生物安全題庫及生物安全手冊

PAGEPAGE39生物安全題一、單選題1生物實驗中的一次性手套及沾染EB致癌物質的物品，應（）。A丟棄在普通垃圾箱內B統(tǒng)一收集和處理C隨意放在實驗室D立即燒毀B2實驗室常用于皮膚或普通實驗器械的消毒液有（）。A75%乙醇B福爾馬林（甲醛）C來蘇兒（甲酚）D漂白粉（次氯酸鈉）A3在分子生物學、遺傳學、基因工程等實驗中，常見藥品（）是致癌物質？實驗中不能讓藥品接觸到皮膚上。A單體丙烯酰胺B甲叉雙丙稀酰胺C溴化乙錠（EB）D十二烷基磺酸鈉C4實驗室生物安全性問題不僅涉及到動物間疾病的傳播，最主要還關系到什么？A實驗成敗B實驗室污染C人民身體健康D動物死亡C5關于紫外線消毒，下列說法不正確的是（）。A它可以是固定式的，也可以是活動式的，但距離被照射物不超過1.2m為宜B紫外線消毒方便實用，但不能徹底滅菌，特別是對細菌的芽孢殺滅效果較差C紫外線對人體有傷害作用，不可直視，更不能在開著的紫外燈光下工作D紫外線可用于所有病原微生物的消毒D6移液時，當有生物污染性物質濺出，為防止擴散應（）。A立即用浸過消毒劑的布或紙?zhí)幚?，然后將被污染的物品進行高壓消毒B立即用布或紙?zhí)幚鞢立即采用高壓消毒D立即用浸過消毒劑的布或紙?zhí)幚鞟7依照實驗室生物安全國家標準的規(guī)定，什么場所不得從事高致病性病原微生物實驗活動？A一級、二級實驗室B三級實驗室C四級實驗室D五級實驗室A8在微生物實驗中，一些污染或盛有有害細菌和病毒的器皿，可（）。A不需要經(jīng)消毒和高壓滅菌處理后就再利用B不需要經(jīng)消毒和高壓滅菌處理后就直接棄掉C經(jīng)消毒和高壓滅菌處理后，再利用D集中存放待統(tǒng)一處理C9在微生物實驗中，一些不要的菌種等可（）。A直接向下水管道傾倒B不需要經(jīng)消毒和高壓滅菌處理后，直接棄掉C經(jīng)消毒和高壓滅菌處理后，再棄掉D經(jīng)紫外線照射后直接棄掉C10如果在微生物實驗中出現(xiàn)意外事故（如菌種管打破等），應立即用什么來清潔桌面、洗手等，及時殺滅細菌和病毒，避免污染面擴大？A用消毒劑（84消毒劑）B用普通自來水C用純凈水D乙醇A11恒溫培養(yǎng)箱的使用最高溫度為（）。A60B100C45D80A12紫外線消毒方便實用，紫外燈可以是固定式，也可以是活動式的，但離被照射物不應超過多少距離？A1.2mB1.8mC2.2mD3.2mA13在生物醫(yī)學實驗室中進行有害微生物和轉基因操作，應使用（）。A生物安全柜B凈化工作臺C普通實驗臺D通風柜A14采用下列哪種方法對受污染的移液管消毒滅菌后，再用自來水沖洗及去離子水沖凈？A適宜的消毒劑中浸泡和高壓滅菌鍋中B高壓消毒鍋中C適宜的消毒劑中浸泡D肥皂水中浸泡A15使用移液管時下列哪種操作是正確的？A可以用移液管反復吸入和抽出傳染性物質B一根移液管未經(jīng)清洗，可吸取多種溶液C可以將任何傳染性物質的液體吹入空氣D用洗耳球吹吸移液管D16關于使用高壓滅菌器注意事項不正確是（）。A注意防護，防止燙傷，待溫度降下后再開蓋B禁止器皿蓋著蓋子進行高壓滅菌，易產(chǎn)生爆裂C定期檢查排水桶、排水管D一次高壓滅菌物品盡可能裝滿D17使用高壓滅菌器時，以下哪個要求是不必要的？A滅菌器腔內裝載要松散，以便蒸汽作用均勻B必須穿防護服和戴手套C滅菌器的排水過濾器應經(jīng)常拆下清洗D待溫度降至80°C以下時才能打開高壓滅菌器B18以下哪種不是生物醫(yī)學類實驗室中必備的消毒溶液？A0.5%的次氯酸鈉溶液B1.0%的來蘇爾溶液C75%乙醇溶液及棉球D10%氨水D19被病原微生物污染的玻璃器皿，應先放在什么設備中進行消毒滅菌？A烘箱B高壓滅菌鍋C加熱真空烘箱D微波爐B20全自動高壓滅菌器的使用哪項是正確的（）。A同類物品裝放一起B(yǎng)液體和固體物品分開存放C敷料與器械同時滅菌時，應將敷料放在下層D常用各種物品的滅菌時間為20-30min（110-121℃B21一本實驗原始記錄本的封面被細菌污染，適宜的消毒方法是（）。A干烤B高壓蒸汽滅菌法C75%酒精浸泡D紫外線照射D22生物安全柜操作時廢物袋以及盛放廢棄吸管的容器放置要求不正確的是（）。A廢物袋以及盛放廢棄吸管的容器等必須放在安全柜內而不應放在安全柜之外B體積大的放在生物安全柜一側即可C污染的吸管、容器等應先在放于安全柜中裝有消毒液的容器中消毒1h以上，方可處理D消毒后的廢棄物方可轉入醫(yī)療廢物專用垃圾袋中進行高壓滅菌等處理B23下列不屬于實驗室一級防護屏障的是：A生物安全柜B防護服C口罩D緩沖間D24下列哪些措施不是減少氣溶膠產(chǎn)生的有效方法：A規(guī)范操作B戴眼罩C加強人員培訓D改進操作技術B25運輸高致病性原微生物菌（毒）種或者樣本須有不少于2人護送，并采取相應的防護措施，以下哪種運輸方式目前是不允許的：A城市鐵路B飛機C專車D輪船A26二級生物安全實驗室必須配備的設備是：A生物安全柜和培養(yǎng)箱B生物安全柜和水浴箱C生物安全柜和高壓滅菌器D離心機和高壓滅菌器C27PCR實驗室要求嚴格分區(qū)，一般分為以下四區(qū)：A主實驗區(qū)、樣本置備區(qū)、產(chǎn)物擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)B試劑準備區(qū)、樣本置備區(qū)、產(chǎn)物擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)C主實驗區(qū)、樣本置備區(qū)、產(chǎn)物擴增區(qū)、試劑準備區(qū)D主實驗區(qū)、試劑準備區(qū)、產(chǎn)物擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)B28作為甲類傳染病的霍亂進行大量活菌的實驗操作應該在哪種級別的實驗室ABSL-1BBSL-2CBSL-3DBSL-4B29避免感染性物質擴散實驗操作的注意點是A微生物接種環(huán)直徑應為2～3mm并且完全閉合，柄的長度不應超過6cmB應該使用密閉的微型電加熱滅菌接種環(huán),最好使用一次性的、無需滅菌的接種環(huán)C小心操作干燥的痰標本，以免產(chǎn)生氣溶膠D以上都對D30高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本在運輸過程中發(fā)生被盜、被搶、丟失、泄露時，承運單位、護送人、保藏機構應立即采取必要的控制措施，以下多少小時內向有關部門報告的時間是A1小時B2小時內C3小時D4小時B31生物安全柜在使用前需要檢查正常指標，不包括A噪聲B氣流量C負壓在正常范圍D風A32微生物對消毒因子的抗力從高到低的順序是A細菌芽孢、分枝桿菌、親水性病毒、真菌孢子、真菌繁殖體、細菌繁殖體、親脂性病毒B細菌芽孢、真菌孢子、分枝桿菌、親水性病毒、真菌繁殖體、細菌繁殖體、親脂性病毒C細菌芽孢、分枝桿菌、真菌孢子、親水性病毒、真菌繁殖體、細菌繁殖體、親脂性病毒D真菌孢子、細菌芽孢、分枝桿菌、親水性病毒、真菌繁殖體、細菌繁殖體、親脂性病毒B33脫卸個人防護裝備的順序是A外層手套→防護眼鏡→防護服→口罩帽子→內層手套B防護眼鏡→外層手套→口罩帽子→防護服→內層手套C防護服→防護眼鏡→口罩帽子→外層手套→內層手套D口罩帽子→外層手套→防護眼鏡→內層手套→防護服A34二級生物安全實驗室硬件設施方面必須具備的條件A送排風系統(tǒng)B三區(qū)兩緩布局CUPS電源D自動閉門系統(tǒng)D35生物安全柜內少量灑溢，沒有造成嚴重后果屬于A嚴重差錯B一般差錯C一般實驗室感染事故D嚴重實驗室感染事故B36下列哪種不是實驗室暴露的常見原因A因個人防護缺陷而吸入致病因子或含感染性生物因子的氣溶膠B被污染的注射器或實驗器皿、玻璃制品等銳器刺傷、扎傷、割傷C在生物安全柜內加樣、移液等操作過程中，感染性材料灑溢D在離心感染性材料及致病因子過程中發(fā)生離心管破裂、致病因子外溢導致實驗人員暴露C37實驗動物按對攜帶的微生物控制程度分成不同的等級，國際分級為A．