實驗動物遺傳控制

關于實驗動物遺傳控制重點掌握內容1、實驗動物遺傳學的基本概念：品種、品系、近交、雜交等。2、實驗動物的遺傳學分類和各類實驗動物的特點和應用3、實驗動物命名。4、實驗動物的遺傳質量控制及培育。第2頁,共97頁，2024年2月25日，星期天羅歇爾（Russel）和布魯克（Bruch）：

動物的基因型、表現(xiàn)型、演出型與環(huán)境之間的關系模式

發(fā)育環(huán)境周圍環(huán)境

┌────┐↓┌────┐↓┌────┐

│基因型│───--│表現(xiàn)型│-───-∣演出型│

└────┘└────┘└────┘

由此可見,遺傳與環(huán)境是影響實驗動物質量的重要因素，實現(xiàn)實驗動物標準化應從控制實驗動物的遺傳、微生物和寄生蟲、營養(yǎng)、環(huán)境等四方面著手。

第3頁,共97頁，2024年2月25日，星期天實驗動物育種與傳統(tǒng)家畜育種的異同：

以遺傳學理論為基礎，作為育種工作的指南。前者是培育在遺傳上有更大限定的實驗動物品系，專門為科學研究提供合適的實驗材料；后者是培育具有高產(chǎn)、高質特性的家畜品系，為人民生活提供豐富、優(yōu)質的食品。第4頁,共97頁，2024年2月25日，星期天第一節(jié)遺傳學基礎知識第5頁,共97頁，2024年2月25日，星期天一、遺傳與變異1、遺傳后代在形態(tài)、生理、生化等方面的特征與親代的一致性，稱為遺傳。

2、變異

后代與親代或者兄弟、姐妹間的不一致性，稱為變異。

遺傳的突破即是變異，變異的鞏固即是遺傳。沒有變異，遺傳只是生命的機械重復，生物不會進化。沒有遺傳，即使產(chǎn)生了變異，其特征也不會傳給后代。因此遺傳和變異是生物進化的根本動力。第6頁,共97頁，2024年2月25日，星期天二、染色體、基因、性狀1、染色質：

存在于細胞核內易于被堿性染料染色的物質的總稱。在細胞分裂期形成的在光學顯微鏡容易觀察到染色質絲狀體則稱為染色體。動物染色體組包括：常染色體-同源染色體，來自親本雙方，各一半；性染色體-哺乳動物♀為配子同型（XX）♂為配子異型（XY），鳥類和爬蟲類為♀為配子異型（ZW）♂為配子同型（ZZ）。第7頁,共97頁，2024年2月25日，星期天主要實驗動物的染色體數(shù)動物名稱染色體數(shù)（2n）動物名稱染色體數(shù)（2n）牛60豚鼠64馬64大鼠42豬38小鼠40狗78金黃地鼠44獼猴42中國地鼠22貓38鴿80兔44雞78山羊60蟾蜍22綿羊56青蛙26第8頁,共97頁，2024年2月25日，星期天2、基因（Gene）：

在DNA分子上占有一定位置的片段(約為500－1500個堿基對)，具有特定的核苷酸順序，表現(xiàn)有特定生物功能的作用單位，是傳遞遺傳信息的基本單位。DNA由腺嘌呤A、鳥嘌呤G、胸腺嘧啶T、胞嘧啶G構成，堿基配對（A-T、G-C）與糖和磷酸構成的2根骨架結合成雙螺旋鏈?；久~：基因：顯性基因、隱性基因、基因座、等位基因基因型：純合子、雜合子基因突變：自發(fā)突變、誘發(fā)突變第9頁,共97頁，2024年2月25日，星期天基因突變基因突變是指基因組DNA分子發(fā)生的突然的、可遺傳的變異現(xiàn)象。從分子水平上看，基因突變是指基因在結構上發(fā)生堿基對組成或排列順序的改變（一個或多個堿基的替代、插入、缺失、重排）。

可見突變--可見表型變化生化突變--生化功能變化突變類型顯性致死致死突變隱性致死條件致死突變第10頁,共97頁，2024年2月25日，星期天3、性狀可觀察的生物個體性質的單位，是生物體外觀結構、形態(tài)和內在生理、生化特性等的總稱。

生物體各種性質（性狀）的顯示是基因信息及其表達過程與環(huán)境交互作用的結果。表現(xiàn)型是基因型的外在顯現(xiàn)，基因型是表現(xiàn)型的內在控制?；久~：顯性性狀、隱性性狀、相對性狀、質量性狀、數(shù)量性狀、表現(xiàn)型（野生型、突變型）第11頁,共97頁，2024年2月25日，星期天三、遺傳定律1、一對相對性狀的遺傳

