2024屆湖北省孝感市重點(diǎn)高中協(xié)作體高三下學(xué)期聯(lián)考生物試題含解析

2024屆湖北省孝感市重點(diǎn)高中協(xié)作體高三下學(xué)期聯(lián)考生物試題注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型（B）填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2．作答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目選項(xiàng)的答案信息點(diǎn)涂黑；如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3．非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答，答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上；如需改動，先劃掉原來的答案，然后再寫上新答案；不準(zhǔn)使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4．考生必須保證答題卡的整潔?？荚嚱Y(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列有關(guān)遺傳與育種的敘述，正確的是（）A．基因工程的原理是基因重組，通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以培育出新物種B．常規(guī)育種都需要通過雜交、選擇、純合化等過程C．花藥離體培養(yǎng)法需要用適宜的激素處理才能獲得單倍體幼苗D．秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗能使染色體組加倍，一定能得到純合子2．生態(tài)農(nóng)業(yè)是能獲得較高的經(jīng)濟(jì)、生態(tài)和社會效益的現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)。下列關(guān)于生態(tài)農(nóng)業(yè)的敘述不正確的是（）A．該生態(tài)系統(tǒng)中食物鏈和營養(yǎng)級越多越好B．比傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性強(qiáng)C．設(shè)計(jì)的主要原理是能量的多級利用和物質(zhì)循環(huán)再生D．屬于人工生態(tài)系統(tǒng)，對病蟲害一般采用生物防治3．某昆蟲病毒是種雙鏈DNA病毒，研究人員為探究該病毒的K基因?qū)基因遺傳信息傳遞過程的影響，以缺失K基因的病毒感染昆蟲細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組，以野生型病毒感染昆蟲細(xì)胞作為對照組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．病毒利用昆山細(xì)胞提供的模板和原料進(jìn)行DNA復(fù)制B．病毒利用自身攜帶的核糖體在昆蟲細(xì)胞中合成蛋白質(zhì)C．若K基因抑制P基因的轉(zhuǎn)錄，則實(shí)驗(yàn)組P基因的mRNA合成速率低于對照組D．若K基因促進(jìn)P基因的翻譯，則實(shí)驗(yàn)組P基因所編碼的蛋白質(zhì)合成速率低于對照組4．下列有關(guān)生物進(jìn)化理論的敘述。錯(cuò)誤的是（）A．與自然選擇學(xué)說相比，現(xiàn)代生物進(jìn)化理論解釋了遺傳和變異的本質(zhì)B．現(xiàn)代生物進(jìn)化理論認(rèn)為生物進(jìn)化以種群為單位、以可遺傳變異為基礎(chǔ)C．新物種的形成一般離不開變異、選擇和隔離三個(gè)基本環(huán)節(jié)D．生物變異和進(jìn)化的不定向性，導(dǎo)致生物具有多樣性和適應(yīng)性5．關(guān)于酶的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．同一種酶可存在于分化程度不同的活細(xì)胞中B．低溫能降低酶活性的原因是其破壞了酶的空間結(jié)構(gòu)C．酶通過降低化學(xué)反應(yīng)的活化能來提高化學(xué)反應(yīng)速度D．酶既可以作為催化劑，也可以作為另一個(gè)化學(xué)反應(yīng)的底物6．如圖，甲表示某環(huán)境的條件變化情況，乙、丙表示該環(huán)境中兩種動物的種群數(shù)量變化曲線，下列有關(guān)敘述正確的是（）A．乙、丙兩種動物的種間關(guān)系最可能是競爭B．環(huán)境條件的改變對種群的K值影響不大C．t3之后，乙種群數(shù)量將呈“J”型増長D．t1～t2之間，乙、丙種群數(shù)量相對穩(wěn)定，有賴于正反饋調(diào)節(jié)機(jī)制7．各種育種方式，為人類的生產(chǎn)實(shí)踐提供了豐富的材料，下列關(guān)于育種的敘述，正確的是（）A．黑農(nóng)5號大豆和轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的育種原理分別是染色體變異和基因重組B．三倍體無籽西瓜有機(jī)物含量高且高度不育，但仍屬可遺傳變異C．利用誘變育種，誘發(fā)家蠶常染色體基因移到性染色體上，其原理是基因突變D．單倍體育種可通過對花藥離體培養(yǎng)獲得的單倍體種子進(jìn)行秋水仙素處理以獲得穩(wěn)定遺傳的后代8．