HIV實驗室操作規(guī)程

文山市人民醫(yī)院檢驗科HIV抗體檢測初篩實驗室

檢驗科HIV實驗室

操作規(guī)程

文件編號：WSY-JYK-MY3

第A版

編制：楊澤玲

審核：李尚輝

批準(zhǔn)：楊榮征

生效日期：2013年01月01日

文山市人民醫(yī)院檢驗科

目錄

樣品的采集和處理SOP....................................................................................................................1

實驗方法與操作步驟SOP...........................................................................................3

HIV抗體初篩試驗結(jié)果報告SOP...............................................................................6

艾滋病實驗室質(zhì)量管理SOP........................................................................................7

儀器的使用的維修SOP................................................................................................8

保密程序SOP..............................................................................................................10

檢測數(shù)據(jù)的記錄和報告SOP......................................................................................11

實驗室的清潔與消毒SOP..........................................................................................12

實驗室與操作者的安全SOP......................................................................................13

文件號：

文山市人民醫(yī)院檢驗科HIV抗

樣品的采集和處理SOP版號：第一版

體檢測初篩實驗室

第1頁共20頁

樣品的采集和處理SOP

一、目的

本SOP文件規(guī)定了檢測HIV抗體標(biāo)本采集、保存、運(yùn)送和接收時必須遵守的

操作。

二、范圍

檢測HIV抗體標(biāo)本的采集、保存、運(yùn)送和接收。

三、責(zé)任

實驗室工作人員嚴(yán)格按要求執(zhí)行。

四、程序

（一）、樣品的采集

艾滋病檢測最常用的樣品是血液，包括血清、血漿和全血。唾液或尿液有時

也可作為測試樣品。常用樣品的采集方法如下：

1、血清樣品采集：用注射器抽出一定量靜脈血，室溫下自然放置1-2小時,

待血液凝固和血塊收縮后再用3000rpm帶蓋離心15分鐘，將帶蓋樣品管置于生

物安全柜中開蓋取樣進(jìn)行實驗。

2、采樣注意事項：

2.1、采集樣品應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范及試劑盒說明書要求進(jìn)行。

2.2、采集標(biāo)本時應(yīng)注意安全，直接接觸HIV感染者或艾滋病病人血液和體液

的操作應(yīng)戴雙層手套。建議采用真空采血管及蝶形針具，以免直接接觸血液。

（二）、樣品的保存

1、用于抗體檢測的血清或血漿樣品應(yīng)存放于-20℃以下，短期（1周）內(nèi)進(jìn)行

檢測的樣品可存放于2-8℃。

2、陰性樣本在2-8°C保存1周，陽性樣本凍存于-20℃以下永久保存。

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文件號：

文山市人民醫(yī)院檢驗科HIV抗

樣品的采集和處理SOP版號：第一版

體檢測初篩實驗室

第2頁共20頁

（三）、樣品的運(yùn)送

1、院內(nèi)樣品轉(zhuǎn)送要求：樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記，標(biāo)

明樣品的編號或受檢者姓名、種類。隨樣品應(yīng)附有送檢單，送檢單應(yīng)與標(biāo)本分開,

不能混放。

2、將試管放入專用帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理。在試管的周圍

應(yīng)墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。如果路程較遠(yuǎn)或氣候炎熱，應(yīng)在2-8℃條件下

運(yùn)送。用于抗體檢測的樣品可在短期內(nèi)（W48小時）室溫遞送。每一包裝的體

積不得超過50ml。運(yùn)送感染性材料必須有記錄。

3、特殊情況下如需對個別樣品進(jìn)行復(fù)測，可以用特快專遞形式投寄，但必須應(yīng)

采用WHO提出的三級包裝系統(tǒng)將盛樣品的試管包扎好，避免使用玻璃容器，以保

證不會破碎和溢漏。

（四）、樣品的接收

1、含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實驗室內(nèi)由經(jīng)過培訓(xùn)的