孟德爾顯隱性定律：當兩個純種雜交時，F(xiàn)1全為雜合子，只表現(xiàn)顯性基因控制的性狀(顯性性狀)。

孟德爾分離定律：當兩個純種雜交的子一代自群交配時，一對等位基因在子一代性細胞形成過程中，彼此隨機分離進入不同的性細胞中，通過性細胞在受精過程中的隨機結合，基因又重組成對，其子F2的基因型比例為1:2:1，表現(xiàn)型的分離比例是3:1。第12頁,共97頁，2024年2月25日，星期天2、兩對以上相對性狀的遺傳基因自由組合（獨立分配）定律：當具有兩對（或更多對）相對性狀的親本進行雜交，在子一代產(chǎn)生配子時，在等位基因分離的同時，非同源染色體上的基因表現(xiàn)為自由組合。其實質是非等位基因自由組合，不同染色體上的等位基因的分離或組合是彼此間互不干擾的，各自獨立地分配到配子中去。因此也稱為獨立分配律。基因連鎖與互換（重組）定律在進行減數(shù)分裂形成配子時，位于同一條染色體上的不同基因，常常連在一起進入配子；在減數(shù)分裂形成四分體時，位于同源染色體上的等位基因有時會隨著非姐妹染色單體的交換而發(fā)生交換，因而產(chǎn)生了基因的重組。

第13頁,共97頁，2024年2月25日，星期天分離定律和自由組合定律的區(qū)別：前者是一對等位基因的分離，后者是非等位基因間的分離,并且這些非等位基因還必須位于不同的染色體上。

實現(xiàn)自由組合定律子二代分離規(guī)律的條件：一符合分離定律遺傳應具有的各項條件之外；二就是控制兩對或更多對相對性狀的等位基因不在同一條染色體上，而且各對等位基因不產(chǎn)生任何相互作用?；虻倪B鎖和交換定律與基因的自由組合定律并不矛盾，它們是在不同情況下發(fā)生的遺傳規(guī)律：位于非同源染色體上的兩對(或多對)基因，是按照自由組合定律向后代傳遞的，而位于同源染色體上的兩對(或多對)基因，則是按照連鎖和交換定律向后代傳遞的。第14頁,共97頁，2024年2月25日，星期天由孟德爾顯隱性定律和分離定律可知：●基因決定遺傳性狀，顯隱性基因控制相對性狀；●體細胞中二個基因控制一個性狀；●在性細胞形成過程中成對的基因彼此分離；●每個性細胞含有一半基因；●性細胞隨機結合；●受精形成合子時，♂♀雙方提供的基因（各一個個）相互影響，決定個體性狀?；蚺c性狀的關系：一個基因決定一個性狀；一個基因決定多個性狀；多個基因決定一個性狀；第15頁,共97頁，2024年2月25日，星期天四、群體遺傳學

群體遺傳學（Populationgenetics）又稱族群遺傳學或種群遺傳學，是應用數(shù)學和統(tǒng)計學方法研究生物群體中的基因頻率和基因型頻率以及影響這些頻率的遺傳學因素，從而了解生物群體遺傳結構的變化規(guī)律。

通俗而言，群體遺傳學以群體為單位研究群體內遺傳結構及其變化規(guī)律的遺傳學分支學科。

四種演化動力包括自然選擇、遺傳漂變、突變以及基因流產(chǎn)。群體遺傳學也研究種群的分類，以及種群的空間結構，同時也試圖解釋諸如適應和物種形成現(xiàn)象的理論。第16頁,共97頁，2024年2月25日，星期天1、群體：又稱為孟德爾群體（Mendelianpopulation）指一定地域內一群可以相互交配的所有生物個體。2、基因頻率和基因型頻率基因型頻率（genotypefrequency）：群體中不同基因型個體所占的比例?；蝾l率（genefrequency）：在一個群體中，在所研究的基因座位上不同的等位基因所占的比例。

第17頁,共97頁，2024年2月25日，星期天3、Hardy－Weinberg定律

在一個完全隨機交配的大群體中，如果沒有突變、選擇、基因遷移等因素的干擾，基因頻率和基因型頻率在世代之間保持不變。也稱為遺傳平衡定律（lawofgeneticequilibrium）平衡群體：在沒有突變、選擇、遷移的情況下，隨機交配群體的基因型頻率與等位基因頻率在世代間保持不變，這樣的群體稱為平衡群體。

第18頁,共97頁，2024年2月25日，星期天平衡群體的基因頻率及基因型頻率：

合子基因頻率(即合子形成的概率)等于配子基因頻率的乘積：

三種基因型的頻率為：

AA:P=p2

Aa:H=2pq

aa:Q=q2正好是（p+q)2二項式的展開式（p+q)2=p2+2pq+q2第19頁,共97頁，2024年2月25日，星期天影響群體Hardy-Weinberg平衡的因素：