（10分）利用四組直立生長的幼苗，均給右側(cè)單側(cè)光進(jìn)行向光性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下圖所示。由此可證明的是（）A．單側(cè)光能引起生長素分布不均勻B．單側(cè)光使幼苗背光側(cè)細(xì)胞伸長得快C．苗尖端有感受單側(cè)光刺激的作用D．苗尖端能產(chǎn)生化學(xué)物質(zhì)并向下傳遞二、非選擇題9．（10分）膠原蛋白廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、化妝品、化工原料等領(lǐng)域，科研人員開展利用家蠶生產(chǎn)人膠原蛋白的研究。請回答下列問題：（1）家蠶核型多角體病毒(BmNPV)專性寄生于鱗翅目昆蟲，將人膠原蛋白基因與___重組后，構(gòu)建___。體外克隆目的基因的方法是____。（2）BmNPV的pl0基因是極強(qiáng)的啟動子，將目的基因連接在pl0基因的下游，目的是____。目的基因與pl0基因連接時(shí)，斷裂與連接的化學(xué)鍵都是____。（3）重組BmNPV感染家蠶幼蟲后，在幼蟲淋巴液中提取蛋白質(zhì)，用____的方法檢測目的基因是否成功表達(dá)。相比于大腸桿菌，選擇家蠶作為人膠原蛋白的生物反應(yīng)器，其優(yōu)點(diǎn)是_______。10．（14分）基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。（1）將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測序驗(yàn)證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機(jī)會發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時(shí)不用的細(xì)胞進(jìn)行__________保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時(shí)間后對受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時(shí)存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細(xì)胞”或“生殖細(xì)胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。11．（14分）透明質(zhì)酸酶是一種能夠降低體內(nèi)透明質(zhì)酸的活性，從而提高組織中液體滲透能力的酶。如圖是利用重疊延伸PCR技術(shù)獲得新透明質(zhì)酸酶基因的過程，NcoⅠ和XhoⅠ為限制酶。請分析回答下列問題：（1）構(gòu)建透明質(zhì)酸酶基因表達(dá)載體時(shí)，使用的載體往往有特殊的標(biāo)記基因，其作用是__________________；所用的DNA連接酶將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的_________________，對所連接的DNA兩端堿基序列_______（有/沒有）專一性要求。早期用大腸桿菌作為受體細(xì)胞，后來發(fā)現(xiàn)毛霉或酵母菌更具優(yōu)勢，最可能的原因是________________。（2）透明質(zhì)酸酶基因上的一段核苷酸序列為“—ATCTCGAGCGGG—”，則對應(yīng)該段核苷酸序列進(jìn)行剪切的XhoⅠ酶識別的核苷酸序列（6個(gè)核苷酸）為____________________。（3）人體細(xì)胞間質(zhì)有基膜粘連蛋白、多糖（如透明質(zhì)酸）、蛋白多糖等成分。鏈球菌等致病菌在侵染人體時(shí)，可產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶。試分析透明質(zhì)酸酶在鏈球菌侵染過程中的作用是_________________，其意義可能是_____________________。12．為探究NaCl對某植物幼苗光合作用的影響，某研究小組做了如下實(shí)驗(yàn)。（注：檢測期間細(xì)胞的呼吸強(qiáng)度為2μmolCO2/（m2·s））（1）實(shí)驗(yàn)步驟：①選取若干株生長狀況（生理狀態(tài)）等方面相同的該植物幼苗平均分成___組，依次編號。②每天傍晚分別將_________噴灑在各組幼苗的葉片上，次日上午10：00測定凈光合速率。（2）結(jié)果與分析：實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1，經(jīng)分析可以得出結(jié)論：_________________。（3）利用上述實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步測定了對應(yīng)NaC1濃度下的胞間CO2濃度（如圖2）、光合色素含量（如圖3）。當(dāng)NaCl濃度在200～250mmol/L時(shí)凈光合速率顯著下降，自然條件下該植物在夏季晴朗的中午凈光合速率也會出現(xiàn)下降的現(xiàn)象。分析原因，前者主要是由于____________，后者主要是由于_______________。（4）請?jiān)谥付ㄎ恢玫淖鴺?biāo)圖上繪制該實(shí)驗(yàn)中總光合速率隨NaCl濃度變化的曲線________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

