生物技術(shù)實(shí)踐-沖刺2022年高考生物大題提分攻略（原卷版）

專題05生物技術(shù)實(shí)踐

高考頻度：★★★★☆難易程度：★★★☆☆

考情分析與預(yù)測(cè)

從近幾年的新課標(biāo)卷的考查知識(shí)點(diǎn)來(lái)看，第37題主要考查微生物的培養(yǎng)和利用、發(fā)酵等知識(shí)。這

部分內(nèi)容難度不大，要求掌握教材知識(shí)，屬于識(shí)記性內(nèi)容，預(yù)計(jì)2022年高考也可能會(huì)以生態(tài)環(huán)境的治理為

切入點(diǎn)，考查微生物的分離和培養(yǎng)，還可能考查果酒、果醋的制作，腐乳和泡菜的制作等，緊貼生活實(shí)際。

真題再現(xiàn)

1.（2021.全國(guó)乙卷高考真題）工業(yè)上所說(shuō)的發(fā)酵是指微生物在有氧或無(wú)氧條件下通過(guò)分解與合成代謝將某

些原料物質(zhì)轉(zhuǎn)化為特定產(chǎn)品的過(guò)程。利用微生物發(fā)酵制作醬油在我國(guó)具有悠久的歷史。某企業(yè)通過(guò)發(fā)酵制

作醬油的流程示意圖如下。

米曲零發(fā)酎發(fā)酎池發(fā)酎提取醬油

回答下列問(wèn)題：

（1）米曲霉發(fā)酵過(guò)程中，加入大豆、小麥和麥熬可以為米曲霉的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，大豆中的

可為米曲霉的生長(zhǎng)提供氮源，小麥中的淀粉可為米曲霉的生長(zhǎng)提供。

（2）米曲霉發(fā)酵過(guò)程的主要目的是使米曲霉充分生長(zhǎng)繁殖，大量分泌制作醬油過(guò)程所需的酶類，這些酶中

的、能分別將發(fā)酵池中的蛋白質(zhì)和脂肪分解成易于吸收、風(fēng)味獨(dú)特的成分，如將蛋白質(zhì)分解為

小分子的肽和。米曲霉發(fā)酵過(guò)程需要提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、通入空氣并攪拌，由此可以判斷米曲霉屬

于（填“自養(yǎng)厭氧”“異養(yǎng)厭氧”或“異養(yǎng)好氧”）微生物。

（3）在發(fā)酵池發(fā)酵階段添加的乳酸菌屬于（填“真核生物”或“原核生物”）；添加的酵母菌在無(wú)

氧條件下分解葡萄糖的產(chǎn)物是。在該階段抑制雜菌污染和繁殖是保證醬油質(zhì)量的重要因素，據(jù)

圖分析該階段中可以抑制雜菌生長(zhǎng)的物質(zhì)是（答出1點(diǎn)即可）。

【答案】蛋白質(zhì)碳源蛋白酶脂肪酶氨基酸異養(yǎng)好氧原核生物酒精和二氧化

碳酒精、乳酸、食鹽（答一個(gè)即可）

【分析】

1、參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)

生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

2、微生物的生長(zhǎng)繁殖一般需要水、無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源等基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有些還需要特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如生

長(zhǎng)因子，還需要滿足氧氣和pH等條件。

3、果酒制作的菌種為酵母菌，其原理是：在有氧的條件下，酵母菌大量繁殖，無(wú)氧的條件下，醋母菌產(chǎn)生

酒精和二氧化碳。

【詳解】

（1）大豆中含有豐富的蛋白質(zhì)，可為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供氮源。小麥中的淀粉可以為微生物的生長(zhǎng)繁殖

提供碳源。

（2）米曲霉在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的蛋白酶能將蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和氨基酸，產(chǎn)生的脂肪酶能將脂肪分

解為甘油和脂肪酸，使發(fā)酵的產(chǎn)物具有獨(dú)特的風(fēng)味。米曲霉發(fā)酵時(shí)需要利用現(xiàn)有的有機(jī)物和需要氧氣，說(shuō)

明其代謝類型是異養(yǎng)好氧型。

（3）乳酸菌沒(méi)有核膜包被的細(xì)胞核，屬于原核生物。酵母菌屬于兼性厭氧型微生物，既可以進(jìn)行有氧呼吸，

也可以進(jìn)行無(wú)氧呼吸，無(wú)氧呼吸的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳。在發(fā)酵池中酵母菌產(chǎn)生的酒精能抑制雜菌的生

長(zhǎng)，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸使發(fā)酵液呈酸性也能抑制雜菌的生長(zhǎng)，同時(shí)往發(fā)酵池中添加的食鹽也能抑制雜菌的

生長(zhǎng)。

【點(diǎn)睛】

本題以醬油的制作為題材，本質(zhì)考查果酒和腐乳的制作，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)

驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累。

2.（2021?全國(guó)甲卷高考真題）加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉。某同學(xué)通過(guò)實(shí)驗(yàn)比較了幾種洗衣粉的

