微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)-復(fù)習(xí)課件

課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1.提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件2.防止其他微生物污染1精選課件課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)2.基本成分：碳源、氮源、水、無機(jī)鹽3.特殊營養(yǎng)：（有些微生物需要）（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）4.pH、氧氣、二氧化碳、滲透壓的需求：一、培養(yǎng)基如:生長因子(即細(xì)菌生長必需，而自身不能合成的化合物,如維生素、某些氨基酸、堿基等)

按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。1.概念：不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方2精選課件2.基本成分：碳源、氮源、水、無機(jī)鹽3.特殊營養(yǎng)：（牛肉膏、營養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來源碳源凡能提供所需碳元素的物質(zhì)合成生物體的細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)氮源凡能提供所需氮元素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物①無機(jī)化合物：CO2、NaHCO3

等。②有機(jī)化合物：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油、牛肉膏、蛋白胨等①無機(jī)化合物：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽。②有機(jī)化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏等自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物注：含C、H、O、N的有機(jī)物是異養(yǎng)型微生物的碳源、氮源、能源，如牛肉膏硝化細(xì)菌3精選課件營養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來源碳源凡能提供合成生物體的細(xì)胞物質(zhì)和一營養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來源生長因子生長必不可少的微量有機(jī)物酶和核酸的組成成分無機(jī)鹽礦物質(zhì)參與酶的組成；調(diào)節(jié)滲透壓——水——作為溶劑和運(yùn)輸?shù)慕橘|(zhì)；參與生化反應(yīng)——牛肉膏、酵母膏、動(dòng)物組織提取液等備注：(1)不同種類的微生物，對(duì)碳源的需要差別較大。(2)微生物最常利用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是銨鹽、硝酸鹽。(3)對(duì)異養(yǎng)微生物來說，含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源和能量來源。(4)微生物之所以需要補(bǔ)充生長因子，往往是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。4精選課件營養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來源生長因子生長必不酶和核酸的組成成分無劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途物理性質(zhì)化學(xué)成分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基用途或功能鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基的種類不加凝固劑加凝固劑，如瓊脂工業(yè)生產(chǎn)，增加某某菌的濃度或產(chǎn)物微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)培養(yǎng)基成分明確分類、鑒定在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長,促進(jìn)所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品,用以鑒別不同種類的微生物鑒別不同種類微生物選擇培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基5精選課件劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途物理性質(zhì)化學(xué)成分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途物理性質(zhì)培養(yǎng)基的種類不加凝固劑加凝固劑，如瓊脂工業(yè)生產(chǎn)，有利于微生物的大量繁殖，從而增加某某菌的濃度或產(chǎn)物、顯微直接計(jì)數(shù)法微生物分離、鑒定、培養(yǎng)菌落，進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種、動(dòng)植物的組織液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基平板劃線法，用于微生物的分離（簡單）稀釋涂布平板法，用于微生物的分離(復(fù)雜),活菌計(jì)數(shù)在固體培養(yǎng)基上的接種方法？？？6精選課件劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途物理性質(zhì)培養(yǎng)基的種類不加凝固劑加凝加入青霉素(是抗生素，殺細(xì)菌)的培養(yǎng)基:不加氮源的無氮培養(yǎng)基:不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基:

