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第一節(jié)中藥材原材料驗(yàn)收流程 2一、原料驗(yàn)收流程圖 2二、現(xiàn)場(chǎng)接收 2三、驗(yàn)收程序 4四、驗(yàn)收內(nèi)容 4第二節(jié)中藥材種植驗(yàn)收細(xì)則 8一、驗(yàn)收辦法 8二、驗(yàn)收步驟 8三、驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn) 9第三節(jié)中藥材種子檢驗(yàn)規(guī)程 10一、定義 10二、構(gòu)成與操作流程圖 13三、扦樣 14四、真實(shí)性鑒定 15五、凈度分析 16六、發(fā)芽試驗(yàn) 16七、幼苗鑒定 21八、重新試驗(yàn) 22九、水分測(cè)定 24十、生活力的測(cè)定 26十一、重量測(cè)定 31十二、健康狀況測(cè)定 32十三、容許誤差 34十四、結(jié)果報(bào)告與檢驗(yàn)證書 34為了使XXX公司產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定、創(chuàng)優(yōu)質(zhì)名牌,樹立公司及產(chǎn)品形象,在總結(jié)過去的經(jīng)驗(yàn)基礎(chǔ)上,結(jié)合政府有關(guān)規(guī)定,特重新修訂了這套《原料驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)》,為使本標(biāo)準(zhǔn)順利執(zhí)行,現(xiàn)對(duì)編制與使用作如下說明。第一節(jié)中藥材原材料驗(yàn)收流程一、原料驗(yàn)收流程圖二、現(xiàn)場(chǎng)接收原料到廠后,檢查運(yùn)輸車輛的衛(wèi)生狀況,雨雪天檢查是否淋濕;按照國家相關(guān)規(guī)定及合同查驗(yàn)許可證明文件編號(hào)、產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)合格證、進(jìn)口登記證編號(hào)及原料質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告,并填寫《原料查驗(yàn)記錄》。抽樣員初步取樣,感官檢查原料的氣味、色澤、形狀、有無發(fā)熱發(fā)霉、有無污染和蟲害。感官檢驗(yàn)合格后,抽樣員通知原料保管員安排卸貨。卸貨過程中,裝卸人員要觀察原料的質(zhì)量,發(fā)現(xiàn)異常立即剔除,并報(bào)告抽樣員。抽樣員在卸貨過程中應(yīng)不定時(shí)監(jiān)視原料質(zhì)量情況,并進(jìn)一步取樣檢查;并由采購部勤填寫《原料進(jìn)貨臺(tái)賬》。(一)抽樣員要充分利用眼、鼻、口、耳、手對(duì)原料的外觀、色澤、形狀等進(jìn)行感官評(píng)定,查驗(yàn)要求包括:1.查看有無昆蟲、顆粒有否穿孔、昆蟲幼蟲及其他可能侵入原料的雜物。2.查看有無結(jié)塊、金屬片或破玻璃塊等,查看有無肥料、鼠類或鳥糞、死鼠、貓及其他動(dòng)物尸體及糞便。3.確定是否有任何不正常氣味出現(xiàn),如腐朽動(dòng)物、化學(xué)品、發(fā)熱、酸敗味、霉變、發(fā)酵、燒焦、化肥、油品、煙味等異味。4.確定是否有霉菌絲、霉粒、霉塊等霉變現(xiàn)象。(二)查驗(yàn)容包括三種情況:第一種情況,對(duì)需要行政許可的國產(chǎn)原料,應(yīng)當(dāng)逐批查驗(yàn)許可證明文件編號(hào)、產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)合格證。沒有許可證明文件、產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)合格證的,不得接收和使用;第二種情況,不需要行政許可的原料應(yīng)依據(jù)原料驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)逐批查驗(yàn)原料質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告;第三種情況,對(duì)需要行政許可的進(jìn)口原料,應(yīng)查驗(yàn)產(chǎn)品的進(jìn)口登記證編號(hào)。沒有進(jìn)口登記證的,不得接收和使用。(三)企業(yè)除做好原料的日常查驗(yàn)和檢驗(yàn)工作外,還應(yīng)根據(jù)原料特性及季節(jié)變化等因素,每3個(gè)月至少選擇5種原料,自行或委托有資質(zhì)的對(duì)其主要衛(wèi)生指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),保存好自行檢測(cè)記錄或委托檢測(cè)報(bào)告。三、驗(yàn)收程序物料來貨后,倉庫驗(yàn)收員協(xié)同質(zhì)量管理員按來貨通知單或來貨清單對(duì)品名、規(guī)格、產(chǎn)地,數(shù)量件數(shù)、外觀質(zhì)量、包裝質(zhì)量、生產(chǎn)批號(hào)等到進(jìn)行驗(yàn)收、取樣,準(zhǔn)確無誤,方可寄庫。