去漬效果（"+”越多表示去漬效果越好），實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表。

加酶洗衣粉A加酶洗衣粉B加酶洗衣粉C無(wú)酶洗衣粉（對(duì)照）

血漬+++++++4-

油漬++++++++

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果回答下列問(wèn)題：

（1）加酶洗衣粉A中添加的酶是；加酶洗衣粉B中添加的酶是；加酶洗衣粉C中

添加的酶是o

（2）表中不宜用于洗滌蠶絲織物的洗衣粉有,原因是

（3）相對(duì)于無(wú)酶洗衣粉，加酶洗衣粉去漬效果好的原因是o

（4）關(guān)于酶的應(yīng)用，除上面提到的加酶洗衣粉外，固定化酶也在生產(chǎn)實(shí)踐中得到應(yīng)用，如固定化葡萄糖異

構(gòu)前已經(jīng)用于高果糖漿生產(chǎn)。固定化的技術(shù)是指。固定化能在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用的優(yōu)點(diǎn)是

（答出1點(diǎn)即可）。

【答案】蛋白酶脂肪酶蛋白酶和脂肪酶加酶洗衣粉A和加酶洗衣粉C蠶絲織物的主要

成分是蛋白質(zhì)，會(huì)被蛋白酶催化水解醐可以將大分子有機(jī)物分解為小分子有機(jī)物，小分子有機(jī)物易溶

于水，從而將污漬與洗滌物分開(kāi)利用物理或化學(xué)方法將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)固定在載體上

的酶可以被反復(fù)利用，可降低生產(chǎn)成本（或產(chǎn)物容易分離，可提高產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量，或固定化酶穩(wěn)定性

好，可持續(xù)發(fā)揮作用）

【分析】

加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶。

其中，應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有大分子

蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污跡容易從衣物上脫落。

【詳解】

（1）從表格中信息可知，加酶洗衣粉A對(duì)血漬的洗滌效果比對(duì)照組的無(wú)酶洗衣粉效果好，而血漬含有大分

子蛋白質(zhì)，因此，加酶洗衣粉A中添加的酶是蛋白酶，同理，加酶洗衣粉B中添加的酶是脂肪酶；加酶洗

衣粉C對(duì)血漬和油漬的洗滌效果比無(wú)酶洗衣粉好，油漬中有脂肪，因此，加酶洗衣粉C中添加的酶是蛋白

醐和脂肪酶。

（2）蠶絲織物中有蛋白質(zhì)，因此，表中不宜用于洗滌蠶絲織物的洗衣粉有加酶洗衣粉A、加酶洗衣粉C,

原因是蠶絲織物主要成分是蛋白質(zhì)，會(huì)被蛋白酶催化水解。

（3）據(jù)分析可知，相對(duì)于無(wú)酶洗衣粉，加酶洗衣粉去漬效果好的原因是：酶可以將大分子有機(jī)物分解為小

分子有機(jī)物，小分子有機(jī)物易溶于水，從而將污漬與洗滌物分開(kāi)。

（4）固定化酶技術(shù)是指利用物理或化學(xué)方法將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與

產(chǎn)物分離，所以固定在載體上的酶還可以被反復(fù)利用。所以固定化酶在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用的優(yōu)點(diǎn)是：降低生

產(chǎn)成本（或產(chǎn)物容易分離，可提高產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量，或固定化酶穩(wěn)定性好，可持續(xù)發(fā)揮作用）。

【點(diǎn)睛】

本題考查加酶洗衣粉、酶的固定化相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，難度較小，解答本題的關(guān)鍵是明確加酶洗衣粉與普通洗衣

粉去污原理的異同，以及固定化酶技術(shù)的應(yīng)用實(shí)例和優(yōu)點(diǎn)。

3.（2020新課標(biāo)1卷）某種物質(zhì)S（一種含有C、H、N的有機(jī)物）難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某

些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要

甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無(wú)機(jī)鹽、水和S,乙的組分為無(wú)機(jī)鹽、水、S和Y。

接種稀釋涂布平板挑單菌落接種多次篩選

①月②月③——④月⑤一高效降解

淤泥一"-A-"s的菌株

無(wú)菌水甲乙甲

回答下列問(wèn)題：

（1）實(shí)驗(yàn)時(shí)，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是

。甲、乙培養(yǎng)基均屬于培養(yǎng)基。

（2）實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2x107個(gè)/mL,若要在每個(gè)平板上涂布100uL稀釋后的菌液，

且保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò)200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋倍。

（3）在步驟⑤的篩選過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過(guò)某一濃度時(shí)，某菌株對(duì)S的降解量反而下降，其原

因可能是一.（答出1點(diǎn)即可）。

（4）若要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)，請(qǐng)寫出主要實(shí)驗(yàn)步驟。

（5）上述實(shí)驗(yàn)中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供4類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，即

【答案】（1）.高壓蒸汽滅菌（2）.瓊脂（3）.選擇（4）.104（5）.S的濃度超過(guò)某一值時(shí)會(huì)抑

制菌株的生長(zhǎng)（6）.取淤泥加入無(wú)菌水，涂布（或稀釋涂布）到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)（7）.水、碳

源、氮源和無(wú)機(jī)鹽

【解析】

【分析】

培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等。

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

【詳解】（1）常用高壓蒸汽滅菌法處理盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶，乙為固體培養(yǎng)基，故需要加入Y瓊脂；甲

和乙培養(yǎng)基可以用于篩選能降解S的菌株，故均屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）若要在每個(gè)平板上涂布100卜山稀釋液后的菌液，且每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò)200個(gè)，則搖瓶M

中的菌液稀釋的倍數(shù)至少為2x107口000x100+200=1x1（）4倍。

（3）當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過(guò)某一濃度后，可能會(huì)抑制菌株的生長(zhǎng)，從而造成其對(duì)S的降解量下降。

