2016年臨床基因擴增檢驗實驗室質(zhì)量手冊

目錄

實驗室公正性說明

修訂頁

第一章質(zhì)量方針

分子生物實驗室組織結構圖

分子生物實驗室設置平面圖

第二章管理程序文件

程序管理文件編碼目錄JS-LJ-SMP0000-000

實驗室內(nèi)務管理程序JS-LJ-SMP0001-000

實驗室人員配置及培訓程序JS-LJ-SMP0002-000

實驗室質(zhì)量控制管理程序JS-LJ-SMP0003-000

儀器設備管理程序JS-LJ-SMP0004-000

臨床標本的管理程序JS-LJ-SMP0005-000

實驗室生物防護與安全管理程序JS-LJ-SMP0006-000

實驗室文件、記錄的管理程序JS-LJ-SMP0007-000

實驗耗材購買、驗收、儲放程序JS-LJ-SMP0008-000

抱怨處理程序JS-LJ-SMP0009-000

儀器設備校準程序JS-LJ-SMPOO10-000

實驗室檢測結果報告程序JS-LJ-SMP0011-000

檢驗過程中發(fā)生故障時的應急處理程序JS-LJ-SMP0012-000

實驗室清潔消毒程序JS-LJ-SMP0013-000

文件修改程序JS-LJ-SMP0014-000

腫瘤分子檢測實驗室標準操作規(guī)程文件編碼目錄JS-LJ-S0P0000-000

石蠟包埋組織DNA提取標準操作規(guī)程JS-LJ-S0P0001-000

石蠟包埋組織樣本RNA提取標準操作規(guī)程JS-LJ-SGP0002-000

血液DNA提取標準操作規(guī)程JS-LJ-S0P0003-000

口腔拭子/唾液DNA提取標準操作規(guī)程JS-LJ-S0P0004-000

組織DNA提取標準操作規(guī)程JS-LJ-S0P0005-000

組織RNA提取標準操作規(guī)程JS-LJ-S0P0006-000

反轉(zhuǎn)錄標準操作流程JS-LJ-SGP0007-000

基因mRNA表達檢測標準操作規(guī)程JS-LJ-S0P0008-000

EGFR基因突變Q-PCR標準操作規(guī)程JS-LJ-S0P0009-000

KRAS基因突變Q-PCR標準操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO10-000

BRAF基因突變Q-PCR標準操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO11-000

PDGFRA基因突變Q-PCR標準操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO12-000

葉酸基因多態(tài)性Q-PCR標準操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO13-000

基因SNPQ-PCR標準操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO14-000

lpl9qLOH標準操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO15-000

MGMT甲基化標準操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO16-000

樣本脫包、分類、編號、登錄、發(fā)放標準操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO17-000

臨床標本采集、驗收、拒收標準操作規(guī)程JS-LJ-SOPOO18-000

臨床標本保存標準操作規(guī)程JS-LJ-S0P0019-000

試劑質(zhì)檢標準操作規(guī)程JS-LJ-S0P0020-000

實驗結果有效性判斷標準操作規(guī)程JS-LJ-S0P0021-000

室內(nèi)質(zhì)量控制標準操作規(guī)程JS-LJ-SOP0022-000

室間質(zhì)量評價標準操作規(guī)程JS-LJ-S0P0023-000

主要儀器使用、維護、校準操作規(guī)程JS-LJ-SOP0024-000

實驗室廢棄物處理程序JS-LJ-S0P0025-000

申請單必須信息JS-LJ-S0P0026-000

腫瘤個體化檢測樣本采集注意事項JS-LJ-SGP0027-000

葉酸基因檢測樣本采集注意事項JS-LJ-S0P0028-000

檢測報告標準操作規(guī)程JS-LJ-SQP0029-000

修訂頁

修訂修訂的

簡要修訂內(nèi)容批準人批準日期

序號章節(jié)條款

第一章

質(zhì)

里

方

針

質(zhì)量方針

題目：質(zhì)量方針起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-ZLC0001-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

臨床基因擴增檢驗實驗室是嚴格按照衛(wèi)生部、山東省臨床基因擴增實驗室

規(guī)范化、標準化要求進行管理與操作，我中心的質(zhì)量方針為：公正、科學、

準確、高效

我們的檢驗工作必須做到：

行為公正一任何情況下，不被各種利益所驅(qū)動，客觀公正、獨立誠實

地開展檢驗工作。

方法科學一遵守國家有關法律、法規(guī)，依據(jù)有關檢驗標準規(guī)范。

數(shù)據(jù)準確一認真執(zhí)行本中心工作程序，對檢驗工作進行全過程質(zhì)量控

制，確保檢驗數(shù)據(jù)的準確性和可靠性。

辦事高效一在規(guī)定的工作日內(nèi)接受客戶委托，出具檢驗報告。

分子實驗室組織結構圖

題目：分子生物實驗室組織結構圖起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-ZLC0002-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

第二章

管

理

程

序

文

件

JS-LJ-SMPOOO1-000

實驗室內(nèi)務管理程序

題目：實驗室內(nèi)務管理程序起草：日期：

審核：日期：

編號:JS-LJ-SMPOOO1-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：防止實驗室交叉污染，保證實驗室的正常運行，確保檢測結果的準確性和

