鳳眼草和蓬子菜化學(xué)成分及生物活性研究

鳳眼草和蓬子菜化學(xué)成分及生物活性研究1．鳳眼草為苦木科臭椿屬臭椿（Ailanthusaltissima（Mill）Swingle）的果實(shí)，我國(guó)南北均有分布。中醫(yī)認(rèn)為鳳眼草味苦、澀，性涼。用于清熱燥濕，止痢，止血。主治痢疾，白濁，帶下，便血，尿血，崩漏。本論文對(duì)鳳眼草的95％乙醇提取物和水提取物進(jìn)行了研究，利用系統(tǒng)溶劑萃取法、重結(jié)晶法、硅膠柱色譜、聚酰胺柱色譜、SephadexLH-20柱色譜、制備性TLC和HPLC等手段分離得到41個(gè)化合物。通過(guò)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)分析鑒定了它們的結(jié)構(gòu)。分別屬于甾體類：豆甾烷-3，6-二酮（stigmastane-3，6-dione，1），豆甾烷-3β，6β-二醇（stigmastane-3β，6β-diol，2），豆甾-4-烯-3，6-二酮（stigmast-4-ene-3，6-dione，3），6β-羥基-豆甾-4-烯-3-酮（6β-hydroxystigmast-4-en-3-one，4），6α-羥基-豆甾-4-烯-3-酮（6α-hydroxystigmast-4-en-3-one，5），豆甾-4-烯-3β，6β-二醇（stigmast-4-ene-3β，6β-diol，6），豆甾-4-烯-3β，6α-二醇（stigmast-4-ene-3β，6α-diol，7），豆甾-4-烯-3-酮（stigmast-4-en-3-one，8），β-谷甾醇（β-sitosterol，9），胡蘿卜苷（daucosterol，10），3β-羥基-豆甾-5-烯-7-酮（3β-hydroxystigmast-5-en-7-one，11），豆甾-5-烯-3β，7α-二醇（stigmast-5-ene-3β，7α-diol，12），豆甾-5-烯-3β，7α，20ξ-三醇（stigmast-5-ene-3β，7α，20ξ-triol，13），麥角甾-4，6，8（14），22-四烯-3-酮（ergesta-4，6，8（14），22-tetraen-3-one，14），5α，8α-表二氧化麥角甾-6，22-二烯-3β-醇（5α，8α-epidioxyergesta-6，22-dien-3β-ol，15），5α，8α-表二氧化麥角甾-6，9（11），22-三烯-3β-醇（5α，8α-epidioxyergesta-6，9（11），22-trien-3β-ol，16）。三萜類：9，19-環(huán)阿爾廷-23（Z）-烯-3β，25-二醇（9，19-cyclolanost-23（Z）-ene-3β，25-diol，17），環(huán)阿爾廷-25-烯-3β，24ξ-二醇（cycloart-25-ene-3β，24ξ-diol，18/19），2β，20（S）-二羥基-達(dá)瑪烷-24-烯-3-酮（2β，20（S）-dihydroxydammar-24-en-3-one，20），β-香樹脂醇（β-amyin，21），齊敦果烷-9（11），12-二烯-3β-醇（olean-9（11），12-dien-3β-ol，22），異齊敦果烷-14-烯-3-酮（D-friedoolean-14-en-3-one，23），熊果酸（ursolicacid，24），22-羥基-何伯烷-3-酮（22-hydroxyhopan-3-one，25），臭椿苦酮A（11β，20-epoxy-1β，2α，12α-pentahydroxypicrasa-3，13（21）-dien-16-one，26）。神經(jīng)鞘苷類：1-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（2S，3R，4E，9E）-2-（2′R-羥基十六烷酰胺基）-4，9-二烯十八烷-1，3-二醇（1-O-β-D-glucopyranosyl-（2S，3R，4E，9E）-2-（2′R-hydroxyhexadecenoylamino）-4，9-octadecadiene-1，3-diol，27）。黃酮類：山柰酚（kaempferol，32），槲皮素（quercetin，33），槲皮素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（quercetin3-O-β-D-glucopyranoside，34），山柰酚3，7-O-二α-L-吡喃鼠李糖苷（kaempferol3，7-O-bis-α-L-rhamnopyranoside，35），3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-山柰酚7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（3-O-α-L-arabinofuranosylkaempferol7-O-α-L-rhamnopyranoside，36）。木脂素類：（+）-異落葉松樹脂醇[（+）-isolariciresinol，40]，（+）-異落葉松樹脂醇9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷[（+）-isolariciresinol9-O-β-D-glucopyranoside，41]。酚酸類：香草醛（vanillin，37），沒(méi)食子酸（gallicacid，38），七葉內(nèi)酯（6，7-dihydroxycoumarin，39）。其他類：正三十四烷（n-tetratriacontane，28），衛(wèi)矛醇（L-evonymitol，29），甘露醇（D-mannitol，30），山梨醇（D-sorbitol，31）。其中，化合物27為未見文獻(xiàn)報(bào)道的新化合物；化合物2為新天然產(chǎn)物；化合物1-8，11-25，28-31，34-41均是首次從該屬分離得到?；衔?0，26，32，33均是首次從鳳眼草中分離得到。