（4）要測(cè)定淤泥中能降解S的細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)，可以取淤泥加無(wú)菌水制成菌懸液，稀釋涂布到乙培養(yǎng)基匕

培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。

（5）甲和乙培養(yǎng)基均含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源。

【點(diǎn)睛】培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，接種工具應(yīng)該進(jìn)行灼燒滅菌，玻璃器皿等耐高溫的、需要

干燥的物品，常采用干熱滅菌。

4.（2020新課標(biāo)2卷）研窕人員從海底微生物中分離到一種在低溫下有催化活性的a-淀粉酶A3,并對(duì)其進(jìn)

行了研究?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）在以淀粉為底物測(cè)定A3醐活性時(shí)，既可檢測(cè)淀粉減少，檢測(cè)應(yīng)采用的試劑是,也可采用

斐林試劑檢測(cè)________的增加。

（2）在A3分離過(guò)程中可采用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)其純度，通常會(huì)在凝膠中添加SDS,SDS的作用是

（3）本實(shí)驗(yàn)中，研究人員在確定A3的最適pH時(shí)使用了三種組分不同的緩沖系統(tǒng)，結(jié)果如圖所示。某同學(xué)

據(jù)圖判斷，緩沖系統(tǒng)的組分對(duì)酶活性有影響，其判斷依據(jù)是。

手

一

e、

s

E

x

*

（4）在制備A3的固定化酶時(shí)，一般不宜采用包埋法，原因是（答出1點(diǎn)

即可）。

【答案】（1）.碘液（2）.還原糖（或答：葡萄糖）（3）.消除蛋白質(zhì)所帶凈電荷對(duì)遷移率的影響

（4）.使蛋白質(zhì)發(fā)生變性（5）.在pH相同時(shí)，不同緩沖系統(tǒng)條件下所測(cè)得的相對(duì)酶活性不同（6）.酶分

子體積小，容易從包埋材料中漏出

【解析】

【分析】

SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳原理：在離子強(qiáng)度低時(shí)，主要以單體形式存在的SDS可以與蛋白質(zhì)結(jié)合，生成蛋

白質(zhì)-SDS復(fù)合物。由于SDS帶有大量負(fù)電荷，復(fù)合物所帶的負(fù)電荷遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)蛋白質(zhì)原有的負(fù)電荷，這使得

不同蛋白質(zhì)間電荷的差異被掩蓋。而SDS-蛋白質(zhì)復(fù)合物形狀都呈橢圓棒形，棒的長(zhǎng)度與蛋白質(zhì)亞基分子量

有關(guān)，所以在SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳中蛋白只存在分子大小的差別，利用這一點(diǎn)可將不同的蛋白質(zhì)分開(kāi)

（分子篩效應(yīng)），因此SDS常用于檢測(cè)蛋白質(zhì)亞基的分子量及鑒定純度。

【詳解】（I）測(cè)定酶活性時(shí)，可以通過(guò)檢測(cè)單位時(shí)間內(nèi)反應(yīng)物的減少或生成物的增加來(lái)反映酶活性，所以

可以用碘液檢測(cè)淀粉的減少，也可用斐林試劑檢測(cè)還原糖（或葡萄糖）的增加。

（2）鑒定蛋白質(zhì)純度常用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法，凝膠中加入SDS可以消除蛋白質(zhì)所帶凈電荷對(duì)遷

移率的影響，并使蛋白質(zhì)發(fā)生變性。

（3）分析題中曲線可知，在pH相同時(shí)，不同緩沖系統(tǒng)條件下所測(cè)得的相對(duì)酶活性不同，可推測(cè)緩沖系統(tǒng)

的組分對(duì)酶活性有影響。

（4）由于酶分子體積小，容易從包埋材料中漏出，所以固定化酶時(shí)，一般不采用包埋法。

【點(diǎn)睛】本題比較基礎(chǔ)，考查蛋白質(zhì)的提取和分離、固定化酶技術(shù)等相關(guān)知識(shí)，對(duì)于此類試題，需要考生

注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用、實(shí)驗(yàn)操作步驟等，考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)

程中應(yīng)注意積累。

5.（2020新課標(biāo)3卷）水果可以用來(lái)加工制作果汁、果酒和果醋等。回答下列問(wèn)題：

（1）制作果汁時(shí)，可以使用果膠酶、纖維素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果膠酶是分解果膠的一類酶

的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、（答出2種即可）。纖維素酶可以分解植物（填

細(xì)胞膜或細(xì)胞壁）中的纖維素。

（2）用果膠酶處理果泥時(shí)，為了提高出汁率，需要控制反應(yīng)的溫度，原因是。

（3）現(xiàn)有甲乙丙三種不同來(lái)源的果膠酶，某同學(xué)擬在果泥用量、溫度、pH等所有條件都相同的前提下比較

這三種酶的活性。通常，酶活性的高低可用來(lái)表示。

（4）獲得的果汁（如蘋果汁）可以用來(lái)制作果酒或者果醋，制作果酒需要菌，這一過(guò)

程中也需要02,02的作用是。制作果醋需要醋酸菌，醋酸菌屬于（填

好氧或厭氧）細(xì)菌。

【答案】（1）.果膠分解酶、果膠酯酶（2）.細(xì)胞壁（3）.溫度對(duì)果膠酶活性有影響，在最適溫度下

酶活性最高，出汁率最高（4）.在一定條件下，單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中反應(yīng)物的消耗量或者產(chǎn)物的增加