幾種?？嫉挠N方法：雜交育種誘變育種單倍體育種多倍體育種方法

（1）雜交→自交→選優(yōu)（2）雜交

輻射誘變、激光誘變、化學(xué)藥劑處理花藥離體培養(yǎng)、秋水仙素誘導(dǎo)加倍

秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗原

理

基因重組基因突變

染色體變異（染色體組先成倍減少，再加倍，得到純種）

染色體變異（染色體組成倍增加）優(yōu)

點(diǎn)不同個(gè)體的優(yōu)良性狀可集中于同一個(gè)體上提高變異頻率，出現(xiàn)新性狀，大幅度改良某些性狀，加速育種進(jìn)程明顯縮短育種年限營養(yǎng)器官增大、提高產(chǎn)量與營養(yǎng)成分缺

點(diǎn)

時(shí)間長，需要及時(shí)發(fā)現(xiàn)優(yōu)良性狀

有利變異少，需要處理大量實(shí)驗(yàn)材料，具有不確定性

技術(shù)復(fù)雜，成本高

技術(shù)復(fù)雜，且需要與雜交育種配合；在動物中難以實(shí)現(xiàn)舉例高桿抗病與矮桿抗病小麥雜產(chǎn)生矮桿抗病品種高產(chǎn)量青霉素菌株的育成抗病植株的育成三倍體西瓜、八倍體小黑麥【詳解】A、基因工程的原理是基因重組，通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以培育出具有優(yōu)良性狀的作物新品種，但仍屬于同一物種，A錯(cuò)誤；B、雜交育種不都要通過雜交、選擇、純合化等手段培養(yǎng)出新品種，如所需優(yōu)良品種為隱性性狀，一旦該性狀出現(xiàn)后選出即可，B錯(cuò)誤；C、花藥離體培養(yǎng)過程中，需要用適宜的植物激素處理才能誘導(dǎo)花藥脫分化、再分化過程，進(jìn)而獲得單倍體幼苗，C正確；D、秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗能使染色體組加倍，不一定能得到純合子，如處理材料為Aa，則AAaa仍為雜合子，D錯(cuò)誤。故選C。2、A【解析】

生態(tài)農(nóng)業(yè)是一個(gè)生態(tài)上自我維持的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)系統(tǒng)，其特點(diǎn)是在保持和改善系統(tǒng)內(nèi)的生態(tài)平衡、不對其周圍環(huán)境造成明顯改變的情況下，求得最大生產(chǎn)力和可持續(xù)發(fā)展?！驹斀狻緼、生態(tài)農(nóng)業(yè)中食物鏈和營養(yǎng)級不是越多越好，且營養(yǎng)級越多消耗的能量越多，A錯(cuò)誤；B、生態(tài)農(nóng)業(yè)比傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)的抵抗力穩(wěn)定性高，B正確；C、生態(tài)農(nóng)業(yè)設(shè)計(jì)的指導(dǎo)原則是能量的多級利用和物質(zhì)的循環(huán)再生，C正確；D、生態(tài)農(nóng)業(yè)屬于人工生態(tài)系統(tǒng)，對病蟲害一般采用生物防治，D正確。故選A。3、D【解析】