隨機遺傳漂移近親交配遷移突變選擇

改變基因頻率的因素：

突變、選擇、遺傳漂變（奠基者效應）

第20頁,共97頁，2024年2月25日，星期天1）基因突變是新基因的唯一來源，是自然選擇的原始材料；對基因頻率的影響也是巨大的。有些突變能影響到動物形態(tài)和生理功能.而另一些突變可能對動物生存影響不大.突變基因也可能通過回復突變轉變?yōu)樵蓄愋偷幕?。?1頁,共97頁，2024年2月25日，星期天突變基因：Aa

初始頻率：p0q0

下一代頻率：p1=p0-up0＋vq0q１=q0-vq0＋up0

改變量：△p=p1－q0=-up0+vq0△q=q1-q0=-vq0+up0

由于u和v朝相反的方向起作用。Ａ突變成為a越多，則將會有更多的a突變成為Ａ。因此，不難看出，朝兩個方向突變的速率可能達到平衡狀態(tài)，即基因頻率改變量為零。這時：△q=up-vq=0up=vqu(1-q)-vq=0q=u/(u+v)同理，p=v/(u+v)第22頁,共97頁，2024年2月25日，星期天2）選擇有自然選擇和人工選擇。自然選擇的結果總是使群體向著更加適應于環(huán)境的方向發(fā)展。影響基因型頻率和基因的頻率；選擇作用發(fā)生在育齡期以后，對基因型頻率和基因頻率的影響不大。選擇的強弱是用選擇系數(shù)（s）來表示，是指某一基因型個體減少繁殖下一代的比例。假設不受選擇的基因型個體對下一代的貢獻為100%或1。如：s=1/1000,表示對于某一基因來說有1/1000的個體不能參與繁殖．那么受選擇的個體對下代的貢獻將為1-s。這里的1-s被稱為某一基因型的適合度或選擇值。第23頁,共97頁，2024年2月25日，星期天★假設有兩個等位基因Ａ和a，初始頻率為p和q，Ａ對a為完全顯性，同時對aa個體的選擇系數(shù)為s，那么三種基因型個體對下一代的貢獻為：

AAAaaasumq0p22pqq211-s111-sq1p22pqq2(1-s)1-sq2第24頁,共97頁，2024年2月25日，星期天★由此可見：下一代基因型頻率的總和不再是1?！镉衧q2部分的個體由于選擇而被淘汰?！镌谙乱淮?，a的基因頻率為q1★由選擇所造成的基因頻率改變量△q為：△q=q1-q0q0=Q+H*1/2=(pq+q2)/Nq1=Q+H*1/2=[pq+q2(1-s)]/N△q=q1-q0=[(pq+q2-sq2)/(1-sq2)]-(pq+q2)=-[sq2(1-q)]/(1-sq2)△q的大小取決兩個因素，選擇系數(shù)和初始頻率?！鱭為負值說明a基因的頻率每代都要減少。第25頁,共97頁，2024年2月25日，星期天3）遺傳漂變（geneticdrift）：由于群體較小和偶然事件（或者是非隨機取樣）所造成的基因頻率的不確定性變化，被稱為隨機遺傳漂變（randomgeneticdrift），或稱Wright效應。當一個群體起源于少數(shù)幾個個體時，就會發(fā)生遺傳漂變的極端情況，稱為奠基者效應：（foundereffect）。這最初的少數(shù)個體就是奠基者。例如：假設群體大小為N，某位點上基因A的頻率為p，另一個等位基因a的頻率為q。抽樣誤差σ=/pq/2N如果p=q=0.5，N=50及5000時，這時的標準偏差為：N=50時，σ＝0.05；N=5000時，σ＝0.005第26頁,共97頁，2024年2月25日，星期天正態(tài)分布曲線群體越小，當N=50,p=0.5時，σ＝0.05，抽樣誤差較大，p一代之后偏離0.5的概率較大。群體越大，當N=5000時，σ＝0.005,p一代之后偏離0.5的概率較小?？梢哉f很少出現(xiàn)抽樣誤差。第27頁,共97頁，2024年2月25日，星期天4）近親交配●在個體數(shù)有限的群體中，即使交配是完全隨機進行的，近親交配也是不可避免的。群體越小，則群體中隨機抽取兩個個體有近親關系的概率越大?！耠S著世代的推移，如果沒有遷移和選擇等因素的影響，群體的近交系數(shù)一直有增加的趨勢。●群體越小，近交系數(shù)增加越快。第28頁,共97頁，2024年2月25日，星期天近交的結果1、增加基因純合性，即降低雜合性，導致動物群體分離為不同基因型的品系；2、必然導致近交衰退。表現(xiàn)為生長、成活、生育、抗病、適應等能力減退。

主要原因：隱性有害基因的暴露；多基因平衡遭到破壞。第29頁,共97頁，2024年2月25日，星期天5）遷移●遷移率（m）=遷入個體數(shù)/原群體數(shù)和遷入數(shù)之和(如1/100)●原群體的個體比例為:1-m。(如:99/100)●就某個基因的頻率而言，如果遷入者為qm，而原群體中的為q0，遷移后混合群體的頻率q1則為：q1=mqm+(1-m)q0=m(qm-q0)+q0●基因頻率變化量（△q）=q1-q0=m(qm-q0)●遷移對群體基因頻率的影響程度取決于遷移率m的大小和遷入者的基因頻率與原群體之間的基因頻率之差。第30頁,共97頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)