量（5）.酵母（6）.促進(jìn)有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖（7）.好氧

【解析】

【分析】

1、果膠是由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物，不溶于水，在果汁加工中，果膠不僅會(huì)影響出汁率，

還會(huì)使果汁混濁。果膠酶能分解果膠，使榨取果汁變得更容易，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶是分

解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等。

2、果酒的制作離不開(kāi)酵母菌。酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖。

在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。

3、醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌

將葡葡汁中的糖分解成醋酸：當(dāng)缺少糖源時(shí).，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】（1）由分析可知，果膠酶包括多聚半乳糖醛酸醐、果膠分解酶和果膠酯酶等。植物細(xì)胞壁由纖維

素和果膠構(gòu)成，故可用纖維素酶分解細(xì)胞壁。

（2）酶發(fā)揮催化作用需要適宜溫度和pH條件，在最適溫度下，果膠酶的活性最高，出汁率最高。

（3）酶的活性是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力，酶活性的高低可以用在一定條件下，單位時(shí)間內(nèi)、單位體

積中反應(yīng)物的消耗量或者產(chǎn)物的增加量來(lái)表示。

（4）由分析可知，果酒的制作離不開(kāi)酵母菌，在初期通入氧氣，可以促進(jìn)酵母菌的有氧呼吸，使其大量繁

殖；醋酸菌是一種好氧細(xì)菌。

【點(diǎn)睛】本題考查果酒、果醋的制作和果膠酶的相關(guān)內(nèi)容，要求考生識(shí)記制作果酒、果醋的原理，掌握果

汁生產(chǎn)中果膠酶的作用，并結(jié)合題干信息解題。

典例引領(lǐng)

生物技術(shù)擁有巨大的發(fā)展空間，給人們的生活帶來(lái)了深刻的變化。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）無(wú)菌技術(shù)是實(shí)驗(yàn)室獲得純凈培養(yǎng)物的重要措施，無(wú)菌技術(shù)除了防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物

污染外，還可以;實(shí)驗(yàn)過(guò)程中防止被其他外來(lái)微生物污染的措施有

___________________（至少答兩點(diǎn)）。

（2）從土壤中分離純化細(xì)菌常用的接種方法是和兩種。通常對(duì)獲得的純菌種還可

以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的。

（3）橙子的果肉可用于制備果酒和果醋。用橙子加工橙汁過(guò)程中加入可使混濁的果汁變得澄

清，釀制的橙子酒沒(méi)有酒味只有醋味，可能的原因是。

【答案】避免操作者自身被微生物污染對(duì)實(shí)驗(yàn)室的空間、操作者的衣著和雙手進(jìn)行清潔和消毒、將用

于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌（或?qū)嶒?yàn)操作應(yīng)該在酒精燈火焰附近進(jìn)行、操作時(shí)應(yīng)

避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍物品接觸）平板劃線法稀釋涂布平板法鑒定果膠酶

發(fā)酵時(shí)處于通氣狀態(tài)，醋酸菌將橙汁中的糖分解成醋酸，或是將乙醇轉(zhuǎn)變成醋酸

【分析】

菌種分離就是用無(wú)菌操作的方法將所需要的菌從混雜的微生物群體中單獨(dú)分離出來(lái)的過(guò)程。最簡(jiǎn)單的分離

微生物的方法是平板劃線法，即用接種環(huán)以無(wú)菌操作沾取少許待分離的材料-，在無(wú)菌平板表面進(jìn)行連續(xù)劃

線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開(kāi)來(lái)，如果劃線適宜的話，微生物能一

分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

【詳解】

（1）無(wú)菌技術(shù)除了防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還可以避免操作者自身被微生物污染。

為防止雜菌污染需要對(duì)實(shí)驗(yàn)室的空間、操作者的衣著和雙手進(jìn)行清潔和消毒，將用于微生物培養(yǎng)的器皿、

接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)該在酒精燈火焰附近進(jìn)行，操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料

用具與周圍物品接觸。

（2）從土壤中分離純化細(xì)菌常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種。通常對(duì)獲得的純菌種還

可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。

（3）果膠酶能分解植物細(xì)胞壁和胞間層，川橙子加工橙汁過(guò)程中加入果膠酶可使混濁的果汁變得澄清。果

醋發(fā)酵需要有氧環(huán)境，果酒發(fā)酵需要無(wú)氧環(huán)境，因此釀制的橙子酒沒(méi)有酒味只有醋味，可能的原因是發(fā)酵

時(shí)處于通氣狀態(tài)，醋酸菌將橙汁中的糖分解成醋酸，或是將乙醇轉(zhuǎn)變成醋酸。

提交技巧

1.純化微生物的接種方法

比較項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法

接種環(huán)在固體平板培養(yǎng)基表面連續(xù)①一系列的梯度稀釋；

關(guān)鍵操作

劃線②涂布平板法操作

稀釋度要足夠高，為確保實(shí)驗(yàn)成功可

注意事項(xiàng)每次劃線前后均需灼燒接種環(huán)

以增加稀釋度

在具有顯著的菌落特征的菌落中挑從適宜稀釋度的平板上的菌落中挑

菌體獲取

取菌體取菌體

可以根據(jù)菌落的特點(diǎn)獲得某種微生既可以獲得單細(xì)胞菌落，又能對(duì)微生

優(yōu)點(diǎn)

物的單細(xì)胞菌落物計(jì)數(shù)

