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Ⅱ卷必考題型專練7生物技術(shù)實(shí)踐(限時(shí):25分鐘)1.(2016·石家莊模擬)生活飲用水已經(jīng)過(guò)沉淀、過(guò)濾、加氯消毒等處理,含微生物很少,但當(dāng)其水源不潔或處理達(dá)不到要求時(shí),仍然會(huì)含相當(dāng)量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破損及二次供水等環(huán)節(jié)也可能導(dǎo)致生活飲用水的污染。因此生活飲用水的微生物安全性日常檢測(cè)是很重要的。我國(guó)生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(GB5749—85)中規(guī)定生活飲用水中細(xì)菌總數(shù)不得大于100個(gè)/mL,總大腸菌群不得大于3個(gè)/L。(1)檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí),通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),記錄菌落數(shù)量,這種方法稱為_(kāi)_______。(2)用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對(duì)照組?________,為什么?___________________________________________________________。(3)如分別取0.1mL已稀釋102倍的水樣分別涂布到四個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為161、155、158、170,則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為_(kāi)_______。(4)純化大腸桿菌時(shí)使用的培養(yǎng)基一般用____________法滅菌,________(填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止雜菌感染。(5)如果要測(cè)定水中的病毒種類,可以用________技術(shù)使其遺傳物質(zhì)擴(kuò)增,然后用______________技術(shù)進(jìn)行鑒定。【解析】(1)檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí),通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),記錄菌落數(shù)量,這種方法稱為稀釋涂布平板法。(2)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)置對(duì)照組,通過(guò)設(shè)置對(duì)照組來(lái)判斷培養(yǎng)基是否被污染。(3)如分別取0.1mL已稀釋102倍的水樣分別涂布到四個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為161、155、158、170,由題意可知,每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為(161+155+158+170)×102/(4×0.1×10-3)=1.61×108個(gè)/L。(4)培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌,不可用加入抗生素的方法防止雜菌感染,因?yàn)榇竽c桿菌對(duì)抗生素也敏感。(5)遺傳物質(zhì)擴(kuò)增常用PCR技術(shù),可用DNA分子雜交技術(shù)測(cè)定水中的病毒種類。【答案】(1)稀釋涂布平板法(2)需要因?yàn)樾枰袛嗯囵B(yǎng)基是否被污染(3)1.61×108(4)高壓蒸汽滅菌不可(5)PCRDNA分子雜交2.(2016·湖北八校模擬)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題:(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由3種組分形成的復(fù)合酶,其中的葡萄糖苷酶可將__________分解成__________。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)染料時(shí),CR可與纖維素形成__________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí),培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的__________。(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落并加以鑒定,某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基:酵母膏無(wú)機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲++++-++培養(yǎng)基乙+++-+++(注:“+”表示“有”,“-”表示“無(wú)”)據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲__________(填“能”或“不能”)用于分離纖維素分解菌,原因是______________________;培養(yǎng)基乙____________________(填“能”或“不能”)用于鑒定纖維素分解菌,原因是______________________?!窘馕觥?1)葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖,(2)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,紅色復(fù)合物無(wú)法形成,出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。(3)維素分解菌分離和鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,而培養(yǎng)基甲中沒(méi)有瓊脂,是液體培養(yǎng)基,要分離和鑒別纖維素分解菌,需要以纖維素為主要碳源的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基乙不具有選擇的作用?!敬鸢浮?1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透明圈(3)不能液體培養(yǎng)基不能分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素(不能形成CR-纖維素紅色復(fù)合物)3.