實驗人員的安全性。

2.適用范圍：本制度適用于PCR實驗室及相關人員，明確實驗室各分區(qū)的內(nèi)務工

作。

3.程序

3.1.實驗室的設置和人流、物流管理

3.1.1.本中心在二樓大實驗室內(nèi)設置臨床基因擴增檢驗實驗室，即PCR實驗室。

3.1.2.PCR實驗室的設置分四個獨立工作區(qū)：PCR試劑準備區(qū)（一區(qū)）、PCR樣本處

理區(qū)（二區(qū)）、PCR擴增區(qū)（三區(qū)）、PCR產(chǎn)物分析區(qū)（四區(qū)），各區(qū)設有專門的責任

人。各區(qū)門前有醒目標志，每個區(qū)都設置緩沖區(qū)，用于更換工作服、工作鞋及維持空

氣流向。進入各個工作區(qū)域工作時，必須嚴格遵守單一方向順序：即從第一區(qū)的試劑

準備區(qū)一-?第二區(qū)的樣本處理區(qū)一-?第三區(qū)的擴增區(qū)一-＞第四區(qū)的產(chǎn)物分析區(qū)。嚴禁

誤入和逆向進入各工作區(qū)。一、二區(qū)通過排風裝置保持正壓，三、四區(qū)通過抽風裝置

保持負壓。

3.1.3,各區(qū)配備專用的儀器、設備、輔助設施、耗材、清潔用品、辦公和消毒用

品，并有明顯的區(qū)域標示，須貼上不同顏色標簽予以區(qū)別：第一區(qū)為藍色標簽，第二

區(qū)為綠色標簽，第三區(qū)為白色標簽，第四區(qū)為粉色標簽不得混用。

3.1.4,各區(qū)配有不同顏色工作服，第一區(qū)為藍色，第二區(qū)為綠色，第三區(qū)為白色，

第四區(qū)為粉色，進入各區(qū)實驗室，必須更換本室有顏色標識的工作服，換上專用鞋，

帶上手套。

3.1.5.實驗室的物流同樣嚴格遵守上述唯一流向制度，并通過傳遞窗進行傳遞。

3.2實驗室清潔消毒管理

JS-LJ-SMPOOO1-000

3.2.1.實驗室工作服應每周由專人定期清洗和消毒。標本制備區(qū)工作服必須先進行消

毒。

3.2.2.實驗結束后實驗人員必須立即對工作區(qū)進行清潔消毒，操作完成后打開排氣

扇。桌面在工作結束后，必須立即用消毒液（2g/L有效氯含量或75%酒精等）擦拭，并

將可移動紫外燈調(diào)至實驗臺60-90cm內(nèi)照射消毒30-60min,室內(nèi)空氣紫外燈消毒

30-60min。

3.2.3.各區(qū)配備專用清潔工具，并有明顯的區(qū)域標示，不得混用。

JS-LJ-SMP0002-000

實驗室人員配置及培訓程序

題目：實驗室人員配置及培訓起草：日期：

程序?qū)徍耍喝掌冢?/p>

編號：JS-LJ-SMP0002-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：保證實驗室有足夠數(shù)量合格的工作人員，確保能夠保質(zhì)保量完成相應的工

作任務。

2.適用范圍：本程序適用于實驗室人員配置、管理、培訓及考核，所有工作人員均

應熟知并遵守該程序。

3.程序

3.1.人員要求

3.1.1.實驗室工作人員應為醫(yī)學檢驗專業(yè)或相關專業(yè)畢業(yè)，具有中級技術職稱或大

中專以上學歷。

3.1.2.實驗室工作人員應參加衛(wèi)生部或市臨檢中心舉辦的PCR技術培訓，并取得合

格證。

3.1.3.對于新進入本室的人員，應在實驗室有培訓合格證的上級技術人員的指導

下進行實驗工作，實驗報告由有資格的本室工作人員出具，并應在最短的時間內(nèi)取得

上崗培訓合格證。

3.2.人員配置

3.2.1.實驗室應根據(jù)工作需要配備足夠的工作人員，目前實驗室操作人員4人，其

中2人已獲得培訓合格證，視工作量的增加和業(yè)務發(fā)展需要，適當增加工作人員。

3.2.2.各級技術人員履行相應的工作職責。

3.3.人員培訓及考核

3.3.1.實驗室負責人（或技術負責人）定期參加衛(wèi)生部PCR室間質(zhì)評總結會。

3.3.2.實驗室工作人員定期參加相關學術交流會議。

3.3.3.安排未取得上崗培訓合格證的工作人員在合適的時間內(nèi)參加技術培訓。

3.4.人員管理

JS-LJ-SMP0002-000

3.4.1實驗室建立所有工作人員的技術檔案，包括：學歷、任職資格、發(fā)表論文、

研究成果、培訓等相關材料復印件。

3.4.2技術檔案包括文本檔案和電子檔案，文本檔案每年更新1次。

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實驗室質(zhì)量控制管理程序

題目：實驗室質(zhì)量控制管理程起草：日期：

序?qū)徍耍喝掌冢?/p>

編號：JS-LJ-SMP0003-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：監(jiān)控本實驗室常規(guī)工作的可靠性和有效性，確定檢測結果能否報告。

2.適用范圍：本程序適用于實驗室臨床檢測實驗全過程，實驗室工作人員均須熟知

并遵守本程序，并逐步完善室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評工作。

3.程序

3.1.室內(nèi)質(zhì)控

3.1.1.由于核酸擴增的高敏感性，為避免假陽性和假陰性，必須對DNA和RNA分析

的各步進行質(zhì)量控制，以保證測定結果的準確性和重復性。室內(nèi)質(zhì)控包括標本制備、

逆轉(zhuǎn)錄、擴增和產(chǎn)物分析中的每一步。

3.1.2.逆轉(zhuǎn)錄和擴增：包括陽性質(zhì)控和陰性質(zhì)控。對逆轉(zhuǎn)錄和核酸擴增的質(zhì)控可使

用內(nèi)標質(zhì)控方法也可采用外標質(zhì)控方法。

3.1.3.在測定血清/血漿病原體如HBV-DNA、HCV-RNA等時，應使用市臨檢中心統(tǒng)一

發(fā)放的質(zhì)控品作為質(zhì)控樣本，與待測臨床標本等同處理提取核酸及擴增，以判斷逆轉(zhuǎn)

錄及擴增檢測的效果。

3.1.4.質(zhì)控樣本在擴增時必須使用與患者的標本相同的主反應混合液。

3.1.5.每一個PCR反應都必須設外加陰性質(zhì)控（污染監(jiān)測質(zhì)控）。

3.1.6.測定結果的評價：

3.1.6.1.采用實時熒光定量PCR檢測方法，在判斷結果時，應先對擴增的熒光信

號作出定性判斷，然后再進行定量分析，避免一些非特異性熒光信號對結果分析的干

擾。

3.1.6.2.當質(zhì)控標本實驗數(shù)據(jù)在控時，方可發(fā)出臨床標本的檢測報告。

3.1.6.3.每次實驗的質(zhì)控數(shù)據(jù)均要作記錄，如有失控現(xiàn)象應及時分析失控原因并

采取措施，并做記錄。

JS-LJ-SMP0003-000

3.2.室間質(zhì)評

3.2.1.參加山東省或衛(wèi)生部臨檢中心相關檢測的室間質(zhì)量評價。

3.2.2.室間質(zhì)控樣本的接收和驗收參見室間質(zhì)量標準操作規(guī)程。

3.2.3.質(zhì)控標本的檢測按常規(guī)臨床標本對待，檢測結果須在截止日期前上報。

3.2.4.對室間質(zhì)評的反饋結果進行分析，確定工作中須修正的環(huán)節(jié)。查閱同行對有

關試劑盒的使用效果。

JS-LJ-SMP0004-000

儀器設備管理程序

題目：儀器設備管理程序起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-SMP0004-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：確保實驗室儀器設備得到妥善的管理。確保檢測質(zhì)量，保障儀器設備的使