驗(yàn)收人員對(duì)貨單有不符,質(zhì)量異常,標(biāo)志不清等商品有權(quán)拒收。在質(zhì)量驗(yàn)收時(shí),對(duì)真?zhèn)?,?yōu)劣對(duì)以確定或有質(zhì)量疑問的藥材,送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行鑒定和檢測(cè),經(jīng)檢驗(yàn)不合格者,應(yīng)根據(jù)驗(yàn)收,檢驗(yàn)所發(fā)檢驗(yàn)報(bào)告書通過業(yè)務(wù)部門辦理退貨手續(xù)。對(duì)驗(yàn)收中查出的偽劣或質(zhì)量問題的藥材應(yīng)及時(shí)記錄。并單獨(dú)存放不合格區(qū)。標(biāo)志要明顯,妥善保管。按規(guī)定及時(shí)處理。四、驗(yàn)收內(nèi)容1.數(shù)量驗(yàn)收:檢查貨物與原始憑證的貨源單位,貨物品名、數(shù)量是否相符,不符合的要查的原因。數(shù)量驗(yàn)收包括清點(diǎn)數(shù)量驗(yàn)收和稱重量驗(yàn)收兩種,清點(diǎn)數(shù)量驗(yàn)收,如對(duì)蜈蚣、白花蛇。稱重量驗(yàn)收,中藥材要過秤除皮重,以確定凈重。貴細(xì)藥材應(yīng)使用天平稱量,做到計(jì)算準(zhǔn)確無誤。2.等級(jí)規(guī)格驗(yàn)收:依照《中國藥典》和其他有關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),檢查來貨等級(jí)規(guī)格是否與所簽合同要求一致。3.質(zhì)量驗(yàn)收:(1)檢純度:對(duì)中藥材的雜質(zhì)等。(2)檢變質(zhì):蟲蛀、發(fā)霉、走油、變色、分解、揮發(fā)、風(fēng)化潮解、腐爛等現(xiàn)象。(3)檢藥用部位:檢查藥用部位是否正確,是否除了非藥用部位。(4)檢炮制質(zhì)量:如購進(jìn)是半成品,應(yīng)對(duì)炮制質(zhì)量驗(yàn)收,炮制是否合格,關(guān)系中藥療效和毒副作用。中藥材炮制品色澤均勻,雖經(jīng)切制或炮制但應(yīng)具有原有的氣味,不應(yīng)帶異味或氣味消失。炒制中藥飲片其生片、糊片等不得超標(biāo),炒炭存性;蜜炙、醋炙、鹽炙、姜汁炙等中藥飲片應(yīng)具有輔料香氣;蒸制過的中藥飲片內(nèi)無生心,色澤黑潤(rùn);鍛制中藥飲片內(nèi)外色澤一致,酥脆易碎,不得碳化等。(5)檢硫熏:適度硫熏可殺蟲害,有利于倉儲(chǔ)保管。但硫磺為有毒物質(zhì),檢測(cè)是否過度硫熏:一看色澤(過度增白)、二嗅氣味(酸味增重)(6)檢增重:貴細(xì)藥材常有增重加工情況,應(yīng)觀察同重量的包裝,其裝量是否比較少。(7)檢老嫩:檢老嫩的目的在于確定采收季節(jié)是否適宜。(8)檢真?zhèn)危褐兴幉牡耐庑渭捌渌卣鞅容^相似,驗(yàn)收時(shí)要認(rèn)真仔細(xì)地檢查,發(fā)現(xiàn)有假冒摻偽品,及時(shí)做出正確處理。4.內(nèi)在質(zhì)量檢驗(yàn):對(duì)有規(guī)定含水量和浸出物含量或其他成分含量測(cè)定的藥材即使性狀項(xiàng)目符合標(biāo)準(zhǔn)要求,也要送質(zhì)量管理部實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行浸出物和含量測(cè)定,符合規(guī)定要求后才能入庫。5.初驗(yàn)合格中藥材則辦理收料手續(xù),寄庫、待檢。6.抽樣原則及方法:(1)中藥取樣法是指選取供檢定用藥材樣品的方法。取樣的代表性直接影響到檢定結(jié)果的正確性。因此,必須重視取樣的各個(gè)環(huán)節(jié)。(2)檢查包件:取樣前,應(yīng)注意品名、產(chǎn)地、規(guī)格等級(jí)及包件或樣是否一致,檢查包裝的完整性,清潔程度以及無水跡、霉變或其他物質(zhì)污染等情況,詳細(xì)記錄。凡有異常情況的包件,應(yīng)單獨(dú)檢驗(yàn)。(3)從同批藥材包件中抽鑒定用樣品的原則:1)藥材總包件數(shù)在100件以下的,取樣5件。100-1000件,按5%取樣。超過1000件的,超過部分按1%取樣。不足5件的,逐件取樣。貴重藥材,不論包件多少均逐件取樣。2)破碎或粉末狀藥材的取樣;對(duì)破碎的、粉末狀的或大小在1cm以下的藥材,可用采取器(探子)抽取樣品,一件至少在不同部位抽取2-3份樣品,包件少的抽取總量應(yīng)不少實(shí)驗(yàn)用量的3倍,包件多的每一包件的取樣量一般按下列規(guī)定。一般藥材100-500g粉末狀藥材25g貴重藥材5-10g個(gè)體大的藥材,根據(jù)實(shí)際情況抽取有代表性的樣品,如藥材的個(gè)體較大時(shí),可在包件不同部位(包件大的應(yīng)從10cm以下的深處)分別抽取。7.質(zhì)量管理部根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果,送檢驗(yàn)報(bào)告單及貨物件數(shù)的合格證或不合格證交倉庫。