普通動物、悉生動物、無菌動物B．普通動物、清潔動物、無菌動物C．普通動物、清潔動物、悉生動物D．普通動物、無特定病原體動物、無菌動物D38在參照國際標準的基礎上，從我國實驗動物實際情況出發(fā)常將實驗動物分為以下幾級A．普通動物、悉生動物、無菌動物B．普通動物、悉生動物、清潔動物、無菌動物C．普通動物、無特定病原體動物、無菌動物D．普通動物、清潔動物、無特定病原體動物、無菌動物D39國內分級法與國際分級法相比，在普通動物與無特定病原體動物間增加了一類等級動物：A．悉生動物B．無特定病原體動物C．清潔級動物D．無菌動物C40以下不屬于實驗動物攜帶的人畜共患傳染病病原體的是：A．狂犬病毒B．漢坦病毒C．梅毒螺旋體D．馬爾堡病毒C41結核分枝桿菌可以通過何種途徑侵入易感機體，以下說法正確的是：A．呼吸道B．消化道C．皮膚損傷D．以上說法都對D42以下不能引起人畜共患病的沙門菌是：A．鼠傷寒沙門菌B．腸炎沙門菌C．副傷寒沙門菌D．豬霍亂沙門菌C43深部真菌的易感動物有：A．人B.貓C．猴D．以上都對D44以下可以引起實驗動物攜帶的人畜共患傳染病病原體的是：A．狂犬病毒B．漢坦病毒C．猴痘病毒．以上都對D45動物實驗室的安全防護分幾級？A．一級B．二級C．三級D．四級D46在安全柜型生物安全四級實驗室，生物安全四級病原微生物感染的實驗動物應飼養(yǎng)在什么級別安全柜內？A．一級生物安全柜B．二級生物安全柜C．三級生物安全柜D．四級生物安全柜C47動物實驗的基本操作規(guī)范涉及：A．實驗動物的飼養(yǎng)管理B．實驗動物的操作與處理內容C．實驗操作后的護理D．以上都對D48病原菌分離的培養(yǎng)物，何種結果需要121℃30分鐘高壓消毒A．陽性結果B．陰性結果C．以上兩種均不需要D．以上兩種均需要D49關于實驗動物護理的基本原則，以下說法錯誤的是：A．實驗動物的飼養(yǎng)和使用應遵守國家有關的法律和規(guī)定。B．動物實驗可以在實驗室內任何的區(qū)域進行。C．使用過程中要求保證周圍環(huán)境和實驗人員的安全。D．完善標準操作規(guī)程，避免或減輕因實驗對動物造成的不適或痛苦。B50高壓蒸汽滅菌的紗布敷料、棉球打開未用完，最長保存期為：A．24小時B．10小時C．48小時D．2小時A51新潔爾滅是實驗室常用消毒劑，其濃度為：Ａ．0.01%B．0.1%C．1%D．10%B52輻射滅菌法不包括：A．紫外線B．紅外線C．微波D．燃燒D53紫外線照射消毒時間一般為：A．10min以上B．20min以上C．30min以上D．15min以上C54紫外線照射以多少納米波長最為有效：A．250-256nmB．200-300nmC．260-280nmD．260-266nmD55有些不耐100℃的物質，用間歇滅菌:將物品先用___加熱1h，然后置37℃保存A．30～40℃B．45～55℃C．75～80℃D．85C56手術室、無菌室的空氣消毒，常采用下列哪種方法Ａ．來蘇爾噴灑Ｂ．高錳酸鉀液噴灑Ｃ．70％酒精噴灑D．紫外線照射D57常規(guī)微生物操作規(guī)程中的安全操作要點，以下哪一項是錯誤的？（）A.禁止非工作人員進入實驗室B.禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物C.所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室之前不必進行滅菌D.以移液器吸取液體，禁止口吸C58關于生物安全實驗室個人責任，其中錯誤的是（）。A.食品、飲料及類似物品只應在指定的區(qū)域中準備和食用B.實驗室內禁止吸煙C.禁止在工作區(qū)域內使用化妝品和處理隱性眼鏡，長發(fā)應束在腦后，工作時若戴有戒指、耳環(huán)、手表、手鐲、項鏈和其它珠寶應將其置于個人防護裝備內D.所有實驗室工作人員應接受免疫以預防其可能被所接觸的生物因子感染，應按有關規(guī)定保存免疫紀錄和免疫前血清D59采集病原微生物樣本應當具備的條件，其中不正確的是：（）。A.具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護水平相適應的設備B.具有掌握相關專業(yè)知識和操作技能的工作人員C.具有有效的防止病原微生物擴散和感染的措施D.具有疑似某種病原微生物感染癥患者整個臨床病期均可采集樣本D二、多選題1對人類而言，下列那種情況屬于生物威脅的來源？A各種致病微生物、轉基因生物B外來生物入侵C工廠煙囪排放的空氣污染D生物恐怖事件ABD2實驗室生物安全防護的內容包括（）。A安全設備、個體防護裝置和措施B嚴格的管理制度和標準化的操作程序和規(guī)程C實驗室的特殊設計和建設要求D實驗樓宇智能化系統(tǒng)ABC3以下哪幾項是實驗室生物安全防護的目的？A保護試驗者不受實驗對象侵染B確保實驗室其他工作人員不受實驗對象侵染C確保周圍環(huán)境不受其污染D保證得到理想的實驗結果ABC4以下關于二級生物安全防護實驗室的注意事項中，正確的是（）。A必須使用生物安全柜等專用安全設備B工作人員在試驗時應穿工作服，戴防護眼鏡C工作人員手上只有在皮膚破損或皮疹時，才應戴手套D必須具備噴淋裝置、洗眼器等應急防護設施ABD5生物醫(yī)學實驗室中個人防護用品包括（）。A口罩、帽子、一次性手套B防護鏡C防護服D紙巾ABC6高致病性病原微生物是指A第一病原微生物B第二病原微生物C第三病原微生物D第四病原微生物AB7一下哪些具有感染性：A病人血液B病原體的培養(yǎng)物C動物尸體D廢棄的疫苗ABC8病原微生物的危害程度分類應主要考慮以下哪些因素A微生物的致病性B微生物的傳播方式和宿主范圍C當?shù)厮邆涞挠行Х雷o措施D當?shù)厮邆涞挠行е委煷胧〢BCD9生物安全二級實驗室門應該標有國際通用的生物危害標志，應包括以下哪些內容：A通用的生物危害性標志B傳染因子C實驗室負責人或其他人的姓名、電話D進入實驗室的特殊要求ABCD10哪些人員應該接受實驗室生物安全培訓A實驗室管理人員B實驗室清潔工C實驗室修理工D鄰近實驗室工作人員.ABC11實驗室負責人應該盡力培訓檔案，培訓檔案應包括哪些內容：A培訓內容B培訓時間C培訓教師D考核結果ABCD12以下哪項是我國有關基因工程操作的管理規(guī)定A《基因工程安全管理辦法》B《農業(yè)生物基因工程安全管理實施辦法》C《農業(yè)轉基因生物安全管理條例》D《農業(yè)轉基因安全評價管理辦法》AB13哪些人可作為實驗室活動的生物危害評估的評估人：A設施技術負責人B實驗室主任C項目負責人D設施、機構安全委員會和生物安全工作人員ABCD14生物危害評估報告應包括哪些內容？