用壽命。

2.適用范圍：本程序適用于基因擴增檢驗診斷室所有的儀器設備的購置、驗收、使

用、校正和維護管理。

3.程序

3.1.儀器購買原則：根據(jù)中心的有關規(guī)定本著“質(zhì)優(yōu)價廉”進行，所購儀器必須三

證齊全（生產(chǎn)許可證、產(chǎn)品注冊證、經(jīng)營執(zhí)照），并能與基因診斷實驗室的工作條件相

符外包裝：廠名廠址、檢測、批準文號、批號和有效期等。

3.2.儀器購買程序

3.2.1.儀器廠家的確定：先由實驗操作人員提出初步意見，提供2家或2家以上（特

殊情況1家亦可）試劑廠家的有關儀器信息，提交中心儀器審核組討論。

3.2.2.儀器的購買：由物流部負責與供貨商聯(lián)系供貨，交儀器審核組討論決定。

3.3.儀器的驗收：供貨商送來儀器后由物流部人員和實驗操作人員共同驗收，在廠

家的供貨清單上簽字。

3.4.儀器的放置：根據(jù)儀器本身的要求及基因診斷實驗室各區(qū)的要求安放儀器。

3.5.基因診斷實驗室的主要儀器設備均需建立檔案，檔案內(nèi)容包括：設備的名稱及

型號、制造商名稱、設備編號、啟用日期、目前放置地點、設備責任人，并應有儀器

的標準操作SOP或其它技術資料復印件。

3.6.常規(guī)儀器設備的操作使用程序

3.6.1.儀器設備的使用授權

3.1.6.1.僅有本實驗室工作人員有權使用實驗室的儀器設備。

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3.1.6.2.儀器設備的使用者在使用前首先必須熟悉儀器設備的操作使用程序并經(jīng)

中心主任考核認可。

3.1.6.3.PCR實驗室現(xiàn)有工作人員均經(jīng)工程師操作培訓，共同完成實驗室檢測系

統(tǒng)的建立，管理文件的撰寫工作。

3.6.2.儀器的使用

3.6.2.1.儀器設備的使用嚴格遵守分區(qū)使用管理。

3.6.2.2.儀器設備的使用必須嚴格遵循儀器設備的標準操作規(guī)程。

3.7.常規(guī)儀器設備的維護保養(yǎng)程序

3.7.1,儀器設備應定期校準，具體參照“儀器設備校準程序”。

3.7.2.儀器出現(xiàn)故障應作記錄和處理意見，如不能正常使用，應填寫維修申請單，

交儀器部設備維修人員或相關專門維修單位進行處理。

3.8.儀器應有工作狀態(tài)標識，正常運行的各區(qū)儀器應貼有相應的標簽（綠色）以表明

其狀態(tài)。待維護的儀器用黃色標簽。有故障待修暫停儀器用紅色標簽。需定期作校準

或檢定的儀器應有校準或檢定日期及下次校準或檢定日期的記錄。

3.9.儀器設備的報廢經(jīng)提出申請后，由中心有關人員統(tǒng)一處理。

3.10.本實驗室所有儀器、設備均為專用不外借。

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臨床標本的管理程序

題目：臨床標本的管理程序起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-SMP0005-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：加強標本采集、運送、貯存、廢棄的管理，保證檢驗結果準確性與有效

性。

2.適用范圍：本程序適用于各類臨床標本的管理。

3.程序

3.1.標本的唯一?性標識：標識構成——中心代碼、病人姓名、標本采集日期、檢

測、該檢測批次的標本序號，無間隔符號。標本的唯一性標識須字跡清晰明了，不得

隨意作任何涂改；必須時，在舊標識上劃雙線更改，更改后應保持舊標識可辨識。具

體見“標本唯標識編號操作規(guī)程”。外包裝：廠名廠址、檢測、批準文號、批號和

有效期等。

3.2.標本的采集、驗收、拒收：本實驗室檢測標本為血清，要求用真空采血管采集

血液標本；接收標本時應核對標本與檢驗申請單的一致性。標本接受人須檢查標本狀

態(tài)：標本合乎要求，須在標本記錄上注明合格，作進一步處理；標本不合格，工作人

員有權拒受標本，其它后續(xù)處理過程中發(fā)現(xiàn)的不合格，應記錄其狀態(tài)并通知相關醫(yī)院

重新送檢。具體見“臨床標本采集、驗收、拒收操作規(guī)程”。

3.3.臨床標本的保存：當天不檢測的標本可經(jīng)離心后吸取血清及時放置于-20℃保

存。具體見“臨床標本保存操作規(guī)程”。

3.4.標本的安全處理：實驗室所有的廢棄標本、使用過的耗材等均應放入含相應濃

度的有效氯消毒液中，然后再作相應的處理。所有標本均可能具有傳染性，須嚴格遵

守檢驗中心有關院內(nèi)感染及醫(yī)用垃圾的管理和處理規(guī)定，工作人員須注意保持并隨時

檢查容器的完整和無標本外泄發(fā)生。具體見“實驗室廢棄物處理程序”和“實驗室生

物防護和安全管理程序”。

JS-LJ-SMP0006-000

實驗室生物防護與安全管理程序

題目：實驗室生物防護與安全起草：日期：

管理程序?qū)徍耍喝掌冢?/p>

編號:JS-LJ-SMP0006-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：保證實驗室、實驗人員和外部環(huán)境的安全。