實驗動物遺傳學分類第31頁,共97頁，2024年2月25日，星期天■按生物學分類：

界（kingdom,regnum）、門（phylum,phylum）、綱（class,classis）、目（order,ordo）、科（family,familia）、屬（genus,genus）、種（pecies,species）；例如：

小鼠屬于動物界、脊索動物門、脊椎動物亞門、哺乳綱、真獸亞綱、嚙齒目、鼠科、小鼠屬、小家鼠種。種（specis）：生物分類學上的基本單位，由自然選擇形成。同種動物能共同生活、交配、繁衍后代；異種動物之間存在生殖隔離。

第32頁,共97頁，2024年2月25日，星期天■按實驗動物學分類：品種、品系

品種(breed)：

是種以下非自然分類單位。是人們根

據(jù)不同需要而對動物進行改良、選擇，

即定向培育，并具有某種特定外形和

生物學特性的動物群體，其特性能較

穩(wěn)定地遺傳。

品系（株strain)：

為實驗動物學的專用名詞,指來源明確，

并采用某種交配方法繁殖，而具有相似

的外貌、獨特的生物學特征和穩(wěn)定的遺

傳特性，可用于不同實驗目的的動物群體。

第33頁,共97頁，2024年2月25日，星期天■按實驗動物遺傳學控制分類——

近交系（含突變系）

封閉群

雜交群

舉例：NIH小鼠：

……小鼠屬

小家鼠種

實驗動物學分類：品種是NIH，

品系是封閉群。

第34頁,共97頁，2024年2月25日，星期天■由遺傳工程產(chǎn)生的新型品系

嵌合體小鼠(mouseaggregationchimeras)

由中山大學研制的黑白斑塊互相嵌合的嵌合體小鼠，它的皮膚中黑和白的部分分別來自黑色和白色皮膚的父母從懷孕白母鼠子宮內取出受精卵，在體外培養(yǎng)成早期胚胎后，從這胚胎中取出胚胎干細胞，在體外培養(yǎng)五個月，建立一個可無限擴增的細胞系接著將此白鼠的干細胞系細胞注入黑色小鼠早期胚胎進行“嫁接”，再把這枚“嫁接”的種子移入“假母”子宮內，經(jīng)三周后得到嵌合體小鼠。

第35頁,共97頁，2024年2月25日，星期天

科研人員先提取白色小鼠３·５天胎齡的囊胚，然后在其體內注射８-12個轉染了綠色熒光蛋白基因的黑色小鼠胚胎干細胞。在獲得

３６３枚嵌合了黑、白兩種小鼠細胞的胚胎后科研人員將其中２３７枚分別移植到１8只小鼠假母（真母在取上述胚胎時已經(jīng)死亡）的子宮里，懷胎３周后，結果只有４只假母能分娩，１６只小鼠中有６只存活，其中４只經(jīng)藍光照射能發(fā)出綠色熒光。遺憾的是最后僅有一只熒光鼠存活在自然光下。，

中山大學研制的綠色熒光小鼠第36頁,共97頁，2024年2月25日，星期天研制熒光鼠的意義在于摸清嵌合體的規(guī)律，為基礎研究提供幫助。例如，科研人員將神經(jīng)干細胞植入小鼠體內治療帕金森，以前沒有熒光鼠的時候，很難分辨打入小鼠體內的神經(jīng)干細胞與小鼠自身的細胞的不同。如果采用熒光鼠來做實驗，科研人員就可在特制的熒光體視顯微鏡下看到，陽性小鼠的皮膚、腦部、肺部發(fā)出綠色熒光，由此可觀察胚胎干細胞發(fā)育走向。第37頁,共97頁，2024年2月25日，星期天單親純合雙倍體動物

轉基因動物

“超級小鼠”正常小鼠轉基因魚轉基因魚第38頁,共97頁，2024年2月25日，星期天一、近交系動物（一）基本概念

近交和近交系亞系和支系重組近交系重組同類系突變系同源突變近交系同源導入近交系

第39頁,共97頁，2024年2月25日，星期天1、近交和近交系

近交(inbreding)——有意識地從一個動物群體中選用血緣關系比較接近的雌雄個體，即有共同祖先的兄妹、母子、父女進行交配。

近交系(inbredstrain)動物——經(jīng)至少連續(xù)20代的全同胞兄妹之間或親代與子代之間交配培育而成的動物。如BALB/c小鼠、C57BL/6J小鼠等。