A危害程度分類B背景資料C實驗室活動及其危害性與預防措施D工作人員素質ABCD三、判斷題1生物安全主要指在進行生物學研究和教學過程中采取適當?shù)姆雷o設施、設備、防護原則及技術操作等以減少或消除有潛在危險性的因子暴露及意外釋放，從而保證人類和環(huán)境的安全。對2污染的（感染的）鋒利物品，如注射針頭、解剖刀片和碎玻璃；應當放置到不容易被刺破的帶蓋的容器中，把它們當作傳染性物質處理。對3一般實驗室的環(huán)境設施條件，達不到動物實驗室國家標準，不能作為動物實驗的場地。對4為了防止污染，有些實驗需要戴一次性手套。所以在進入實驗室就要戴手套，并一直戴著做所有事情。錯5開展病原微生物實驗時，可用超凈工作臺替代生物安全柜。錯6無菌室使用前，將全部要接種的物品移入無菌室緩沖間，并用75%酒精棉球擦拭干凈，最后將物品送入工作臺上，開啟紫外燈進行物品表面消毒滅菌30min左右。對7實驗室應時常監(jiān)測生物安全柜以確保其性能符合相關要求。應保存檢查記錄和任何功能性測試結果，并在安全柜上標記檢查證明。對8每次微生物實驗結束后，必須用普通自來水清潔實驗桌面，并需徹底洗手等。錯9凡是《基因工程實驗》操作所用的一切塑料器具（eppendorf管、tip等），在使用前都應裝入盒子和瓶子中滅菌，可以直接用手裝盒或裝瓶。錯10發(fā)酵實驗期間，要保持室內地面、桌面、操作臺及其各種物品和器具的清潔衛(wèi)生，同時也要保持發(fā)酵罐體外及其管路的衛(wèi)生，做到無灰塵、無污垢。對11發(fā)酵實驗過程中要嚴格按操作規(guī)程進行，要注意水、電、汽（氣）安全，厲行節(jié)約，嚴禁跑冒滴漏。要注意不要將酸堿等液體滴到儀器設備表面，避免造成儀器表面污染或腐蝕。對12當冷凍離心機用完后，不要馬上關閉離心機蓋子，應敞開一段時間，待冷凍造成的霜自然晾干后，再關閉離心機蓋子。對13在需用橡膠或塑料手套的生化類實驗中，不用經(jīng)常檢查手套有無破損。錯14每次微生物實驗結束后，必須清潔消毒實驗桌面，并需徹底洗手等。對15在微生物實驗中，一定要有“有菌觀念”和“無菌操作意識”，操作中一定要按正確的程序嚴格無菌操作，一方面避免感染，另一方面加強自我防護。對16當生物安全柜內發(fā)生少量感染性材料溢灑時，應用吸收紙巾立即處理，并立即用浸滿消毒液的毛巾或紗布對生物安全柜及其內部的所以物品進行擦洗。工作面消毒后應更換手套，不論是摘下手套還是更換手套都要洗手。對17高壓滅菌鍋滅菌時，待滅菌的物品可與含有腐蝕性抑制劑或化學試劑的物質放在一起滅菌。錯微生物實驗室生物安全管理手冊實驗室生物安全管理體系文件目錄序號名稱備注1實驗室人員和項目準入制度2人員培訓考核制度3人員健康監(jiān)護制度4生物安全檢查制度5實驗室人員生物安全行為規(guī)范6事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報告制度7實驗室生物危險標識使用規(guī)定8實驗室內務管理制度9實驗室菌（毒）種和生物樣本安全保管和檔案管理制度10實驗室廢棄物管理制度11實驗室消毒隔離制度12實驗室應急處置預案13實驗活動生物安全標準操作規(guī)程一．實驗室人員和項目準入制度1.目的規(guī)范生物安全二級實驗室的使用和管理，保證操作人員，實驗對象和環(huán)境安全，確保檢測結果準確可靠。2.適用范圍適用于檢驗科生物安全二級實驗室安全運轉及在此環(huán)境下的所有檢測工作。3.職責進入生物安全二級實驗室從事檢測工作的所有人員嚴格按照本規(guī)定執(zhí)行。4.具體要求：4.1概述4.1.1生物安全二級實驗室用于對檢驗者和環(huán)境有中度潛在危險樣品的各項實驗，必須符合下列規(guī)定：4.1.1.1具備操作資質的人員可在生物安全二級實驗室內工作，其他任何人未經(jīng)許可禁止進入實驗室。4.1.1.2在實驗室內的一切活動，必須遵照生物安全手冊的規(guī)定進行。4.1.1.3實驗室內污染的空氣需通過高效過濾器后方能排出室外。4.1.1.4實驗室內產(chǎn)生的污水，必須經(jīng)過消毒后方可進入公共污水系統(tǒng)。4.1.1.5實驗室的所有廢棄品，必須通過高壓滅菌后才能處理和清洗。必須攜出實驗室的中間實驗材料、更換維修的儀器設備、也只有在確保無病原微生物污染的條件下，才能攜出實驗室。4.1.1.6實驗室內準備二級全排式生物安全柜，所有可能造成污染的能夠置于生物安全柜內的實驗操作，置其內進行，以保證實驗室內空間的安全。4.1.2實驗室運行的安全性要求本手冊規(guī)定的各項要求，首先是為了保證實驗室的安全運行，包括防止實驗室工作人員的感染、防止實驗室操作的病原微生物對環(huán)境的污染、防止檢測樣品的污染，保證實驗結果的準確可靠。4.1.3實驗室工作的質量要求本手冊規(guī)定的各項要求，同時也是為了保證實驗室的工作質量，即：實驗產(chǎn)生的各項結果和數(shù)據(jù)，必須準確可靠：實驗室出具的檢驗報告，必須明確完整。4.2實驗室操作規(guī)程4.2.1啟動實驗室開始工作前半小時。開啟實驗室主電源，使實驗室及生物安全柜投入運行。開啟順序：①開啟屋頂風機②開啟全排風③開啟空調④開啟安全柜⑤打開房間紫外線燈。4.2.2個人防護工作人員按照下列要求進行個人防護，才能進入實驗室區(qū)域：（1）在更衣室中換穿工作服和工作鞋。（2）在清潔區(qū)內，根據(jù)實驗要求做好防護。（3）實驗中需使用腐蝕性試劑時，在膠乳手套外加帶一次性塑料手套；需要進行可能造成污染材料飛濺的操作時，需加戴防護面罩。4.2.3進入實驗室4.2.3.1工作人員進入實驗室時，每進入一道門，應將此門關好，再開啟下一道門。4.2.3.2進入實驗室后，關閉房間紫外線燈。4.2.3.3檢查實驗室運轉是否正常。4.2.3.4做好開始實驗的各項準備。4.2.4啟用標本、試劑一切準備工作就緒后，才將標本和試劑從冰箱中取出，直接放入生物安全柜中。用完立即歸位，使其在冰箱外停留的時間盡可能短。4.2.5操作4.2.5.1嚴格按照試劑使用說明進行操作。洗滌時避免液體材料飛濺。吸取、稀釋液體時，將吸管插入試管底部，用吸球緩慢吸取，避免產(chǎn)生汽泡或汽溶膠。4.2.5.2離心時，應使用雙蓋封閉式離心機和全封閉試管，每管離心液總量低于最高容量1個刻度單位：平衡時不得有液體滲陋到管套中，離心機使用后立即用消毒液擦洗消毒。4.2.6觀察結果不打開容器的觀察允許在生物安全柜外進行，否則，必須在生物安全柜內觀察結果。