2.適用范圍：本程序適用于整個臨床基因診斷實驗室。

3.程序：根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》，參照《微生物和生物醫(yī)學實驗室生

物安全通用準則》以及山東省臨床檢驗中心下發(fā)的《山東省臨床檢驗專業(yè)質(zhì)控督查基本

內(nèi)容和要求》，對本實驗室中各種危險因素采取有效的控制措施，預防實驗室中存在的

污染源對實驗室、實驗人員和環(huán)境的污染，具體內(nèi)容詳見中心文件“生物安全手

冊nn，，o

3.1.嚴格執(zhí)行生物防護和安全制度，監(jiān)控各種危險因素，采取有效控制措施，注意個

人生物安全防護，實驗中嚴格按照各種標準操作程序操作外包裝：廠名廠址、檢測、

批準文號、批號和有效期等。

3.2.每天更換廢液缸的2g/L有效氯含量消毒液，并保證2g/L有效氯含量消毒液用量為

廢液缸內(nèi)總液量的1/5左右。正確配置使用消毒液。如不當使用消毒液也能散布污染通

過空白對照、陰性對照、陽性對照和弱陽性（低拷貝數(shù)）對照進行質(zhì)控。

3.3.實驗臺面日常清潔時使用75%的酒精擦拭。每區(qū)每天實驗前后紫外燈照射30—60

min,如有需要可延長照射時間，對工作臺面實驗前后也要用紫外燈照射30—60min,

并作好記錄。

3.4.標本采集、運送過程中，應保持容器完好，無泄漏。工作桌面或地面一旦有標本

污染時，應及時用含氯消毒液清潔，再用75%的酒精清潔桌面。

3.5.實驗廢棄物、患者樣本均可能具有傳染性，應按照生物傳染性質(zhì)對待，應嚴格按

照實驗室廢棄物處理制度處理。

3.6.有下列情況之一者，還需另外消毒：手接觸有傳染性的微生物；水龍頭、水池肥

皂、工作服可能同時被大量細菌污染者。消毒劑可用2g/L有效氯含量消毒液。

JS-LJ-SMP0006-000

3.7.其它安全措施：

3.7.1.在基因擴增檢驗實驗室門上需貼上生物危害標志，非工作需要，其他人員不

得入內(nèi)。與實驗無關的任何私人物品嚴禁入內(nèi)。

3.7.2.實驗室工作人員應接受生物安全相關培訓，了解病原體感染的途徑和預防方

法。

3.7.3.接觸感染性物質(zhì)的實驗室人員必須作好個人防護，戴好手套、口罩和帽子，

禁止裸手接觸任何物質(zhì)，不要戴著手套觸摸皮膚。

3.7.4.實驗使用后的廢物按照不同的處理要求進行處理。

3.7.5.實驗人員進入PCR實驗工作區(qū)，應換上各區(qū)的專用工作服，離開時脫下該區(qū)

的工作服，并掛在指定的地方。工作結束后，立即洗手才可離開。

3.7.6.實驗結束后必須立即對工作區(qū)進行清潔消毒。桌面在工作結束后，必須立即

用消毒液（2g/L有效氯含量消毒液或75給酉精等）擦拭，并將可移動紫外燈調(diào)至距實驗

臺60-90cm內(nèi)照射消毒30-60min（＞

3.7.7.保證實驗室所用的實驗消耗品均經(jīng)過高壓滅菌處理。

3.7.8.制定防火、防盜措施：①及時檢查電線是否老化，發(fā)現(xiàn)隱患應及時排除；②

防盜措施：設內(nèi)保安全機制，由PCR室工作人員為安全員，負責工作完畢后檢查門窗。

3.7.9.要嚴格執(zhí)行以上各項措施，并定期由室負責人對以上措施的落實情況予以調(diào)

查。如調(diào)查不合格，對相應責任人進行處罰，并限期整改。

4.應急措施:

4.1.工作人員在實驗過程中懷疑被感染、發(fā)生重大生物污染時，應立即停止試驗并報

告上級，并暫時關閉實驗室，進行嚴格的消毒，并根據(jù)實際情況，采取相應有效措施

避免感染的發(fā)生或蔓延。如遇實驗中手指被劃破，應立即用水沖洗、消毒包扎傷口，

如此標本為陽性，應立即接種疫苗，同時上報山東省臨檢中心，提請再次審核實驗室

消毒隔離情況。

4.2.在此期間，為了確保報告的及時，將病人標本送往其他經(jīng)衛(wèi)生部審批的實驗室檢

測。

JS-LJ-SMP0007-000

實驗室文件、記錄的管理程序

題目：實驗室文件、記錄的管起草：日期：

理程序?qū)徍耍喝掌冢?/p>

編號：JS-LJ-SMP0007-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：確保資料的記錄、保存狀態(tài)在控。

2.適用范圍：本程序適用于實驗過程中產(chǎn)生的數(shù)據(jù)、文本資料的記錄和保存的整個

過程，主要有：病人和標本信息、實驗操作記錄、實驗檢測結果、原始檢測申請

單和出具的檢測報告單、儀器使用記錄等。

3.程序

3.1.病人和標本信息：接收標本后，在標本登記表中登記病人和標本信息，包

括：病人姓名、性別、年齡、檢測、標本類型、標本狀態(tài)、送檢日期、標本接收人

等，對不符合檢測要求的標本在“拒收標本登記表”上記錄，并及時通知送檢單位。

當天工作結束后將以上表格分類保存于標本接受間外包裝：廠名廠址、檢測、批準文

號、批號和有效期等。

3.2.檢測過程中的實驗記錄：在專用實驗記錄簿上記載，不同實驗區(qū)的記錄簿

不得混用。試劑準備和貯存區(qū)應記錄檢測所用的試劑盒情況（名稱、批號、數(shù)量）；

標本制備區(qū)記錄檢測標本數(shù)及在本區(qū)內(nèi)進行的操作過程；在擴增及產(chǎn)物分析區(qū)記錄質(zhì)

控結果和分析。

3.3.PCR儀運行結束，運行和結果文件應保存在專門的數(shù)據(jù)文件夾中。文件名

應保持唯一性，前面英文字母為實驗，后面六位數(shù)字為實驗日期，如HBV020710c

3.4.將病例資料、樣品資料、檢測結果錄入報告系統(tǒng)，產(chǎn)生結果報告單，經(jīng)實

驗室主任審核簽名；檢驗申請單、檢驗結果記錄（包括病例資料）裝訂保存于擴增區(qū)

工作臺抽屜里，統(tǒng)一建檔封存，至少保存2年以上。

3.5.實驗記錄要真實，不得隨意涂改，如確需更改，應在所需更改內(nèi)容上劃雙

紅線，填上新內(nèi)容，說明更改原因并簽名。

JS-LJ-SMP0007-000

3.6.實驗記錄須妥善保存，涉及醫(yī)療糾紛及特殊情況外，本室無義務提供給他

人借閱或復印通過空白對照、陰性對照、陽性對照和弱陽性（低拷貝數(shù)）對照進行質(zhì)