病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，需依賴于宿主細(xì)胞生存。基因是一段有功能的核酸，在大多數(shù)生物中是一段DNA，在少數(shù)生物（RNA病毒）中是一段RNA?；虮磉_(dá)是指將來自基因的遺傳信息合成功能性基因產(chǎn)物的過程，基因表達(dá)產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)?；虮磉_(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。轉(zhuǎn)錄過程由RNA聚合酶進(jìn)行，以DNA為模板，產(chǎn)物為RNA。RNA聚合酶沿著一段DNA移動，留下新合成的RNA鏈。翻譯過程是以信使RNA（mRNA）為模板，指導(dǎo)合成蛋白質(zhì)的過程?！驹斀狻緼、病毒進(jìn)行DNA復(fù)制，模板是病毒的DNA，A錯(cuò)誤；B、病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，沒有核糖體，B錯(cuò)誤；C、若K基因抑制P基因的轉(zhuǎn)錄，則實(shí)驗(yàn)組缺失K基因，P基因的mRNA合成速率高于對照組，C錯(cuò)誤；D、若K基因促進(jìn)P基因的翻譯，則實(shí)驗(yàn)組缺失K基因，P基因所編碼的蛋白質(zhì)合成速率低于對照組，D正確。故選D。4、D【解析】

現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的基本觀點(diǎn)：種群是生物進(jìn)化的基本單位，生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)在于種群基因頻率的改變；突變和基因重組產(chǎn)生生物進(jìn)化的原材料；自然選擇使種群的基因頻率發(fā)生定向的改變并決定生物進(jìn)化的方向；隔離是新物種形成的必要條件。【詳解】A、達(dá)爾文的自然選擇學(xué)說是在拉馬克的用進(jìn)廢退和獲得性遺傳的觀點(diǎn)基礎(chǔ)上形成的，但不能科學(xué)地解釋遺傳和變異的本質(zhì)，現(xiàn)代生物進(jìn)化理論能夠解釋遺傳和變異的本質(zhì)，A正確；B、現(xiàn)代生物進(jìn)化理論認(rèn)為種群是生物進(jìn)化的基本單位，可遺傳變異（突變和基因重組）為生物進(jìn)化提供原材料，是進(jìn)化的基礎(chǔ)，B正確；C、突變和基因重組、自然選擇及隔離是物種形成過程的三個(gè)基本環(huán)節(jié)，通過它們的綜合作用，種群產(chǎn)生分化，最終導(dǎo)致新物種形成，C正確；D、變異為進(jìn)化提供基礎(chǔ)，生物的變異是不定向性的，進(jìn)化的方向是定向的，D錯(cuò)誤。故選D?！军c(diǎn)睛】解答此題要求考生識記現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的主要內(nèi)容，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。5、B【解析】

1.同一種酶可存在于分化程度不同的活細(xì)胞中，例如，與呼吸作用有關(guān)的酶。

2.酶既可以作為催化劑，也可以作為另一個(gè)化學(xué)反應(yīng)的底物，例如，唾液淀粉酶在口腔中催化淀粉分解，但是到了胃中就成為胃蛋白酶的底物。

3.低溫能降低酶活性的原因是，低溫使分子運(yùn)動減弱，從而使酶和底物結(jié)合率降低，反應(yīng)速率就降低，表現(xiàn)出酶活性降低，并沒有破壞其結(jié)構(gòu)，當(dāng)溫度回升時(shí)，仍然可以恢復(fù)期活性?！驹斀狻緼、有些酶是生命活動所必須，比如呼吸作用有關(guān)的酶，在分化程度不同的活細(xì)胞中都存在，A正確；

B、導(dǎo)致酶空間結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞變性的因素有：過酸、過堿、高溫等，低溫只能抑制酶的活性，不會破壞結(jié)構(gòu)，B錯(cuò)誤；