4.2.7準予攜出實驗室的材料確保不含感染性的實驗材料，才可以從實驗室攜出。容器表面應用75%乙醇消毒。4.2.8實驗室清潔每一實驗步驟完成后，均應清理臺面。所有用過的試劑均應歸還原位；使過的吸管等長形器材放入儲存污物的盒內；鋒利品放入專用的污物盒；紙巾軟物品放入污物袋；在臺面上噴灑75%乙醇，保持20分鐘，然后以紙巾擦干。實驗室的其他表面，也應經(jīng)常用75%乙醇擦拭。4.2.9污染物品處理放置污染物品的容器裝滿時，應更換新的容器。實驗結束后，對用過的污染物品進行高壓消毒。4.2.10更換工作服。工作完畢的更衣順序是，先用消毒液浸泡手套5分鐘，然后依次除去口罩、防護服、鞋套，放入高壓消毒袋內，再次浸泡手套后除去手套，用75%酒精棉球擦面部裸露部位。4.2.11實驗室消毒每次工作完畢，生物安全柜內用75%酒精擦拭臺面，消毒液消毒地面，開啟紫外線燈照射1小時后，逐一關閉實驗室送風和通風設備{關閉順序與開啟順序相反}。4.3實驗記錄與實驗報告4.3.1實驗記錄在實驗室內，實驗記錄應使用鉛筆書寫。記錄內容應簡明扼要，包括實驗日期，實驗目的和實驗的基本條件等提示記憶的內容，并較詳細地記載觀察到的實際現(xiàn)象及數(shù)據(jù)結果。要求字跡應清晰，數(shù)字成行成列，以避免錄入錯誤。4.3.2實驗記錄帶出實驗室將上述記錄在紙張上的實驗記錄應用80福爾馬林，密閉熏蒸消毒6小時后方可帶出實驗室?；蜷w著實驗室玻璃窗由清潔區(qū)工作人員抄錄一份。4.3.3實驗記錄錄入計算機實驗記錄必須在實驗結束后24小時內錄入計算機。記錄準確的實驗報告和錄入時間。再按照由實驗室?guī)С龅臅鴮懹涗?，準確地記載實驗結果和數(shù)據(jù)。錄入后，書寫記錄保存1周，以備查驗。實驗記錄錄入后，一般不得修改。因數(shù)據(jù)記錄錯誤，錄入錯誤，或實際觀察到的實驗結果改變，必須更改記錄時，不要刪除已經(jīng)錄入的描述和數(shù)據(jù)，而應錄入新的描寫和數(shù)據(jù)，并注明更改原因。4.3.4實驗室記錄備份每月一次，將上月計算機的實驗記錄做出備份，備份的實驗記錄不得修改。實驗室負責人應定期檢查實驗記錄，核對備份與原始的實驗記錄，對記錄中的缺陷提出修改意見。4.3.5實驗記錄的保存年限實驗記錄保存一年。已使用的實驗記錄(出具報告，發(fā)表論文，或以其他方式引用)，在使用后再保存一年。如無特殊必要，備份的實驗記錄一般永久保存。4.3.6出具實驗報告在需要出具正式實驗報告的場合，報告由實驗者填寫署名，交實驗室負責人記錄核對后簽字，再由單位簽發(fā)人簽字并加蓋公章發(fā)出。4.4標本保管規(guī)則4.4.1標本進入實驗室4.4.1.1出實驗室采集的標本，本實驗室統(tǒng)一登記編號，能反映出標本的來源、種類、性質、目的等相關信息。4.4.1.2有關單位送檢的標本由實驗室統(tǒng)一登記編號，注明送檢單位、送檢時間、種類、性質、實驗目的等相關信息。4.4.2標本的保管根據(jù)標本的性質、目的進行保存，每分標本分兩份，一份檢測時使用，另一份備用。標本因各種原因損失時，啟用后備標本，并重新備份。4.4.3標本的銷毀確定不用的標本，采用高壓滅菌后焚燒的方式銷毀。4.5實驗室裝備保養(yǎng)4.5.1實驗室定期保養(yǎng)實驗室的定期保養(yǎng)按照提供實驗室設備廠商的規(guī)定進行，主要是對機械和電器部分進行維護。4.5.2實驗室儀器設備的保養(yǎng)和維護實驗室內的儀器設備的保養(yǎng)由實驗室工作人員進行。維護有專業(yè)人員進行。生物安全柜的濾器必須按說明書規(guī)定的時間定期由專業(yè)人員更換，其它儀器設備也應根據(jù)實際需要清潔保養(yǎng)。4.5.3實驗室儀器設備的維修更換儀器設備需要更新，需要離開實驗室進行維修，或損壞需要更換，以及必須臨時進入實驗室使用，使用完畢后必須撤出實驗室的貴重儀器，在撤出實驗室之前必須以恰當?shù)姆绞絿栏裣?，方可處理或重新投入使用?.6意外情況處理4.6.1實驗室意外事件的處理原則4.6.1.1造成或可能造成實驗室污染，但未造成人身傷害的實驗室報告，由實驗室負責人處理。例如實驗過程中。由于標本、試劑益處濺落造成操作臺或地面的污染等，應立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾，待消毒液徹底浸泡30分鐘后，對污染的物品進行清理。清理后的物品高壓滅菌。并填寫生物安全2級實驗室意外情況登記與處理記錄表，實驗室負責人應指導這些處理活動，并檢查處理效果。4.6.1.2實驗室事故可能造成氣溶膠污染，如壓力容器或管道破裂、離心機事故等，應立即關閉實驗室，張貼禁止入內的標識。用消毒液噴霧和紫外線照射污染的區(qū)域，24小時再進行終末消毒，實驗室負責人除立即采取對應措施外，應向上級部門報告，并填寫意外情況登記與處理記錄表。4.6.1.3實驗室工作人員在沒有強毒微生物時，在實驗室內受到意外傷害，如割傷、燒傷、燙傷等，在實驗室內昏倒或發(fā)生身體嚴重不適，也有實驗室負責人處理。令受到傷害的人員立即停止工作，用消毒液清洗未破損的平凡表面，傷口以碘伏消毒，眼睛用無菌生理鹽水沖洗。由在同一實驗室內人員或派人迅速著裝進入實驗室，清除造成傷害的原因，清理實驗材料，幫助受傷人員緊急處理并撤離實驗室。受到傷害的人員應進行治療并休息，在身體狀況未恢復之前，不得重新進入實驗室工作。實驗室在經(jīng)過整理，消除了造成傷害的故障之后，方可重新使用。4.6.1.4傷害事故可能導致被強毒微生物感染，例如針頭刺破、銳器割傷、黏膜暴露等途徑接觸到感染性液體，或在操作過程中發(fā)生培養(yǎng)物、污染材料濺落身體表面，意外接種等情況，首先進行局部處理，用肥皂和水清洗污染的皮膚，擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液，用肥皂和清水沖洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎傷口。暴露的黏膜應盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。實驗室負責人應向上級部門報告，對受傷害者進行隔離觀察，同時根據(jù)情況預防性用藥，并寫出職業(yè)暴露后預防感染的評價和處理方案。4.6.2實驗室人員的隔離觀察發(fā)生可疑的實驗室感染事故時，應對被感染的人員進行隔離觀察。如果判定為法定的傳染病感染，應按[傳染病防治法]的規(guī)定報告，同時給予有效的隔離治療人員培訓考核制度1.目的規(guī)范實驗室相關人員的培訓考核2.適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3、人員培訓考核制度3.1.實驗室工作人員的培訓新工作人員進入實驗室前，必須經(jīng)過培訓，取得進入實驗室工作的資格。培訓由實驗室負責人組織進行，并指定熟悉實驗室工作的人員擔任輔導。培訓內容包括：（1）相關檢驗的國家診斷標準、處理原則以及本手冊內容。（2）實驗室所有設備的使用方法。