幾種選擇培養(yǎng)基舉例：分離酵母菌、霉菌等真菌分離固氮菌

分離自養(yǎng)型微生物唯一碳源為纖維素的培養(yǎng)基分解纖維素的細(xì)菌7精選課件加入青霉素(是抗生素，殺細(xì)菌)的培養(yǎng)基:幾種選擇培養(yǎng)基舉例：1.無菌范圍：實(shí)驗(yàn)操作空間消毒操作者的手、衣著消毒實(shí)驗(yàn)用具滅菌實(shí)驗(yàn)操作過程2.消毒與滅菌?酒精燈旁操作超凈工作臺(tái)關(guān)鍵是防止外來雜菌的污染二、無菌技術(shù)8精選課件1.無菌范圍：實(shí)驗(yàn)操作空間消毒操作者的手、衣著消毒實(shí)驗(yàn)用具滅耐高溫需保持干燥的物品，160～170℃1～2小時(shí)接種環(huán)、接種針等金屬用具70~75℃、30min80℃、15min100℃、5~6min消毒滅菌定義方法較為溫和理化方法，殺死部分有害菌體（不包括芽孢、孢子）強(qiáng)烈的理化方法，殺死所有微生物（包括芽孢、孢子）煮沸消毒法巴氏消毒法化學(xué)藥劑紫外線灼燒滅菌干熱滅菌酒精、氯氣、石炭酸等高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)基，100KPa、121℃、15～30min關(guān)鍵是防止外來雜菌的污染2.消毒與滅菌：二、無菌技術(shù)9精選課件耐高溫需保持干燥的物品，160～170℃四、大腸桿菌的純化培養(yǎng)分散成單個(gè)細(xì)胞,形成單個(gè)菌落3.功能：單個(gè)或少數(shù)菌體2.特征：大小、形狀、光澤度、顏色、透明度等。鑒定菌種的重要依據(jù)固體培養(yǎng)基上大量繁殖子細(xì)胞群體(菌落)1.定義：10精選課件四、大腸桿菌的純化培養(yǎng)分散成單個(gè)細(xì)胞,形成單個(gè)菌落3.功能：㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1.計(jì)算：培養(yǎng)基用量依配方計(jì)算各成分的用量2.稱量：3.溶化：牛肉膏黏稠，用稱量紙稱取牛肉膏、蛋白胨易吸潮，要快、加蓋牛肉膏、稱量紙、少量水加熱溶解→取紙→蛋白胨、NaCl→瓊脂→補(bǔ)水定容4.調(diào)pH、分裝、封口：5.滅菌：6.倒平板：培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿11精選課件㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1.計(jì)算：培養(yǎng)基用量依配方計(jì)算各倒平板約50℃倒置：防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基倒置12精選課件倒平板約50℃倒置：防止皿蓋上的水珠灼燒滅菌，倒置12精選課1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。思考討論（課P17）13精選課件1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。14精選課件4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的學(xué)生看課P18平板劃線法的操作在給學(xué)生看平板劃線法的視頻15精選課件學(xué)生看課P18平板劃線法的操作在給學(xué)生看平板劃線法的視頻15㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基㈡純化大腸桿菌：接種方法⑴:平板劃線法：菌種劃3個(gè)平板1個(gè)不劃線1.接種：接種環(huán)防止劃破培養(yǎng)基？（重復(fù)實(shí)驗(yàn)）（空白對(duì)照）四、大腸桿菌的純化培養(yǎng)16精選課件㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基㈡純化大腸桿菌：接種方法⑴:平板17精選課件17精選課件18精選課件18精選課件平板劃線時(shí)不能劃破培養(yǎng)基，為什么？一旦劃破，會(huì)造成劃線不均勻，難以達(dá)到分離單菌落的目的；二是存留在劃破處的單個(gè)細(xì)胞無法形成規(guī)矩的菌落，菌落會(huì)沿著劃破處生長，會(huì)形成一個(gè)條狀的菌落。19精選課件平板劃線時(shí)不能劃破培養(yǎng)基，為什么？19精選課件問題討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次殘留的菌種，保證使下一次劃線時(shí)，菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。操作的第一步灼燒接種環(huán)：每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)：在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)：20精選課件問題討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種第一次灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束灼燒目的避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線結(jié)束后殘留在接種環(huán)上的菌種，使每次劃線的菌種均來自上次劃線末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者②灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。③劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。問題討論21精選課件第一次灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束灼燒目的避免接種環(huán)上殺死上問題討論2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。22精選課件問題討論2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？6支試管，分別加入9ml無菌水1ml1011ml1021ml1031ml1041ml1051ml106接種方法