2、亞系和支系在一個近交系內,因殘余的雜合性或突變等原因可導致該系動物形成數(shù)個具有部分遺傳組成差異的分支,稱亞系(substrain)。此外還通常把經(jīng)過技術處理的品系稱為支系(subline)。第40頁,共97頁，2024年2月25日，星期天

3、特殊類型的近交系動物

重組近交系

（recombinantinbredstrainRI）

由兩個近交系雜交后，經(jīng)連續(xù)20代以上兄妹交配培

育成的近交系，稱重組近交系。

重組同類系

（recombinantcongenicstrainRC）

由兩個近交系雜交后，子代與兩個親代近交系中的

一個近交系進行數(shù)次回交（通常回交2次），再經(jīng)

無對特殊基因選擇的近親交配而育成的近交系。

第41頁,共97頁，2024年2月25日，星期天

突變系（mutantstrain）

保持有特殊突變基因的品系動物，即正常染色體的基因發(fā)生了變異具有各種遺傳缺陷的動物。同源突變近交系（coisogenicinbredstrain）

兩個近交系，除了一個指明位點等位基因不同外，其他遺傳基因全部相同。

同源導入近交系（congenicinbredstrain）

通過雜交-互交或回交等方式將一個基因導入到近交系中，由此形成一個新的近交系。第42頁,共97頁，2024年2月25日，星期天

（二）近交系動物的命名

1、以一系列字母和數(shù)字作為品系代碼：

A、DBA，C57BL、C3H，615、129

2、亞系的命名：

在原品系名稱后加“/”，后標明亞系符號。

亞系符號有：

1）數(shù)字：DBA/1；

2）培育或生產(chǎn)亞系的單位或個人英文縮寫：

CBA/J

3）當一個近交系擁有2個亞系時，可在數(shù)字后再

加保持者的英文縮寫,如：C57BL/6J第43頁,共97頁，2024年2月25日，星期天

3、支系命名：1）“f”——代乳培育。2）“e”或“o”——受精卵或卵巢移植培育。3）“p”——移植胚胎經(jīng)冷凍保存的品系。4）復合亞系符號——用于由于代乳或導入一個外來基因而形成的復合株符號，如：DBA/2eB/De表示由Deringer把DBA/2的受精卵轉輸給C57BL，并由Deringer保種。第44頁,共97頁，2024年2月25日，星期天4、突變系命名：在原品系名稱后加連字號“-”和突變基因符號。例如：Balb/c-nu/nu,表示Balb/c小鼠品系的nu突變基因。第45頁,共97頁，2024年2月25日，星期天

5、近交品系動物綜合表示方法

DBA/1fLACA/LAC---

“DBA”表示小鼠近交品系名稱

“1”表示亞系

“f”表示代乳

“LACA”表示代乳母鼠品系名稱

“LAC”表示培育單位代號

含義：英國實驗動物中心（LAC）用自己培育的

小鼠（LACA）代乳而培育的DBA/1小鼠

第46頁,共97頁，2024年2月25日，星期天常見近交系縮寫近交系縮寫名稱

C57BL／6B6BALB／cCDBA／2D2C3HC3CBACBAKRAK

第47頁,共97頁，2024年2月25日，星期天亞系常用代號BCrBirmingham大學腫瘤研究所Cd

比利時Libre大學AlbertClande博士Crgl

美國伯克萊加利福尼亞大學腫瘤研究所遺傳實驗室CRJ

日本CharlesRiverJapan，Inc公司An

美國國立腫瘤研究所H·B·Andervont博士Gr

英國倫敦大學動物系H·Grunebery博士Gro

荷蘭Groningen大學遺傳研究所H

英國醫(yī)學研究協(xié)會放射醫(yī)學部門所在地HarwellHe

美國國立腫瘤研究所的W·E·Heston博士第48頁,共97頁，2024年2月25日，星期天H-2Histocompatibility-2allele組織相容性抗血清Ⅱ型特性ICLCInternationalCommitteeonlaborataryAnimalScience國際實驗動物科學委員會ICR

美國國立腫瘤研究所InstituteforCancerResearchJax

美國杰克遜實驗室JacksonMemorielLaboratoryJCL

日本柯力亞（Clea）公司（株式會社）JCR日本國立腫瘤研究所（JapenCancerResearch）Jic

日本實驗動物中央研究所Lac

英國M.R.C實驗動物中心NIH

美國國立衛(wèi)生研究院……

第49頁,共97頁，2024年2月25日，星期天（三）近交系動物的特點

1.基因純合性（遺傳穩(wěn)定性）

2.遺傳同源性（同基因性）

3不同品系遺傳的獨特性(可辨別性)

5.對外界因素的敏感性

6.遺傳.同一品系表型的一致性

4.組成獨特性

7.背景資料可查性

8.國際分布廣泛性

第50頁,共97頁，2024年2月25日，星期天（四）近交系動物的應用

組織移植—同基因性制作疾病動物模型—基因純合性比較遺傳學研究—品系間的獨特性

第51頁,共97頁，2024年2月25日，星期天常用近交系小鼠：AAKRBALB/cCBAC3HC57BLDBA615TA1TA2C-1等大鼠：BNF344SHR等第52頁,共97頁，2024年2月25日，星期天二、封閉群動物（一）封閉群動物的定義

