免疫組化指標(biāo)意義及分子分型

關(guān)于免疫組化指標(biāo)意義及分子分型腫瘤標(biāo)志物定義：指腫瘤組織或細(xì)胞由于癌基因及其產(chǎn)物異常表達(dá)所產(chǎn)生的抗原和生物活性物質(zhì)。反映癌的發(fā)生、發(fā)展過程中有關(guān)基因或癌基因活化程度可在腫瘤病人的組織、體液和排泄物中檢出。包括：激素、受體、酶和同工酶、癌基因及其產(chǎn)物，單克隆抗體等。第2頁,共31頁，2024年2月25日，星期天性激素受體雌激素受體（estrogenreceptor，ER）為糖蛋白，生物特性不穩(wěn)定，受熱易破壞只能與雌二醇及結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì)結(jié)合受體飽和達(dá)到容量限度后，結(jié)合與離解呈動(dòng)態(tài)平衡激素與受體結(jié)合后，在體內(nèi)發(fā)揮各種激素效應(yīng)第3頁,共31頁，2024年2月25日，星期天染色結(jié)果ER陽性的細(xì)胞的核與胞漿中均可見深的棕黑色顆粒判斷標(biāo)準(zhǔn)：(-):陽性細(xì)胞數(shù)<10%(+):癌細(xì)胞內(nèi)顆粒呈淡黃色，陽性細(xì)胞數(shù)占10%～25%(++):棕色顆粒較深，陽性的細(xì)胞數(shù)占25%～50%(+++):棕色顆粒量多，深棕色，陽性的細(xì)胞數(shù)>50%第4頁,共31頁，2024年2月25日，星期天性激素受體

孕激素受體（prosgesteronereceptor，PR）

PR是E2和ER結(jié)合誘導(dǎo)的產(chǎn)物，其合成必須有雌激素作為啟動(dòng)，缺乏ER時(shí)很少能合成PR，PR的出現(xiàn)顯示ER功能機(jī)制的完整性，大多數(shù)乳腺癌呈激素依賴性第5頁,共31頁，2024年2月25日，星期天正常乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)存在ER、PR。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，ER和PR出現(xiàn)部分和全部缺失。如果細(xì)胞仍保留ER和（或）PR，則該乳腺癌細(xì)胞的生長和增殖仍然受內(nèi)分泌的調(diào)控，稱為激素依賴性乳腺癌如果ER和（或）PR缺失，則該乳腺癌細(xì)胞的生長和增殖不再受內(nèi)分泌的調(diào)控，稱為非激素依賴性乳腺癌第6頁,共31頁，2024年2月25日，星期天基因癌基因與抑癌基因：是細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞分裂和分化的基因族，在特定情況下，可使其激活或失活，從而導(dǎo)致細(xì)胞癌變。第7頁,共31頁，2024年2月25日，星期天C-erBb-2基因又稱neu或HER2定位于17q21，編碼分子質(zhì)量為185kDa(P185)的跨膜蛋白，具有胞內(nèi)酪氨酸酶活性與表皮生長因子受體(EGFR)具有高度同源性，故它又稱人表皮生長因子相關(guān)基因第8頁,共31頁，2024年2月25日，星期天意義：

參與細(xì)胞生長、分化的調(diào)節(jié)。正常情況下處于非激活狀態(tài)，當(dāng)受到體內(nèi)、外某些因素作用而激活時(shí)，具有腫瘤轉(zhuǎn)化活性，通過基因擴(kuò)增和蛋白過度表達(dá)在細(xì)胞信號傳遞系統(tǒng)中起橋梁作用，刺激細(xì)胞增殖、浸潤和轉(zhuǎn)移。在正常乳腺組織中呈低表達(dá)，在乳腺癌組織中表達(dá)率可增高，其表達(dá)與乳腺癌分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期呈正相關(guān)，表達(dá)率越高，預(yù)后可能也就越差。第9頁,共31頁，2024年2月25日，星期天P53抑癌基因有兩種類型：野生型和突變型，野生型能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和促進(jìn)DNA修復(fù)，但其半衰期短，含量低，用免疫組化方法難以檢測突變型P53蛋白因構(gòu)象改變，半衰期長，故臨床測定主要是突變型的P53蛋白。突變型P53基因失去了對細(xì)胞的監(jiān)視功能，不能引起細(xì)胞增殖的停滯和凋亡，使細(xì)胞帶著受損和錯(cuò)配的DNA進(jìn)入S期，結(jié)果細(xì)胞因遺傳不穩(wěn)定而發(fā)生突變和染色體畸形變，最后發(fā)生癌變。第10頁,共31頁，2024年2月25日，星期天意義乳腺癌P53基因的突變率約為14%～40%P53基因突變或P53蛋白的過度表達(dá)與乳腺癌組織分化低、表皮生長因子受體及Ki-67表達(dá)增加、晚期、轉(zhuǎn)移擴(kuò)散、ER、PR含量低有關(guān)P53陽性病例無病生存率和總生存期較短P53基因與淋巴結(jié)關(guān)系不大，但淋巴結(jié)陽性同時(shí)P53陽性者預(yù)后較差第11頁,共31頁，2024年2月25日，星期天