工作人員打開，用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。

2、核對標(biāo)本與送檢單，檢查樣品管有無破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存

留的樣品移出、對樣品管和盛器消毒，同時還要報告有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家。

3、檢查樣品的狀況，記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情

況。

4、因特殊臨床治療導(dǎo)致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測試。

5、合格的標(biāo)本接收后編號并進(jìn)行登記被檢測者原始資料。

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文件號：

文山市人民醫(yī)院檢驗科HIV抗體ELISA法（生物梅里埃）檢測

版號：第一版

檢測初篩實驗室HIV1/2抗體及抗原HIV1P24SOP

第3頁共20頁

實驗方法與操作步驟SOP

ELISA法（生物梅里埃）檢測HIV1/2抗體及抗原HIV1P24SOP

一、目的

本SOP文件規(guī)定了ELISA法實驗的程序和相應(yīng)的操作。

二、范圍

HIV1/2抗體及HIV1P24抗原檢測。

三、責(zé)任

實驗室工作人員嚴(yán)格按要求執(zhí)行。

四、程序

本程序適用于檢測人類免疫缺陷病毒HIV1/2抗體及HIV1P24抗原診斷試劑

盒（ELISA法）（生物梅里埃公司）。

1、使用儀器及器具

1.1、微量移液器50uL,lOOuL

1.2、刻度離心管15mL

1.3、前處理加樣儀器Neon150

1.4、恒溫水浴箱上海醫(yī)療器械七廠

1.5、酶標(biāo)儀KHBWellscanK3

1.6,洗板機(jī)KaytoRT-3100

2、試劑盒組成：微量酶標(biāo)板陰性對照HIV-1抗體陽性對照HIV-2抗體陽性

對照HIV-1抗原陽性對照標(biāo)本稀釋液濃縮磷酸鹽緩沖液TMB溶液尿過

氧化物溶液封圈和封條酶標(biāo)板封膜標(biāo)簽表說明書

3、測定操作

初篩試驗：以第四代ELISA（雙抗原夾心法）為例。

3.1、實驗準(zhǔn)備：試驗開始前將試劑和樣品放置在室溫（18~23℃）,按實驗室SOP

做好試劑準(zhǔn)備。

磷酸鹽緩沖液：若液體內(nèi)有結(jié)晶，應(yīng)放置在37℃直至溶解，用蒸饋水1：25稀釋

濃縮液，4c保存2周。

TMB底物液：使用前配制，TMB液和過氧化肥液等量混勻。

終止液：85ml蒸儲水中加入5ml濃硫酸。

備好試劑盒、待檢樣品和外部對照質(zhì)控血清后，按試劑盒說明書以及質(zhì)控和安全

防護(hù)要求進(jìn)行篩查檢測。

3.2、實驗操作

①裝好所需使用數(shù)目的孔條，每孔均加入100U1樣品稀釋液。設(shè)2個陰性對照

孔，1個HIV-1陽性對照孔，若需要可再設(shè)1個HIV-2陽性對照孔或HIV-1抗原

陽性對照。

②每孔加入50”待檢樣品及對照（對照要后加），未用孔用樣品稀釋液加滿以

溶解結(jié)合物球，以免堵塞洗板機(jī)孔?？烧饟u15S,37±2℃孵育60±5min。

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文件號：

文山市人民醫(yī)院檢驗科H（V抗體ELISA法（生物梅里埃）檢測

版號：第一版

檢測初篩實驗室HIV1/2抗體及抗原HIV1P24SOP

第4頁共20頁

③置洗板機(jī)上洗滌6遍（用洗液將反應(yīng)孔完全加滿，靜置30?60S,共洗滌6遍,

洗完后孔上方及底部不應(yīng)殘存液體，禁止在濾紙上拍干）。

④每孔加入100u1底物液，勿攪動，室溫避光孵育30±2mino

⑤每孔加入100u1終止液終止反應(yīng)，充分混勻。

⑥在2h內(nèi)置于酶標(biāo)儀讀數(shù)，雙波長450/630nm測OD值。

3.3、實驗結(jié)果

①陰性對照（NC）,HIV-1陽性對照（PCI）,HIV-2陽性對照（PC2）

NC必須V0.25方可用，排除NC20.25的值，計算NC平均值。

NC界限范圍：0.6倍NC均值VNCV1.4倍NC均值。

②符合以下條件的實驗成立：

兩個以上的NC可用。

PC1-NC均值20.4,PC2-NC均值20.4

③Cutoff值=陰性對照均值+0.100

小于Cutoff為陰性，大于或等于Cutoff為陽性

3.4、報告：對呈陰性反應(yīng)的樣品，可由實施檢測的實驗室出具HIV抗體陰性

報告；對呈陽性反應(yīng)的樣品，須進(jìn)行復(fù)檢，不能出陽性報告。

5.1.3.2復(fù)檢試驗：對初篩呈陽性反應(yīng)的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或