（3）個人防護方法。（4）實驗室基本技術。（5）實驗室消毒凈化的方法。3.2.實驗室工作人員的資格考試新工作人員經(jīng)過培訓后，由實驗室負責人組織考核。通過考核后，還須與有資格的工作人員一同工作3個月，才能獲得獨立進行實驗室操作的正式資格。人員健康監(jiān)護制度1.目的規(guī)范實驗室相關人員的健康監(jiān)護2.適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3、人員健康監(jiān)護制度3.1工作人員從事工作前必須進行HIV抗體和甲肝、乙肝、丙肝等肝炎病毒標記物的檢測，每半年進行一次HIV抗體復檢，并保留血樣一年以上。3.2工作人員應每年進行一次體檢，并將可能涉及生物安全危害的體檢結果存檔，以便判斷生物安全危害是否發(fā)生。3.3實驗室應建立人員健康監(jiān)護檔案，檔案內容包括既往病史、檢測結果、免疫接種史等，以便對從事涉及生物安全危害人員的健康狀況進行跟蹤。3.4實驗室工作人員的適合工作狀態(tài)實驗室工作人員必須在身體狀況良好的情況下，才能進入實驗室工作。出現(xiàn)下列情況，不應進入實驗室：身體出現(xiàn)開放性損傷；患發(fā)熱性疾?。焊忻?、上呼吸道感染；其他導致抵抗力下降的狀況：妊娠、在實驗室內連續(xù)工作4小時以上或其他原因造成的疲勞狀態(tài)。生物安全檢查制度1.目的規(guī)范實驗室生物安全，保證設備正常運行。2.適用范圍適用于生物安全涉及的儀器設備（比如生物安全柜等）3、生物安全檢查制度實驗室內，每2個月以細菌培養(yǎng)的方式進行安全性檢測。生物安全柜內放置平板培養(yǎng)基2個，實驗室4角和中間各放置1個，半污染區(qū)放置2個。將平皿敞開5分鐘，然后蓋上，每平板菌落數(shù)平均不得超過2個，超過標準，需要對實驗室或污染部位進行甲醛熏蒸消毒。實驗室人員生物安全行為規(guī)范1.目的規(guī)范實驗室人員的生物安全行為規(guī)范2.適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3生物安全組織管理與行為規(guī)范3.1組織框架圖單位法人{或授權}負責人↓實驗室負責人↓生物安全員↓實驗室工作人員3.2各類人員相應行為規(guī)范3.2.1單位法人{或授權}負責人（1）負責組織生物安全實驗室的立項、選址，施工隊的資質驗證。（2）負責成立生物安全委員會負責生物安全，制定管理制度，監(jiān)督有關法規(guī)和操作規(guī)程的執(zhí)行情況。（3）負責組織對造成外環(huán)境污染、實驗室污染、人身傷害事故的調查與處理。3.2.2實驗室負責人（1）組織制定安全手冊、操作規(guī)程等文件。（2）按照上述文件要求組織實驗室的各項工作，保證實驗室運行的安全和實驗室工作質量的準確可靠。（3）組織進入生物安全二級實驗室的人員進行業(yè)務培訓，保證工作人員熟知微生物的操作規(guī)程和技術，掌握實驗室設備的特殊要求并熟練操作，對培訓的結果進行考核，決定進入實驗室工作人員的資格。3.2.3生物安全員（1）對技術方法、化學品、材料與設備定期進行內部安全檢查，確保其符合國家和地方的有關安全與衛(wèi)生政策與標準。一旦發(fā)現(xiàn)不安全因素，立即停止工作并上報實驗室負責人。（2）與有關人員討論研究安全政策的問題。（3）確認所有工作人員都具有進入實驗室工作的資格。（4）為所有人員提供連續(xù)性的安全要教育與指導。（5）針對操作程序、技術方法和各種條件要求的變更，以及新設備的引進，為全體工作人員提供最新的安全文獻和信息資料。（6）定期檢查實驗室的各項技術參數(shù)，組織對實驗室裝備的常規(guī)保養(yǎng)。（7）所有可能涉及潛在傳染性或有毒物質泄露的意外事件與事故，即使沒有人員受傷或暴露，也要予以調查，并向實驗室負責人員和安全委員會報告調查結果和提出建議。（8）當任何實驗室工作人員的疾病或缺勤與工作有關，并被記錄為可能的實驗室獲得性感染時，協(xié)助隨訪調查其疾病或缺勤情況。（9）確保在發(fā)生傳染性物質濺灑其他事件時，監(jiān)督消毒凈化程序得到正確執(zhí)行；并對這類意外事件和事故進行詳細的書面記錄。（10）確保任何需要修理和維護的儀器設備在消毒與凈化之后方可運出實驗室。生物安全員由主管檢驗師以上的人員承擔，必須具備如下資質：具有實際工作的經(jīng)驗；對操作的微生物有全面、完整的了解；具有組織實驗室工作的能力；對工作有高度的責任心。3.2.4實驗室工作人員（1）生物安全二級實驗室，只允許進行實驗室目的規(guī)定的操作，與此無關的活動一律不得進行。（2）必須按規(guī)定進行個人防護，方得進入實驗室。（3）保持實驗室環(huán)境的整潔，每項工作完成之后，必須清理和清潔臺面，離開實驗室（4）注意個人的健康狀況，出現(xiàn)身體不適情況，應及時向實驗室負責人報告。（5）實驗室內禁止飲食、吸煙、訪客和喧嘩。實驗室工作人員的技術要求（1）必須了解實驗室安全原理，熟悉本手冊的各項規(guī)定，熟記緊急情況下的正確應對措施。（2）掌握病原微生物操作的基本要求，正確、安全地實用標本，避免污染，以獲得準確、可靠的實驗結果。（3）必須熟悉相關實驗的國家標準，能夠完成標準所規(guī)定的任務。（4）一旦發(fā)生意外，立即向生物安全員匯報。4、個人防護程序4.1個人防護用品的使用要求4.1.1口罩：應使用N95型口罩或1216層棉紗口罩，最好使用防濺口罩{如31860型}如有胡須應刮去，使用應始終保持口罩與臉緊貼。一次性使用口罩應在使用后4小時丟棄，不能重復使用，不能與他人共同使用。如口罩遭到分泌物飛濺或弄濕，應嚴格洗手后，帶上清潔手套更換。4.1.2防護面罩：實驗人員在進行工作時應佩帶防護面罩，防護面罩要求透亮度好，有較好的防飛濺功能，重復使用前應進行徹底消毒。4.1.3防護服：實驗人員工作時應穿戴一次性防護服。最好是連體式，防水及抗靜電性能好，無過濾作用。袖口、腳踝口應為彈性收口，面部、腰部應有彈性收口或拉繩收口。4.1.4手套和鞋套：鞋套應為一次性防水鞋套。手套為一次性膠乳手套，須戴兩副，外層手套應根據(jù)需要及時更換。4.2個人防護用品的穿戴順序4.2.1進入清潔區(qū)前穿上普通白大衣和實驗室專用鞋。4.2.2進入清潔區(qū)時穿戴一次性口罩，手術帽，一次性隔離衣、兩副膠乳手套和兩副一次性鞋套。注意將手套和鞋套分別套在袖口和褲口外。4.2.3戴N95口罩及防護面罩、穿防水隔離服、防水鞋套、再戴外層手套。4.3個人防護用品脫卸順序4.3.1完成實驗后，在半污染區(qū)先用75%乙醇溶液消毒外層手套，然后脫掉外層手套{在脫另一只手套時，手指只能接觸手套的里部}。4.3.2著內層手套依次脫掉防護面罩、N95口罩、防水鞋套及防水隔離服{脫隔離服時，不要接觸隔離服的外表面，應從里反脫，以保里面超外}。將脫掉的物品放入專用消毒袋中就地高壓消毒。防護面罩等重復使用的物品立即放入消毒液內，按有關規(guī)定消毒處理。