封閉群(closedcolony)動物又稱遠交群(outbredstock)動物，是指以非近親交配方式進行繁殖生產(chǎn)的一個種群，在不從其外部引入新個體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上的動物。如昆明種小鼠、SD大鼠等。（二）封閉群動物的命名

由2—4個大寫英文字母命名，種群名稱前標明保持者的英文縮寫。如：N：NIH—美國國立衛(wèi)生院保持的NIH小鼠。第53頁,共97頁，2024年2月25日，星期天常見的封閉群小鼠：NIH小鼠，KM小鼠，ICR小鼠，LACA小鼠；大鼠：Wister大鼠，SD大鼠，Long-Evans,Brown-Norway;兔：NewZealand兔，日本大耳白，青紫藍兔等。第54頁,共97頁，2024年2月25日，星期天SD,WISTER,ICR,KM第55頁,共97頁，2024年2月25日，星期天(三）封閉群動物的特點1.生長發(fā)育特點--

繁殖率高；小鼠生長周期短；小鼠成熟早：性成熟♀35-50d♂45-60d體成熟♀65-75d♂70-80d小鼠性活動保持1年，繁殖力強。

2.實驗特點--重復性差第56頁,共97頁，2024年2月25日，星期天

3.遺傳特點--

遺傳雜合性程度較高，遺傳組成接近自然群體；

基因型頻率保持相對穩(wěn)定，使群體在一定范圍

內保持相對穩(wěn)定的特征。

4.繁殖特點--

繁殖量大，方法簡單、成本低、抗病力強。要求一定群體大小，隨機交配，繁殖一定的代數(shù).第57頁,共97頁，2024年2月25日，星期天（四）應用1.遺傳

封閉群動物的遺傳組成具有很高的雜合性。因此在遺傳中可作為選擇實驗的基礎群體，用于對某些性狀遺傳力的研究。同時，封閉群可攜帶大量的隱性有害基因，可用于估計群體對自發(fā)或誘發(fā)突變的遺傳負荷能力。2.藥物篩選和毒性試驗3.較強的繁殖力和生活力第58頁,共97頁，2024年2月25日，星期天三、雜交群動物（一）雜交群動物概念：由不同品系或種群之間雜交產(chǎn)生的后代，稱雜交群(hybrids)動物、系統(tǒng)雜交動物、雜交系或雜交一代動物，簡稱F1代動物。（二）雜交群動物的命名：

雌性親代在前，雄性親代在后，兩者之間以“X”相連。

如：AKRDBA2F1表示AKR為母系，DBA/2為父系雜交后生育的雜種一代。一般可簡寫為AKD2F1，

第59頁,共97頁，2024年2月25日，星期天F1的區(qū)別舉例

♀C3H×♂C57BL/6（高發(fā)品系）（低發(fā)品系）↓C3B6F1（高發(fā)品系）♀C57BL/6×♂C3H（低發(fā)品系）（高發(fā)品系）↓B6C3F1（低發(fā)品系）第60頁,共97頁，2024年2月25日，星期天（三）雜交群動物的特點1.遺傳均質性--個體的雜合性,遺傳型、表現(xiàn)型都一致；2.F2會發(fā)生遺傳性狀分離--一般不宜繼續(xù)繁殖和培育近交系；3.雜交優(yōu)勢--生命力、適應性、抗病力強，繁殖旺盛。

4.F2具有親代雙親的特點。5.實驗重復性好--

廣泛用于各類實驗研究，其研究結果易于重復，便于國際交流。第61頁,共97頁，2024年2月25日，星期天6.國際分布廣--

容易獲得；7.適當?shù)乇４嫫淠冈唇惶匦?-

無論何時都能重復育成具有相同性狀的個性；8.容易獲得該近交系中尚未發(fā)現(xiàn)的特性的雜交個體；9.利用率高--

在分析用4元雜交或F2代的動物做的實驗結果，還能利用其F1代或其基礎近交系（親本品系）.第62頁,共97頁，2024年2月25日，星期天（四）雜交群動物的在生物醫(yī)學研究中的應用