不同廠家的篩查試劑重復(fù)檢測。如兩種試劑復(fù)測均呈陰性反應(yīng)，則報告HIV抗

體陰性；如均呈陽性反應(yīng)，或一陰一陽，需送艾滋病確認(rèn)實驗室進(jìn)行確認(rèn)。

4、完成實驗

4.1、處理廢棄物品“按照傳染病檢測實驗室安全管理作業(yè)指導(dǎo)書”要求進(jìn)行。

4.2、清理消毒工作區(qū)，為下次實驗做好準(zhǔn)備。

5、結(jié)果報告

結(jié)果報告參照HIV抗體初篩試驗結(jié)果報告SOPo

6、質(zhì)控

6.1、所用試劑必須經(jīng)過國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)生產(chǎn)，并通過批批檢，在

有效期內(nèi)。

6.2、每次實驗必須做試劑盒內(nèi)陰性、陽性對照，外部弱陽性對照；

6.3、試劑盒內(nèi)的試劑都是為了產(chǎn)生正確的反應(yīng)而組合起來的，請務(wù)必注意將生

產(chǎn)批號不同的試劑混合在一起使用；

6.4、所有實驗用具定期檢查校正，并有記錄；

6.5、實驗用具如有維修，必須有維修記錄。

7、復(fù)查和修訂

每年復(fù)查、修訂一次。

8、參考文件

人類免疫缺陷病毒抗體ELISA法（生物梅里埃）診斷試劑盒說明書。

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文件號：

文山市人民醫(yī)院檢驗科HIV抗膠體硒法檢測HIV1+2型抗體

版號：第一版

體檢測初篩實驗室SOP

第5頁共20頁

膠體硒法檢測HIV1+2型抗體SOP

一、目的

本SOP文件規(guī)定了膠體硒法檢測HIV1+2型抗體實驗的程序和相應(yīng)的操作。

二、范圍

HIV1/2抗體檢測。

三、責(zé)任

實驗室工作人員嚴(yán)格按要求執(zhí)行。

四、程序

本程序適用于檢測人類免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗體診斷試劑盒（膠體

硒法）。

1、使用器具

微量加樣器50uL（0.050mL）

2、試劑組成

雅培DETERMINEHIV-1/2血清/血漿分析試劑盒（ListNo.7D23-18）100個測試。

3、測定操作

3.1、每10條一組的樣品反應(yīng)條可折斷并撕開單獨使用，注意：分開使用時必

須從右邊開始，左邊有試劑批號和效期；

3.2、據(jù)樣本數(shù)量編號并去掉每個測試條的外包裝；

3.3、用微量移液管加50uL血清或血漿于樣品反應(yīng)塹中（箭頭所指處），等最

少15分鐘（最多60分鐘）然后讀取結(jié)果。

3.4、結(jié)果判斷

陽性：病人條帶（標(biāo)有“Patient"）和質(zhì)控線（標(biāo)有“Control”）都呈紅色。

陰性:病人條帶（標(biāo)有“Patient”）無色而質(zhì)控線（標(biāo)有“Control"）都呈紅色。

無效:病人條帶（標(biāo)有“Patient"）和質(zhì)控線（標(biāo)有“Control”）都不顯色。需重

作，如果問題持續(xù)，請同試劑產(chǎn)家聯(lián)系。

4、完成實驗

4.1、處理廢棄物品“按照傳染病檢測實驗室安全管理作業(yè)指導(dǎo)書”要求進(jìn)行。

4.2、清理消毒工作區(qū)，為下次實驗做好準(zhǔn)備。

5、結(jié)果報告

結(jié)果報告參照HIV抗體初篩試驗結(jié)果報告SOPo

6、質(zhì)控

6.1、所用試劑必須經(jīng)過國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)生產(chǎn)，并通過批批檢，在