中藥材的每件包裝上應(yīng)有品名、規(guī)格、數(shù)量、產(chǎn)地、調(diào)出單位等內(nèi)容。倉管員憑質(zhì)量管理部發(fā)放的檢驗(yàn)報(bào)告書解除物料待驗(yàn)標(biāo)志。合格物料則移入相應(yīng)庫房,并放置綠色的合格標(biāo)志,做入庫手續(xù);不合格物料移入不合格品庫或退貨庫,辦理退貨手續(xù)。中藥材驗(yàn)收記錄驗(yàn)收內(nèi)容到貨日期年月日應(yīng)與到貨驗(yàn)收單一致□一致□不一致供貨單位應(yīng)與到貨驗(yàn)收單一致□一致□不一致品名應(yīng)與到貨驗(yàn)收單一致□一致□不一致產(chǎn)地應(yīng)與到貨驗(yàn)收單一致□一致□不一致規(guī)格應(yīng)與到貨驗(yàn)收單一致□一致□不一致數(shù)量應(yīng)與到貨驗(yàn)收單一致□一致□不一致外包裝應(yīng)完整、清潔、無污染□是□否性狀符合中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)□符合□不符合藥材凈度應(yīng)身干無雜物霉變□符合□不符合來源抽查結(jié)果抽查XX件備注驗(yàn)收人復(fù)核人第二節(jié)中藥材種植驗(yàn)收細(xì)則為規(guī)范人工中藥材驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn),及時(shí)兌現(xiàn)種植補(bǔ)貼,提高群眾種植積極性,穩(wěn)步擴(kuò)大全縣中藥材種植規(guī)模,特制定細(xì)則如下:一、驗(yàn)收辦法采取X點(diǎn)抽樣法,計(jì)算畝保苗量或畝成活株數(shù)。二、驗(yàn)收步驟采購單位根據(jù)中藥材的種植基地條件、采收后的成品數(shù)量進(jìn)行驗(yàn)收。三、驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)(一)人工撫育種植中藥材驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)1.甘草育苗、直播驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。育苗每畝保苗量在4.5萬株(67株/平方米)以上為合格。直播每畝保苗量在1.5萬株(23株/平方米)以上為合格,否則不予驗(yàn)收。2.水地甘草移栽及黃芪驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。每畝保苗量在1.5萬株(23株/平方米)以上為合格,1.2萬株以下按旱地移栽兌現(xiàn)。3.旱地黃芪移栽驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。旱地移栽每畝保苗量在1萬株(19株/平方米)以上為合格。1萬株以下,按實(shí)際保苗量折算。旱地黃芪田間雜草每平方米5株以上或直立草苗高于10公分以上或匍匐草大于10公分的,以上三種情形任何一種或以上占到總面積的百分比進(jìn)行兌現(xiàn)。4.旱地甘草移栽驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。旱地移栽每畝保苗量在0.8萬株(12株/平方米)以上為合格。0.8萬株以下,按實(shí)際保苗量折算。5.人工甘草補(bǔ)植封育區(qū)驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。每畝補(bǔ)植區(qū)種植200株,每穴下苗量為1株。具體方法為取長(zhǎng)20米、寬10米的地塊,達(dá)到90穴為合格,否則按株數(shù)折算兌現(xiàn)。6.采種基地驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。查閱病蟲害發(fā)生的田間記錄、施藥品種、數(shù)量、勞動(dòng)者姓名、監(jiān)督員姓名等資料。7.枸杞驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。取5點(diǎn),測(cè)量行距與株距,計(jì)算畝種植量,每畝成活率在200株以上,視為合格,否則按株數(shù)折算兌現(xiàn)。8.除上述情況以外的,由驗(yàn)收組合議后報(bào)經(jīng)驗(yàn)收部門同意后予以兌現(xiàn)。第三節(jié)中藥材種子檢驗(yàn)規(guī)程一、定義(一)種批同一產(chǎn)地、同一年份、同一采收期內(nèi)收獲的、在規(guī)定數(shù)量之內(nèi)的種子。(二)初次樣品從種批中抽取出的少量種子樣品。(三)混合樣品從一個(gè)種批中抽取的全部初次樣品合并而成的樣品。(四)送檢樣品送到種子檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)的規(guī)定數(shù)量樣品。(五)測(cè)定樣品從送檢樣品中分取的、供某一檢驗(yàn)項(xiàng)目之用的樣品。(六)凈種子種子單位或構(gòu)造符合送驗(yàn)物種(包括該種子的全部植物學(xué)變種和栽培品種)的種子。通常包括完整的種子單位和大于原來大小一半的破損種子單位。