本文利用文獻(xiàn)，從結(jié)構(gòu)類型、植物分布、生物活性、生合成途徑及人工合成方法、結(jié)構(gòu)研究方法等方面對(duì)苦味苦素類化合物的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。2．蓬子菜為茜草科拉拉藤屬（Galium）植物藥用全草，我國(guó)南北均有分布。中醫(yī)認(rèn)為蓬子菜味微辛、苦，性微寒。用于清熱解毒、活血通經(jīng)、祛風(fēng)止癢。主治肝炎、腹水、咽喉腫痛、瘡疔腫毒、婦女閉經(jīng)、帶下、蕁麻疹。本論文對(duì)蓬子菜的95％乙醇回流提取物進(jìn)行研究，利用系統(tǒng)溶劑萃取法、硅膠柱色譜、聚酰胺柱色譜、SephadexLH-20柱色譜、制備性TLC和HPLC等手段分離得到34個(gè)化合物。通過(guò)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)分析鑒定了他們的結(jié)構(gòu)。分別屬于黃酮類：異鼠李素（isorhamnetin，1），異鼠李素3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1-6）-β-D-吡喃葡萄苷（isorhamnetin3-O-α-L-rhamnopyranosyl-（1-6）-β-D-glucopyranoside，2），香葉木素（diosmetin，3），香葉木素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（diosmetin7-O-β-D-glucopyranoside，4），香葉木素7-O-β-D-吡喃木糖基-（1-6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（diosmetin7-O-β-D-xylopyranosyl-（1-6）-β-D-glucopyranoside，5），香葉木素7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1-2）[β-D-吡喃木糖基-（1-6）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（diosmetin7-O-α-L-rhamnopyranosyl-（1-2）-[β-D-xylopyranosyl-（1-6）]-β-D-glucopyranoside，6），山柰酚（kaempferol，7），槲皮素（quercetin，8），3，5，7，3′，4′，3″，5″，7″，3′″，4′″-十羥基-[8-亞甲基-8″]-雙黃酮（3，5，7，3′，4′，3″，5″，7″，3′″，4′″-decahydroxyl-[8-CH₂-8″]-biflavone，9）。蒽醌類：2，5-二羥基-1，3-二甲氧基-蒽醌（2，5-dihydroxy-1，3-dimethoxy-anthra-quinone，10），2-羥基-1，3-二甲氧基-蒽醌（2-hydroxy-1，3-dimethoxy-anthraquinone，11），大黃素甲醚（physcione，12），1，3-二羥基-2-甲基-蒽醌（1，3-dihydroxy-2-methyl-anth-raquinone，13），2，8-二羥基-1-甲氧基-蒽醌（2，8-dihydroxy-1-methoxy-anthraquinone，14），1-羥基-2-羥甲基-3-甲氧基-蒽醌（1-hydroxy-2-hydroxymethy-3-methoxy-anthraquinine，15）。木脂素類：（+）-松脂素4，4′-O-二β-D-吡喃葡萄苷[（+）-pinoresinol4，4′-O-bis-β-D-glucopyranoside，16]，（+）-表松脂素[（+）-epipinoresinol，17]，松脂素【（+）-medioresinol，18]。環(huán)烯醚萜類：morindolide（19），水晶蘭苷（monotropein，20），去乙酰車葉草甙酸（deacetyl-asperulosidicacid，21），6α-羥基-京尼平苷（6α-hydroxygeniposide，22），車葉草甙（deacetyl-asperuloside，23）。三萜類：熊果酸（ursolicacid，29），rubifolicacid（30），熊果醛（ursolicaldehyde，31）。酚酸類：東莨菪素（scopoletin，24），阿魏酸（ferulicacid，25），phthalicacidbis-（2-ethyl-hexyl）ester（26），對(duì)羥基-苯丙酸（p-hydroxy-phenylpropionicacid，27），香豆酸三十二酯（trans-dotriacontyl-coumarate，28）。其它類：正三十二烷醇（n-dotriacontanol，32），β-谷甾醇（β-sitosterol，33），胡蘿卜苷（daucosterol，34）。其中，化合物6，9，10為未見文獻(xiàn)報(bào)道的新化合物；化合物1，2，11，14-19，23，25-32為首次從該屬分離得到?；衔?2，24為首次從蓬子菜中分離得到。本論文以E．coli，S．a(chǎn)ureus，P．a(chǎn)eruginosa和S．typhiuriun為受試菌，采用瓊脂擴(kuò)散紙片法對(duì)鳳眼草和蓬子菜抗菌活性成分進(jìn)行追蹤，測(cè)定鳳眼草水提大孔樹脂洗脫物、95％乙醇提取物乙酸乙酯萃取部分和正丁醇萃取部分均有不同程度的抗菌活性，有效成分的分離鑒定表明，黃酮類化合物和木脂素類物質(zhì)是主要的抗菌活性物質(zhì)。蓬子菜的95％乙醇回流提取液的正丁醇層具有抗菌作用，所得單體化合物中，黃酮類化合物活性最強(qiáng)，部分蒽醌、環(huán)烯醚萜和木脂素類化合物具有較好的抗菌活性。利用二倍稀釋法測(cè)定抗菌活性化合物的最小抑菌濃度（MIC）。借助超氧化歧化酶（SOD）測(cè)試盒，對(duì)2