有效期內(nèi)。

6.2、為確保結(jié)果有效，測試條上有“Control”的質(zhì)控線，當(dāng)分析結(jié)束后質(zhì)控線

沒有變紅，測試結(jié)果無效，必須重測。

6.3、實驗用具定期檢查校正，并有記錄；

6.4、所有實驗用具如有維修，必須有維修記錄。

7、復(fù)查和修訂

每年復(fù)查、修訂一次。

8、參考文件

人類免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗體診斷試劑盒（膠體硒法）說明書。

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文件號：

文山市人民醫(yī)院檢驗科HIV抗

HIV抗體初篩試驗結(jié)果報告SOP版號：第一版

體檢測初篩實驗室

第6頁共20頁

HIV抗體初篩試驗結(jié)果報告SOP

一、目的

本SOP規(guī)定了HIV抗體初篩試驗結(jié)果報告程序。

二、范圍

HIV抗體初篩試驗結(jié)果報告。

三、責(zé)任

實驗室工作人員嚴(yán)格按要求執(zhí)行。

四、程序

1、血液標(biāo)本合格后，用篩查檢測試劑進(jìn)行檢測，如呈陰性反應(yīng)，則做HIV抗體

陰性報告；若篩查反應(yīng)結(jié)果呈陽性反應(yīng)的標(biāo)本，須進(jìn)行重復(fù)檢測（復(fù)檢）。

2、重復(fù)檢測

對篩查呈陽性反應(yīng)的標(biāo)本用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的試

劑重復(fù)檢測。如兩種試劑復(fù)測均呈陰性反應(yīng)，則報告HIV抗體陰性；如均呈陽性

反應(yīng)，或一陰一陽，需送艾滋病確認(rèn)實驗室進(jìn)行確認(rèn)。應(yīng)盡可能將重新采集的受

檢者血液標(biāo)本和原有標(biāo)本一并送檢。

3、篩查試驗的流程圖

4、所有結(jié)果必須核對，并填寫記錄；

5、核對填寫報告單，陰性者填寫“陰性報告”，初篩陽性者報告“HIV抗體待復(fù)查,

請到云南省艾滋病檢測中心做確認(rèn)實驗”，并登記記錄。

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文件號：

文山市人民醫(yī)院檢驗科HIV抗

艾滋病實驗室質(zhì)量管理SOP版號：第一版

體檢測初篩實驗室

第7頁共20頁

艾滋病實驗室質(zhì)量管理SOP

一、目的

本SOP文件規(guī)定了在HIV抗體檢測過程中必須遵守的實驗質(zhì)量管理操作。

二、范圍

艾滋病實驗室質(zhì)量管理，包括質(zhì)量保證、質(zhì)量控制和質(zhì)量評價。

三、責(zé)任

行政部門和領(lǐng)導(dǎo)要給予行政支持，實驗室工作人員嚴(yán)格按要求執(zhí)行。

四、程序

1、質(zhì)量保證（QA）

1.1行政支持

行政部門和領(lǐng)導(dǎo)要關(guān)心艾滋病實驗室的建設(shè)和發(fā)展，保證實驗室負(fù)責(zé)人員和

技術(shù)人員隊伍的穩(wěn)定，保證實驗室建筑和設(shè)備需要，給予充足的經(jīng)費(fèi)支持，并進(jìn)

行經(jīng)常性監(jiān)督檢查。

1.2實驗室規(guī)范化建設(shè)

艾滋病實驗室的設(shè)置及其建筑、設(shè)施、設(shè)備必須符合《全國艾滋病檢測工作

規(guī)范》的要求。

1.3人員培訓(xùn)及其評價

實驗室工作人員上崗前必須接受技術(shù)培訓(xùn)并獲得合格證書。在工作中要定期

或不定期接受復(fù)訓(xùn)。實驗室主管領(lǐng)導(dǎo)應(yīng)定期對工作人員進(jìn)行評價，包括工作的準(zhǔn)

確性、效率、執(zhí)行安全條例和規(guī)章制度情況、職業(yè)道德、出勤率以及上崗資格等。

1.4標(biāo)本采集、運(yùn)送和處理

嚴(yán)格遵守第一章樣品的采集和處理SOPo

1.5檢測方法和試劑的選擇

使用經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)生產(chǎn)，通過批批檢，在有效期內(nèi)的

試劑。特別推薦使用可靠的檢測方法和敏感性高、特異性好的試劑，并定期

進(jìn)行質(zhì)量評價。

1.6設(shè)備維護(hù)與校準(zhǔn)

設(shè)立常用儀器的維護(hù)及校準(zhǔn)制度，以保證正常運(yùn)轉(zhuǎn)。

2、質(zhì)量控制（QC）

在每次實驗中必須包含有內(nèi)部對照質(zhì)控血清和外部對照質(zhì)控血清，內(nèi)部

對照質(zhì)控血清指試劑盒內(nèi)提供的陽性和陰性對照血清，外部對照質(zhì)控血清為

2-4倍cutoff值的弱陽性質(zhì)控品，內(nèi)部對照是質(zhì)量控制的基礎(chǔ)，而外部對照質(zhì)

控血清檢測實驗的重復(fù)性和精密度。內(nèi)部對照只能在同批號的試劑盒中使用。

3、質(zhì)量評價（EQA）

室間質(zhì)量評價是檢驗實驗室對未知樣品獲得正確結(jié)果的能力。本實驗室

參加每年一次的云南省疾控中心艾滋病實驗室對本省的艾滋病篩查實驗室進(jìn)

行室間質(zhì)量評價。

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文件號：

文山市人民醫(yī)院檢驗科HIV抗

儀器的使用和維修SOP版號：第一版

體檢測初篩實驗室

第8頁共20頁

儀器的使用和維修SOP

一、目的

為了實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，必須設(shè)立常用儀器的維護(hù)及校準(zhǔn)制度，以保證實驗