(七)其他植物種子除凈種子以外的任何植物種子單位,包括雜草種子和異作物種子。(八)雜質(zhì)雜凈種子和其他植物種子外的種子單位和所有其他物質(zhì)和構(gòu)造。(九)種子真實(shí)性供檢種子與文件記錄(如標(biāo)簽等)的植物種子是否相符。(十)發(fā)芽率在規(guī)定的條件下和時(shí)間內(nèi)長(zhǎng)成的正常幼苗種子數(shù)占供檢種子總數(shù)的百分率。(十一)正常幼苗能在土質(zhì)良好及適宜水分、溫度和光照條件下繼續(xù)生長(zhǎng)發(fā)育成為正常植株的幼苗。正常幼苗必須具有完整的幼苗結(jié)構(gòu),如:根系、胚軸、子葉、初生葉、頂芽或芽鞘等(禾本科、棕櫚科)。正常幼苗必須符合下列類型之一:1.完整幼苗:幼苗具有發(fā)育良好根系(包括初生根、次生根及根毛),發(fā)育良好的胚軸,形態(tài)完整的子葉和芽,并且生長(zhǎng)良好、完全、勻稱和健康。2.帶有輕微缺陷的幼苗:幼苗的主要構(gòu)造出現(xiàn)某種輕微缺陷,如,初生根局部損傷,胚軸有輕度的損傷或裂痕,子葉局部損傷或初生葉邊緣缺損、壞死等,但在其他方面仍能比較良好而均衡發(fā)展的完整幼苗。3.次生感染的幼苗:幼苗明顯地符合上述的完整幼苗和帶有輕微缺陷幼苗的要求,但已受到不是來自種子本生的真菌或細(xì)菌的病源感染。(十二)不正常幼苗在土質(zhì)良好及適宜水分、溫度和光照條件下不能繼續(xù)生長(zhǎng)發(fā)育成為正常植株的幼苗。包括:1.受損傷的幼苗:幼苗的構(gòu)造殘缺不全或受到嚴(yán)重?fù)p傷,不能均衡正常發(fā)育者。如幼苗沒有初生根,胚軸、子葉、初生葉及芽缺失、破裂、縮縊、腐爛。2.畸形的幼苗:幼苗主要構(gòu)造畸形,發(fā)育不平衡或生長(zhǎng)瘦弱。如初生根短粗、腫脹、纖細(xì),子葉及初生葉腫脹卷曲、畸形、變色、壞死,胚軸深度開裂、嚴(yán)重扭曲或彎曲、纖細(xì),子葉出現(xiàn)后幼苗沒有進(jìn)一步的發(fā)育。3.腐壞的幼苗:幼苗的主要構(gòu)造染病或腐爛嚴(yán)重,以致阻礙幼苗的正常發(fā)育。(十三)未發(fā)芽種子在適宜的條件下,試驗(yàn)?zāi)┢谌圆荒馨l(fā)芽的種子,包括硬實(shí)種子、新鮮不發(fā)芽的種子、死種子(變軟、變色、發(fā)霉等沒有幼苗生長(zhǎng)的跡象)。(十四)種子含水量種子樣品按規(guī)定程序烘干所失去的重量,這個(gè)失去重量占供檢樣品原始重量的百分率為種子含水量。(十五)生活力種子發(fā)芽的潛在能力或種胚具有的生命力,稱為種子的生活力。(十六)千粒重從凈種子中數(shù)取一定數(shù)量的種子,稱其重量,計(jì)算其1000粒種子的重量,并換算成國家種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)水分條件下的重量,稱為千粒重。(十七)種子健康度主要是指種子是否攜帶有病原菌,如真菌、細(xì)菌、病毒,以及害蟲。二、構(gòu)成與操作流程圖(一)構(gòu)成中藥材種子檢驗(yàn)規(guī)程的內(nèi)容可分為扦樣、真實(shí)性鑒定、凈度分析、發(fā)芽試驗(yàn)、水分測(cè)定、生活力測(cè)定、重量測(cè)定及健康狀況測(cè)定等部分構(gòu)成。其中檢測(cè)部分的真實(shí)性鑒定、凈度分析、發(fā)芽試驗(yàn)、水分測(cè)定、重量測(cè)定為必檢項(xiàng)目,其他項(xiàng)目檢驗(yàn)屬于非必檢項(xiàng)目。(二)種子檢驗(yàn)流程圖全面檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)遵循的操作程序見下圖。三、扦樣要了解成批種子的質(zhì)量必須從中取出有代表性的樣品進(jìn)行檢查,扦樣就是從大量的種子中,隨機(jī)取得重量適當(dāng)、有代表性的供檢樣品。為了使種子檢驗(yàn)獲得一致和正確的結(jié)果,應(yīng)按照規(guī)程中所規(guī)定的方法從種子批中隨機(jī)抽取有代表性的初次樣品、混合樣品和送檢樣品。具體扦樣方法應(yīng)符合GB/T3543.2的規(guī)定。四、真實(shí)性鑒定(一)目的鑒定送驗(yàn)種子樣品與文件記錄物種(或品種)種子是否相符。(二)儀器設(shè)備放大鏡、體視鏡、顯微鏡、培養(yǎng)箱、溫室等。(三)方法與程序真實(shí)性鑒定可用種子、幼苗。1.種子形態(tài)鑒定隨機(jī)從送驗(yàn)樣品中數(shù)取50粒種子,二次重復(fù)。根據(jù)種子的形態(tài)特征,如種子大小、形狀、顏色、光澤、表面構(gòu)造及氣味等,必要時(shí)可借助放大鏡、體視鏡等進(jìn)行逐粒觀察,并與標(biāo)準(zhǔn)種子樣本或鑒定圖片及有關(guān)資料對(duì)照,鑒別送檢種子是否與文件記錄物種種子特征相符。將種子分為文件記錄物種種子和其他物種種子,計(jì)算兩類種子數(shù)量。2.幼苗鑒別隨機(jī)從送驗(yàn)樣品中數(shù)取100粒種子,二次重復(fù)。將種子置于適宜發(fā)芽床及發(fā)芽環(huán)境中(如培養(yǎng)室或溫室)進(jìn)行培養(yǎng),加速種子生長(zhǎng),當(dāng)幼苗生長(zhǎng)達(dá)到適宜評(píng)價(jià)的發(fā)育階段時(shí),對(duì)全部幼苗進(jìn)行形態(tài)鑒定。