實驗六血細(xì)胞計數(shù)及血涂片制作

關(guān)于實驗六血細(xì)胞計數(shù)及血涂片制作血細(xì)胞計數(shù)1．熟悉并清洗計數(shù)板和蓋玻片2．稀釋血液：

血樣采集：兔耳緣靜脈采血血樣抗凝：肝素鈉抗凝血樣稀釋：如下第2頁,共28頁，2024年2月25日，星期天實驗操作

紅細(xì)胞稀釋液：生理鹽水白細(xì)胞稀釋液：冰醋酸(鹽酸)紅細(xì)胞計數(shù)：0.9%NaCl1.99mL+0.01mL血，稀釋200倍白細(xì)胞計數(shù)：1%HCL0.38mL+0.02mL血，稀釋20倍3．充池：（混勻，從中間取）4．靜置計數(shù)板2min5．計數(shù)6．計數(shù)原則：數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右7.計算：紅細(xì)胞數(shù)/L=N*50*106*200=N*1010

白細(xì)胞數(shù)/L=N/4*10*20*106=N*5*107第3頁,共28頁，2024年2月25日，星期天血細(xì)胞計數(shù)計數(shù)板第4頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第5頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第6頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第7頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第8頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第9頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第10頁,共28頁，2024年2月25日，星期天保證計數(shù)板和蓋玻片清潔；以防影響計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。一次完成充池，如充池過少、過多、有氣泡或出現(xiàn)任何碎片，應(yīng)拭凈計數(shù)板及蓋玻片后重新操作。充池后平放計數(shù)板，不能移動蓋玻片。計數(shù)板中細(xì)胞如果嚴(yán)重分布不均，應(yīng)重新充池計數(shù)。凡壓線的細(xì)胞應(yīng)按照數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右的原則，避免漏數(shù)或重復(fù)計數(shù)。注意事項第11頁,共28頁，2024年2月25日，星期天血細(xì)胞的分類與計數(shù)第12頁,共28頁，2024年2月25日，星期天血液涂片的制備1、每份樣本制作3張血涂片。要求所用玻片清潔、干燥、無塵，大小為25mm×75mm，厚度為0.8～1.2mm。并有明確標(biāo)記。如果樣本中白細(xì)胞數(shù)量少時，需要制備更多血涂片（如6張）。2、使用EDTA－K2抗凝血液樣本時，應(yīng)在采集后4小時內(nèi)制備血涂片。在制片前，樣本應(yīng)充分混勻。注意，樣本不能冷藏。3、用楔形技術(shù)制備血涂片。在玻片近一端1/3處，加一滴（約0.05ml）充分混勻的血液，握住另一張較狹窄的、邊緣光滑的推片，以30o～45o角使血滴沿推片迅速散開，快速、平穩(wěn)地推動推片至玻片的另一端。4、在1小時內(nèi)，用染液染色；或在1小時內(nèi)，用無水甲醇（含水量﹤3%）固定后染色。第13頁,共28頁，2024年2月25日，星期天推片技巧

推片傾斜45°±1，推成血膜長度25～35mm，寬度18～20mm，血膜四周留有空隙區(qū)，血膜終尾離玻片終端至少10mm，血膜均勻，薄如蟬翼，尾端形如弧狀，迅速扇（搖）干，血膜具有頭、體、尾不同厚薄區(qū)域。此外，涂片時，還要考慮患者的血液狀態(tài)，如貧血程度、血液粘稠度、WBC或有核細(xì)胞多少等因素，調(diào)整推片技巧。第14頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第15頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第16頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第17頁,共28頁，2024年2月25日，星期天血膜至玻片邊緣約5mm血膜至玻片一端約為總長1/3血涂片頭部，涂片厚血涂片體部的檢查區(qū)域血涂片尾部，涂片太薄第18頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第19頁,共28頁，2024年2月25日，星期天染色步驟取新鮮血液涂片，晾干；加劉A溶液（覆蓋血涂片為宜），染色30s；加劉B溶液于A液上（約為A的2倍），以洗耳球吹出微風(fēng)，使液面產(chǎn)生漣漪，染色30s-1min；水洗，干燥，鏡檢；第20頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第21頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第22頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第23頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第24頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第25頁,共28頁，2024年2月25日，星期天第26頁,共28頁，