天然藥化常見的鑒別反應(yīng)

自然藥化常見的鑒別反應(yīng)(部分)一、顏色反應(yīng)的對比(一\三苗類的顏色反應(yīng).Liebermann-Burchard反應(yīng)將樣品溶于乙酸酎中，加濃硫酸-乙酸酎(1:20)數(shù)滴，可產(chǎn)生黃■＞紅一紫一藍(lán)等顏色變化,最終褪色。.Kahldenberg反應(yīng)將樣品的氯仿或醇溶液點(diǎn)于濾紙上，噴20%五氯化鈾的氯仿溶液(或三氯化鋪飽和的氯仿溶液)，干燥后60℃-70℃

加熱，顯藍(lán)色、灰藍(lán)色、灰紫色等多種顏色。.Rosen-Heimer反應(yīng)將樣品溶液滴在濾紙上，噴25%三氯乏段乙醇溶液，加熱至100℃,呈些，漸漸變?yōu)樽仙?Salkowski反應(yīng)將樣品溶于氯仿，加入濃硫酸后,在硫酸層呈現(xiàn)紅色或藍(lán)色,氯仿層有綠色熒光消失。5.Tschugaeff反應(yīng)將樣品溶于冰乙酸中，加乙酰氯數(shù)滴及氯化鋅結(jié)晶數(shù)粒，稍加熱，則呈現(xiàn)淡紅色或紫紅色。(二卜留體類化合物的顏色反應(yīng).Liebermann-Burchard反應(yīng)將樣品溶于氯仿中，加濃硫酸-乙酸酊(1:20)數(shù)滴，可產(chǎn)生紅→紫—藍(lán)—綠一污綠等顏色變化,最終褪色。也可將樣品

溶于冰乙酸，加試劑產(chǎn)生同樣的反應(yīng)。.Kahldenberg反應(yīng)將樣品的氯仿或醇溶液點(diǎn)于濾紙上，噴20%至數(shù)維的氯仿溶液，干燥后60°C~70°C力口熱，樣品斑點(diǎn)顯藍(lán)色、灰藍(lán)色、

灰紫色等多種顏色。.Rosen-Heimer反應(yīng)將樣品溶液滴在濾紙上，噴25%三氯乙酸乙醇溶液,加熱至60℃,呈紅色,漸漸變?yōu)樽仙?Salkowski反應(yīng)將樣品溶于氯仿，加入濃硫酸后,在硫酸層呈現(xiàn)紅色或藍(lán)色,氯仿層有綠色熒光消失。5.Tschugaeff反應(yīng)將樣品溶于冰乙酸中，加乙酰氯數(shù)滴及氯化鋅結(jié)晶數(shù)粒，稍加熱，則呈現(xiàn)淡紅色或紫紅色。二、強(qiáng)心甘的顏色反應(yīng)1.Cl7位上不飽和內(nèi)酯環(huán)的顏色反應(yīng)甲型強(qiáng)心昔在堿性醇溶液中，五元不飽和內(nèi)酯環(huán)上的雙鍵移位產(chǎn)生C22活性亞甲基，能與活性亞甲基試劑作用而顯色。

乙型強(qiáng)心甘在堿性醇溶液中，不能產(chǎn)生活性亞甲基，無此類反應(yīng)。所以，采用此類反應(yīng)可區(qū)分甲、乙型強(qiáng)心昔。(1)Legal反應(yīng)：又稱亞硝酰鐵禽化鈉試劑反應(yīng)。取樣品1~2mg,溶于叱嚏2~3滴中，加3%亞硝酰鐵富化鈉溶液

和2mol∕L氫氧化鈉溶液各1滴，反應(yīng)液呈深紅色并慢慢退去。(2)Raymond反應(yīng)：陽性反應(yīng)是反應(yīng)液呈紫紅色。(3)Kedd反應(yīng)：又稱3,5-二硝基苯甲酸試劑反應(yīng)。陽性反應(yīng)是反應(yīng)液呈紅色或紫紅色。(4)Baljet反應(yīng)：又稱堿性苦味酸試劑反應(yīng)。陽性反應(yīng)是反應(yīng)液呈現(xiàn)橙色或橙紅色。2.0■去氧糖顏色反應(yīng)(1)Keller-Kiliani(K-K)反應(yīng)：此反應(yīng)在如乙邀溶液中進(jìn)行，如有去氧糖，乙酸層顯藍(lán)色。界面的顏色隨昔元羥基、