將幼苗分為文件記錄物種幼苗和其他物種幼苗,計(jì)算兩類幼苗數(shù)量。(四)結(jié)果報(bào)告五、凈度分析(一)目的確定送檢樣品中不同成分的重量百分率,據(jù)此推斷種子批的組成。(二)程序分析時(shí)將送檢樣品分成三種成分:凈種子、其他植物種子和雜質(zhì),并測(cè)定各成分的重量百分率。在種子構(gòu)造上凡能明確鑒別出屬于所分析的種(已變成菌核、黑穗病孢子團(tuán)或線蟲癭的除外),即使是未成熟的、瘦小的、皺縮的、帶病的或發(fā)過芽的種子都作為凈種子。具體凈度分析方法應(yīng)符合GB/T3543.3的規(guī)定。六、發(fā)芽試驗(yàn)(一)目的發(fā)芽試驗(yàn)是測(cè)定種子批的最大發(fā)芽潛力,據(jù)此可估測(cè)田間播種價(jià)值,也可比較不同種子批的質(zhì)量。(二)發(fā)芽床通常采用紙和砂作為發(fā)芽床。除特殊情況外,土壤或其他介質(zhì)不宜用作初次試驗(yàn)的發(fā)芽床。濕潤(rùn)發(fā)芽床的水質(zhì)應(yīng)純凈、無毒無害,pH值為6.0-7.5。1.紙床用作發(fā)芽的紙床應(yīng)具有一定的強(qiáng)度、質(zhì)地好、吸水性強(qiáng)、保水性好、無毒無菌、清潔干凈,不含可溶性色素或其他化學(xué)物質(zhì),pH值為6.0-7.5??梢杂脼V紙、吸水紙等作為紙床。2.砂床用作發(fā)芽的砂具有砂粒大小均勻,其直徑為0.05-0.80mm。無毒無菌無種子。持水力強(qiáng),pH值為6.0-7.5。使用前必須進(jìn)行洗滌和高溫消毒。化學(xué)藥品處理過的種子樣品發(fā)芽所用的沙子,不再重復(fù)使用。3.土壤用作發(fā)芽的土壤土質(zhì)疏松良好、無大顆粒、不含種子、無毒無菌、持水力強(qiáng)、pH值為7.0-7.5。使用前,必須經(jīng)過消毒,一般不重復(fù)使用。(三)儀器設(shè)備發(fā)芽皿、發(fā)芽盤、光照培養(yǎng)箱等。(四)程序1.數(shù)取試驗(yàn)樣品從經(jīng)充分混合的凈種子中,隨機(jī)數(shù)取400粒。通常以100粒為一次重復(fù),大粒種子可以50粒、甚至25粒為一個(gè)重復(fù)。復(fù)胚種子單位可視為單粒種子進(jìn)行試驗(yàn),不需分開(弄破)。2.選用發(fā)芽床通常小粒種子選用紙床;大粒種子選用砂床或紙間;中粒種子選用紙床、砂床均可。(1)紙床紙床包括紙上和紙間。紙上:種子放在一層或多層紙上發(fā)芽。1)紙放在:①培養(yǎng)皿內(nèi)。②光照發(fā)芽箱內(nèi),箱內(nèi)的相對(duì)濕度接近飽和。③發(fā)芽器上。2)紙間可用下列方法:①另外用一層紙松松地蓋在種子上。②紙卷,把種子均勻置放在濕潤(rùn)的發(fā)芽紙上,再用另一張同樣大小的發(fā)芽紙覆蓋在種子上,然后卷成紙卷,兩端用皮筋扣住,豎放。紙間可直接放在保濕的發(fā)芽箱盤內(nèi)。(2)砂床砂床包括:1)砂上(TS):種子壓入砂的表面。2)砂中(S):種子播在一層平整的濕砂上,然后根據(jù)種子大小加蓋10-20mm厚度的松散砂?;虬逊N子與沙按1:3的比例混合均勻。(3)土壤當(dāng)在紙床上幼苗出現(xiàn)植物中毒癥狀或?qū)τ酌玷b定發(fā)生懷疑時(shí),為了比較或有某些研究目的,才采用土壤作為發(fā)芽床。3.置床培養(yǎng)將數(shù)取的種子均勻地排在濕潤(rùn)的發(fā)芽床上,粒與粒之間應(yīng)保持一定的距離。在培養(yǎng)器具上貼上標(biāo)簽,按規(guī)定的條件進(jìn)行培養(yǎng)。發(fā)芽期間要經(jīng)常檢查溫度、水分和通氣狀況。如有發(fā)霉的種子應(yīng)取出沖洗,嚴(yán)重發(fā)霉的應(yīng)更換發(fā)芽床。(五)測(cè)定條件1.水分和通氣根據(jù)發(fā)芽床和種子特性決定發(fā)芽床的加水量。如砂床加水為其飽和含水量的60%-80%;紙床,吸足水分后,瀝去多余水分即可;如用土壤作發(fā)芽床,加水至手握土粘成團(tuán),再手指輕輕一壓就碎為宜。發(fā)芽期間發(fā)芽床必須始終保持濕潤(rùn)。發(fā)芽應(yīng)使種子周圍有足夠的空氣,注意通氣。尤其是在紙卷和砂床中應(yīng)注意:紙卷須相當(dāng)疏松;用砂床和土壤試驗(yàn)時(shí),覆蓋種子的砂或土壤不要緊壓。2.溫度發(fā)芽應(yīng)在規(guī)定的溫度進(jìn)行,發(fā)芽器、發(fā)芽箱、發(fā)芽室的溫度在發(fā)芽期間應(yīng)盡可能一致。溫度變幅不應(yīng)超過±1℃。當(dāng)規(guī)定用變溫時(shí),通常應(yīng)保持白天高溫8h,晚上低溫16h。溫度的變化應(yīng)在1h或更短時(shí)間內(nèi)完成。3.光照需光種子的光照強(qiáng)度為13.5-22.5μmol·m-2·s-1,如在變溫條件下發(fā)芽,光照應(yīng)在8h高溫時(shí)進(jìn)行。(六)休眠種子處理許多中藥材種子存在休眠現(xiàn)象,主要是由于種皮硬實(shí)、胚未成熟或存在抑制物質(zhì)??