缺點(diǎn)不能對(duì)微生物計(jì)數(shù)操作復(fù)雜，需要涂布多個(gè)平板

2.平板劃線操作的注意事項(xiàng)

（1）操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束

時(shí)，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒目的如下表：

第一次操作每次劃線之間劃線結(jié)束

殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的殺死接種環(huán)上殘

殺死接種環(huán)上原菌種，使下次劃線的菌種直接來(lái)源存的菌種，避免細(xì)

目的

有的微生物于上次劃線的末端，使每次劃線菌菌污染環(huán)境和感

種數(shù)目減少染操作者

（2）灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。

（3）第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增

加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。

（4）劃線時(shí)最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。

（5）劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破。

3、微生物計(jì)數(shù)易錯(cuò)提醒

“選擇菌落數(shù)在30~300的平板”的兩個(gè)提醒

用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)微生物時(shí)，要求選擇菌落數(shù)在30?300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。解題時(shí)易出現(xiàn)以下

誤解：

（1）只得到1個(gè)菌落數(shù)在30?300的平板是錯(cuò)誤的。錯(cuò)誤的原因是不符合實(shí)驗(yàn)的重復(fù)原則，易受到偶

然因素的影響。

（2）得到3個(gè)或3個(gè)以上菌落數(shù)在30?300的平板，也不一定正確，這可能有兩種情況：

①不同平板間差異較大，如得到3個(gè)平板，菌落數(shù)分別為230、34、240,雖然菌落數(shù)均在“30?300”，

這也是不正確的，因?yàn)椤?4”與“230”“240”差異太大，應(yīng)重新實(shí)驗(yàn)找出原因。

②不同平板之間差異不大，是符合要求的，用其平均值作為估算的最終結(jié)果。可見(jiàn)，并不是只要

得到3個(gè)“菌落數(shù)在30?300的平板”即可，而應(yīng)該是涂布的同一稀釋度的平板均符合“菌落數(shù)在

30?300的平板”且無(wú)較大差異，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)操作合格，才能按照計(jì)算公式進(jìn)行計(jì)算。

4.微生物的鑒別方法

（1）菌落特征鑒別法：根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色

等特征進(jìn)行鑒別。

(2)指示劑鑒別法：如以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種微生物后，培養(yǎng)基變

紅說(shuō)明該種微生物能夠分解尿素。

(3)染色鑒別法：如利用剛果紅染色法，根據(jù)培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈來(lái)篩選分

解纖維素的微生物。

5.篩選微生物的三種方法

(1)單菌落挑取法：利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物

菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物。

(2)選擇培養(yǎng)法：利用選擇培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)，直接獲得目的微生物。

(3)鑒定培養(yǎng)法：利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物。

6.果酒、果醋制作的注意事項(xiàng)

(1)材料的選擇與處理

選擇新鮮的葡萄，榨汁前先沖洗后除去枝梗，以避免去除枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染

的機(jī)會(huì)。

(2)防止發(fā)酵液被污染

需要從發(fā)酵制作的過(guò)程進(jìn)行全面的考慮，因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。為避免雜菌污染，

榨汁機(jī)要洗凈并晾干；發(fā)酵裝置要洗凈并用70%的酒精消毒；封閉充氣口；若用簡(jiǎn)易的發(fā)酵裝置；

每隔一定時(shí)間排氣時(shí)只需擰松瓶蓋，不要完全揭開(kāi)瓶蓋等。

(3)控制好發(fā)酵時(shí)間與溫度、果醋制作時(shí)適時(shí)充氣。

【特別提醒】

氧氣供應(yīng)狀況對(duì)酒精發(fā)酵結(jié)果影響的分析方法

(1)酒精發(fā)酵所需的氧氣供應(yīng)條件

①發(fā)酵前期：需要通入空氣或在發(fā)酵瓶中留有一定的空間，可以給酵母菌提供氧氣以利于酵母菌

通過(guò)有氧呼吸大量增殖。②發(fā)酵后期：要通過(guò)密封嚴(yán)格控制無(wú)氧環(huán)境，以利于酵母菌通過(guò)無(wú)氧呼

吸產(chǎn)生酒精。

(2)酒精發(fā)酵異常的情況

①酒精發(fā)酵的前期如果供氧不足，酵母菌數(shù)量少，產(chǎn)生的酒精少。②酒精發(fā)酵后期如果密封不嚴(yán)，

則酵母菌數(shù)量充足，但是不能產(chǎn)生酒精。

實(shí)戰(zhàn)演練

1.廚余垃圾富含淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪等，利用微生物發(fā)酵處理不僅可以減少環(huán)境污染，還可以生產(chǎn)大量的

微生物菌體蛋白（可做飼料），實(shí)現(xiàn)廚余垃圾的無(wú)害化和資源化利用。

（1）廚余垃圾廢液中的淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)，可以被微生物在體外分解，原因是微生物能

（2）為了提高處理效率，必須進(jìn)行微生物的純化，常用的微生物分離技術(shù)有稀釋涂布平板法

和0

（3）研究發(fā)現(xiàn)圓褐固氮菌和芽抱桿菌（均為需氧型）處理廚余垃圾廢液效果好。為探究圓褐固氮菌和芽抱

桿菌處理某廚余垃圾廢液的最佳接種量比，來(lái)制備微生物菌劑，研究者做了如下實(shí)驗(yàn)：

①將兩種菌液進(jìn)行不同配比分組處理如下表所示：

編號(hào)ABCD

圓褐固氮菌：芽胞桿菌1:00:11:12:1

將上表菌液分別接種于50mL某廚余垃圾廢液中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，振蕩處理的目的是o