控。

JS-LJ-SMP0008-000

實驗耗材購買、驗收、儲放程序

題目：實驗耗材購買、驗收、儲起草：日期：

放程序?qū)徍耍喝掌冢?/p>

編號:JS-LJ-SMP0008-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：規(guī)定試劑購買原則、驗收的程序和試劑的1E確貯存。

2.適用范圍：本程序適用于實驗室所購的診斷試劑盒、實驗耗材。

3.程序

3.1.試劑的購買和管理

3.1.1.試劑購買原則：PCR檢測試劑選用原則“質(zhì)優(yōu)價廉”并與ABI7500儀器配

套，所購試劑必須三證齊全。（三證包括：）

3.1.2.試劑購買程序

3.L2.1試劑廠家的確定：先由具體檢測人員提供2家或2家以上（特殊情況1家亦

可）試劑生產(chǎn)廠家的相關試劑信息，提交試劑審核組討論并確定第一試劑商和第二試劑

供貨商，將申請單交物流部與供貨商確定試劑價格。

3.1.2.2試劑的購買：操作人員提前1周以上填寫請購單，交由物流部與供貨商聯(lián)系

供貨。

3.1.2.3試劑生產(chǎn)廠商的變更：為保證試劑使用的穩(wěn)定性，原則上一年內(nèi)不變更試劑

生產(chǎn)廠商，如在使用過程中發(fā)現(xiàn)質(zhì)量問題，操作人員及時向?qū)嶒炇邑撠熑藚R報，必要

時提出更換試劑生產(chǎn)廠家的要求，交試劑審核組討論決定。

3.1.3.試劑驗收：

3.1.3.1物流部專門人員負責核對試劑品名、數(shù)量和價格，并在供貨清單上簽字。

3.1.3.2操作人員負責試劑質(zhì)量驗收（內(nèi)外包裝驗收）：

3.1.3.2.1.外包裝要求：包裝完整無損、標識清楚齊全（品名、廠家、批準文號、生

產(chǎn)日期、效期）、所購試劑需保證至少仍有三個月以上效期；

3.1.3.2.2.內(nèi)包裝要求：內(nèi)包裝完好無損、無泄漏，試劑各部分、說明書齊全。供

貨清單由試劑管理人員保管，試劑驗收后登記存儲。

JS-LJ-SMP0008-000

3.1.4.試劑儲存：試劑盒保存按照說明書規(guī)定進行。PCR檢測試劑分區(qū)保存：擴增

反應體系試劑保存于試劑儲存區(qū)；對照品、定量校準品、核酸提取試劑儲存于樣品處

理區(qū)。

3.1.5.試劑質(zhì)檢：按照試劑質(zhì)檢標準操作程序操作。

3.1.6.試劑出現(xiàn)質(zhì)量問題，立即書面通知實驗室負責人員，在其知情同意下，書面

通知物流部辦理退換貨手續(xù)。

3.2.實驗耗材的購買和管理

3.2.1.購買：由實驗室工作人員填寫申請，按需提出所購耗材的品名、規(guī)格、數(shù)

量，由實驗室負責人簽字同意后交物流部購買。

3.2.2.驗收：消耗品購進后由物流部相關人員核對數(shù)量、規(guī)格，查驗外包裝是否破

損，如發(fā)生破損或其它質(zhì)量問題，給予退回。由實驗室工作人員負責進行質(zhì)量驗收。

3.3.實驗操作人員對庫存試劑定期每月檢查，并填寫試劑使用記錄表，不使用過期

試劑，并杜絕浪費現(xiàn)象。

3.4.試劑外借必須征得實驗室負責人員同意，并履行中心有關借出手續(xù)。

JS-LJ-SMP0009-000

抱怨處理程序

題目：抱怨處理程序起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-SMP0009-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：“抱怨”往往提示實驗室存在著尚未得到認識的漏洞或問題。為正確處理好