室的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。

二、范圍

實驗室內(nèi)酶標(biāo)讀數(shù)儀、洗板機(jī)、移液器、冰箱和孵育箱等。

三、責(zé)任

實驗室工作人員嚴(yán)格按要求執(zhí)行。

四、程序

1、酶標(biāo)讀數(shù)儀、洗板機(jī)

1.1、每天：核對濾光片波長，檢查洗板機(jī)管道是否通暢，是否有漏液現(xiàn)象。

1.2、每周：清潔儀器表面，保護(hù)光學(xué)零件不沾灰塵。

1.3、每月：檢查洗滌時各孔是否與相應(yīng)的沖洗頭對位良好，負(fù)壓是否符合規(guī)

定要求。

1.4、每年：檢查、清洗濾光片，如果出現(xiàn)破裂或霉點則要更換。根據(jù)儀器內(nèi)

具有的校準(zhǔn)程序或使用校準(zhǔn)板，對濾光片的精密度進(jìn)行校準(zhǔn)并保留記錄。

實驗過程中發(fā)現(xiàn)異常情況，應(yīng)隨時進(jìn)行處理，可根據(jù)使用情況更換必要的部

件。

2、移液器

2.1、移液器必須1年至少標(biāo)定一次，發(fā)現(xiàn)異常情況應(yīng)隨時進(jìn)行校準(zhǔn)。移液器

的精密度應(yīng)在廠家說明書的范圍內(nèi)。

2.2、本實驗室用蒸儲水稱量法標(biāo)定移液器

在室溫22°C無風(fēng)的工作室中，在萬分之一級別天平上放置一個小三角燒瓶,

用待校準(zhǔn)的移液器吸取存放過夜的蒸儲水加入燒瓶底部，稱重并計算蒸儲水重

量，連續(xù)稱重10次。加蒸儲水的量根據(jù)待校準(zhǔn)移液器的規(guī)格而不同（表2）,10

次校準(zhǔn)稱量均在要求的范圍內(nèi)為合格，貼上合格標(biāo)簽，注明校準(zhǔn)日期，不合格移

液器要請生產(chǎn)廠家進(jìn)行校準(zhǔn)。填寫和保存校準(zhǔn)記錄。

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文件號：

文山市人民醫(yī)院檢驗科HIV抗

儀器的使用和維修SOP版號：第一版

體檢測初篩實驗室

第9頁共20頁

表2

移液器規(guī)格蒸儲水的量要求重量范圍

0.5~10uL2uL1.75~2.25mg

5~40uLlOuL9.8~10.2mg

40~200uL70uL69.4~70.6mg

200~1000uL300uL296.0~302.0mg

l-5mL2000uL1990.0-20lO.Omg

2~10mL3500uL3485.0-3515.0mg

3、冰箱和孵育箱

須每天檢查和記錄低溫、超低溫冰箱及孵育箱的溫度，并做好記錄。

4、定期檢查其它儀器設(shè)備

精密儀器及出具實驗結(jié)果的儀器必須定期校準(zhǔn)，其它儀器定期檢查并做好記錄。

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文件號：

文山市人民醫(yī)院檢驗科HIV抗

保密程序SOP版號：第一版

體檢測初篩實驗室

第10頁共20頁

保密程序SOP

一、目的

本SOP文件規(guī)定檢測HIV抗體前后工作人員必須遵守的保密條例。

二、范圍

與HIV/AIDS相關(guān)檢測項目的所有資料均應(yīng)嚴(yán)格保密。

三、責(zé)任

實驗室工作人員嚴(yán)格按要求執(zhí)行。

四、程序

所有參與檢測的工作人員必須接受相應(yīng)的培訓(xùn)。對于自愿接受檢測的人員，

咨詢員要在檢測前后為他們提供檢測、預(yù)防和治療等咨詢服務(wù)，做好知情咨詢和

檢測服務(wù)的保密工作，不得向無關(guān)人員泄露艾滋病病毒抗體檢測呈陽性人員的任

何個人資料。要建立嚴(yán)格的保密制度并定期檢查。

1、HIV抗體檢測實驗室要有專人負(fù)責(zé)妥善保存各種實驗記錄、感染者檔案，不

得擅自修改和銷毀；嚴(yán)格遵守保密制度，未經(jīng)省級衛(wèi)生行政部門許可，不得向無

關(guān)人員或單位提供任何情況；

2、與HIV/AIDS相關(guān)檢測項目的所有資料均應(yīng)嚴(yán)格保密，包括送檢單與檢測記

錄的保管、報告單的發(fā)放和工作人員年度采血檢測等。

3、艾滋病檢測實驗室所有人員應(yīng)具有高度的保密意識。不可對無關(guān)人員透露檢