刹捎孟铝幸环N或幾種方法進(jìn)行處理。1.破除種皮硬實(shí)種子的方法(1)開水燙種:發(fā)芽試驗(yàn)前將種子用開水燙種數(shù)分鐘,再行發(fā)芽。(2)機(jī)械損傷:小心地用工具刺破或用砂紙摩擦種皮,或用機(jī)械碰破種皮。(3)濃硫酸浸泡法:用98%的濃硫酸浸沒種子,一段時(shí)間后(依品種而定),將種子撈出,立即用大量的自來水沖洗干凈。2.破除胚休眠的方法(1)低溫處理:將各重復(fù)種子放在濕潤(rùn)的發(fā)芽床上(最好是砂床),種子在較低的恒溫條件下(5℃左右)或在變溫的條件下(通常5-10℃)進(jìn)行,處理一定的時(shí)間后,取出在規(guī)定溫度下進(jìn)行發(fā)芽。(2)高低變溫處理:將各重復(fù)種子放在濕潤(rùn)的發(fā)芽床上(最好是砂床),然后進(jìn)行變溫處理。溫度處理分為兩個(gè)階段:第一階段是把種子放在較高的溫度條件下,進(jìn)行形態(tài)后熟,經(jīng)一段時(shí)間待胚完全發(fā)育后,轉(zhuǎn)到較低的溫度條件下(5-10℃)進(jìn)行生理后熟處理,一段時(shí)間后,取出在規(guī)定溫度下進(jìn)行發(fā)芽。七、幼苗鑒定(一)試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間試驗(yàn)前或試驗(yàn)間用于破除休眠處理所需時(shí)間不作為發(fā)芽試驗(yàn)時(shí)間的一部分。如果樣品在規(guī)定試驗(yàn)時(shí)間內(nèi)只有幾粒種子開始發(fā)芽,則試驗(yàn)時(shí)間可延長(zhǎng)7d,或延長(zhǎng)規(guī)定時(shí)間的一半。根據(jù)試驗(yàn)情況,可增加計(jì)數(shù)的次數(shù)。反之,如果在規(guī)定試驗(yàn)時(shí)間結(jié)束前,樣品已達(dá)到最高發(fā)芽率,則該試驗(yàn)可提前結(jié)束。(二)鑒定鑒定要在主要構(gòu)造已發(fā)育到一定時(shí)期進(jìn)行。根據(jù)種的不同,試驗(yàn)中絕大部分幼苗應(yīng)達(dá)到:子葉從種皮中伸出、初生葉展開或葉片從胚芽鞘中伸出。在計(jì)數(shù)過程中,發(fā)育良好的正常幼苗應(yīng)從發(fā)芽床中揀出,對(duì)可疑的或損傷、畸形或不均衡的幼苗,通常到末次計(jì)數(shù)。嚴(yán)重腐爛的幼苗或發(fā)霉的種子應(yīng)從發(fā)芽床中除去,并隨時(shí)增加計(jì)數(shù)。復(fù)胚種子單位作為單粒種子計(jì)數(shù),試驗(yàn)結(jié)果用至少產(chǎn)生一個(gè)正常幼苗的種子單位的百分率表示。當(dāng)送驗(yàn)者提出要求時(shí),也可測(cè)定100個(gè)種子單位所產(chǎn)生的正常幼苗數(shù),或產(chǎn)生一株、兩株及兩株以上正常幼苗的種子單位數(shù)。八、重新試驗(yàn)當(dāng)試驗(yàn)出現(xiàn)下列情況進(jìn),應(yīng)重新試驗(yàn)。1.由于真菌或細(xì)菌的蔓延而使試驗(yàn)結(jié)果不一定可靠時(shí),可采用砂床或土壤進(jìn)行試驗(yàn)。如有必要,應(yīng)增加種子之間的距離。2.當(dāng)正確鑒定幼苗數(shù)有困難時(shí),可采用一種或幾種方法在砂床或土壤上進(jìn)行重新試驗(yàn)。3.當(dāng)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)條件、幼苗鑒定或計(jì)數(shù)有差錯(cuò)時(shí),應(yīng)采用同樣方法進(jìn)行重新試驗(yàn)。4.當(dāng)100粒種子重復(fù)間的差距超過表1最大容許差距時(shí),應(yīng)采用同樣的方法重新試驗(yàn)。如果第二次結(jié)果與第一次結(jié)果相一致,及其差異不超過表2中所示的容許差距,則將兩次試驗(yàn)的平均數(shù)填報(bào)在結(jié)果單上。如果第二次結(jié)果與第一次結(jié)果不相符合,其差異超過表2所示的容許差距,則采用同樣的方法進(jìn)行第三次試驗(yàn),填報(bào)符合要求的結(jié)果平均數(shù)。表1同一發(fā)芽試驗(yàn)四次重復(fù)間的最大容許差距50%以上平均發(fā)芽率50%以下最大容許差距99259836974796589569表2同一或不同實(shí)驗(yàn)室來自相同或不同送驗(yàn)樣品間發(fā)芽試驗(yàn)的容許差距平均發(fā)芽率50%以上50%以下最大容許差距98-992-3295-974-6391-947-10485-9011-16577-8417-24660-7625-41751-5942-508結(jié)果計(jì)算和表示試驗(yàn)結(jié)果以粒數(shù)的百分率表示。當(dāng)一個(gè)試驗(yàn)的四次重復(fù)(每個(gè)重復(fù)以100粒計(jì),相鄰的副重復(fù)合并成100粒的重復(fù))正常幼苗百分率都在最大容許差距內(nèi)(表1),則其平均數(shù)表示發(fā)芽百分率。