nm23基因由Steeg等在1988年應(yīng)用消減技術(shù)發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，定位于人17號染色體長臂主要分布于細(xì)胞質(zhì)中，胞膜上有少量表達(dá)；其基因產(chǎn)物二磷酸核苷激酶(NDPK)參與多種生物學(xué)活動(dòng)，在細(xì)胞信號傳遞、細(xì)胞分化、維持細(xì)胞的正常骨架等過程中起著重要作用。第12頁,共31頁，2024年2月25日，星期天意義Nm23的表達(dá)與腫瘤大小、病理類型無相關(guān)性淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移者nm23呈高表達(dá)，反之呈低表達(dá)第13頁,共31頁，2024年2月25日，星期天Ki67抗原是與增殖細(xì)胞相關(guān)的核抗原，分布于核內(nèi)，其功能被認(rèn)為與染色質(zhì)相連及與細(xì)胞的有絲分裂有絲分裂密切相關(guān)，與其他細(xì)胞周期相關(guān)的蛋白不同的是它不表達(dá)于DNA修復(fù)狀態(tài)的細(xì)胞。Ki67在G1

后期開始出現(xiàn)，S、G2

期升高，M期達(dá)高峰，其后迅速降解，在G0

期無表達(dá)，半衰期為1小時(shí)或更短。第14頁,共31頁，2024年2月25日，星期天意義乳腺癌中Ki67抗原的陽性率與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著關(guān)系，而Ki67抗原表達(dá)水平與乳腺癌患者生存率的直接關(guān)系國內(nèi)外罕見報(bào)道。Ki67抗原表達(dá)水平與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是與腫瘤細(xì)胞的增殖活性密切相關(guān)的，Ki67抗原是與增殖細(xì)胞相關(guān)的核抗原，故Ki67抗原表達(dá)水平高者易出現(xiàn)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。Ki67蛋白的表達(dá)，可反映腫瘤細(xì)胞活性，與惡性腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預(yù)后高度相關(guān)第15頁,共31頁，2024年2月25日，星期天E-cadherin屬于鈣粘蛋白家族中典型的鈣粘蛋白亞族的一員。分布在所有上皮組織中，是建立與保持上皮細(xì)胞極性和細(xì)胞-細(xì)胞間緊密連接的關(guān)鍵分子。E-cadherin是一分子量約120kD的跨膜糖蛋白，分為細(xì)胞外區(qū)、跨膜區(qū)、胞漿區(qū)。第16頁,共31頁，2024年2月25日，星期天意義E-cadherin的表達(dá)與乳腺癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后均有一定的關(guān)系。乳腺癌起源于乳腺的導(dǎo)管和小葉上皮細(xì)胞，E-cadherin在小葉癌和導(dǎo)管癌中表達(dá)是不同的，大多數(shù)導(dǎo)管癌表達(dá)E-cadherin陽性，而小葉癌E-cadherin表達(dá)很少用免疫組織化學(xué)方法標(biāo)記E–cadherin，用作導(dǎo)管癌和小葉癌的鑒別診斷。第17頁,共31頁，2024年2月25日，星期天表皮生長因子受體（EGFR）又稱C-erBb-1或Her-1能引起細(xì)胞的過度分裂、增殖，最后引起細(xì)胞癌變。第18頁,共31頁，2024年2月25日，星期天意義EGFR陽性率與乳腺癌的組織學(xué)分級呈顯著相關(guān)性，分化差的乳腺癌EGFR陽性率表達(dá)高，分化好的腫瘤細(xì)胞則較低EGFR的高表達(dá)提示有較強(qiáng)的侵襲轉(zhuǎn)移力、生存率降低、預(yù)后差。第19頁,共31頁，2024年2月25日，星期天p63基因是一個(gè)抑癌基因，免疫組化染色主要定位于細(xì)胞核，判斷肌上皮完整性的指標(biāo)p63在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要的作用可為乳腺癌的早期診斷、及時(shí)治療及預(yù)后判斷提供必要的理論依據(jù)。第20頁,共31頁，2024年2月25日，星期天BRCA1(breastcancersusceptibilitygene1)