測結(jié)果。

4、HIV抗體初篩實驗室（含初篩中心實驗室）檢測的陽性結(jié)果不是最終結(jié)果，

應(yīng)及時作進(jìn)一步確認(rèn)，初篩實驗室不能出具HIV抗體陽性的結(jié)果報告，更不能告

知受檢者本人；

5、HIV抗體確認(rèn)實驗室確認(rèn)的陽性結(jié)果，以機(jī)密級向送檢單位出具陽性報告；

送檢單位接到陽性報告后，應(yīng)報告當(dāng)?shù)匦l(wèi)生防疫和衛(wèi)生行政部門，在對陽性者告

知檢測結(jié)果時要先做好法律、醫(yī)學(xué)、生活等方面的咨詢。

6、所有經(jīng)確認(rèn)的陽性標(biāo)本，包括在實驗室留存的標(biāo)本，應(yīng)送省級HIV抗體確認(rèn)

中心或省級衛(wèi)生行政部門指定的單位保存，不得擅自處理。標(biāo)本保存時間至少5

年。

7、保密制度納入年度考核，發(fā)現(xiàn)問題及時處理并根據(jù)情況修訂保密制度。

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檢測數(shù)據(jù)的記錄和報告SOP版號：第一版

體檢測初篩實驗室

第11頁共20頁

檢測數(shù)據(jù)的記錄和報告SOP

一、目的

本SOP規(guī)定了檢測數(shù)據(jù)的記錄和報告的相關(guān)性條例。

二、范圍

HIV抗體檢測數(shù)據(jù)的記錄和報告。

三、責(zé)任

實驗室工作人員嚴(yán)格按要求執(zhí)行。

四、程序

1、實驗的原始記錄表

應(yīng)按實驗要求，設(shè)計操作的原始記錄表，標(biāo)明陽性對照和待檢樣品的位置，

便于指導(dǎo)實驗人員加樣。要注明試劑盒廠家、測定方法、批號、效期、操作人員

和復(fù)核人員姓名及檢測日期。

2、標(biāo)本的登記

收到標(biāo)本后，及時登記有關(guān)參數(shù)，包括受檢者姓名或代號、試管編號、性別、

年齡、職業(yè)、送檢單位、人群類別、檢測結(jié)果、送檢日期、報告日期、備注（必

要時記錄通信地址）等。

3、HIV陽性標(biāo)本的保存記錄

包括HIV陽性標(biāo)本（血清和血漿）、編號、姓名、貯存量、貯存溫度（-20°C）,

貯存時間以及標(biāo)本保管人姓名。

4、文件存檔

實驗原始記錄表、檢測記錄表、標(biāo)本登記、標(biāo)本保存記錄以及儀器設(shè)備維修

和校準(zhǔn)記錄等都應(yīng)該妥善存檔保存15年以上。最好同時使用計算機(jī)保存各種文

件和記錄。

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實驗室的清潔與消毒SOP版號：第一版

體檢測初篩實驗室

第12頁共20頁

實驗室的清潔與消毒SOP

一、目的

本SOP規(guī)定了實驗室的清潔與消毒方法，防止傳染病的發(fā)生和傳播。

二、范圍

實驗室內(nèi)污染區(qū)和半污染區(qū)。

三、責(zé)任

實驗室工作人員嚴(yán)格按要求執(zhí)行。

四、程序

1、工作前和工作完畢后，要對工作臺面及實驗室內(nèi)進(jìn)行消毒。工作臺面及地面

應(yīng)當(dāng)用1000mg/L次氯酸溶液消毒；工作前用消毒液清洗后要干燥20min以上方

可進(jìn)行實驗。

2、實驗必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，做完實驗后生物安全柜內(nèi)用其紫外燈消毒

60mino實驗室內(nèi)用ZXC-2型紫外線消毒車消毒60mino

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實驗室與操作者的安全SOP版號：第一版

體檢測初篩實驗室

第13頁共20頁

實驗室與操作者的安全SOP

一、目的

本SOP規(guī)定了實驗室與操作者安全的相關(guān)條例。

二、范圍

實驗室管理、個人防護(hù)和安全操作。

三、責(zé)任

實驗室工作人員嚴(yán)格按要求執(zhí)行。

四、程序

1、個人防護(hù)及保健

艾滋病實驗室所用的個人防護(hù)裝備均應(yīng)符合國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。