本實(shí)驗(yàn)的對(duì)照組應(yīng)在50mL廚余垃圾廢液中接種。

②培養(yǎng)3天后測(cè)定活菌數(shù)：取一定量菌液進(jìn)行,然后分別取0.1mL的菌液采用涂布平板法接

種于完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)。進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，可依據(jù)菌落形態(tài)對(duì)兩種菌進(jìn)行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在__________范

圍內(nèi)的平板。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖所示（其中黑色柱形圖代表圓褐固氮菌菌落數(shù)），由實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出的初步結(jié)論

是：o

2.聚乙烯（PE）是農(nóng)田常用的塑料膜的主要成分，難以被降解，往往會(huì)造成土壤污染。下圖為研究人員分

離PE降解菌的流程圖?；卮鹣铝袉?wèn)題。

接種

土埴樣品到

選擇培養(yǎng)劃線純化菌種

（1）微生物生長(zhǎng)繁殖所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有水、無(wú)機(jī)鹽、四類。圖可知，與選擇培養(yǎng)相比，劃線純

化的培養(yǎng)基中特有的成分是o該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以聚乙烯（PE）為唯一碳源，其原因是

（2）若要對(duì)選擇培養(yǎng)后的PE降解菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，則可采用法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)，其中前者計(jì)數(shù)結(jié)

果往往偏小，原因是。

（3）若劃線的某個(gè)平板經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都長(zhǎng)滿了菌落，第二劃線區(qū)域劃的第一條線上

無(wú)菌落，其他劃線上有菌落，則劃線無(wú)菌落的原因可能有。

（4）研究人員在選擇培養(yǎng)基中發(fā)現(xiàn)兩種降解聚乙烯（PE）的酶。可用凝膠色譜法分離這兩種酶，先洗脫出

來(lái)的是相對(duì)分子質(zhì)量（填“較大"或“較小”）的酶，原因是一。

3.尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的，但隨著科學(xué)家成功實(shí)現(xiàn)尿素的體外人工合成，尿素的生產(chǎn)逐漸走向工

業(yè)化，尿素也逐步成為一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥。下圖是土壤中分解尿素的細(xì)菌分離與計(jì)數(shù)的基本流程，請(qǐng)回

答有關(guān)問(wèn)題：

土壤取樣一制備培養(yǎng)去一接種一培養(yǎng)觀察一計(jì)數(shù)

（1）配制圖中所用培養(yǎng)基，在熔化瓊脂時(shí)需要不斷用玻棒攪拌，目的是。配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐

形瓶中后，可采用方法進(jìn)行滅菌。

（2）該過(guò)程采用的接種方法是,培養(yǎng)一段時(shí)間要能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，從操作層面需要

滿足兩個(gè)條件：一是;二是涂布時(shí)要盡量做到均勻涂布。

（3）該實(shí)驗(yàn)中的選擇培養(yǎng)基對(duì)分解尿素的細(xì)菌具有選擇作用，其原理是。若要判斷選擇培養(yǎng)基是否

起到了篩選的作用，對(duì)照組的設(shè)置是。

（4）一般選擇菌落數(shù)在30?300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，原因是o

（5）在篩選尿素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入,用于鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。

4.回答下列有關(guān)微生物的發(fā)酵問(wèn)題.

（1）乳酸菌能產(chǎn)生亞硝酸鹽還原酶從而分解亞硝酸鹽，從泡菜濾液中篩選出亞硝酸鹽還原酶活力較高的乳

酸菌，純化乳酸菌所用的選擇培養(yǎng)基以為唯一氮源，進(jìn)入乳酸菌的亞硝酸鹽的主要作用是。

（2）檢測(cè)泡菜濾液乳酸菌的含量時(shí)，通常將樣品進(jìn)行一系列的梯度稀釋，將不同稀釋度的水樣用涂布器分

別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，然后記錄菌落數(shù)，這種方法稱為,如果看到培養(yǎng)基上

菌落數(shù)較少，推測(cè)可能的原因是。

（3）亞硝酸鹽的含量變化先增加后下降，亞硝酸鹽含量下降的原因是o發(fā)酵初期乳酸含量開(kāi)始

很低，中后期急劇增加的原因是。

（4）某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因

是。消毒常采用巴氏消毒法，這種方法的優(yōu)點(diǎn)是。

（5）泡菜發(fā)酵發(fā)現(xiàn)10天內(nèi)的發(fā)酵效果越來(lái)越好，且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系，但無(wú)法確定發(fā)酵的最佳

時(shí)間；若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間，還需要做的事情是。

5.幽門螺旋桿菌（Hp）是急慢性胃炎和消化道潰瘍的主要致病因子，能分解對(duì)熱不穩(wěn)定的尿素。研究人員

從帶菌者胃黏膜樣本中分離出該類細(xì)菌，并進(jìn)行大量培養(yǎng)。所利用的培養(yǎng)基成分：葡萄糖10.0g、蛋白陳

5.0g、KH2PO41.4g、Na2HPO42.1g、尿素1.0g,瓊脂15.0g、H2O（定容至1L）?；卮鹣铝袉?wèn)題：

O）分析培養(yǎng)基的成分可知，上述培養(yǎng)基___________（填''能''或"不能”）用于分離Hp,理由是

（2）培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)，滅菌與添加尿素的先后順序是；實(shí)驗(yàn)室中對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌常用