4.3.3脫掉外層一次性鞋套，用75%乙醇溶液消毒內層手套。4.3.4戴者手套脫掉一次性口罩、手術帽、內層鞋套、然后脫掉一次性隔離衣及手套，放入消毒袋高壓消毒。4.3.5用消毒巾擦拭面部，用碘伏徹底消毒雙手，并用流動水沖洗。事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報告制度1、目的糾正檢驗工作中的差錯，及時處理責任事故，吸取事故的教訓，確保檢驗設備和人員的安全。2、范圍適用于檢驗工作中出現(xiàn)的事故分析報告、調查和處理。3、職責3.1事故責任部門負責人填寫事故報告單，報告事故發(fā)生的原因及采取的措施。3.2業(yè)務質量管理科和有關科室負責人協(xié)助中心負責人做好事故的調查處理工作。4、工作程序4.1事故分類凡違反各項規(guī)定所造成的事故均為責任事故，按其經(jīng)濟損失和人身傷害和大小分為以下幾種：大小事故界限表損失情況小事故一般事故大事故重大事故經(jīng)濟損失≤100元100~1000元1000~10000元≥10000元人身傷亡一人受傷，休工≤3日一人受傷，休工3日以上兩人受傷或一人受傷，休工1-6個月三人以上受傷，休工一年以上，或一人致殘或死亡。4.2事故的處理4.2.1事故發(fā)生后，應立即采取有效措施，防止事態(tài)擴大，搶救受傷人員和儀器設備，報告上級領導。4.2.2事故發(fā)生3日內，事故責任人寫出事故發(fā)生原因、經(jīng)過及教訓、責任，并由發(fā)生事故科室填寫事故報告單，報業(yè)務質量管理科和行政管理科。4.2.3事故發(fā)生后5日內，由業(yè)務質量管理科和行政管理科協(xié)助中心負責人主持召開事故分析會，對事故進行分析并對事故責任人作出處理。事故責任科室采取糾正措施，防止類似事故再發(fā)生。4.2.4重大事故發(fā)生后一周內，由檢驗科負責人向上級主管部門送交事故處理專題報告。4.2.5事故報告處理單等記錄材料由業(yè)務質量管理科歸檔保存。大事故和重大事故記入事故責任人技術檔案。實驗室生物危險標識使用規(guī)定1.目的規(guī)范生物安全二級實驗室的使用和管理。2.適用范圍適用于生物安全二級實驗室。3.具體要求：3.1在具有生物安全二級實驗室門口加貼專門的生物安全警示標識，以避免無關人員進入相關區(qū)域，造成感染的危險。3.2在有可能對人員造成威脅的生物標本儲存處加貼生物安全警示標識，以防無關人員將危險標本帶入安全區(qū)域對人員造成威脅。實驗室內務管理制度1.目的確保生物安全二級實驗室的正常運行、實驗人員、物品和環(huán)境的安全2.適應范圍適應于生物安全二級實驗室。3.職責進入生物安全二級實驗室工作的所有工作人員嚴格遵照本管理制度執(zhí)行。4.基本制度4.1在主實驗室設置清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)。入口處貼有醒目的生物危險標志。4.2非實驗室有關人員和物品不得進入。4.3實驗室內不得進食和飲水，或者進行其他與實驗無關的活動。4.4實驗室工作人員、外來合作者、進修和學習人員在進入實驗室及其崗位之前必須經(jīng)過實驗室負責人的批準。4.5實驗過程中，嚴格按有關操作程序操作，降低剪除和氣溶膠的產(chǎn)生。4.6用移液器吸取液體，嚴禁口吸。4.7實驗室的工作人員必須是經(jīng)受過專業(yè)培訓的技術人員。在獨立進行工作前還需在中高級實驗室技術人員指導下進行上崗培訓，達到合格標準，方可開始工作。4.8實驗室的工作人員必須被告知實驗室工作的潛在危險并接受實驗室安全教育，自愿從事實驗室工作。4.9實驗室的工作人員必須遵守實驗室的所有制度、規(guī)定和操作規(guī)程。4.10實驗室的工作人員在開始工作前必須留本底血清進行有關的檢測，以后定期復檢。如有疫苗必須進行免疫注射。4.11所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室前必須經(jīng)可行的消毒方法進行消毒。4.12工作前應消毒，活性物質濺出后要隨時消毒。5.實驗室特殊管理制度5.1進行感染性實驗室時，應禁止他人進入實驗室，或必須經(jīng)實驗室負責人同意方可入內，免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的人員不許進入實驗室，或必須經(jīng)實驗室負責同意方可入內。5.2實驗室人員進入實驗室前必須進行有效的培養(yǎng)和模擬訓練。掌握預防暴露和暴露后的消毒處理程序。5.3實驗室人員應接受必要的免疫接種和相應的抗體水品測定。5.4實驗室事故處理：工作人員在操作過程中發(fā)生意外，如針刺和切傷、皮膚污染、感染性標本濺及體表和口鼻眼內、衣物污染實驗臺面等均視為安全事故，應視事故類型的不同情況，立即進行緊急處理。具體措施按《實驗室應急處置預案》執(zhí)行。5.5填寫意外情況登記與處理記錄表，并按規(guī)定報告給有關部門。5.6處特殊情況外，禁止在實驗室內使用銳器。5.7剩余的標本應密封后置于適當條件下保存。5.8實驗過程中應使用鑒定合格的二級生物安全柜。5.9實驗設備在運出修理或維修前必須嚴格消毒，方可運出。實驗室菌（毒）種和生物樣本安全保管和檔案管理制度1.目的規(guī)范實驗室菌（毒）種和生物樣本的保管和檔案管理2.適用范圍實驗室菌（毒）種和生物樣本的處理和檔案管理3、實驗室菌（毒）種和生物樣本的保管3.1按國家規(guī)定可以保存的菌（毒）種，由指定的專人負責登記、保存和管理。按期傳代、鑒定，必須在無菌室或接種罩內進行，并做好有關記錄。在保存過程中發(fā)現(xiàn)菌（毒）種變異或死亡，應及時上報科長和中心主任。3.2本區(qū)檢出的地方菌（毒）株應及時上報，因工作需要暫時保留的菌（毒）株也應按上級規(guī)定的時間進行銷毀處理。新發(fā)現(xiàn)的菌（毒）株，要做好原始記錄，并上報主管部門復核確認。3.3菌（毒）種必須每種設一記錄卡，其內容包括：名稱、編號、來源、分離日期、引進日期、鑒定日期、鑒定結果、鑒定者、審核者、傳代情況、所用培養(yǎng)基、保存方法、溫度、使用轉移及銷毀情況、保存者、部門負責人等。3.4向上級主管部門申請索取菌（毒）種和向下級有關部門發(fā)放菌（毒）種時，應有2人參加辦理，嚴格執(zhí)行國家有關規(guī)定，手續(xù)要完備，并認真做好記錄備查。3.5一、二類菌（毒）種，應派專人向提供單位領取，不得郵寄；三類菌（毒）種的郵寄必須持有郵寄單位證明，并按照菌（毒）種郵寄與包裝的有關規(guī)定辦理。3.6未經(jīng)上級批準，任何單位及個人不得以工作之便，進行國際間各類菌（毒）種交流，做好菌（毒）種安全防范工作。4、檔案管理制度4.1、非實驗室人員不得隨意查看實驗室記錄4.2、實驗室人員負責妥善保存各種樣品登記本、報告單及實驗室原始記錄，不得擅自修改和銷毀4.3、專人負責保管感染者檔案4.4、未經(jīng)領導批準不得向無關人員或單位提供任何實驗室及感染者信息4.5、HIV抗體初篩實驗室檢測的陽性結果不是最終結果，須進一步確認，確認前不得出具陽性報告及告知受檢者本人或有關單位實驗室廢棄物管理制度1.