⑵:稀釋涂布平板法：a.梯度稀釋菌液：菌液微量移液器23精選課件6支試管，分別加入9ml無菌水1ml1011ml1021ml24精選課件24精選課件⑵稀釋涂布平板法：a.梯度稀釋菌液：b.涂布平板：不超過0.1ml1個(gè)不涂布作空白對(duì)照滴灼冷涂稀釋103倍稀釋104倍稀釋105倍各梯度分別涂布3個(gè)平板(重復(fù)組，取平均值)25精選課件⑵稀釋涂布平板法：a.梯度稀釋菌液：b.涂布平板：不超過0.平板劃線法⑵稀釋涂布平板法：26精選課件平板劃線法⑵稀釋涂布平板法：26精選課件問題討論涂布平板的所有操作都應(yīng)該在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作？答：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”，例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適，吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍，等等27精選課件問題討論涂布平板的所有操作都應(yīng)該在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線⑴平板劃線法：㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基㈡純化大腸桿菌：1.接種：⑵稀釋涂布平板法：2.培養(yǎng)：將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基放入37℃恒溫箱中培養(yǎng)12h～24h后，觀察并記錄四、大腸桿菌的純化培養(yǎng)接種方法28精選課件⑴平板劃線法：㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基㈡純化大腸桿菌：1下面對(duì)發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是()A.防止雜菌污染

B.消滅雜菌

C.培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌

D.滅菌必須在接種前B滅菌的目的是防止雜菌污染，但實(shí)際操作中不可能只消滅雜菌，而是消滅全部微生物。滅菌必須在接種前，如果接種后再滅菌就會(huì)把所接菌種也殺死。滅菌的目的發(fā)酵所用的微生物是滅菌后專門接種的29精選課件下面對(duì)發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是()B滅菌的目的是五、課題成果評(píng)價(jià)

培養(yǎng)12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同，及時(shí)觀察記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn)。（一）培養(yǎng)基的制作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2d后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。（二）接種操作是否符合無菌要求如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn)，則說明接種操作是符合要求的；如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未達(dá)到要求，需要分析原因，再次練習(xí)。（三）是否進(jìn)行了及時(shí)細(xì)致的觀察與記錄30精選課件五、課題成果評(píng)價(jià)培養(yǎng)12h與24h后的大腸桿菌菌落的大1.臨時(shí)保藏：試管固體斜面培養(yǎng)基上4℃2.長期保存：菌種易被污染、變異甘油管藏1ml甘油＋1ml菌液－20℃六、課題延伸（菌種的保藏）31精選課件1.臨時(shí)保藏：試管固體斜面培養(yǎng)基上4℃2.長期保存：菌種易被本課題知識(shí)小結(jié)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)培養(yǎng)基無菌技術(shù)制備牛肉蛋白胨固體培養(yǎng)基純化大腸桿菌結(jié)果分析與評(píng)價(jià)培養(yǎng)基的類型培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)避免雜菌污染的方法實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法平板劃線法稀釋涂布法（步驟）32精選課件本課題知識(shí)小結(jié)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)培養(yǎng)基無菌技術(shù)制備牛肉蛋白胨編號(hào)成分含量①粉狀硫10g②（NH4）2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100ml例3．右表是某微生物培養(yǎng)基成分，請(qǐng)據(jù)此回答：（1）表中營養(yǎng)成分共有

類。（2）右表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類型是

。自養(yǎng)型微生物

3

33精選課件編號(hào)成分含量①粉狀硫10g②（NH4）2SO40.4g③K2（3）若除去成分②

（NH4)2SO4，加（CH2O），該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)