的方法是。

（3）利用平板劃線法劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)一段時(shí)間后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了Hp,但

第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無(wú)菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落的操作失誤可能是

______________________________________________（答出一項(xiàng)即可）。

（4）向使用的培養(yǎng)基中添加酚紅指示劑，利用顏色變化可實(shí)現(xiàn)對(duì)分離的Hp的初步鑒定，該實(shí)驗(yàn)思路的原

理是。若要臨時(shí)保存Hp樣本，可將其接種到培養(yǎng)基上。

6.某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn).實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、

菌落觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題：

（1）培養(yǎng)基中含有的蛋白陳、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了和o除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的

基本成分是和。

（2）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是。

（3）為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于中培養(yǎng)，培養(yǎng)的

溫度設(shè)定在37℃。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

（4）培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說(shuō)明湖水樣品中有多種細(xì)菌。一般說(shuō)來(lái),

菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越。

7.尿素分解菌能分泌A酶將尿素分解為二氧化碳和氨，氨能被植物吸收利用。某中學(xué)生物興趣小組從土壤

中分離尿素分解菌，并統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，為篩選尿素分解菌，配制了以下甲、乙兩種培養(yǎng)基。

請(qǐng)回答以下有關(guān)問(wèn)題：

葡萄糖

KH2Po4Na2HPO4MgSO4.7H2O蛋白陳.尿素瓊脂

甲培養(yǎng)基1.4g.2.1g0.2g1.0g10.0g1.0g15.0g

乙培養(yǎng)基1.4g2.lg0.2g-10.0g1.0g1.0g

（1）A酶是,上述培養(yǎng)基中的KH2P04和NazHPCM的作用是。

（2）根據(jù)培養(yǎng)基的成分分析，能分離出上壤中尿素分解菌的是，理由是

（3）要統(tǒng)計(jì)每克上壤樣品中活菌數(shù)目，最好采用法接種。某同學(xué)取稀釋倍數(shù)為IO。倍的菌液o.2mL

接種后，測(cè)得平板上菌落數(shù)為156、178和191,則每毫升樣品中的菌落數(shù)為—o對(duì)尿素分解菌進(jìn)行鑒定

時(shí)，需要在選擇培養(yǎng)基中加入。

（4）該小組中有人設(shè)想：由活性A酶和尿素混合，制成"加酶尿素”，尿素肥效肯定更高，為了提高“加酶

尿素”中腺酶的利用率，應(yīng)當(dāng)采用技術(shù)。

8.我國(guó)制作泡椒的歷史悠久，泡椒是川菜中特有的調(diào)味料泡椒在儲(chǔ)運(yùn)過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生脹袋而縮短保質(zhì)

期。某實(shí)驗(yàn)小組從泡椒中篩選出產(chǎn)氣微生物，為延長(zhǎng)泡椒保質(zhì)期提供了理論依據(jù)。回答下列問(wèn)題：

（1）泡椒屬于泡菜的一種，制作泡椒時(shí)要先將鹽水煮沸，目的是。為了縮短泡椒的

制作時(shí)間，可加入少量的陳泡椒液，目的是o

（2）制作泡椒主要利用的微生物是。泡椒成熟過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽，亞硝酸鹽在特定條件下

會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物。

（3）該實(shí)驗(yàn)小組對(duì)泡椒水樣品中的微生物進(jìn)行了分離計(jì)數(shù)，過(guò)程如圖所示。圖中所示過(guò)程需要使用的接種

工具是o若接種0.2mL菌液并培養(yǎng)48h后，三個(gè)重復(fù)組平板上的菌落數(shù)分別為35,

39和31,則每毫升泡椒水樣品中的微生物數(shù)量是個(gè)。若培養(yǎng)的時(shí)間過(guò)短，則可能導(dǎo)致最終的計(jì)

數(shù)值__________，原因是o

1mL1mL1mL0.2mL

90mL無(wú)菌水9mL9mL9mL

+10mL菌液無(wú)菌水無(wú)菌水無(wú)菌水

9.為開(kāi)發(fā)適合豬生長(zhǎng)的發(fā)酵秸稈飼料，某科研小組以豬盲腸為微生物來(lái)源，從中分離能有效分解纖維素的

細(xì)菌?；卮鹣铝袉?wèn)題。

(1)分離純化纖維素分解菌時(shí)，首先需要用對(duì)豬盲腸食糜進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的原

因是。

(2)將豬盲腸食糜稀釋液接種到纖維素鑒別培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，將剛果紅溶液倒入培養(yǎng)基中浸染10

分鐘后，用溶液洗去表面浮色。有分解纖維素能力的菌落周圍會(huì)出現(xiàn)透明圈。測(cè)量并記錄透

明圈、菌落直徑，結(jié)果如表所示。分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)選擇的最優(yōu)目標(biāo)菌株為號(hào)。需要進(jìn)一步

測(cè)定所得菌株纖維素酶活性，其活性可用一定條件下表示。

不同菌株的透明圈直徑和菌落直徑

菌株編號(hào)透明圈直徑菌落直徑

12.811.62

23.230.71

33.031.09

(3)利用上述所得菌株制備纖維素酶的流程如圖。透析的目的是:粗提物中包含纖維素酶及

其他雜蛋白。請(qǐng)寫出一種純化得到纖維素酶的方法及其純化原理

發(fā)酵液一》而斗一?勰圖一》|透析卜一畫同一純化|~f純酶

1I

去除菌體去除透析液

纖維素酶制備流程

10.在繽彩紛呈的生物世界里，微生物似乎顯得過(guò)于微小和沉寂。然而，它們?cè)谧匀唤鐓s作用非凡！回答

下列關(guān)于微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的問(wèn)題：

1mL

?②過(guò)程

重復(fù)3次

酸奶樣品無(wú)菌水無(wú)菌水?