雙鍵的位置和數(shù)目不同而異，可顯紅色、綠色、黃色等。留意此反應(yīng)只對游離的。-去氧糖或?！鋈パ跆桥c昔元連接的昔顯色,對?！鋈パ跆呛推咸烟腔蚱渌u基糖連接的二糖、三糖

及乙?；摹?去氧糖不顯色。因它們在此條件下不能水解出。-去氧糖。此反應(yīng)陽性可確定去氧糖的存在,但對此反應(yīng)不顯色的有時未必具有完全的否定意義。(2)咕噸氫醇反應(yīng)：反應(yīng)試劑為咕噸氫醇試劑,此反應(yīng)極為靈敏，只要分子中有α-去氧糖即呈紅色，且分子中的。-去氧糖可定量地發(fā)生反應(yīng)，故還可用于定量分析。(3)對■二甲氨基苯甲醛反應(yīng)：分子中若有去氧糖可顯灰紅色斑點(diǎn)。(4)過碘酸-對硝基苯胺反應(yīng)：此反應(yīng)可在濾紙或薄層板上進(jìn)行，反應(yīng)過程是先噴過碘酸鈉水溶液，再噴對硝基苯胺試液，則快速在灰黃色背底上消失深黃色斑點(diǎn)，置紫外燈下觀看則為棕色背底上消失黃色熒光斑點(diǎn)。再噴以5%氫氧化鈉甲醇

溶液，則斑點(diǎn)轉(zhuǎn)為綠色。三|、醒類化合物的顏色反應(yīng) |醒類的顏色反應(yīng)主要基于其氧化還原性質(zhì)以及分子中的酚羥基嬴~(1)Feigl反應(yīng)：全部酶類衍生物在堿性條件下經(jīng)加熱能快速與醛類及鄰二硝基苯反應(yīng)生成紫色化合物。(2)無色亞甲藍(lán)顯色試驗(yàn)：無色亞甲藍(lán)溶液為苯醍類及蔡醍類的專用顯色劑。藍(lán)色斑點(diǎn),與蔥醍類化合物相區(qū)分。(3)Borntrager反應(yīng)：羥基醍類在堿性溶液中發(fā)生顏色轉(zhuǎn)變，會使顏色深入。多呈橙、紅、紫紅及藍(lán)色。羥基蔻能以

及具有游離酚羥基的蔥醍昔均可呈色，但蕙酚、蕙酮、二蕙酮類化合物則需氧化形成羥基蕙醍類化合物后才能呈色也就是不

顯色。(4)Kesting—Craven反應(yīng)(活性亞甲基)：苯酶及禁配類化合物當(dāng)其醍環(huán)上有未被取代的位置時，可在堿性條件下與

一些含有活性次甲基試劑(如乙酰乙酸酯、丙二酸酯、丙二睛等)的醇溶液反應(yīng)，生成藍(lán)綠色或藍(lán)紫色。蔡配的苯環(huán)上如有羥基取代，此反應(yīng)即減慢反應(yīng)速度或不反應(yīng)。慈醍類化合物因醍環(huán)兩側(cè)有苯環(huán)，不能發(fā)生該反應(yīng)，故

可加以區(qū)分。(5)與金屬離子的反應(yīng)：在慈釀類化合物中，假如有。-酚羥基或鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)時，則可與Pb2÷,Mg2+等金屬離子形

成絡(luò)合物。反應(yīng)靈敏，生成的顏色因分子中羥基的位置不同而不同，有助于識別羥基位置顯的顏色不同：環(huán)上有1個?！隽u基——橙色鄰二酚羥基——藍(lán)紫色對二酚羥基——顯紫到紫紅色各有1個羥基或還有間位羥基一橙紅色至紅色(6)對亞硝基二甲苯胺反應(yīng)：9位或10位未取代的羥基慈酮類化合物，尤其是1,8-二羥基衍生物，其翔基對位的亞甲

基上的氫很活潑，可與0.1%對亞硝基-二甲苯胺毗嚏溶液反應(yīng)縮合而產(chǎn)生各種顏色。本反應(yīng)可作為蕙酮類化合物的定性鑒別

反應(yīng)，不受蕙酶類、黃酮類、香豆素類、糖類及酚類化合物的干擾。四、香豆素的顏色反應(yīng)(1)異羥月虧酸鐵反應(yīng)香豆素類成分具有內(nèi)酯結(jié)構(gòu)，在堿性條件下開環(huán)，與鹽酸羥胺縮合生成異羥麗酸，在酸性條件下再與Fe3+絡(luò)合而顯紅

