152pmol/L,160pmol/L,156pmol/L,160pmol/L,162pmol/L,151pmol/L,167pmol/L,163pmol/L,164pmol/L,158pmol/L。則單次測量結果的標準差s(xi):s(xi)=i(nx-i-1x)2≈5.1(pmol/L)實際校準時在重復性條件下連續(xù)測量3次,以3次測量的算術平均值作為結果,則由測量重復性引入的標準不確定度分量:C.6.2標準物質引入的標準不確定度分量u(cs)u(c)=sC.6.2標準物質引入的標準不確定度分量u(cs)由標準物質引入的不確定度分量u(cs)可以根據(jù)標準物質證書提供的擴展不確定度U(cs)和包含因子k根據(jù)公式(C.4)計算:u(cs)(C.4)式中:u(