(2016·高考押題卷)請(qǐng)回答有關(guān)物質(zhì)提取、微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的問(wèn)題:【導(dǎo)學(xué)號(hào):15482102】(1)實(shí)驗(yàn)室分離葉綠體中的色素常用的方法是__________;從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是__________法。(2)微生物培養(yǎng)過(guò)程中,獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是__________。常用的對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌的方法是__________。(3)從土壤中分離尿素分解菌的過(guò)程中,應(yīng)向以____________為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入____________指示劑。(4)純化菌種和統(tǒng)計(jì)某活菌的數(shù)目時(shí),宜采用的接種方法是____________,用這種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低,其原因是____________。【解析】(1)常用紙層析法分離葉綠體中的色素;胡蘿卜中的胡蘿卜素易溶于有機(jī)溶劑,常用萃取法提取。(2)微生物培養(yǎng)過(guò)程中,獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵,常用的對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌的方法是干熱滅菌法。(3)尿素分解菌能將尿素分解成氨,氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),pH升高,酚紅指示劑在堿性條件下呈紅色。(4)純化菌種和統(tǒng)計(jì)某活菌的數(shù)目時(shí),宜采用的接種方法是稀釋涂布平板法。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,故用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)出的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低?!敬鸢浮?1)紙層析法萃取(2)防止外來(lái)雜菌的入侵干熱滅菌法(3)尿素酚紅(4)稀釋涂布平板法當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落4.微生物在人類生活、生產(chǎn)與科研中發(fā)揮著重要作用,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)土壤中富含各種微生物,將土壤浸出液接種到特定培養(yǎng)基上,可獲得能分解尿素的細(xì)菌,從功能上講,該特定培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)室中獲得純凈菌種的接種方法有稀釋涂布平板法和____________。其中用稀釋涂布平板法接種前,要對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量,一般選用________的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)在________之間、適于計(jì)數(shù)的平板。(2)幽門(mén)螺桿菌含有脲酶,能夠分解尿素?,F(xiàn)采集樣本并制成菌液后,進(jìn)行分離培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)步驟如圖:eq\x(配制培養(yǎng)基)→eq\x(滅菌、倒平板)→eq\x(接種)→eq\x(培養(yǎng))→eq\x(觀察)在配制培養(yǎng)基時(shí),加入的尿素能夠?yàn)橛拈T(mén)螺桿菌提供________;對(duì)該培養(yǎng)基滅菌常用的方法是______________________。倒平板和接種操作都需要在__________________附近進(jìn)行。為了鑒定幽門(mén)螺桿菌能夠分解尿素,可在培養(yǎng)基中加入________指示劑。【解析】(1)允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)室中獲得純凈菌種的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量,一般選用104、105和106倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)在30~300之間、適于計(jì)數(shù)的平板。(2)尿素能夠?yàn)橛拈T(mén)螺桿菌提供氮源。一般用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。倒平板和接種操作都需要在酒精燈火焰附近進(jìn)行。為了鑒定幽門(mén)螺桿菌能夠分解尿素,可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑。【答案】(1)選擇平板劃線法104、105和106倍30~300(2)氮源高壓蒸汽滅菌法酒精燈火焰酚紅[備選試題](2016·銀川一中檢測(cè))農(nóng)村中泡菜的制作方法是:新鮮的蔬菜經(jīng)過(guò)整理、清潔后,放入徹底清洗并用白酒擦拭過(guò)的泡菜壇中,然后向壇中加入鹽水、香辛料及一些“陳泡菜水”。密封后置于陰涼處,適宜環(huán)境溫度為28~30℃。有時(shí)制作的泡菜會(huì)“咸而不酸”或“酸而不咸”,據(jù)此分析,回答下列問(wèn)題。(1)用白酒擦拭泡菜壇的目的是________。(2)若制作的泡菜“咸而不酸”,最可能的原因是__________________。(3)制作過(guò)程中,需要加入鹽水,其中清水與鹽的比例應(yīng)為_(kāi)_______,加入“陳泡菜水”的作用是______________。(4)若要獲得優(yōu)良乳酸菌菌種,應(yīng)選用培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)基中應(yīng)含有_____、______、水和無(wú)機(jī)鹽,同時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加________。純化菌種時(shí),為了得到單菌落,常采用的接種方法有____________________。培養(yǎng)時(shí)還需提供________條件?!窘馕觥?1)作泡菜時(shí),用白酒擦拭泡菜壇的目的是消毒。(2)“咸而不酸”是由于加入的食鹽過(guò)多,抑制了乳酸菌的無(wú)氧呼吸,產(chǎn)生乳酸。(3)在制作泡菜過(guò)程中,加入清水和食鹽的比例

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