目的規(guī)范廢棄物處理2.適用范圍尖銳器具和其他廢棄物的處理。3.具體方法：3.1尖銳器具的處理3.1.1尖銳器具，如針、注射器等，除特殊情況外，禁止在實驗室使用，盡可能用塑料器材代替玻璃器材。3.1.2注射和吸取感染性材料時，盡可能使用一次性注射器。用過的針頭禁止折段、剪段、折段、重新蓋帽或從注射器上取下，禁止用手直接操作。用過的針頭、注射器直接放入防刺破的盛廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中，進行高壓消毒處理。3.1.3盡可能使用帶針頭套的的注射器、無針頭的系統(tǒng)和其他安全裝置。3.1.4打碎的玻璃器具，禁止用手直接清理，必須使用其他工具，如掃把、簸箕、夾子或鑷子等。盛污染針、銳器及碎玻璃的容器在丟棄前必須徹底消毒。3.2廢棄物的處理3.2.1實驗后的廢棄物如不及時處置則會污染環(huán)境，從而對人造成危害，因此有關人員必須嚴格按照規(guī)定執(zhí)行。3.2.2實驗樣本在處理和進行實驗室檢測時產(chǎn)生的廢棄物，如一次性針頭、離心管、平皿等應放入適當?shù)娜萜骱蛧栏穹缆┑母邏捍鼉?，待實驗結束后立即就地高壓消毒。3.2.3實驗過程中產(chǎn)生的污染性液體物質、廢棄的液體標本等放在盛有消毒液的嚴格防滲漏的專用容器中，并及時加蓋。3.2.4進行實驗所必須使用的容器，如針頭、一次性注射器、玻璃器具、手術刀片等，放入專用的堅壁容器內，加蓋密封。3.2.5以上所有盛裝廢棄物的容器，在每次實驗結束后，就地高壓消毒。3.2.6高壓鍋應有專人負責，嚴格按使用說明操作，確保在121條件下，高壓30分鐘，以達到消毒要求。3.2.7所有實驗產(chǎn)生的廢棄物，必須經(jīng)嚴格高壓消毒后方能運出實驗區(qū)，并送至指定地點集中焚燒處理。十一、實驗室消毒隔離制度1.目的規(guī)范微生物實驗室和生物安全二級實驗室的消毒隔離工作。2.適用范圍微生物實驗室和生物安全二級實驗室。3.職責所有工作人員都必須遵從本規(guī)程。4.具體步驟4.1實驗室基本要求4.1.1實驗室相對獨立，實驗室核心區(qū)包括實驗間及緩沖間，明確劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)，并有明顯標識。4.1.2各區(qū)域交叉處應設置有效氯2000的含氯消毒劑溶液浸濕的腳墊。4.1.3實驗室內所有物品應專用，須帶出時必須嚴格消毒。4.1.4實驗人員進入實驗室應穿戴好個人防護用品，如隔離衣、防護眼睛、口罩、一次性手套等。實驗過程中注意自身防護，并防止操縱過程中的交叉污染。4.1.5培養(yǎng)基、組織、體液等必須放在防漏密閉的容器中儲運。4.1.6血清學試驗、樣品的處理和分裝應在BSL-2安全柜內進行。4.1.7樣品離心使用密封的離心杯，以防濺出。4.1.8實驗過程中使用的器材、實驗廢棄物均應按廢棄物處理程序進行消毒處理。4.1.9當傳染性標本溢出或濺出后，應有專業(yè)人員立即消毒和清理。4.1.10實驗完畢，先消毒物體表面，再按規(guī)定程序脫下個人防護用品放入包裝袋內就地高壓消毒，并進行空氣消毒。4.1.11離開實驗室前，必須按有關規(guī)定消毒雙手。4.2消毒方法4.2.1儀器等表面消毒：工作結束后，用含有效氯1000的消毒液或75%乙醇溶液擦拭消毒，作用20分鐘以上。4.2.2實驗器材的分類消毒：將使用后的銳器方入防刺破、防滲漏的密閉專用銳器處置盒內，121℃高壓消毒30分鐘。其他器材方入有效氯為2000mg/L的含氯消毒液內浸泡1小時以上。處理時應避免皮膚損傷。4.2.3工作臺等物體表面消毒：工作完畢，用含有效氯2000mg/L的消毒液或75％乙醇溶液擦拭消毒，作用20分鐘以上。4.2.4個人防護用品消毒：實驗結束，將隔離衣、口罩、帽子、手套、鞋套等121℃高壓消毒30分鐘。防護鏡浸泡在75％乙醇或有效氯為1000mg/L的含氯消毒劑中，作用30-60分鐘。4.2.5手的消毒：用典伏或75％的乙醇擦拭，作用1-3分鐘。4.2.6空氣消毒：每次實驗前后用紫外燈照射消毒，每次不少于1小時，每立方米空間安裝紫外燈瓦數(shù)≥1.5W，距紫外燈1米處照射強度≥70W/㎡。4.2.7這張消毒：應用80ml/m3福爾馬林，密閉熏蒸消毒6小時后方可帶出。4.2.8地面消毒：工作結束，應用含有有效2000mg/L的消毒液噴灑拖地。4.2.9廢棄物的處理：實驗的廢棄物應放入適當?shù)娜萜鲀?，就?21℃高壓消毒30分鐘，消毒后的廢棄物集中收集、焚燒處理。5.實驗室高壓消毒安全操作5.1使用前應了解并掌握高壓鍋的原理及操作規(guī)則，以及不正確使用而導致的災難性后果。5.2按照操作規(guī)程使用高壓鍋5.2.1接通電源，合上高壓滅菌器左側總電源開關。5.2.2注入加熱用水，注水至加熱器罩的水位水準器配件尖端浸入水中為止。5.2.3設定滅菌溫度，先按“編集”鍵，然后按上下鍵調節(jié)到滅菌所需溫度，然后按“實行”鍵，把所設溫度存進程序。5.2.4設定滅菌時間，先按“編集”鍵，然后按上下鍵調節(jié)到滅菌所需時間，然后按“實行”鍵，把所設時間存進程序。5.2.5按“實行”鍵執(zhí)行滅菌程序，此時“滅菌”燈閃爍。5.2.6當滅菌程序執(zhí)行完成，滅菌程序自動停止運行。5.2.7在確認壓力表的顯示壓力降到0刻度時，打開高壓滅菌器頂蓋，取出滅菌樣品。5.3高壓鍋操作人員在使用高壓鍋時不得離開崗位；在日常使用過程中，必須嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行，并按照規(guī)定進行設備的維護。每1年保養(yǎng)一次，每月檢測一次消毒效果。5.4高壓鍋的物品不得放的過滿，否則影響滅菌效果。放好被消毒滅菌的物品后，高壓鍋的蓋子或門必須擰緊。5.5定期檢查高壓鍋，以確保其正常工作，防止意外事故發(fā)生，保證消毒滅局效果。5.6高壓滅菌安全操作步驟5.6.1在滅菌前將雙層的高壓滅菌帶包好，廢物在滅菌袋中的體積不能超過袋子體積的3/4，滅菌袋用橡皮帶捆好，但不能扎得太死，否則蒸汽不能進入所料袋內影響滅菌效果。5.6.2實驗產(chǎn)生的所有廢物應該及時就地滅菌處理。如果滅菌器正在使用或優(yōu)于其它原因不能馬上使用，則廢物必須放在滅菌袋內捆好并放在實驗室內，在存放期間確保袋子無損壞。5.6.3當高壓鍋消毒滅菌盜時間后，取出物品放在廢物收集處。5.6.4當開始滅菌時必須確信滅菌國內水量合適，高壓溫度和時間設置正確。滅菌應保持在121℃30分鐘，時間和溫度不得超過設定值，否則滅菌袋會融化，清理困難。十二、實驗室應急處置預案1．目的規(guī)范緊急情況的處理工作。2．適用范圍微生物實驗室和微生物安全二級實驗室。3．職責遇有緊急情況所有工作人員嚴格按此規(guī)程處理。4．具體要求：4.1造成或可能造成實驗室污染，但未造成人身傷害的實驗室事故，由實驗室負責人處理。