“抱怨”，鞏固和完善實驗室質(zhì)量體系，特制訂本程序。

2.適用范圍：本程序適用于來自于患者，臨床醫(yī)護人員或?qū)嶒炇夜ぷ魅藛T針對檢測結

果質(zhì)量、服務質(zhì)量或?qū)嶒炇夜芾淼葐栴}的投訴。每個實驗室工作人員均有責任接待

申訴者，實驗室負責人對抱怨進行處理，如超出室負責人職權范圍，應經(jīng)中心負責

人處理。

3.程序

3.1.接到抱怨

3.2.記錄抱怨

3.3.提出針對具體抱怨的處理方法

3.4.將不在《常見抱怨處理方式》范圍內(nèi)的處理方法交室負責人審核

3.5.征求抱怨方對處理方法的意見

3.6.執(zhí)行解決方案

3.7.記錄最后的處理結果

4.處理措施：

4.1.針對客戶對服務態(tài)度抱怨的處理措施

4.1.1.接到抱怨后，由室負責人責成相關人員向客戶致歉。

4.1.2.對患者提出的合理要求及時進行處理。

4.1.3.調(diào)查事情原委，根據(jù)調(diào)查結果對相關責任人進行處罰。

4.1.4.記錄抱怨及其處理結果。

4.2.針對客戶對結果準確性抱怨的處理措施

4.2.1.為客戶展示原始實驗數(shù)據(jù)。

JS-LJ-SMP0009-000

4.2.2.向客戶解釋相關實驗程序和可能臨床情況，幫助客戶解除疑慮。

4.2.3.如確有實驗結果不符合有效性要求或出現(xiàn)錯誤，則應及時糾正錯誤，重新實

驗以得到準確結果。同時由室負責人向客戶致歉以爭取得到其諒解，按有關條例對責任

人進行相應處罰，并記錄。

4.3.針對客戶對檢測結果和臨床診斷的符合率抱怨的處理措施

4.3.1.針對客戶抱怨的檢查進行從實驗前到實驗后的全程調(diào)查，查找是否存在影響

結果的因素，并形成書面報告。

4.3.2.就調(diào)查發(fā)現(xiàn)的問題進行針對性解決。

4.3.3.與客戶建立定期交流機制，定期了解臨床使用情況和對臨床作出

解釋。

4.4.針對客戶對結果發(fā)放時效性抱怨的處理措施

4.4.1.嚴格按承諾時間發(fā)放臨床報告。

4.4.2.在與客戶交流會上就報告發(fā)放過程及時間作出解釋，獲取臨床對結果報告時

效性的理解。

5.抱怨解決的原則

5.1.所有實驗室工作人員要認真對待客戶及其它部門人員就實驗室工作所提出的抱

怨，對提出抱怨的人員要做到語言文明，熱情接待。

5.2.由實驗室負責人負責對抱怨申訴進行處理，實驗室負責人不在時由其委托人處

理，實驗室所有工作人員均有責任接待申訴者。

5.3.對抱怨和投訴均應進行相應記錄，包括日期、申訴人、申訴內(nèi)容、處理措施、處

理者、聯(lián)系方式等。

5.4.對于當時能解決的申訴應及時處理，當時不能解決的，要限時處理，并明確告知

申訴者。

5.5.如抱怨涉及到實驗室操作程序是否符合《臨床基因擴增實驗室管理暫行辦法》、

《臨床基因擴增實驗室工作規(guī)范》等，實驗室負責人應召集實驗室工作人員討論，如實

驗室的操作程序確實不符合有關規(guī)定，應重新修訂操作規(guī)程后執(zhí)行。

5.6.當實驗室負責人無法滿意解決報怨時，應將有關材料遞交中心，由中心處理。

JS-LJ-SMPOO10-000

儀器設備校準程序

題目：儀器設備校準程序起草：日期：

審核：日期：

編號:JS-LJ-SMPOO10-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：確保實驗室儀器設備得到妥善的管理，確保檢測質(zhì)量。

2.適用范圍：本程序適用于適用于實驗室所有的儀器設備。

3.程序

3.1.校準方法：

3.1.1.定量擴增儀、生物安全柜、冷凍高速離心機功能性儀器由各生產(chǎn)廠家每年進

行一次維修檢測，并將此作為校準依據(jù)。各儀器的校準單位（即生產(chǎn)廠家）見主要儀器

一覽表。

3.1.2.移液器校準外送專業(yè)機構專業(yè)人員進行校準。

3.1.3.干式恒溫器使用經(jīng)質(zhì)量檢定的溫度計進行自行校準。

3.1.4.溫濕度計校準以經(jīng)過質(zhì)量計量監(jiān)督局校準過的其他溫度計和濕度計進行校

準。

3.1.5.移動紫外線消毒車由檢驗中心儀器部專門人員每六個月對紫外燈管的紫外線

進行測試。新燈管要求紫外線強度大于或等于90UW/cm；舊燈管紫外線強度大于或等于

2

70UW/cm0每年聯(lián)系生產(chǎn)廠家進行一次維護和檢測，并將此作為校準依據(jù)。

3.2.校準計劃

3.2.1,啟用校準：設備在投入使用時實施啟用校準。

3.2.2.周期校準：設備在投入使用后，每年實施一次校準。

3.2.3.維修后校準：設備在維修后須經(jīng)校準方可重新投入使用。

3.2.4,校準計劃外的校準：如在檢測及EQA,IQC活動中發(fā)現(xiàn)存在結果漂移或偏差及

其它可疑情況時，通過分析對可疑設備及時實施校準。

JS-LJ-SMPOO10-000

3.2.5.移液器的校準順序：按照單一流向規(guī)定，對移液器的校準首先校準試劑準備

區(qū)，然后依次為樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)。每校準完一個區(qū)的移液器，將其放回原處

后，再取下一個區(qū)的移液器進行校準。

3.2.6.校準安排在不進行樣本檢測的日期完成。

3.2.7.校準的有效標識：經(jīng)校準的設備加貼綠色標簽，標簽上應標明本次校準的日

期和結果及下次校準的計劃預定日期。

3.2.8.實驗室負責人員每年應制定書面的各儀器設備的校準計劃，經(jīng)實驗室負責人

批準后由各儀器設備責任人按計劃實施。

3.3.校準結果的審批及記錄保存：每次校準的結果須及時送交中心質(zhì)量負責人審閱簽

字。校準記錄須妥善保存于PCR實驗室三區(qū)直至設備報廢。

JS-LJ-SMP0011-000

實驗室檢測結果報告程序

題目：實驗室檢測結果報告程序起草：日期：

審核：日期：

編號:JS-LJ-SMPOO11-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：檢測報告是過程的最終輸出，為使報告的生成、發(fā)放、管理受控，特制訂本程

序。

2.適用范圍：本程序適用于本基因擴增檢驗實驗室所有臨床檢測的結果報告，只有經(jīng)PCR

培訓并獲得上崗證的工作人員才有權審核和簽發(fā)報告單。

3.程序

3.1.檢測結果的報告應準確、清晰、明確、客觀和及時，杜絕虛假報告。

3.2.實時熒光PCR測定時，其檢測數(shù)據(jù)要經(jīng)過分析，避免因非特異性熒光而造成假陽性結

果。根據(jù)質(zhì)控品判斷PCR擴增的有效性，只有當質(zhì)控品的實驗數(shù)據(jù)在控時，才可發(fā)出報告，否

則應重新測定。

3.3.定量結果報告以每毫升拷貝數(shù)（拷貝數(shù)/ml）報告，如結果高于測定方法線性范圍上限，

則對樣本稀釋后再測，結果乘上稀釋倍數(shù)；如結果低于方法的線性范圍下限，則報告小于檢測

下限。

3.4.病人檔案及測定結果及病人檔案一并登記到實驗結果記錄表中，由室負責人管理所有

病人資料。每份報告均應由我實驗室出具；報告內(nèi)容至少應包括：病人姓名、性別、年齡、樣

本號、標本特性、標本狀態(tài)、標本接收日期及測定、測定方法、結果、參考范圍以及操作者和

審核者的簽名和檢測日期等內(nèi)容。否則視為無效或虛假報告單。以上記錄實行完整保存，至少

保存2年以上。

3.5.報告單應及時發(fā)出。由送化驗單人員負責送往各送檢醫(yī)院。

3.6.打印當日檢測報告匯總表，存檔，妥善保存2年以上

3.7.當臨床科室醫(yī)生要求電話報告結果時，應先確認對方身份，核對其所查詢的病人姓

名、病區(qū)床號等情況，方可報告，并明確告知對方，實驗的最終結果以檢測報告單為準。

JS-LJ-SMPOO11-000

3.8.當患者要求電話報告結果時，應讓患者提供病人基本信息后由送檢醫(yī)院科室負責人出

面告知對方其檢測結果，并需明確告知對方，實驗的最終結果以檢測報告單為準。

JS-LJ-SMPOO12-000

檢驗過程中發(fā)生故障時的應急處理程序

題目：檢驗過程中發(fā)生故障時的起草：日期：

應急處理程序?qū)徍耍喝掌冢?/p>

編號:JS-LJ-SMPOO12-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：為避免因儀器設備發(fā)生故障和試劑盒發(fā)生質(zhì)量問題而影響到臨床檢測報告的