色。此反應(yīng)為香豆素的檢識或結(jié)構(gòu)鑒定。(2)酚羥基反應(yīng)香豆素類成分常具有酚羥基取代，可與三氟化鐵溶液反應(yīng)產(chǎn)生綠色至墨綠色沉淀。常采用與三氯化鐵溶液的反應(yīng)推斷酚

羥基的有無。四、黃酮類顏色反應(yīng)①HCI-Mg:多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物顯紅?紫紅色；②四氫硼鈉還原反應(yīng)：二氫黃酮類化合物專屬性較高；③錯鹽-枸檬酸反應(yīng)：3-0H,5-0H;④氨性氯化鐮反應(yīng)：鄰二酚羥基；⑤五氯化鏤：查耳酮。.還原反應(yīng)(1)鹽酸-鎂粉反應(yīng)①鑒定黃酮類化合物最常用的顏色反應(yīng)；②多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物顯紅?紫紅色，少數(shù)顯藍(lán)色或綠色，分子中特殊是當(dāng)B?環(huán)上有?0H

或-OCH3取代時，呈現(xiàn)的顏色亦即隨之深入。③查耳酮、橙酮、兒茶素類無該顯色反應(yīng)；④異黃酮類除少數(shù)例外，也不顯色。⑤留意事項(xiàng)：采用此反應(yīng)進(jìn)行黃配類化合物的鑒別時，需留意花色素類及部分橙配、查耳酮類等單純在濃鹽酸酸性下也

會發(fā)生顏色變化，消失假陽性結(jié)果。操作：必要時需預(yù)先作空白對比試驗(yàn)，即在供試液中不加鎂粉，而僅加入濃鹽酸進(jìn)行觀看，若產(chǎn)生紅色，則表明供試液

中含有花色素類或某些橙配或查耳配類。(2)鈉汞齊還原反應(yīng)黃酮、二氫黃酮、異黃酮、二氫異黃酮類顯紅色；黃酮醇類顯黃?淡紅色；二氫黃酮醇類顯恒同色。(3)四氫硼鈉還原反應(yīng)①四氫硼鈉(NaBH4)是對二氫黃酮類化合物專屬性較高的一種還原劑,此反應(yīng)可在試管中或?yàn)V紙上進(jìn)行。②現(xiàn)象：二氫黃酮類或二氫黃酮醇類被還原產(chǎn)生紅?紫紅色，其他黃酮類均為負(fù)反應(yīng)。③應(yīng)用：可用于鑒別二氫黃配類、二氫黃配醇類和其他黃酮類化合物。.與金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)具有3?羥基、4-翔基或5?羥基、4■叛基或鄰二酚羥基等結(jié)構(gòu)，則可以與很多金屬鹽類試劑如鋁鹽、錯鹽、鋰鹽等反應(yīng)，

生成有色的絡(luò)合物或有色沉淀，有的還產(chǎn)生熒光。(1)三氯化鋁反應(yīng)生成的絡(luò)合物多呈黃色，置紫外燈下顯鮮黃色熒光，但“■羥基黃酮醇或7,4?二羥基黃酮醇顯天藍(lán)色熒光。(2)錯鹽-枸檬酸反應(yīng)①應(yīng)用：采用此反應(yīng)鑒別黃酮類化合物分子中3-或5?0H的存在與否。②若消失黃色，說明3-0H或5-0H與皓鹽生成了絡(luò)合物。繼之再加入枸檬酸，如黃色不減褪，示有3?0H或3,5■二

0H;假如黃色顯著減褪，示無3-0H,但有5-0H。③原理：由于5-羥基、4-粉基與鉛鹽生成的絡(luò)合物沒有3-羥基、4-黑基錯絡(luò)合物穩(wěn)定。簡單被弱酸分解。此反應(yīng)也可在濾紙上進(jìn)行，得到的精鹽絡(luò)合物斑點(diǎn)多呈黃綠色并有熒光。(3)氨性氯化鋰反應(yīng)如產(chǎn)生綠色至棕色乃至黑色沉淀，則表示有鄰二酚羥基。(4)三氯化鐵反應(yīng)多含有酚羥基,能與三氯化鐵水溶液或醇溶液發(fā)生顯色反應(yīng)，可呈現(xiàn)紫、綠、藍(lán)等不同顏色。.堿性試劑反應(yīng)生成黃色、橙色或紅色等。.硼酸顯色反應(yīng).羥基黃酮、6'■羥基查耳酣,可與硼酸反應(yīng)，產(chǎn)生亮黃色。①一般在草酸存在下顯黃色并具有綠色熒光。②在枸椽酸丙酮存在的條件下，則只顯黃色而無熒光。.五氯化鋪反應(yīng)①查耳酮類則生成紅色或紫紅色沉淀，而黃配、二氫黃酮及黃酮醇類顯黃色至橙色。②應(yīng)用：區(qū)分查耳酮類與其他黃酮類化合物。.其他顯色反應(yīng)①應(yīng)用：Gibb's反應(yīng)也可用于鑒別酚羥基對位是否被取代。②方法：酚羥基對位未被取代者在加入Gibb's試劑后即顯藍(lán)色或藍(lán)綠色。.還原反應(yīng)(1)鹽酸-鎂粉反應(yīng)①鑒定黃酮類化合物最常用的顏色反應(yīng)；②多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物顯紅?紫紅色，少數(shù)顯藍(lán)色或綠色，分子中特殊是當(dāng)B?環(huán)上有-0H