。（5）不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝前，要進(jìn)行是

。（6）右表中各成分重量確定的原則是

。（7）若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定，應(yīng)該增加的成分是

。固氮微生物

調(diào)整pH

依微生物的生長需要確定

瓊脂（或凝固劑）

34精選課件（3）若除去成分②（NH4)2SO4固氮微生物調(diào)整pH課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)35精選課件課題235精選課件一、課題背景1、尿素的利用尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥。尿素不能直接被農(nóng)作物吸收。土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后才能被植物利用。2、細(xì)菌利用尿素的原因土壤中的細(xì)菌分解尿素是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕窩O(NH2)2脲酶+CO22NH3+H2O36精選課件一、課題背景1、尿素的利用尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥。尿素是培養(yǎng)基中的唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源，才能生長。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。5、該培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。37精選課件尿素是培養(yǎng)基中的唯一氮源，5、該培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的1、顯微鏡直接計(jì)數(shù)：利用血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量。㈡.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目：不能區(qū)分死菌與活菌；不適于對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)；需要相對(duì)高的細(xì)菌濃度；個(gè)體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察；缺點(diǎn)38精選課件1、顯微鏡直接計(jì)數(shù)：利用血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積里2.間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）⑴原理：在稀釋度足夠高時(shí)，微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的一個(gè)菌落是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成的，即一個(gè)菌落代表原先的一個(gè)單細(xì)胞。⑵常用方法：稀釋涂布平板法。每克樣品中的菌落數(shù)＝(C÷V)×M其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(ml)，M代表稀釋倍數(shù)。39精選課件2.間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）每克樣品中的菌落數(shù)＝(C÷V)×注意事項(xiàng)①為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30——300的平板上進(jìn)行計(jì)數(shù)。②為使結(jié)果接近真實(shí)值可將同一稀釋度加到三個(gè)或三個(gè)以上的平皿中，經(jīng)涂布，培養(yǎng)計(jì)算出菌落平均數(shù)。(即設(shè)置重復(fù)組求平均數(shù))③統(tǒng)計(jì)的菌落往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。40精選課件注意事項(xiàng)40精選課件（一）土壤取樣（二）制備培養(yǎng)基（三）土壤樣品的稀釋（四）取樣涂布（五）微生物的培養(yǎng)與觀察（八）鑒定（七）細(xì)菌的計(jì)數(shù)二.實(shí)驗(yàn)的操作流程

選擇培養(yǎng)基（尿素培養(yǎng)基）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(作對(duì)照)41精選課件（一）土壤取樣（二）制備培養(yǎng)基（三）土壤樣品的稀釋（四）取樣（六）鑒定：篩選后必鑒定鑒別培養(yǎng)基：加入某種指示劑或化學(xué)藥品，不影響微生物的生存1、酚紅培養(yǎng)基：鑒定分解尿素的細(xì)菌。原理：脲酶催化尿素分解成氨→培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)→酚紅變紅→脲酶陽性2、伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基：鑒定大腸桿菌原理：代謝產(chǎn)物與伊紅—美藍(lán)結(jié)合→菌落呈黑色并帶有金屬光澤。CO(NH2)脲酶+CO2NH3+H2O屬鑒別培養(yǎng)基，它并沒有促進(jìn)大腸桿菌的生長和抑制其他微生物的生長42精選課件（六）鑒定：篩選后必鑒定CO(NH2)脲酶+CO操作實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用選擇培養(yǎng)基接種選擇培養(yǎng)基不接種選擇培養(yǎng)基接種牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基接種需將未接種的選擇培養(yǎng)基同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)需設(shè)立牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行接種后培養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上菌落數(shù)目、進(jìn)行對(duì)比得出結(jié)金版P21實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原則(1)設(shè)立重復(fù)組：統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)時(shí)，要至少涂布三個(gè)平板作重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的說服力與準(zhǔn)確性。(2)設(shè)立兩種對(duì)照組：43精選課件操作實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染判斷選擇培養(yǎng)基是否欄目鏈接四.結(jié)果分析與評(píng)價(jià)2244精選課件欄目鏈接四.結(jié)果分析與評(píng)價(jià)2244精選課件分解纖維素的微生物的分離分解纖維素的微生物的分離2.纖維素酶纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶(外切酶)、CX酶(內(nèi)切酶)和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纖維素3.纖維素的分解：土壤中某些微生物(真菌、放線菌及細(xì)菌)能夠產(chǎn)生纖維素酶,把纖維素分解為葡萄糖，后再利用。2.纖維素酶纖維二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纖維素3.(三)、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基挑選菌落什么樣的環(huán)境取樣?①培養(yǎng)的目的?②選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)?挑選什么樣的菌落?①鑒別培養(yǎng)基的特點(diǎn)?②如何鑒別?根據(jù)：微生物對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)環(huán)境中去找；目的：增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物；剛果紅染色法47精選課件(三)、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)【資料三】剛果紅染色法方法一：先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)方法二：在倒平板時(shí)就加入剛果紅漂洗作用,氯化鈉可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去,