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1農(nóng)業(yè)部1485號(hào)公告—4—2010轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品成分TT51-1轉(zhuǎn)化體特異性序列event-specific采用水稻內(nèi)標(biāo)基因GOS和抗蟲(chóng)水稻TT51-1轉(zhuǎn)化體特異性序列引物和探針,對(duì)測(cè)試樣、TT51-1陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照及空白對(duì)照進(jìn)行微滴式數(shù)字PCR擴(kuò)增,根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和空白對(duì)照確定陽(yáng)性和陰性微滴的閾值,分析軟件自動(dòng)計(jì)算測(cè)試樣GOS基因和TT51-1轉(zhuǎn)化體的每微升體系所含拷貝數(shù)2HEX-CGGCAGTGTGGTTGGTTTCTTCGG-AGAGACTGGTGATTTCAGCFAM-CGGCAGTGTGGTTGGTTTCTTCG分析天平(0.0001g)、離心機(jī)、超微量紫外分光光度計(jì)、微滴發(fā)生器、微滴讀取儀、普通P按照表2配制微滴式數(shù)字PCR反應(yīng)體系,本文件用水符合GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方-----微滴式數(shù)字PCR的操作按照《InstructionManual,QX100?DropletManual,QX100?Dropl);根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和空白對(duì)照確定陽(yáng)性微滴和陰性微滴的閾值,分析軟件自動(dòng)計(jì)算測(cè)試樣____
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