不正常幼苗、硬實(shí)、新鮮不發(fā)芽種子和死種子的百分率按四次重復(fù)平均數(shù)計(jì)算。正常幼苗、不正常幼苗和未發(fā)芽種子百分率的總和必須為100,平均數(shù)百分率修約到最近似的整數(shù),修約0.5進(jìn)入最大值中。5.結(jié)果報(bào)告填報(bào)發(fā)芽結(jié)果時(shí),須填報(bào)正常幼苗、不正常幼苗、硬實(shí)及新鮮不發(fā)芽種子和死種子的百分率。假如其中任何一項(xiàng)結(jié)果為零,則將符號(hào)“-0-”填入該格中。同時(shí)還須填報(bào)采用的發(fā)芽床和溫度、試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間以及為促進(jìn)發(fā)芽所采用的處理方法。九、水分測(cè)定(一)目的測(cè)定送驗(yàn)樣品的種子水分,為種子品質(zhì)評(píng)價(jià)及安全貯藏、運(yùn)輸?shù)忍峁┮罁?jù)。(二)儀器設(shè)備恒溫烘箱、樣品盒、干燥器、干燥劑等、分析天平(感量達(dá)到0.001g)。(三)測(cè)定程序1.樣品準(zhǔn)備進(jìn)行測(cè)定時(shí)需要取兩次重復(fù)的獨(dú)立樣品。用恒溫烘箱法要求種子樣品的重量為:樣品盒直徑小于8cm的種子重量為4~5g;樣品盒直徑等于或大于8cm的種子重量要求10g。稱重的精確度為0.001g,測(cè)定時(shí)樣品暴露在實(shí)驗(yàn)室空氣中的時(shí)間要減少至最低限度,應(yīng)不超過2min。2.樣品處理特大粒種子在烘干前必須磨碎,磨碎的種子至少有50%的磨碎物通過0.5mm篩孔的金屬絲篩;較大粒種子或皮堅(jiān)硬的種子應(yīng)切成小片。3.低恒溫烘干法該法必須在相對(duì)濕度70%以下的室內(nèi)進(jìn)行。必須使試驗(yàn)樣品在樣品盒的分布為不超過0.3g/cm2。取樣時(shí)勿直接用手觸摸種子,而應(yīng)用勺或鏟子。先將樣品盒預(yù)先烘干、冷卻、稱重,并記下盒號(hào),取試樣兩份(磨碎種子應(yīng)從不同部位取得),每份4.5g~5.0g,將試樣放入預(yù)先烘干和稱重過的樣品盒內(nèi),再稱重(精確至0.001g)。使烘箱通電預(yù)熱至110-115℃,將樣品攤平放入烘箱內(nèi)的上層,樣品盒距溫度計(jì)的水銀球約2.5cm處,迅速關(guān)閉烘箱門,使箱溫在5-10min內(nèi)回至103±2℃時(shí)開始計(jì)算時(shí)間,烘8±1h。用坩堝鉗或戴上手套蓋好盒蓋(在箱內(nèi)加蓋),取出后放入干燥器內(nèi)冷卻至室溫,約30-45min后再稱重。4.高溫烘干法其程序與低恒溫烘干法相同。首先將烘箱預(yù)熱至140-145℃,打開箱門5-10min后,烘箱溫度須保持130-133℃,樣品烘干時(shí)間為1h。5.高水分預(yù)先烘干法需要磨碎的種子,如果種子水分含量超過16%,必須采用預(yù)先烘干法。稱取兩份樣品各25.00±0.02g,置于直徑大于8cm的樣品盒中,在103±2℃烘箱中預(yù)烘30min。取出后放在室溫冷卻和稱重。此后立即將這兩個(gè)半干樣品分別磨碎,并將磨碎物各取一份樣品按3或4條所規(guī)定的方法進(jìn)行測(cè)定。(四)結(jié)果計(jì)算根據(jù)烘后失去的重量計(jì)算種子水分百分率,按式(1)計(jì)算到小數(shù)點(diǎn)后一位:(1)式中:M1—樣品盒和蓋的重量,g;M2—樣品盒和蓋及樣品的烘前重量,g;M3—樣品盒和蓋及樣品的烘后重量,g。若用預(yù)先烘干法,可從第一次(預(yù)先烘干)和第二次按上述公式計(jì)算所得的水分結(jié)果換算樣品的原始水分,按式(2)計(jì)算。(2)式中:S1—第一次整理種子烘后失去的水分,%;S2—第二次磨碎種子烘后失去的水分,%。(五)容許差距若一個(gè)樣品的兩次測(cè)定之間的差距不超過0.2%,其結(jié)果可用兩次測(cè)定值的算術(shù)平均數(shù)表示,否則,重做兩次測(cè)定。(六)結(jié)果報(bào)告結(jié)果填報(bào)在檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告單的規(guī)定空格中,精確度為0.1%。十、生活力的測(cè)定(一)目的在短期內(nèi)快速估測(cè)種子樣品的生活力,特別是休眠種子樣品的生活力。XX樣品在發(fā)芽末期尚有較多的休眠種子時(shí),可應(yīng)用生活力的生化法快速估測(cè)種子。一般采用三苯氯化四氮唑(簡(jiǎn)稱四唑,TTC)法。(二)試劑0.1%-1.0%(m/V)的TTC溶液。1.0%溶液用于不切開胚的種子染色,而0.1%-0.5%溶液可用于已經(jīng)切開胚的種子染色。配成的溶液須貯存在黑暗處或棕色瓶里。如果用蒸餾水配制溶液的pH值不在6.5-7.5范圍內(nèi),則采用磷酸緩沖液來配制。(三)儀器、設(shè)備1.控溫設(shè)備電熱恒溫箱或發(fā)芽箱,冰箱。2.觀察器具體視顯微鏡或手持放大鏡,光線充足柔和的燈光。3.容器棕色定量加液器,不同規(guī)格的染色盤。4.切刺工具單面刀片、矛狀解剖針、小針等。5.預(yù)濕物品濾紙、吸水紙和毛巾等。6.其他天平(感量為0.001g)、鑷子、吸管等。