或?0CH3取代時，呈現(xiàn)的顏色亦即隨之深入。③查耳酮、橙酮、兒茶素類無該顯色反應(yīng)；④異黃酮類除少數(shù)例外，也不顯色。⑤留意事項(xiàng)：采用此反應(yīng)進(jìn)行黃配類化合物的鑒別時，需留意花色素類及部分橙配、查耳酮類等單純在濃鹽酸酸性下也

會發(fā)生顏色變化，消失假陽性結(jié)果。操作：必要時需預(yù)先作空白對比試驗(yàn)，即在供試液中不加鎂粉，而僅加入濃鹽酸進(jìn)行觀看，若產(chǎn)生紅色，則表明供試液

中含有花色素類或某些橙配或查耳配類。(2)鈉汞齊還原反應(yīng)①方法：樣品的乙醇溶液中加入鈉汞齊，放置數(shù)分鐘至數(shù)小時或加熱，過濾，濾液用鹽酸酸化。②現(xiàn)象：黃酮、二氫黃酮、異黃酮、二氫異黃酮類顯紅色；黃酮醇類顯黃?淡紅色；二氫黃酮醇類顯棕黃色。(3)四氫硼鈉還原反應(yīng)①四氫硼鈉(NaBH4)是對二氫黃酮類化合物專屬性較高的一種還原劑，此反應(yīng)可在試管中或?yàn)V紙上進(jìn)行。②現(xiàn)象：二氫黃酮類或二氫黃配醇類被還原產(chǎn)生紅~紫紅色，其他黃酮類均為負(fù)反應(yīng)。③應(yīng)用：可用于鑒別二氫黃酮類、二氫黃酮醇類和其他黃酮類化合物。2.與金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)黃酮類化合物分子中若具有3?羥基、4?涉基或5?羥基、4-粉基或鄰二酚羥基等結(jié)構(gòu)，則可以與很多金屬鹽類試劑如鋁鹽、

皓鹽、鐮鹽等反應(yīng)，生成有色的絡(luò)合物或有色沉淀，有的還產(chǎn)生熒光。(1)三氯化鋁反應(yīng)①方法：此反應(yīng)可在濾紙、薄層上或試管中進(jìn)行。②現(xiàn)象：生成的絡(luò)合物多呈黃色，置紫外燈下顯鮮黃色熒光，但“■羥基黃酮醇或7,4,■二羥基黃酮醇顯天藍(lán)色熒光。(2)錯鹽-枸檬酸反應(yīng)①應(yīng)用：采用此反應(yīng)鑒別黃酮類化合物分子中3-或5-0H的存在與否。②方法：是取樣品0.5~1mg,用甲醇10ml溶解，加2%二氯氧錯甲醇溶液1ml,若消失黃色，說明3-0H或5-0H與

錯鹽生成了絡(luò)合物。繼之再加入2%枸檬酸甲醇溶液，如黃色不減褪，示有3?0H或3,5■二0H;假如黃色顯著減褪，示無

3-0H,但有5-OHo③原理：由于5-羥基、4-默基與錯鹽生成的絡(luò)合物沒有3-羥基、4-涉基錯絡(luò)合物穩(wěn)定。簡單被弱酸分解。此反應(yīng)也可在濾紙上進(jìn)行，得到的錯鹽絡(luò)合物斑點(diǎn)多呈黃綠色并有熒光。(3)氨性氯化鋰反應(yīng)黃酮類化合物的分子中假如有鄰二酚羥基，則可與氨性氯化鋰試劑反應(yīng)，如產(chǎn)生綠色至棕色乃至黑色沉淀，則表示有鄰