及時性和準確性，特制定本程序。

2.適用范圍：本程序適用于可能影響到檢測報告發(fā)出的儀器設備和試劑等，對于潛在

著一定的可能影響檢測質(zhì)量的不確定因素，一旦發(fā)生，作為對應措施，實驗室應有一套相

應的應急處理程序，室負責人有責任組織并直接監(jiān)督本程序的實施。

3.程序

3.1.實驗室負責人接到儀器設備故障的報警后，立即現(xiàn)場確認異常情況的性質(zhì)和故障

程度。

3.2.儀器設備故障本室不能解決的，應及時通知有關設備維修人員或供應商，具體程

序見儀器設備管理程序。對于發(fā)生故障的儀器設備，及時維修的同時，采取以下處理辦

法。

3.2.1.有滿足使用要求的替用設備的，啟用替用設備。

3.2.2.可借用其他部門儀器設備時，核實該設備的使用狀態(tài)良好后可借用。

3.2.3.替用、借用或備用設備的使用在滿足質(zhì)量要求的同時，必須同時滿足實驗室管理

措施（特別是防污染）的要求。

3.3.試劑盒質(zhì)量發(fā)生問題，經(jīng)核實后，及時通知供貨商更換另一批次試劑，使用前需

先作質(zhì)量檢測，合格后方可使用。

3.4.當有樣本或反應管破裂，并泄露于離心機內(nèi)或擴增儀時，應停止工作，立即用浸

有75%的乙醇消毒液的棉簽榛拭離心機或擴增儀，然后紫外燈照射30min；將該破管的原

始標本按要求保存好與下一批標本一起檢測。

3.5.當有樣本破裂,并泄露于工作臺面時,應用棉簽吸干血清,并用浸有2g/L有效氯消

毒液的毛巾覆蓋30min后，清水擦干再用紫外線燈照射30min。

JS-LJ-SMPOO12-000

3.6.若質(zhì)控品出現(xiàn)問題，應更換其他批次的質(zhì)控品。

3.7.如果試劑配制與標本處理過程中遇到停電狀況，把試劑、標本先保存在冰箱里，

等待電源來時再繼續(xù)操作。如果在擴增過程中遇到停電，實驗室內(nèi)部UPS將利用電池組供

電，使PCR實驗操作完成。

3.8.儀器設備故障或試劑質(zhì)量問題不能得到解決，預期將會影響到檢測報告的及時發(fā)

出，可將標本送至其它實驗室檢查（該實驗室同樣應為獲同類認準的PCR檢測實驗室）；

如已影響到報告的及時發(fā)出，應向相關醫(yī)院公告，取得病人和醫(yī)生的諒解。

3.9.影響到檢測報告發(fā)出的情況，應在“應急處理登記表”作記錄。

JS-LJ-SMP0013-000

實驗室清潔消毒程序

題目：實驗室清潔消毒程序起草：日期：

審核：日期：

編號:JS-LJ-SMPOO13-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：保證實驗室環(huán)境的整潔，防止污染。

2.適用范圍：適于實驗室工作環(huán)境、實驗臺面、工作服、移液器等的清潔消毒工

作。所有實驗室工作人員應熟知并遵守本程序，清潔工作可由實驗室指定人員進行。

3.操作程序

3.1.消毒液配制

3.1.1.配制2g/L有效氯消毒液：參照消毒劑說明書配制終濃度為2g/L有效氯消毒

液。

3.1.2.各實驗區(qū)的清潔消毒工具均專用，不可混用。所配制的消毒液只限在當天內(nèi)

使用，隔夜如使用時應根據(jù)本S0P重新配制。

3.2.紫外消毒

3.2.1.紫外消毒須根據(jù)需要設定時間，通常為30min,根據(jù)需要適當延長時間。

3.2.2.消毒結束后，關閉電源開關。

3.3.實驗室消毒清潔程序

3.3.1,每次實驗前一天和實驗結束后對各區(qū)進行全面消毒。包括實驗臺面、傳遞

窗、地板。

3.3.2.實驗過程中如發(fā)生標本或試劑外濺，應立即用含2g/L有效氯消毒液濕布覆蓋

污染處30min,再進行擦拭，隨后用清水擦洗，并作記錄。

3.3.3.實驗結束后用含2g/L有效氯消毒液對臺面進行清潔，紫外燈照射30min。

3.3.4.實驗結束后，用移動紫外消毒車對工作臺面進行紫外照射30min,并將傳遞

窗紫外燈打開照射30min。

3.3.5.實驗結束后，開啟室內(nèi)紫外燈對實驗室進行紫外照射消毒至少30min。

3.3.6.實驗結束后，用含2g/L有效氯消毒液對各區(qū)所有儀器設備進行擦拭清潔。

JS-LJ-SMP0013-000

3.3.7.每次對使用過的移液器、鏡子用75%酒精棉球進行擦拭。

3.3.8.每周將待清潔工作服高壓滅菌后洗滌消毒，不同實驗區(qū)的工作服隔天洗滌。

JS-LJ-SMPOO14-000

文件修改程序

題目：文件修改程序起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-SMPOO14-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：保證文件完整性和有效性。

2.適用范圍：本實驗室管理體系的所有文件。

3.程序：

3.1.使用文件的操作人員在實驗過程中發(fā)現(xiàn)某個文件不適合實際工作，應書面向室負責

人提出申請。

3.2.申請在中心會議上通過，文件即可修改。

3.3.文件修改由原撰寫人執(zhí)行。

3.4.文件首次發(fā)行為第一版，當文件有修改后，修改狀態(tài)用阿拉伯數(shù)字表示，按1、2、

3、4順序遞增，標示在版號后。

3.5.修改的文件經(jīng)中心負責人審核批準、所有要求的授權簽字均已履行后，文件即為正

式發(fā)布，并同時生效執(zhí)行，原文件同時作廢。

3.6.文件修改內(nèi)容的相關記錄由實驗室負責人保存。

JS-LJ-SOPOOO1-000

石蠟包埋組織DNA提取標準操作規(guī)程

題目：石蠟包埋組織DNA提取標準操作規(guī)程起草：日期：

審核：日期：

編號：JS-LJ-SOPOOO1-001批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：采用細胞裂解和血紅素/蛋白沉淀技術，結合DNA制備膜選擇性地吸附