C、酶的作用實(shí)質(zhì)即為降低反應(yīng)所需活化能從而提高化學(xué)反應(yīng)速率，C正確；

D、酶是蛋白質(zhì)或者RNA，本身是催化劑，也可作為底物被蛋白酶或者RNA酶降解，D正確。

故選B?！军c(diǎn)睛】易錯(cuò)點(diǎn)：酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的、具有催化作用的有機(jī)物；每種酶都有其最適宜的溫度，低溫使酶的活性降低，溫度過高會使酶的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變進(jìn)而使酶失去活性。6、A【解析】

由題圖可知，種群乙和丙為競爭關(guān)系，t0~t1兩種群數(shù)量都增長，此時(shí)競爭最弱，t1~t2兩種群競爭力相當(dāng)，相互抑制，t3~t4乙種群在競爭中處于優(yōu)勢，越來越多，丙種群處于劣勢，最終被淘汰。【詳解】A、由題圖可知，種群乙和丙是你死我活的關(guān)系，為競爭關(guān)系，A正確；B、種群的K值并非一成不變的，天敵的加入會降低種群的K值，而建立自然保護(hù)區(qū)、改善環(huán)境會提高K值，B錯(cuò)誤；C、由于存在環(huán)境阻力，t3后乙種群數(shù)量以S型曲線增長，C錯(cuò)誤；D、t1~t2乙、丙種群數(shù)量相對穩(wěn)定，是負(fù)反饋調(diào)節(jié)的結(jié)果，D錯(cuò)誤。故選A。7、B【解析】

四種育種方法的比較如下表：雜交育種誘變育種單倍體育種多倍體育種方法雜交→自交→選優(yōu)輻射誘變、激光誘變、化學(xué)藥劑處理花藥離體培養(yǎng)、秋水仙素誘導(dǎo)加倍秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗原理基因重組基因突變?nèi)旧w變異（染色體組先成倍減少，再加倍，得到純種）染色體變異（染色體組成倍增加）【詳解】A、黑農(nóng)5號大豆是誘變育種的結(jié)果，其育種原理為基因突變；轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是基因工程育種的結(jié)果，其育種原理是基因重組，A錯(cuò)誤；

B、三倍體無籽西瓜有機(jī)物含量高且高度不育，其原理是染色體數(shù)目變異，所以仍屬可遺傳變異，B正確；

C、利用誘變育種，誘發(fā)家蠶常染色體基因移到性染色體上，其原理是染色體結(jié)構(gòu)變異，C錯(cuò)誤；

D、由于單倍體高度不育，不能結(jié)種子，所以單倍體育種可通過對花藥離體培養(yǎng)獲得的單倍體幼苗進(jìn)行秋水仙素處理以獲得穩(wěn)定遺傳的后代，D錯(cuò)誤。

故選B?！军c(diǎn)睛】本題考查育種的相關(guān)知識，要求考生識記幾種育種方法的原理、方法、優(yōu)點(diǎn)、缺點(diǎn)及實(shí)例，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。8、C【解析】

題圖分析，兩組實(shí)驗(yàn)的自變量是尖端是否感光和是否含有尖端，故綜合分析實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是尖端是感受光刺激的部位，在單側(cè)光的照射下，幼苗發(fā)生了向光彎曲生長?！驹斀狻緼、該實(shí)驗(yàn)不能證明單側(cè)光能引起生長素分布不均勻，A錯(cuò)誤；B、該實(shí)驗(yàn)不能證明單側(cè)光使幼苗背光側(cè)細(xì)胞伸長得快，B錯(cuò)誤；C、該實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蜃C明苗尖端有感受單側(cè)光刺激的作用，C正確；D、該實(shí)驗(yàn)不能證明苗尖端能產(chǎn)生化學(xué)物質(zhì)并向下傳遞，D錯(cuò)誤。故選C。二、非選擇題9、BmNPV基因基因表達(dá)載體PCR技術(shù)使目的基因在pl0基因的驅(qū)動下高效表達(dá)磷酸二酯鍵抗原抗體雜交家蠶細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體會對人膠原蛋白進(jìn)行加工使表達(dá)的膠原蛋白與人的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)和功能相似【解析】