培養(yǎng)、計(jì)數(shù)

（1）在微生物培養(yǎng)過(guò)程中提供的培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等。水在培養(yǎng)基中提供的主要

營(yíng)養(yǎng)為。除了提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以外，培養(yǎng)基制備時(shí)還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、氧氣

以及的要求。

（2）微生物的培養(yǎng)過(guò)程中常使用無(wú)菌技術(shù)。要想獲得純凈物的關(guān)鍵是。常用的無(wú)菌技術(shù)包

括消毒和滅菌兩個(gè)方面。而對(duì)于接種室、接種箱等可采用紫外線照射進(jìn)行消毒，其原因是紫外線能

（3）某研究小組為探究“好一多"折耳根酸奶中的乳酸菌數(shù)量，實(shí)驗(yàn)操作如圖所示，使用該方法統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)時(shí)

常用科學(xué)計(jì)數(shù)法，結(jié)果需要乘以l（r后，才用于表示乳酸菌的數(shù)量（單位：個(gè)/mL）,這里的n=。該

方法可用于微生物計(jì)數(shù)的原因是。

（4）土壤中的某些微生物是自養(yǎng)微生物，能利用空氣中的二氧化碳作為碳源。某生物興趣小組從土壤中分

離出一種X細(xì)菌。若要設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)鑒定X細(xì)菌能否利用空氣中的二氧化碳作為碳源。請(qǐng)簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路，

預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即o

11.我國(guó)科學(xué)家屠呦呦因在抗瘧藥物青蒿素研究上的突出貢獻(xiàn)而獲得諾貝爾獎(jiǎng)。青蒿素為無(wú)色針狀結(jié)晶、

不易揮發(fā)的菇類化合物，高溫下結(jié)構(gòu)易被破壞。青蒿素可用如下方法提?。?/p>

黃花蒿曬干、粉碎一浸泡、萃取一過(guò)濾一濃縮提取液一粗品一精制

回答下列問(wèn)題。

（1）浸泡萃取時(shí)，可用石油酸或乙醇等有機(jī)溶劑，原因是。濃縮提取液時(shí)利用的原理即可獲得

青蒿素粗品，該過(guò)程可用裝置。

（2）實(shí)驗(yàn)研究顯示，采用石油酸和乙醇做萃取劑時(shí)，萃取效果差別不大，但生產(chǎn)中常用乙醇而不用石油酸

做萃取劑，主要原因是o

（3）為了提高萃取效率，可在萃取液中加入適量的纖維素酶，因酶具有特性，使纖維素酶能在短時(shí)

間內(nèi)大幅度提高萃取效率的同時(shí)還不破壞青蒿素。為了使酶發(fā)揮作用后易與青蒿素分離，可對(duì)酶采用

技術(shù)。

（4）是否可利用鑒定胡蘿卜素的紙層析法鑒定提取物中是否含有青蒿素？請(qǐng)說(shuō)明理由。

12.我國(guó)制作泡椒的歷史悠久，泡椒是川菜中特有的調(diào)味料。泡椒在儲(chǔ)運(yùn)過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生脹袋而縮短保

質(zhì)期。某實(shí)驗(yàn)小組從泡椒中篩選出產(chǎn)氣微生物，為延長(zhǎng)泡椒保質(zhì)期提供了理論依據(jù)。回答下列問(wèn)題：

（1）泡椒屬于泡菜的一種，制作泡椒時(shí)要先將鹽水煮沸，目的是。為了縮短泡椒的制作時(shí)

間，可加入少量的陳泡椒液，目的是。

（2）泡椒成熟過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽，亞硝酸鹽和發(fā)生重氮化反應(yīng)后，再和N-1-蔡基乙二

胺鹽酸鹽結(jié)合形成______________色染料。

（3）該實(shí)驗(yàn)小組對(duì)泡椒水樣品中的微生物進(jìn)行了分離計(jì)數(shù)，過(guò)程如圖所示。圖中所示過(guò)程需要使用的接種

工具是。若接種0.2mL菌液并培養(yǎng)48h后,三個(gè)重復(fù)組平板上的菌落數(shù)分別為35.39和31,

則每毫升泡椒水樣品中的微生物數(shù)量是個(gè)。若培養(yǎng)的時(shí)間過(guò)短，則可能導(dǎo)致最終的計(jì)數(shù)值

（原因是。

）0mL無(wú)菌水9ini.9mL9mL

blOmL菌液無(wú)菌水無(wú)菌水無(wú)菌水

13.圖為某生物興趣小組設(shè)計(jì)的果酒發(fā)酵實(shí)驗(yàn)裝置，請(qǐng)據(jù)圖分析回答相關(guān)問(wèn)題:

（1）用此裝置制作葡萄酒，在酒精發(fā)酵的過(guò)程中，需對(duì)氣閥進(jìn)行關(guān)閉：若葡萄酒變酸、繼續(xù)

用此裝置制作葡萄醋，需改變的條件是：

①____________________________②