DNA,以從石蠟包埋組織中提取高質(zhì)量的基因組DNA。

2.適用范圍：本程序適用于所有石蠟包埋組織樣品的DNA提取。

3.方法原理：利用細胞裂解液裂解細胞核釋放基因組DNA,由硅膠膜柱可逆吸附基因

組DNA,經(jīng)蛋白酶消化、漂洗液清洗除去蛋白質(zhì)、脂質(zhì)以及多糖等雜質(zhì)后，用純化液洗

脫獲得基因組DNAo

4.實驗準備：

4.1.儀器和試劑：水浴鍋，小型常溫高速離心機，細胞/組織基因組DNA（離心柱）提

取試劑盒（百泰克），1.5ml離心管，20-200內(nèi)移液器及槍頭，100-100014移液器及

槍頭。

4.2.預備：實驗前10min打開水浴鍋，調(diào)至56C；另一水浴鍋調(diào)制90C；本實驗操

作過程在抽提專用實驗臺進行，穿實驗服，戴乳膠手套及口罩。漂洗液照使用前確認

加入無水乙醇，用記號筆在瓶上標記。其余溶液TL或CB如果有結晶或者沉淀，請于

37c水浴重新溶解，并混勻。

4.3.樣本確認：根據(jù)樣本登記表的信息對樣本進行確認，并確認樣本抽提類型、樣本

質(zhì)量及是否足量等。

5.實驗步驟：

5.1.組織脫蠟：開啟通風櫥；在通風處內(nèi)開啟1.5ml離心管管蓋，用移液槍加入1ml

二甲苯，用刀片將5-8片10Pm厚的石蠟生物組織切片（蠟塊組織處理：在石蠟包埋

組織樣品表面輕輕刮去不含組織的石蠟表層，再刮取5T0um厚的薄片，并保證剩余樣

本表面平整，嚴禁使用摳取，粉碎，切除等操作破壞組織樣本；若是蠟卷，則直接用

干凈的槍頭挑取適量樣本）輕輕刮入L5ml離心管，密蓋，振蕩器振蕩30s；于離心

機內(nèi)12000rpm離心2min,棄上清至專用廢液缸。注意不要棄掉沉淀。再加入1ml

JS-LJ-S0P0001-000

無水乙醇，密蓋，再用振蕩器充分振蕩混勻；于離心機內(nèi)120002111離心2111門，棄上

清專用廢液缸。打開管蓋，于室溫或37℃干燥10T5min,至酒精完全揮發(fā)，備用。過

程使用槍頭為一次性耗用物，不得反復使用。

5.2.消化：加入200間裂解液TL,重懸沉淀，加入3014蛋白酶K,混勻。置于64c

水浴鍋水浴lh（或直至樣品完全溶解），90℃水浴鍋水浴30min,短暫離心，試管壁上

的溶液收集到管底。

5.3.加入200m結合液CB,渦旋混勻，再加入100月異丙醇，漩渦震蕩充分混勻。

短暫離心，試管壁上的溶液收集到管底。

5.4.轉(zhuǎn)移溶液：將所有的溶液（不要沉淀）都轉(zhuǎn)移到一個吸附柱中，12000rpm離心

30s,倒去收集管中廢液。重新將吸附柱放回收集管中。

5.5.洗滌：向吸附柱內(nèi)加入500以抑制物去除劑IR,棄槍頭，12000rpm離心30s,

倒掉收集管中廢液。

5.6.向吸附柱內(nèi)加入700m漂洗液WB,12000rpm,離心30s,倒掉收集管中廢液，

加500川漂洗液WB,12000rpm,離心30s,倒掉收集管中廢液。

5.7.晾干吸附柱：空轉(zhuǎn)12000rpm2min,將吸附柱放入新的1.5ml離心管中，打開

吸附柱蓋子，室溫放置2min或以上以徹底晾干吸附材料中殘余的酒精。

5.8.洗脫：向吸附膜中間加入65射的洗脫緩沖液EB（65℃預熱），室溫放置2-3min,

12000rpm離心Imin,離心管中的液體即為抽提的基因組DNA。

5.8.濃度測量：用分光光度計測量DNA濃度。

6.質(zhì)控標準:DNA濃度高于20ng/l4,0D260/0D280約為1.度2.0則認為DNA可用,可

直接用于PCR等后續(xù)實驗，否則需重新抽提。若抽提好的DNA暫時不用，可置于-20℃保

存?zhèn)溆谩?/p>

7.關機及實驗臺整理：實驗完成后，關閉水浴鍋，所有用過的移液器調(diào)至最大量程，

擺放整齊，所有用過的東西歸回原位。最后用75%酒精噴灑實驗臺面，2min后擦拭干

凈。

8.注意事項：試劑盒在第一次使用前請按試劑瓶標簽說明在漂洗液WB中加入無水乙

醇，并做好標記；溶液使用后，應避免長期暴露于空氣中，用后應及時蓋緊蓋子。剩

余石蠟標本在下次接收樣本時返還客服部，并由客服簽字確認。

9.參考文獻：細胞、組織基因組DNA提取試劑盒說明書。（百泰克）

JS-LJ-SQP0002-000

石蠟包埋組織樣本RNA提取標準操作規(guī)程

題目：石蠟包埋組織樣本RNA提取標準操作起草：日期：

規(guī)程審核：日期：

編號：JS-LJ-SOP0002-000批準：日期：

頒發(fā)部門：技術部生效日期：

分發(fā)部門：技術部

1.目的：柱提法從石蠟包埋組織樣本中提取高質(zhì)量的RNA。

2.適用范圍：本程序適用于所有石蠟包埋組織樣品的RNA提取。

3.方法原理：改進的異硫氟酸胭/酚一步法裂解細胞和滅活RNA,然后總RNA在高離序

鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過一系列快速的漂洗離心的步驟，漂

洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，最后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅

基膜上洗脫。

4.實驗準備：

4.1.儀器和試劑：通風櫥，小型高速冷凍離心機；固定組織基因組RNA（離心柱）提

取試劑盒（百泰克）溶液PTL,蛋白酶K,裂解液MRL,去蛋白液RE,漂洗液R肌

RNase-freeH。70%乙醇，RNase-free吸附柱，氯仿，收集管，移液器及槍頭。

注意：所有接觸樣