干細胞研究

免疫學研究細胞動力學研究

單克隆抗體研究第63頁,共97頁，2024年2月25日，星期天具有遺傳和表型上的一致性就某些生物學特征而言，雜種一代比近交系動物具有更高的一致性，不容易受環(huán)境因素變化的影響，廣泛地適用于營養(yǎng)、藥物、病原和激素的生物評估。適合于攜帶保存某些有害基因，常用來做長時間慢性致死實驗，也可作為代乳動物以及卵、胚胎和卵巢移植的受體。具有雜合的遺傳組成，同時又以能接受兩個親本品系的細胞、組織、器官和腫瘤的移植，適用于免疫學和發(fā)育生物學等研究領域。作為某些人類疾病研究的動物模型。例如，NZB×NZWF1是自身免疫缺陷的動物模型，C3H×IF1是肥胖病和糖尿病的模型。第64頁,共97頁，2024年2月25日，星期天同基因型與不同基因型動物的特性比較特性同基因型不同基因型近交系F1動物遠交系F2或雜種動物同基因性高高不高低純合性高低低（可變性）低長期遺傳穩(wěn)定性高高低低可檢定的客觀指標高高中等低表型一致性高較高中等低獨特性高較高中等低國際分別很廣很廣有限及有限背景資料多中等中等少第65頁,共97頁，2024年2月25日，星期天第三節(jié)

實驗動物育種第66頁,共97頁，2024年2月25日，星期天一、近交系的培育1.原始材料的選擇從野生群中選擇

---具有未知遺傳特性，繁殖困難；從雜交群中選擇

---材料廣泛第67頁,共97頁，2024年2月25日，星期天2.交配方式單線法：從近交系原種選3-5對兄妹交配，優(yōu)選其一近交傳代；特點是容易斷代、平行法：從近交系原種選3-5對兄妹交配，每隊都選留下一代進行近交傳代；特點是個體不均一，選擇范圍大，易分化。優(yōu)選法：從近交系原種選擇N對兄妹交配，每對每代均選留N對兄妹近交傳代；具有前二法有優(yōu)點。第68頁,共97頁，2024年2月25日，星期天3.近交系引起的變化降低雜合性，增加純合性；暴露突變的隱性雜合基因；可將群體分化為不同基因型品系；引起近交衰退—有害隱性基因暴露和多基因平衡遭破壞。第69頁,共97頁，2024年2月25日，星期天二、封閉群的培育

假如將兩個近交系進行交配。培育出一個新的群體。此時其中一個近交系的基因型假定為A/A；

另一近交系為a/a，則兩者雜交以后產(chǎn)生的F1，其基因A/a，然后讓F1進行隨機交配，則F2代從理論上講，基因型分離的比例A/A為25%，A/a為50%，a/a為25%。再讓F2進行隨機交配，生下的F3，其基因型的比例和F2一樣，不發(fā)生變化。第70頁,共97頁，2024年2月25日，星期天1.培育示意圖第71頁,共97頁，2024年2月25日，星期天2.培育原理在一個無限大的隨機交配群體中，如果沒有突變、選擇和遷移等因素的作用，則每代的基因頻率和基因型頻率保持不變。群體一旦具有世代恒定不變的基因頻率和基因型頻率，就稱為Hardy-Weinberg平衡群體。Hardy-Weinberg平衡的條件：無限個個體構成的群體，群體內部完全進行隨機交配。第72頁,共97頁，2024年2月25日，星期天3、封閉群交配系統(tǒng)randommatingsystem（隨即交配或分組交配）maximum-avoidanceofinbreedingsystem（最大避免近親交配）circularmatingsystem（循環(huán)交配）第73頁,共97頁，2024年2月25日，星期天

randommatingsystem（隨即交配或分組交配）

具體做法是將被選留的同一批種鼠分組編號

后，♀♂分籠飼養(yǎng)。配種時♀♂鼠應按組別交叉配種。這樣就能避免同窩♀♂的交配。

第1組♂鼠與3組♀鼠交配：第2組♂鼠1組♀鼠交配：第3組♂鼠2組♀鼠交配第74頁,共97頁，2024年2月25日，星期天maximum-avoidanceofinbreedingsystem（最大避免近親交配）

這種交配方法可完全避免兄妹配，使△F最小。實質上是安排堂兄妹之間進行交配。因此，這種交配方法也稱為堂兄妹交配系統(tǒng)。這種交配方法適用于小群體繁殖，群體少于32。第75頁,共97頁，2024年2月25日，星期天第76頁,共97頁，2024年2月25日，星期天circularmatingsystem（循環(huán)交配）

這種交配系統(tǒng)的實質是每代都安排半同胞個體交配，和最大限度避免近交系統(tǒng)一樣，只適用于小群體的飼養(yǎng)繁殖。(參見圖)。第77頁,共97頁，2024年2月25日，星期天群體大小對封閉群的影響:群體大?。褐溉后w中雌雄動物的具體數(shù)目，是群體遺傳學的術語一般用N表示。有效群體大小:是指群體中能夠參與繁殖的動物實際數(shù)量。一般用Ne表示。第78頁,共97頁，2024年2月25日，星期天影響有效群體大小的因素:雌雄個體的比例參與各代繁殖的個體數(shù)群體內個體傳給下一代配子數(shù)每代動物的數(shù)量第79頁,共97頁，2024年2月25日，星期天二、雜交群的培育1.二元雜交（正逆交配）C57BL/6（♀）×DBA/2（♂）DBA/2（♀）×C57BL/6（♂）↓↓B6D2F1D2B6F1