二酚羥基。(4)三氧化鐵反應(yīng)多數(shù)黃酮類化合物分子中含有酚羥基，能與三氯化鐵水溶液或醇溶液發(fā)生顯色反應(yīng)，可呈現(xiàn)紫、綠、藍(lán)等不同顏色。.堿性試劑反應(yīng)①現(xiàn)象：黃酮類化合物與堿性溶液可生成黃色、橙色或紅色等。②應(yīng)用：對于鑒別黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)類型有肯定意義。還可關(guān)心鑒別分子中某些結(jié)構(gòu)特征。.硼酸顯色反應(yīng)5-羥基黃酮、6'-羥基查耳配類化合物在無機(jī)酸或有機(jī)酸存在條件下，可與硼酸反應(yīng)，產(chǎn)生亮黃色。①一般在草酸存在下顯黃色并具有綠色熒光。②在枸椽酸丙酮存在的條件下，則只顯黃色而無熒光。.五氯化鋪反應(yīng)①方法：樣品的無水四氯化碳溶液，加2%五氯化睇的四氯化碳溶液，若為查耳酮類則生成紅色或紫紅色沉淀，而黃配、

二氫黃酮及黃酮醇類顯黃色至橙色，②應(yīng)用：查耳酮類與其他黃配類化合物。.其他顯色反應(yīng)①應(yīng)用：Gibb's反應(yīng)也可用于鑒別黃酮類化合物酚羥基對位是否被取代。②方法：將樣品溶于毗嚏中，酚羥基對位未被取代者在加入Gibb's試劑后即顯藍(lán)色或藍(lán)綠色。顯色總結(jié)：①HCI-Mg:多數(shù)黃酮、黃配醇、二氫黃酣及二氫黃鮑醇類化合物顯紅~紫紅色；②四氫硼鈉還原反應(yīng)：二氫黃酮類化合物專屬性較高；③皓鹽■枸椽酸反應(yīng)：3-OH,5-0H;④氨性氯化鋰反應(yīng)：鄰二酚羥基；⑤五氯化睇:查耳酮。膽汁酸類除具有留體母核的顏色反應(yīng)外，尚具有以下顏色反應(yīng)：（1）Pettenkofer反應(yīng)：取膽汁加蒸餡水及10%蔗糖溶液搖勻，沿試管管壁加入濃硫酸，則在兩液分界處消失紫色環(huán)。

其原理是蔗糖經(jīng)濃硫酸作用生成羥甲基糠醛，后者可與膽汁酸結(jié)合成紫色物質(zhì)。（2）GregoryPascoe反應(yīng)：取膽汁加45%硫酸及0.3%糠醛，水浴加熱，膽酸存在的溶液顯藍(lán)色。本反應(yīng)可用于膽酸

的定量分析。（3）Hammarsten反應(yīng)：取少量樣品，用20%珞酸溶液（20gCQ3在少量水中，用乙酸加至100m1）溶解，溫?zé)?，?/p>

酸為紫色，鵝去氧膽酸不顯色。Molish反應(yīng)--是糖和苗類的檢識反應(yīng)。樣品+濃硫酸+a蔡酚:界面處紫色環(huán)。碳昔和糖醛酸與Molish陰性。Smith降解一檢測糖的種類，連接方式，氧環(huán)大小?特點(diǎn)：反應(yīng)條件溫柔、易得到原昔元適用：昔元不穩(wěn)定的昔和碳昔，不適合昔元上有鄰二醇羥基或易被氧化的基團(tuán)的昔。樣品（含稀醇）+NalO4=糖開裂成醛+NaBH4=伯醇，再調(diào)pH=2,放置。Smith裂解獲得連一個醛基的昔元異羥月虧酸鐵反應(yīng)一鑒定內(nèi)酯環(huán)的存在：堿性條件下，香豆素內(nèi)酯開環(huán)，并與鹽酸羥胺縮合成異羥月虧酸，再在酸性條件下與三

價鐵離子絡(luò)合成鹽而顯紅色。酚羥基反應(yīng)：具酚羥基取代的香豆素類在水溶液中可與三氯化鐵試劑絡(luò)合而產(chǎn)生不同的顏色。酚羥基的對位未被取代，6?位上沒有取代，內(nèi)酯環(huán)堿化開環(huán)后，可與Gibb's試劑、Emerson試劑反應(yīng)。Gibb,s反應(yīng)：2,6-二氯（溪）苯醍氯亞胺試劑藍(lán)色。Emerson反應(yīng)：2%的4-氨基安替匹林和8%的鐵富化鉀試劑紅色。.