是遺傳性乳腺癌和卵巢癌的易感基因，BRCA1基因的結(jié)構(gòu)和功能1990年Hall等研究發(fā)現(xiàn)，染色體17q21與早期發(fā)生的家族性乳腺癌相關(guān)。第21頁,共31頁，2024年2月25日，星期天血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子VEGF

是一種重要的血管生成因子，又稱血管通透因子(vascularpeameabilityfactor，VPF),是近年來發(fā)現(xiàn)的一種多肽類細(xì)胞因子功能:通過其受體直接刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，并誘導(dǎo)產(chǎn)生蛋白水解酶、間質(zhì)膠原酶和組織因子來促進(jìn)血管形成；提高血管通透性，促進(jìn)血漿蛋白、纖維蛋白原外滲導(dǎo)致腫瘤間質(zhì)水腫，引起細(xì)胞外基層改變，從而為腫瘤浸潤及轉(zhuǎn)移提供適合的基礎(chǔ)。第22頁,共31頁，2024年2月25日，星期天SMA（smoothmuscleactin）：

稱為平滑肌肌動(dòng)蛋白，是可靠的標(biāo)記抗體。從乳腺正常組織、良性病變到原位癌，早期浸潤和浸潤性癌，它的消失是一逐漸發(fā)展的過程。第23頁,共31頁，2024年2月25日，星期天COX-2(cyclooxygenase-2)COX-2是前列腺素合成途徑中的關(guān)鍵酶，乳腺癌組織中存在COX-2的表達(dá)。在腫瘤生成的多個(gè)關(guān)鍵步驟，如細(xì)胞抗凋亡、增強(qiáng)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性及血管生成中發(fā)揮重要作用。COX-2高表達(dá)與乳腺癌脈管侵犯、淋巴結(jié)侵犯、分期、PR表達(dá)、CerbB2表達(dá)及p53表達(dá)具有相關(guān)性。第24頁,共31頁，2024年2月25日，星期天全球狀況100%乳腺癌患者絕經(jīng)前26%絕經(jīng)后74%ER–46%ER+54%ER–27%ER+73%晚期:19%早期:81%DecisionResourcesEpidemiologyData&PrimaryMR.第25頁,共31頁，2024年2月25日，星期天中國狀況100%乳腺癌患者絕經(jīng)前60%絕經(jīng)后40%ER–50%ER+50%ER–40%ER+60%晚期:19%早期:81%流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，中國婦女發(fā)病的高峰年齡較美國提前10年，為40－49歲，

30－39歲年齡組乳腺癌所占比例超過20％第26頁,共31頁，2024年2月25日，星期天乳腺癌分子分型第27頁,共31頁，2024年2月25日，星期天第28頁,共31頁，2024年2月25日，星期天乳腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的分組

危險(xiǎn)度判別要點(diǎn)轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)其他低度陰性同時(shí)具備以下5條標(biāo)本中病灶大?。╬T）≤2cm，且分級a1級且瘤周脈管未見腫瘤侵犯b且Her-2/neu基因沒有過度表達(dá)或擴(kuò)增c且年齡≥35歲（且ER和/或PR表達(dá)）中度以下5條至少具備一條：標(biāo)本中病灶大?。╬T）＞2cm，或分級2-3級或有瘤周脈管腫瘤侵犯Her-2基因過度表達(dá)或擴(kuò)增或年齡<35歲（或ER和PR表達(dá)缺失）1-3個(gè)陽性未見Her-2過度表達(dá)和擴(kuò)增。（并且ER和/或PR表達(dá)）高度（并且ER和PR表達(dá)缺失）或Her-2過度表達(dá)或擴(kuò)增。≥4個(gè)陽性第