1.1、防護(hù)服

1.1.1、艾滋病實驗室應(yīng)為每個工作人員配備足夠的防護(hù)服，包括白大衣、

隔離衣或一次性工作服。平時應(yīng)將清潔的防護(hù)服置于實驗室清潔區(qū)內(nèi)專用存放

處。

1.1.2、離開實驗室時，應(yīng)脫去防護(hù)服。每次穿過的污染的防護(hù)服應(yīng)及時

放入污衣袋中，待消毒后方可洗滌或廢棄。

1.1.3、當(dāng)含有艾滋病病毒的液體（樣品或病毒培養(yǎng)液）及有可能賤到工

作人員時，應(yīng)使用防滲透性的（如塑料）圍裙。

1.1.4、當(dāng)發(fā)現(xiàn)防護(hù)服已被污染時，應(yīng)立即更換。

1.2、艾滋病實驗室應(yīng)配備一次性手套、一次性口罩、安全防護(hù)眼鏡及沖洗眼睛

的裝置。

1.3、艾滋病實驗室應(yīng)配備實驗室專用的工作鞋，鞋面覆蓋足背，鞋底防滑。

1.4、個人保健

1.4.1、高標(biāo)準(zhǔn)的個人保健對于減少感染的危險性很重要。皮膚受損、患

病都會增加感染的危險。皮膚的任何傷口和擦傷都應(yīng)以防水敷料覆蓋。

1.4.2、進(jìn)實驗室前要摘除首飾，修剪長的帶刺的指甲，以免刺破手套。

1.4.3、進(jìn)入實驗室應(yīng)穿隔離衣，戴手套。如果接觸物傳染危險性大，則

應(yīng)戴雙層手套和防護(hù)眼鏡。

1.4.4、離開實驗室前必須脫去隔離衣，并洗手。

1.4.5、嚴(yán)禁在艾滋病實驗室內(nèi)進(jìn)食、飲水、吸煙和化妝。

2、實驗室管理要求

2.1、建立安全制度

2.1.1、實驗室的儀器設(shè)備、建筑和設(shè)施的安全性應(yīng)通過全國艾滋病實驗

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體檢測初篩實驗室

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室審評和技術(shù)指導(dǎo)專家組的評審。

2.1.2、根據(jù)本《規(guī)范》制訂本實驗室的安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程

序(S-SOP),該制度或程序應(yīng)適用于現(xiàn)有的實驗條件，并與實驗室其它規(guī)定相一

致。

2.1.3、無論是否發(fā)生意外事故，每年都要對安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操

作程序及其實施情況進(jìn)行檢查和修訂，并有記錄。

2.1.4、制定意外事故處理預(yù)案。建立意外事故的登記和報告制度。

2.1.5、實驗室主任負(fù)責(zé)組織對突發(fā)事件和職業(yè)暴露事故進(jìn)行調(diào)查、登記、

處理和報告。

2.2、人員培訓(xùn)和管理

2.2.1、提供并完成與工作相關(guān)的充足有效的技術(shù)培訓(xùn)。強(qiáng)化全員安全培

訓(xùn)和“普遍性防護(hù)原則”安全意識。所有工作人員必須經(jīng)過艾滋病檢測技術(shù)和省

級以上艾滋病實驗室安全培訓(xùn)，包括上崗培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)，并接受實驗室管理人員的

監(jiān)督。實驗室的安全責(zé)任人要對工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé)，所有工作人員都有責(zé)任