Y染色體，B6D2F1的雄性帶有來自DBA/2的Y染色體，而D2B6F1則帶有來自C57BL/6的Y染色體；母性因素，包括細胞質成分，子宮環(huán)境和母乳。B6D2F1是從C57BL/6接受這些因素，而D2B6F1從DBA/2接受這些因素。第80頁,共97頁，2024年2月25日，星期天2.多元雜交兩個以上的近交系雜交稱為多元雜交，如3元雜交，4元雜交等。

A×BA×BC×D↓↓F1×CF1×F1↓↓3元雜交動物4元雜交動物第81頁,共97頁，2024年2月25日，星期天第四節(jié)

實驗動物遺傳質量監(jiān)測第82頁,共97頁，2024年2月25日，星期天一、遺傳監(jiān)測目的目的：是為了證實各品系動物應具有的遺傳特性，檢查是否發(fā)生遺傳突變和是否混入其他血緣動物以及是否發(fā)生錯誤交配而造成遺傳污染等，以確保被監(jiān)測對象符合該品系的要求。原因:擴散后變異的影響、殘余雜合子的影響、管理的影響、特殊品種的錯配。第83頁,共97頁，2024年2月25日，星期天二、遺傳監(jiān)測的主要方法形態(tài)學方法：主要監(jiān)測外形特征，如毛色基因測試法、下頜骨測定法；免疫學監(jiān)測方法：包括皮膚移植法、混合淋巴細胞培養(yǎng)法、腫瘤移植法、血清反應法。蛋白質和酶監(jiān)測：通常使用生化標記的方法進行檢測。分子生物學技術應用監(jiān)測

：限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)、DNA指紋技術和多聚酶鏈反應開始應用到實驗動物遺傳監(jiān)測中。第84頁,共97頁，2024年2月25日，星期天

（一）、形態(tài)學監(jiān)測1．毛色基因檢測（Coat

Color

Gene

Testing）

原理：被毛顏色的變化是位于細胞水平的生化過程，它是由基因控制。在一個小鼠品系中，小鼠毛色形狀，主要受位于不同染色體上Aa、Bb、Cc三個位點的基因控制。由于基因效應的相互作用，白化小鼠的C基因是隱性等位基因，當cc基因型存在時，可遮攔任何色素基因顯示顏色反應，而表現(xiàn)白色。方法：毛色基因測試法就是根據(jù)這一原理，用已經(jīng)知道隱性毛色基因的有色近交系小鼠與被測的白化小鼠交配，按照基因分離規(guī)律和自由重組規(guī)律，觀測第一代小鼠顯示的毛色在3-4周以上，確定毛色基因型，并檢查有無污染。第85頁,共97頁，2024年2月25日，星期天2．下頜骨測定法（Mandible

Measurement）

原理：動物的骨骼形態(tài)具有高度的遺傳性，而各種骨骼的形態(tài)、大小及其出現(xiàn)的差異均可以作為鑒定品系的方法。利用下頜骨分析法來鑒別和檢測大、小鼠

的亞系變異。方法：將年齡、性別、體重相當?shù)拇?、小鼠處死，小心剪下腦部，煮沸2-3min，加入蛋白酶，恒溫保持過夜，去除殘余肌肉和牙齒，找到下頜骨，加以標記，在直角坐標系上測量多個形態(tài)特征參考點距離，然后將所有測量的平均數(shù)做統(tǒng)計分析，利用判別函數(shù)確定下頜骨形狀。

第86頁,共97頁，2024年2月25日，星期天（二）、免疫學方法監(jiān)測

1．皮膚移植法（Skin

Grafting）原理：皮膚移植法的依據(jù)是高度純合的近交系，其組織相容性基因也應該是純合的。由于移植物的接受或排斥取決于組織相容性抗原，若皮膚移植的供體和受

體之間，基因是同質的就接受，基因異質的就排斥。2.

腫瘤移植法：使用經(jīng)過適當選擇和培養(yǎng)的腫瘤系株，將腫瘤制成懸液或小塊狀，接種到受檢測的動物體內，品系內腫瘤將被接納出現(xiàn)生長，最終受體動物死亡；若品系間動物會發(fā)生腫瘤排斥。

第87頁,共97頁，2024年2月25日，星期天3.

血清反應法：紅細胞凝集試驗和細胞毒性試驗是主要常用的兩種血清學方法。紅細胞凝集試驗用于檢測紅細胞抗原和某些H-2抗原。細胞毒性試驗主要用于檢測

H-2抗原、Ia抗原和白細胞抗原。4.

混合淋巴細胞反應

反應的基本原理是不同品系動物或遺傳上存在個體差異

的動物淋巴細胞混合，或混合培養(yǎng)后，這些淋巴細胞開