(四)測(cè)定程序1.試驗(yàn)樣品的數(shù)取從經(jīng)凈度分析后并充分混合的純凈種子隨機(jī)數(shù)取100粒種子作為一種重復(fù)。共取3次重復(fù)。如是測(cè)定發(fā)芽末期休眠種子的生活力,則單用試驗(yàn)?zāi)┢诘男菝叻N子。2.種子的預(yù)處理(1)預(yù)措:有些種子在預(yù)濕前須先除去種子的外部附屬物(包括剝?nèi)ス麣ぃ┖驮诜N子非要害部位弄破種皮,如刺破硬實(shí)種皮等。較易剝掉種皮種子,可用始溫30-45℃的水浸種24-48h,每天換水。硬粒大種子可用始溫80-85℃水浸種,攪拌并在自然冷卻中浸種24-72h。種皮致密堅(jiān)硬的種子,可用98%的濃硫酸浸種20-180min,充分沖洗,再用水浸種24-48h,每天換水。(2)預(yù)濕:為加快充分吸濕、軟化種皮,便于樣品準(zhǔn)備,以提高染色的均勻度,通常種子在染色前要進(jìn)行預(yù)濕。根據(jù)種的不同,預(yù)濕的方法有所不同。一種是緩慢潤(rùn)濕,即將種子放在紙上或紙間吸濕,它適用于直接浸在水中容易破裂種子(如豆科大粒種子),以及許多陳種子和過分干燥種子;另一種是水中浸漬,即將種子完全浸在水中,讓其達(dá)到充分吸脹,它適用于直接浸入水中而不會(huì)造成組織破裂損傷的種子。3.染色前的準(zhǔn)備為了使胚的主要構(gòu)造和活的營養(yǎng)組織暴露出來,便于四唑溶液快速而充分地滲入和觀察鑒定,經(jīng)軟化的種子應(yīng)進(jìn)行樣品準(zhǔn)備。準(zhǔn)備方法因種子構(gòu)造和胚的位置不同而異,如禾谷類種子沿胚縱切,傘形科種子近胚縱切等。丹參等種子預(yù)濕后表面有黏液,可采用硫酸鋁鉀5min清除掉。將早已準(zhǔn)備好的種子樣品放入染色盤中,加入適宜濃度的四唑溶液以完全淹沒種子,移至一定溫度的黑暗控溫設(shè)備內(nèi)進(jìn)行染色反應(yīng)。所用染色時(shí)間因四唑液濃度、溫度、種子種類、樣品準(zhǔn)備方法等因素的不同而有差異。一般來說,四唑溶液濃度高,染色快;溫度高,染色時(shí)間短,但最高不超過45℃。到達(dá)規(guī)定時(shí)間或染色已很明顯時(shí),倒去四唑溶液,用清水沖洗。4.鑒定前處理為便于觀察鑒定和計(jì)數(shù),將已染色的種子樣品,加以適當(dāng)處理使胚主要構(gòu)造和活的營養(yǎng)組織明顯暴露出來,如一些豆類沿胚中軸縱切,瓜類剝?nèi)シN皮和內(nèi)膜等。5.觀察與鑒定大中粒種子可直接用肉眼或手持放大鏡進(jìn)行觀察鑒定,對(duì)小粒種子最好用10-100倍體視顯微鏡進(jìn)行觀察。觀察鑒定時(shí),確定種子是否具有生活力,必須根據(jù)胚的主要構(gòu)造和有關(guān)活營養(yǎng)組織的染色情況進(jìn)行正確的判斷。一般的鑒定原則是:凡胚的主要構(gòu)造或有關(guān)活營養(yǎng)組織全部染成有光澤的鮮紅色且組織狀態(tài)正常的為正常有生活力的種子;否則為無生活力的種子。(1)依據(jù)鑒定標(biāo)準(zhǔn),將有生活力與無生活力的種子分開和計(jì)數(shù)。鑒定標(biāo)準(zhǔn)如下:有生活力的種子符合下列任意一條的列為有生活力種子:1)胚和子葉全部均勻染色。2)子葉遠(yuǎn)胚根一端≤1/3不染色,其余部分完全染色。3)子葉側(cè)邊總面積≤1/3不染色,其余部分完全染色。(2)無生活力的種子符合下列任意一條的列為無生活力種子:1)胚和子葉完全不染色。2)子葉近胚根處不染色。3)胚根不染色。4)胚和子葉染色不均勻,其上有斑點(diǎn)狀不然色。5)子葉不染色總面積>1/2。6)胚所染顏色異常,且組織軟腐。(五)結(jié)果表示與報(bào)告計(jì)算各個(gè)重復(fù)中有生活力的種子數(shù),重復(fù)間最大容許差距不得超過表3的規(guī)定,平均百分率計(jì)算到最近似的整數(shù)。表3生活力測(cè)定重復(fù)間的最大容許差距平均生活力百分率%124次重復(fù)重復(fù)間容許的最大差距3次重復(fù)2次重復(fù)9925--98365-974766965876十一、重量測(cè)定(一)目的種子重量以“千粒重”表示,千粒重與種子大小和飽滿程度密切相關(guān),也是計(jì)算種子播種量的必要依據(jù)。(二)測(cè)定方法有百粒法和五百粒法:1.百粒法:大粒種子一般采用百粒法。從試驗(yàn)樣品中隨機(jī)數(shù)取種子100粒,8次重復(fù),分別稱重(g),小數(shù)位數(shù)與GB/T3543.3的規(guī)定相同。2.五百粒法:中小粒種子一般采用五百粒法。從試驗(yàn)樣品中隨機(jī)數(shù)取種子500粒,4次重復(fù),分別稱重(g),小數(shù)位數(shù)與GB/T3543.3的規(guī)定相同。3.結(jié)果計(jì)算與表示計(jì)算8個(gè)重復(fù)的平均重量、標(biāo)準(zhǔn)差及變異系數(shù),按以下公式計(jì)算:式中:X─各重復(fù)重量(g)n─重復(fù)次數(shù)。S—標(biāo)準(zhǔn)差;X—100
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