基因工程的基本步驟：1、提取目的基因；2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建（即目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，是實(shí)施基因工程的第二步，也是基因工程的核心）；3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；4、目的基因的檢測和表達(dá)。【詳解】（1）因?yàn)锽mNPV專性寄生于鱗翅目昆蟲，故將目的基因與BmNPV基因重組，構(gòu)建基因表達(dá)載體，更有利于將目的基因?qū)爰倚Q細(xì)胞。PCR是指在體外復(fù)制特定DNA片段，可在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。（2）啟動子位于基因的首端，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。將目的基因與運(yùn)載體連接時(shí)，限制酶和DNA連接酶作用的都是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二脂鍵。（3）檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，可用抗原抗體雜交的方法。大腸桿菌為原核細(xì)胞，家蠶為真核生物，家蠶細(xì)胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體會對人膠原蛋白進(jìn)行加工，與人體內(nèi)表達(dá)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能更相似?！军c(diǎn)睛】本題在掌握基因工程基本步驟的基礎(chǔ)上，結(jié)合具體實(shí)例解題。10、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細(xì)胞【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）分析題圖可知，將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測序驗(yàn)證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動物細(xì)胞（或克?。┡囵B(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時(shí)不用的細(xì)胞進(jìn)行液氮（或冷凍）保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情）的母鼠體內(nèi)，一段時(shí)間后對受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時(shí)存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的生殖細(xì)胞恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的原理及技術(shù)以及胚胎工程的有關(guān)知識，重點(diǎn)考查基因工程的操作步驟，要求考生識記基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，識記胚胎工程的操作過程，屬于考綱識記層次的考查。11、供重組DNA的鑒定和選擇（或鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來）磷酸二酯鍵沒有（毛霉、酵母菌）是真核細(xì)胞，有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，能夠?qū)δ康幕虻谋磉_(dá)產(chǎn)物進(jìn)行加工-CTCGAG-或-GAGCTC-分解宿主細(xì)胞間質(zhì)的主要成分（或分解宿主細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸）破壞宿主的防御系統(tǒng)，利于致病菌入侵（或?yàn)榧?xì)菌提供能源物質(zhì)）【解析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。分析圖解可知，圖中目的基因的中間存在NcoⅠ限制酶的切割位點(diǎn)，因此進(jìn)行重疊延伸PCR是為了防止限制酶NcoI破壞目的基因?！驹斀狻浚?）構(gòu)建透明質(zhì)酸酶基因表達(dá)載體時(shí)，使用的載體往往有特殊的標(biāo)記基因，標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來；所用的DNA連接酶將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，對所連接的DNA兩端堿基序列沒有專一性要求。早期用大腸桿菌作為受體細(xì)胞，后來發(fā)現(xiàn)毛霉或酵母菌更具優(yōu)勢，因?yàn)槊购徒湍妇鸀檎婧松铮袑δ康幕虮磉_(dá)產(chǎn)物進(jìn)行加工的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，產(chǎn)生的透明質(zhì)酸酶是具有生物活性的。（2）XhoI限制酶識別的序列及位點(diǎn)是5，-CTCGAG-3，中的C、T位點(diǎn)，透明質(zhì)酸酶基因上的一段核苷酸序列為“—ATCTCGAGCGGG—”，則對應(yīng)該段核苷酸序列進(jìn)行剪切的XhoⅠ酶識別的核苷酸序列（6個(gè)核苷酸）為-CTCGAG-或-GAGCTC-。（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)先取出動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織），再剪碎，再用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一段時(shí)間使其分散成單個(gè)細(xì)胞。