例如實驗過程中，由于標本、試劑溢出濺落造成操作臺或地面的污染等，應立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾，等消毒液徹底浸泡30分鐘后，對污染的物品進行處理。清理后的物品高壓滅菌。并填寫生物安全二級實驗室意外情況登記與處理記錄表，實驗室負責人應指導這些處理行動，并檢查處理效果。4.2在沒有強毒微生物時，再實驗室內受到意外傷害，例如割傷、燒傷、燙傷等，由實驗室負責人處理。令受到傷害的人員立即停止工作，用消毒液清洗未破損的皮膚表面，傷口以碘伏消毒，眼睛用洗眼器反復沖洗。有在同一實驗室內工作人員或派人迅速著裝進入實驗室，清除造成傷害的原因，清理實驗材料，幫助受傷人員緊急處理并撤離實驗室。受到傷害的人員應立即就醫(yī)，并將受傷原因及接觸微生物的情況通報負責人。對其進行恰當而完整的病史記錄。在其身體狀況未恢復之前，不得重新進入實驗室工作。實驗室在經(jīng)過整理，消除了造成傷害的故障之后，方可重新使用。4.3傷害事故可能導致被強毒微生物感染，例如針頭刺破、銳器割傷、粘膜暴露等途徑接觸到感染性液體，首先進行局部處理，用肥皂和水清洗污染的皮膚，擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液，用肥皂或清水沖洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎傷口。在操作過程中發(fā)生培養(yǎng)物、污染材料濺落身體表面等情況，首先使用噴淋裝置，盡快將污染物沖洗掉，然后再進行局部處理。暴露的粘膜應盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。實驗室負責人應向上級部門報告，對受傷害者進行隔離觀察，同時根據(jù)情況預防性用藥，并寫出職業(yè)暴露后預防感染的評價和處理方案。4.4實驗室事故可能造成氣溶膠污染，如壓力容器或管道破裂等，立即關閉實驗室，疏散現(xiàn)場的所有人員，對所有暴露人員提出相應的醫(yī)學建議。立即通知實驗室負責人及生物安全員。至少在1小時內，任何人員不得進入現(xiàn)場，以便氣溶膠的消散記空氣中較重微粒的沉降。張貼禁止入內的警示標志。在生物安全員的監(jiān)督下進行消毒、凈化處理；執(zhí)行這項工作時應當穿戴合適的防護服及呼吸防護用具。實驗室負責人員除立即采取對應措施外，應向上級部門報告，填寫意外情況登記與處理記錄表。4.5培養(yǎng)物等傳染性物質的破碎被傳染性物質物質污染的小玻璃瓶及其他容器破碎時，用布或紙巾覆蓋，爾后將消毒劑傾倒其上，放置30分鐘。其后即可清除掉，玻璃碎片應當用鑷子清理。污染區(qū)域應當用消毒劑清洗。破碎物品清理時如果使用了簸箕，應將其進行高壓滅菌或用有效的消毒劑浸泡24小時。清理使用過的布、紙巾、抹布及拖把，放入污染廢棄物容器中。上述步驟均應佩戴手套。4.6如果實驗室的紀錄表格、其他印刷品或書面材料遭到污染，在妥善轉抄后或烤后，應當將其棄入污染廢棄物容器。4.7試管破碎于密閉式安全離心杯中所有密閉式安全離心杯在生物安全過程中裝載和卸載。如果懷疑發(fā)生了破損，應當將其蓋子擰松；爾后，將整個離心杯高壓滅菌。4.8蓄意破壞堅固、厚重的門、牢靠的鎖具以及限制出入，都是合適的防范措施。發(fā)現(xiàn)蓄意破壞情況后報告實驗室負責人及生物安全員，視破壞種類按照上述方法進行處理，并詳細填寫意外情況登記與處理記錄表。十三、實驗活動生物安全標準操作規(guī)程（一）艾滋病初篩檢測實驗操作規(guī)程1.目的保證艾滋病病毒抗體ELISA實驗的準確性。2.適用范圍艾滋病病毒抗體ELISA實驗。3.具體要求3.1樣品采集樣品采集安試劑盒要求采集。采血時注意安全，用一次性注射器謹慎操作，防止發(fā)生刺傷和造成外界污染。血樣如即時用可存于普通冰箱，如要長期保存，分離血清置于-20℃及以下。同時做好記錄。3.2樣品運送樣品轉送，除特殊需要外，必須是血清或血漿，置于帶有蓋帽的試管內，或將塑料試管用酒精燈封死，防止樣品流出。試管上標明姓名、時間、編號，將試管放入專門帶蓋的容器內，容器的材料要易于消毒處理，在所放試管周圍上下墊有軟性物質，以免碰碎，容器外標有HIV檢測專用字樣和生物危害標志。路途較遠或氣候炎熱時，容器應置于4℃以下運送。這樣同時附送檢單。3.3樣品登記和處理3.3.1收到樣品后，及時填寫標本登記記錄表，送樣人、收樣人簽字，如已進行過初檢，登記初檢結果和實驗方法及所用試劑情況。3.3.2對從其他實驗室送來的樣品，檢查并注明送檢單與標本記錄的符合、樣品管破損、溢漏等情況。如有溢漏應立即將尚存的血樣移出，并對管壁和盛器消毒。檢查并記錄樣品的質量有無嚴重溶血、細菌污染、血脂過多以及黃疸等情況。3.3.3對實驗室自采的樣品，最好將血液先放置1-2個小時，再用3000離心15分鐘，吸出上清液備用，如在幾天內檢測可放在2-8℃冰箱中，如要貯存，置于-20℃冰箱。3.4實驗準備3.4.1將試劑從冰箱中取出，按試劑盒要求時間恢復室溫。3.4.2檢查并記錄冰箱、溫箱溫度。3.4.3按照試劑盒要求準備實驗原始記錄表，標明空白、陰性對照、陽性對照、外部質控血清以及檢測樣本的位置：登記日期和實驗起止時間，記錄環(huán)境條件及試劑盒廠家、批號、效期：整個實驗過程中每一步操作都要在原始記錄表上詳細登記。3.4.4按照試劑盒的要求配置洗液及其他所需要的試劑。3.5加樣和稀釋根據(jù)樣品數(shù)量將合適數(shù)量的酶標板條固定在板架上，為了不損壞洗扳機，每道上的酶標板條必須保持完整{不足部分可用廢棄的微孔添充}，檢查加樣器加樣刻度是否與試劑盒要求的加樣量相符，按照原始記錄表表明的位置加入各種質控品和檢測樣品，注意：空白只加標本稀釋液。加樣量和稀釋度嚴格按照試劑盒說明書規(guī)定的操作，一般先加樣品稀釋液后再加入樣品。加樣要準確，小心不要使吸頭碰著酶標板空上是包被抗原。為保證加樣的準確，最好使用多孔道加樣器，使用時注意防止吸頭間的交叉污染。3.6溫育貼好封板膜，按照試劑盒要求的溫度和時間進行溫育，最好選擇濕育方法。3.7洗板開啟洗板機前，先檢查洗板機廢液瓶是否已排空，開啟后先用蒸餾水沖洗管道，再換上洗液瓶。按照試劑盒的要求，選擇、修改洗扳方式、洗滌次數(shù)和浸泡時間，根據(jù)所用酶標板的條數(shù)確定洗板道數(shù)，根據(jù)酶標板的位置調節(jié)洗頭的位置，然后開始洗板，洗板結束后用蒸餾水沖洗管道。3.8加酶結合物對于二步法ELISA實驗需加酶結合物，按試劑盒要求完成。3.9加底物洗好板后應立即加底物，需加自配的底物應現(xiàn)配現(xiàn)用。3.10終止反應在規(guī)定的時間內用試劑盒中的或根據(jù)要求自行配置的終止液終止反應。3.11酶標儀讀物按照試劑盒的要求選擇濾光片，確定空白孔位置，選擇合適達的打印報告格式，讀數(shù)并打印結果。3.12所用儀器在使用后及時填寫使用記錄。3.13結果判斷計算3.13.1根據(jù)試劑盒說明書要求的陰陽對照OD值范圍判斷實驗