保護(hù)自己和他人的安全。

2.2.2、必須告知新上崗人員實驗室工作的潛在危險，進(jìn)行安全教育，直

至有能力后方可單獨工作。

2.2.3、實驗室主任應(yīng)了解所有工作人員。在安排工作區(qū)域時，要根據(jù)人

員的工作種類和所涉及的生物材料，對實驗室環(huán)境做好安全檢查。

2.2.4、新調(diào)入人員、外來合作、進(jìn)修和學(xué)習(xí)的人員在進(jìn)入實驗室之前必

須經(jīng)過實驗室主任的批準(zhǔn)。非實驗室人員和非實驗室物品不得進(jìn)入實驗室。

2.2.5、嚴(yán)格執(zhí)行實驗室工作人員年度采血檢測艾滋病抗體和備案制度，

工作人員血清應(yīng)長期保留。實驗室工作人員從事工作前必須進(jìn)行艾滋病抗體和乙

肝、丙肝等肝炎病毒標(biāo)記物的檢測；注射乙肝疫苗；每半年至一年進(jìn)行一次艾滋

病抗體檢測，并保留血清樣品。

2.3、對存放試劑和有毒物區(qū)域的監(jiān)控

2.3.1、冷藏柜、冰箱、培養(yǎng)箱和存放生物試劑、化學(xué)危險品、放射性物

質(zhì)的容器置于工作人員視線之外的地點時應(yīng)上鎖。

2.3.2、應(yīng)設(shè)有專門儲存陽性血清、質(zhì)控品的低溫冰柜和/或血清庫毒種庫,

并應(yīng)上鎖，專人管理。

2.4、建立應(yīng)付突發(fā)事件的措施

2.4.1、在緊急預(yù)案中要包括在緊急事件發(fā)生時通知實驗室主任、設(shè)備管

理員、實驗室工作人員和設(shè)備安全員。

2.4.2實驗室主任和設(shè)備安全員要遵循有關(guān)規(guī)定，報告、調(diào)查和處理突發(fā)

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體檢測初篩實驗室

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事件以及可能發(fā)生的意外職業(yè)暴露。

3、實驗室的安全操作

3.1、在安排工作人員的實驗室區(qū)域時，要根據(jù)其工作的種類和所涉及的生物試

劑，對實驗室環(huán)境做好安全檢查。

3.2、進(jìn)入實驗室應(yīng)穿隔離衣、戴手套，必要時（如對篩查陽性標(biāo)本進(jìn)行復(fù)測或

確認(rèn)時，或直接對艾滋病毒種進(jìn)行操作時）戴防護(hù)眼鏡，以防污染暴露的皮膚和

衣物。不用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。

3.3、如接觸物傳染性危險大，可戴雙層（兩付）手套以增加保護(hù)。操作時手套

破損，應(yīng)立即丟棄、洗手并戴上新手套。

3.4、禁止采用口腔吸液管，必須使用移液器來操作實驗室的所有液體。

3.5、操作中有標(biāo)本、檢測試劑外濺時應(yīng)及時消毒。對大量濺出的濃度高的傳染

物在清潔之前應(yīng)先用10000mg/L次氯酸鈉溶液浸泡，然后戴上手套擦凈。

3.6、工作完畢，要對工作臺面消毒。工作臺面應(yīng)當(dāng)用1000mg/L次氯酸溶液消

毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上；

3.7、工作完畢，脫去手套后洗手，再脫去工作衣，用肥皂和流動水洗手。

3.8、血清及其它體液樣本均應(yīng)嚴(yán)格按要求妥善保存，艾滋病抗體陽性樣本應(yīng)做

好標(biāo)記單獨保存。

4、避免利器的使用

4.1、盡量避免在實驗室使用針頭、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺傷。如果必

須使用，在處理或清洗時應(yīng)采取措施防止刺傷或劃傷，并應(yīng)對用過的物品進(jìn)行消

毒處理。

4.2、盡量使用安全針具采血，如蝶形真空針，自毀性針具等，以降低直接接觸

血液和刺傷的危險性。

4.3、應(yīng)將用過的銳器直接放入耐刺、防滲漏的利器盒，針頭直接放入堅固的容

器內(nèi)，消毒后廢棄。禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。禁止用手直接

接觸使用后的針頭、刀片等銳器。

5、樣品的采集

所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品，均應(yīng)視為有潛在傳染性，

都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。

5.1、應(yīng)像操作未知傳染風(fēng)險樣品一樣，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染

性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。

5.2、采血時一定要注意安全，采血用一次性注射器，謹(jǐn)慎操作，防止發(fā)生刺傷

皮膚和造成外界污染。

5.3、如用濾紙采樣，則手指或耳垂局部消毒嚴(yán)格按常規(guī)進(jìn)行，在刺破皮膚后，

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迅速把濾紙沾上，切勿讓血液滴落在其它物體表面造成污染。采血后要待血樣干

燥后再包裝送檢

5.4、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時形成

氣溶膠。

6、帶入和帶出實驗室的物品

6.1、對所有帶入實驗室的物品都應(yīng)進(jìn)行檢查。含有測試樣品的包裹應(yīng)在安全柜

或送到合適的實驗室方可打開，不能在收發(fā)地點和倉庫等地點打開，應(yīng)有合適的

包裝（見第一章）并有醒目的標(biāo)記。包裹必須在下列情況下才能打開：人員在處

理感染源方面受過訓(xùn)練；具有處理感染源設(shè)備的實驗室；穿戴防護(hù)衣的工作人員；

用后置可消毒的容器中。

6.2、打開標(biāo)本容器時要小心，以防內(nèi)容物潑濺。核對樣品與